利用肾小球全基因组表达数据筛选治疗糖尿病肾病的药物

目的:利用2型糖尿病肾病(T2DN)患者微分离的肾小球全基因组表达数据,借助关联性图谱(CMAP)数据库和生物信息学方法,探寻具有T2DN治疗作用的潜在药物。方法:选取中国汉族T2DN患者23例和正常对照6例,微分离肾小球,利用Affymetrix U133 Plus 2.0全基因组表达谱芯片检测获得基因表达数据,获得T2DN患者不同分期之间的差异表达基因后,进一步通过2种不同的生物信息学方法寻找T2DN的潜在治疗药物,并阐明其可能的分子作用机制。结果:利用T2DN晚期和早期相比的差异表达基因和CMAP数据库,筛选出小白菊内酯(parthenolide)、荜茇酰胺(piperlongumine)、15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)和LY-294002(PI3K抑制剂)等候选药物。上述药物能够逆转T2DN患者在疾病进展过程中肾小球基因表达的变化,提示这些药物可能具有治疗T2DN的潜能。既往研究证实这些药物对T2DN有一定的治疗作用,验证了该药物筛选方法的可靠性。结论:利用T2DN患者肾小球全基因组表达谱和CMAP数据库能够快速筛选出具有T2DN治疗潜能的药物,候选药物可进行下一步的动物实验和临床试验以证实其治疗的安全性和有效性,应用前景广阔。     

全反式维甲酸对糖尿病肾病肾小球p-cadherin表达的影响

目的 观察全反式维甲酸(ATRA)对糖尿病肾病(DN)肾小球p-cadherin表达的影响,明确其对肾脏的保护作用.方法 应用链脲佐菌素(STZ)建立DN大鼠模型.ATRA治疗组(n=10)给予ATRA每天20 mg/kg灌胃,对照组(C组,n=10)、DN组(n=10)以等量蒸馏水灌胃.采用ELISA法检测大鼠24 h尿液中白蛋白及肌酐值;免疫组织化学和胶体金免疫电镜法观察p-cadherin蛋白表达的部位及数量;RT-PCR法检测p-cadherin mRNA表达. 结果 ATRA组肾重及尿白蛋白/尿肌酐比值较DN组明显下降(P＜0.01).免疫组化检测结果示ATRA组p-cadherin蛋白表达较DN组上调,与C组相比无明显下降.电镜结果示DN组免疫金染色的p-cadherin蛋白较C组减少.RT-PCR结果示ATRA组p-cadherin mRNA表达较DN组上调,与C组无明显差异.结论 ATRA可逆转DN大鼠早期DN肾小球足细胞p-cadherin蛋白的下调,由此降低早期DN尿白蛋白排泄量,延缓DN进展.     

肾小球血流动力学改变和糖尿病肾病

本文介绍肾小球血流动力学改变对糖尿病性肾病发生和发展的影响，并较详细地阐述糖尿病时肾小球血流动力学改变的产生机制及有关对策。     

糖尿病肾病患者肾小球中nephrin表达及其临床意义

目的检测糖尿病肾病（DN）患者肾小球组织中nephrin的表达,以探讨nephrin在DN患者蛋白尿发生机理中可能的作用.方法免疫荧光染色图像分析及RT-PCR法检测DN组、单纯糖尿病组、单纯血尿组及对照组肾小球组织nephrin的表达水平.结果DN组肾小球组织nephrin的表达量显著低于单纯糖尿病组、单纯血尿组及对照组（P＜0.05）.DN组患者肾小球组织中nephrin的mRNA表达量也显著低于单纯糖尿病组、单纯血尿组及对照组（P＜0.05）.结论DN患者肾小球组织nephrin的表达减少,可能影响肾小球滤过屏障的通透性,导致蛋白尿的产生.     

肾小球血流动力学改变和糖尿病性肾病

本文介绍肾小球血流动力学改变对糖尿病性肾病发生和发展的影响，并较详细地阐述糖尿病时肾小球血流动力学改变的产生机制及有关对策。     

糖尿病肾病肾小球功能的监护

糖尿病肾病严重威胁糖尿病人的存活,在幼年起病型糖尿病尤为明显。有研究证实1/3的幼年起病型糖尿病可直接死于糖尿病肾病。同时,一些研究还指出适当的血糖控制有益于改变早期糖尿病肾病的进展。为更好对糖尿病肾病的各发展阶段进行观察并对治疗的疗效加以估价,有必要寻求一种可靠、敏感的肾功能指标。为此,作者对13例伴有糖尿病肾病的胰岛索依赖型糖尿病人进行了51个月的前瞻性研究,对一些肾功能测定方法及其与病人病情变化的关系作了观察与分析。作者用测定~(51)Cr-EDTA的清除证实所有病人的     

糖尿病肾病大鼠肾小球叉头状转录因子O1的表达和作用

目的观察糖尿病肾病大鼠肾小球叉头状转录因子O1（FoxO1）的表达,探讨其与糖尿病肾病发生、发展的关系。方法8周龄健康雄性sD大鼠30只,链脲佐菌素（STZ）诱导建立糖尿病大鼠模型,采用随机数字表法分为糖尿病组（13只,普通饲料连续喂养4周）和糖尿病肾病组（13只,普通饲料连续喂养12周）。选取健康同龄大鼠18只作为正常对照组（NC组）。4、12周末检测体质量（BW）、血糖（BG）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、24h尿蛋白（UPro／24h）及尿白蛋白定量（UAIb）。处死动物后计算肾重指数（KI）;分光光度计测定大鼠肾皮质丙二醛（MDA）含量和总超氧化物歧化酶（SOD）活性;免疫组化法检测肾小球FoxO1蛋白、胶原Ⅳ及纤连蛋白水平;RT—PCR检测肾皮质Fox01mRNA水平;光镜及电镜下观察肾脏组织形态学变化。组间比较采用独立样本t检验。结果糖尿病肾病组肾皮质MDA蛋白、肾小球胶原Ⅳ和纤连蛋白水平显著高于糖尿病组[分别为（3．49±0．31）VS（2．34±0．28）nmol／mgProt,20．1±1．3VS10．1±1．0,10．6±1．3VS6．3±1．0,t值分别为9．290、20．967、9．119,均P〈0．05];糖尿病肾病组肾皮质SOD活性蛋白、Fox01mRNA表达水平明显低于糖尿病组[分别为（23±8）VS（43±6）U／mgProt,0．20±0．06VS0．35±0．05,t值分别为7．069、6．717,均P〈0．05]。FoxO1蛋白表达水平各组问比较无显著差异（均P〉0．05）。结论糖尿病肾病大鼠肾皮质FoxO1 mRNA表达水平降低,其机制可能通过下调其抗氧化靶基因使。肾脏氧化应激反应增强,从而参与糖尿病肾病发生发展的过程。     

IgA肾病全基因组关联分析研究

已有研究表明,遗传因素在IgA肾病发病机制中起着重要作用。近年兴起的全基因组关联分析研究(GWAS)为遗传学研究提供了新的工具和思路。中山大学附属第一医院肾内科进行了中国汉族人群IgA肾病GWAS研究,发现两个中国汉族人群特有的遗传易感位点(17p13和8p23),同时还验证了在欧美研究中发现的两个易感位点(22q12和MHC区域),并发现多个易感基因与IgA肾病各临床表型相关联。GWAS研究对于明确IgA肾病的遗传发病机制,进一步探索IgA肾病特异性治疗方法及干预新靶点具有重要的科学意义和实用价值。     

糖尿病肾病患者肾小球中α-辅肌动蛋白-4和肾病蛋白的表达及其临床意义

目的通过检测α-actinin-4mRNA和nephrinmRNA在糖尿病肾病（DN）患者肾小球组织中的表达,探讨其在糖尿病肾病患者蛋白尿发生中的作用。方法用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测α-actinin-4mRNA和nephrinmRNA在测糖尿病肾病组、单纯糖尿病组、单纯血尿组及对照组患者肾小球组织中的表达。结果糖尿病肾病组nephrinmRNA表达显著低于单纯糖尿病、单纯血尿组及对照组,糖尿病肾病组α-actinin-4mRNA表达显著低于单纯糖尿病、单纯血尿组及对照组,两者表达存在正相关。结论糖尿病肾病患者肾小球组织nephrin和α-ctinin-4mRNA的表达减少,导致蛋白尿的产生。     

抗肾小球基膜肾炎合并糖尿病肾病

中年男性,以持续肉眼血尿伴大量蛋白尿、肾功能减退、血抗肾小球基膜( GBM)抗体阳性起病；肾活检组织学符合新月体肾炎,免疫荧光见IgG沿肾小球毛细血管袢线性沉积,符合抗GBM肾炎,同时亦见肾小球呈结节样改变、肾小管基膜(TBM)增厚、动脉透明变性等,超微结构观察GBM呈均匀一致性增厚,经糖耐量检查确诊糖尿病.该患者最终诊断为抗GBM肾炎合并糖尿病肾病(DN).     

结核分枝杆菌全基因组测序数据分析方法与应用进展

全基因组测序技术已经广泛应用于结核分枝杆菌的研究中,包括谱系鉴定、微进化、耐药预测、传播监测、混合感染诊断等多方面。生物信息学在基因组学研究中贯穿了从数据处理、分析到可视化的各个阶段,对全基因组测序技术的应用起到了至关重要的作用。笔者主要介绍和归纳了目前在结核分枝杆菌全基因组测序中常用的主流生物信息学分析软件和平台,并对近年来新开发的生物信息学分析方法从可用性、软件选择及应用等方面进行概述,为同领域研究者更方便、更灵活地开展数据分析和快速选择研究分析工具提供参考。     

全基因组测序分析北京地区人源结肠弯曲菌基因组特征和耐药性

目的 了解北京地区人源结肠弯曲菌的耐药特征、毒力特征及多位点序列分型等遗传进化关系。方法 对2019-2021年北京市肠道门诊腹泻病例中分离到的36株结肠弯曲菌,采用琼脂稀释法进行抗生素敏感性检测;基于全基因组测序结果分析其耐药基因、毒力基因、多位点序列分型及全基因组单核苷酸多态性(whole genome single nucleotide polymorphisms, wgSNPs)遗传进化分析。结果 36株结肠弯曲菌对萘啶酸和四环素的耐药率为100.0%,对环丙沙星的耐药率为97.2%,对红霉素和阿奇霉素的耐药率为38.9%;36株菌均为多重耐药株,有10种耐药模式。基于全基因组测序结果,36株结肠弯曲菌分为21种ST型,优势克隆群为CC828;携带大环内脂类、喹诺酮类、氨基糖苷类、酰胺醇类、四环素类等多种类型耐药基因;携带6类38种毒力基因。wgSNPs遗传进化分析显示克隆群CC1150与优势克隆群CC828相距较远,处于独立的分枝,CC828克隆群内菌株聚集成3簇,呈现多样性分布。结论 北京市人源结肠弯曲菌分离株耐药严重,多重耐药谱广泛;耐药基因与耐药表型有一定的关联;克隆复...     

肾小球足细胞synaptopodin和WT-1表达水平与糖尿病肾病患者肾脏损害的关系

目的 观察synaptopodin和WT-1在糖尿病肾病患者肾脏组织内的表达水平,探讨其对糖尿病肾病进展的影响.方法 选取1998年1月至2005年9月经解放军二八一医院确诊的35例糖尿病肾病患者,收集肾脏组织标本,根据病理变化分为弥漫性系膜硬化组(n=20)和结节性硬化组(n=15),另以7例肾脏肿瘤患者瘤旁肾脏组织为对照.应用间接免疫荧光双标记和激光共聚焦显微镜技术检测肾脏组织内synaptopodin和WT-1表达水平.收集患者肾脏活检前24h尿蛋白定量、血肌酐、评估的肾小球滤过率等临床资料.采用单因素方差分析、q检验、t检验、直线相关分析进行数据统计.结果 结节性硬化组与弥漫性系膜硬化组比较,24 h尿蛋白定量和血肌酐升高[24 h尿蛋白定量分别为(3.7±0.9)、(5.6 ±1.6)g,/24 h,t=4.177,P<0.05;血肌酐分别为(92±20)、(135±45)vmol/L,t=10.455,P<0.05] ,评估的肾小球滤过率降低[分别为(65±19)、(53±24)ml/min,t=8.921,P<0.05] .与对照组相比,糖尿病肾病患者肾组织内足细胞数量(F=4.06,P<0.05)、synaptopodin(F=3.79,P<0.05)、WT-1表达显著减少(F=5.68,P<0.05),结节性硬化组较弥漫性系膜硬化组减少更为显著(q值分别为5.80、6.42、5.35,均P<0.05).糖尿病肾病患者synaptopodin 和WT-1表达与24 h尿蛋白定量呈负相关(相关系数分别为-0.64、-0.71,均P<0.05),与评估的肾小球滤过率呈正相关(相关系数分别为0.57、0.62,均P<0.05).结论 糖尿病肾病患者肾小球内synaptopodin和WT-1表达降低,并且与肾脏损害临床指标存在相关性,提示足细胞损伤可能为糖尿病肾病进展的原因之一.     

糖尿病和糖尿病肾病患者循环lncRNA表达谱的分析

目的分析健康对照组、糖尿病患者、糖尿病肾病患者循环lnc RNA及m RNA表达谱的差异,探讨糖尿病和糖尿病肾病的表观遗传学发病机制,为糖尿病肾病寻找新的治疗靶点提供依据。方法采集2015年1月至3月中国医科大学附属第一医院肾内科收治的肾活检病理明确为结节性糖尿病肾小球硬化症患者21例(DN组)、2型糖尿病患者9例(DM组)及19名正常健康人(N组)的血清。采用Arraystar Human lnc RNA/m RNA V3.0芯片进行lnc RNA和m RNA表达谱检测,使用Agilent Feature Extraction软件对获得的微阵列图像包含的讯息进行提取,采用Gene Spring GX软件包对获得lnc RNA及m RNA原始表达讯息进行标准化。结果与糖尿病组及正常对照组相比,糖尿病肾病组患者尿白蛋白/肌酐比值和血清肌酐显著升高,估计肾小球滤过率(estimated glomeruar filtration rate,e GFR)显著下降(P0.05)。与健康对照组相比,糖尿病组血清中有245个lnc RNA表达上调和680个lnc RNA表达下调。与糖尿病组相比,糖尿病肾病组血清中有45个lnc RNA表达上调和813个lnc RNA表达下调。自正常组到糖尿病组,再到糖尿病肾病组,lnc RNA-ARAP1-AS2表达逐渐上调(DM/N 2.82倍,DN/DM 2.47倍),lnc RNAARAP1-AS1表达逐渐下调(DM/N 2.24倍,DN/DM 4.79倍),其靶基因ARAP1(Arf GAP with Rho GAP domain,ankyrin repeat and PH domaim 1)m RNA的表达逐渐上调(DM/N 2.25倍,DN/DM 2.45倍)。结论表达下调的lnc RNA-ARAP1-AS1和表达上调的lnc RNA-ARAP1-AS2作用于靶基因m RNA-ARAP1,使m RNA-ARAP1在糖尿病和糖尿病肾病中表达上调,可能通过调控Rho激酶和EGF受体途径,参与了糖尿病和糖尿病肾病的发生,其有望成为糖尿病和糖尿病肾病新的生物标志物。     

2型糖尿病的全基因组关联研究

近年来,全基因组关联研究在复杂疾病遗传学方面取得了巨大成功.作为一种典型的复杂疾病,2型糖尿病也是重要的研究热点.本文就全基因组关联研究及其在2型糖尿病的应用进行综述.     

趋化因子和糖尿病肾病

趋化因子在糖尿病肾病(DN)发病机制中具有重要的作用,趋化因子的表达受到诸多因素的影响,阻断趋化因子的病理效应可能是DN治疗的新的靶点。     

糖尿病全基因组关联研究告诉我们什么？

全基因组关联研究（genome—wide association study,GWAS）是指在全基因组层面上,利用现代基因芯片技术,通过对大样本人群DNA进行高密度遗传标记的分型检测,从而寻找多基因复杂病如糖尿病、肥胖病等的遗传因素的一种研究方法,能够发现与疾病发生、发展相关的基因变异位点.     

2型糖尿病全基因组关联分析的研究进展

全基因组关联研究(GWAS)使用高通量的基因检测技术分析成百上千个遗传标记(基因型)与临床疾病和可测性状(表型)的相关性.2型糖尿病是环境和遗传因素共同作用的结果,GWAS在2型糖尿病的研究方面取得了重要进展,发现了涉及胰岛β细胞发育和功能的新的基因区域,为2型糖尿病的病因学研究及防治提供新的思路.     

肾小球基底膜中胶原的合成、降解与糖尿病肾病

糖尿病肾病是终末期肾病的主要原因,发病机制复杂.肾小球基底膜增厚及系膜区细胞外基质增生是主要的病理特点,胶原合成增多、降解减少是肾脏病理改变的主要原因.研究肾小球滤过屏障的生理功能与损伤机制,对深入了解糖尿病肾病的发生、发展尤为重要.