莪术油注射液致人卵巢癌SKOV_3细胞胀亡形态变化研究

目的研究莪术油注射液对人卵巢癌SKOV3细胞形态学改变的影响。方法以不同的药物浓度作用人卵巢癌SKOV3细胞株后,采用光学显微镜和透射电镜观察卵巢癌SKOV3细胞形态学变化。结果光镜下可见莪术油低浓度组部分细胞体积开始变大,细胞胞浆空泡化,胞浆内出现致密颗粒,细胞核开始变形。细胞胞浆出现大面积的空泡,细胞核变形明显,细胞质出现颗粒脱落,出现细胞质空泡,核内染色质分散。高浓度组细胞肿胀,胞浆减少,核浆比例增加,细胞质大量颗粒脱落,细胞质空泡明显,有胞膜崩解、细胞核溶解;电镜下可见卵巢癌SKOV3细胞胀亡,且呈浓度依赖性。结论莪术油注射液诱导SKOV3细胞胀亡是其抑制肿瘤细胞生长的机制之一。     

柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞环氧化酶2mRNA及蛋白表达水平的影响

目的：研究中药柚皮苷对人卵巢癌SK—OV3细胞环氧化酶2（CoX-2）tuRNA及蛋白表达水平的影响。方法：常规培养人卵巢癌sK—OV3细胞,分为空白对照组、柚皮苷10umol／L组、柚皮苷20tzmol／L组、柚皮苷40umol／L组、阳性对照组（塞来昔布80tLmol／L）。MTT法测定柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响,运用Real—timePCR和WesternBlot法测定培养48h后各组细胞中COX_2mRNA和蛋白表达水平的变化。结果：MTT检测法显示,柚皮苷各浓度处理组,时间依赖性和剂量依赖性地抑制人卵巢癌SKOV3细胞生长。经药物处理48h后,Real-timePCR结果显示,与空白对照组（1．094±0．053）比较,10、20umol／L柚皮苷即对SK—OV3细胞COX_2mRNA表达抑制作用（O．828±0．006,0．753±0．011,P〈0．05）,而40gmol／L柚皮苷则明显下调COX-2mRNA的表达（0．412±0．216,P〈0．01）,与塞来昔布组（0．321±0．017）的抑制程度相近。WesternBlot法检测结果显示,与空白对照组（1．7325±0．0826）相比,10umol／L柚皮苷组相对表达量（1．7925±0．0880）虽略有上调,但无统计学差异,20、40／umol／L柚皮苷组均可明显下调SKOV3细胞COX-2蛋白的表达（1．2225±0．0822,1．2725±0．0763,P〈0．05）,塞来昔布组也明显抑制CoX-2蛋白的表达。结论：柚皮苷可抑制人卵巢癌SKOV3细胞体外增殖并抑制COX-2mRNA和蛋白的表达。     

Cpd5对人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制和凋亡诱导作用

目的：观察Cpd5[2-（2-巯基乙醇）-3-甲基-1,4-萘醌,Compound5]对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响。方法：MTT法观察Cpd5对SK-OV3细胞的生长抑制作用,AnnexinV/PI双标记流式细胞术检测Cpd5对SKOV3细胞的凋亡诱导,Hoechst-33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态。结果：5、10、20、30、40、50、60μmol/LCpd5处理SKOV3细胞48h,生长抑制率分别为2.77%、5.19%、10.61%、41.15%、71.37%、82.90%、89.81%。不同时间点（12、24、48和72h）检测,细胞生长抑制率存在剂量-时间依赖关系。流式细胞术检测,30μmol/LCpd5处理12、24和48h后,细胞凋亡率分别达9.25%、20.07%、56.16%;50μmol/L组的细胞凋亡率明显高于30μmol/L,且随时间增加而显著增加。用40、50和60μmol/LCpd5处理细胞12h,光镜观察即可见明显的形态学改变。荧光显微镜观察：AnnexinV-EGFP/PI双染显示,实验组比阴性对照组细胞凋亡率明显增多;Cpd5作用24、48h后,Hoechst-33258染色可见细胞出现明显的凋亡形态,20μmol/L浓度组凋亡率增加,30、40、50、60μmol/L各组细胞凋亡率显著增加。结论：Cpd5能以剂量-时间依赖的方式抑制SKOV3细胞增殖并诱导凋亡,是潜在的抗卵巢癌新化合物。     

拉帕替尼联合顺铂对人卵巢癌细胞SKOV3生长的影响

目的探讨新型靶向治疗药物拉帕替尼联合顺铂(DDP)对人卵巢腺癌细胞株SKOV3的增殖抑制作用以及对磷酸AKT蛋白表达的影响。方法体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3,采用MTT方法检测不同浓度拉帕替尼、DDP单用或者合用对细胞增殖活力的改变;用流式细胞仪进行细胞周期分析;用流式细胞仪检测SKOV3应用拉帕替尼前后磷酸化AKT(P-AKT)蛋白的表达。结果拉帕替尼及顺铂单独使用即对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞有增殖抑制作用,不同浓度的拉帕替尼与顺铂联合应用对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞的增殖抑制作用较单药组增强(P<0.05),与对照组相比有统计学意义(P<0.05);应用拉帕替尼前后P-AKT蛋白的表达有显著不同(P<0.05)。结论拉帕替尼联合顺铂可显著抑制SKOV3细胞株的增殖,其作用可能与P-AKT的表达有关,为其在卵巢癌上的应用提供了新的靶点和一定的理论基础。     

熊果酸对人上皮性卵巢癌 SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究熊果酸(UA)对人上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 将处于对数生长期人上皮性卵巢癌SKOV3细胞随机分为5组:正常对照组、熊果酸(40、20、10 mg·L-1)干预组和顺铂(40 mg·L-1)干预组(阳性对照组)。药物干预48 h后,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增值抑制率;通过流式细胞仪分析细胞周期的改变、观察细胞凋亡并计算细胞凋亡率;通过RT-PCR技术检测细胞Bax mRNA和bcl-2 mRNA表达并计算Bax/bcl-2表达比值,Western blot法检测细胞半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达并进行半定量分析。结果 较正常对照组,熊果酸(40、20 mg·L-1)干预组细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01),细胞周期被阻滞于G₂/M期,细胞凋亡率显著升高(P<0.01);熊果酸(40、20 mg·L-1)干预组细胞中bcl-2 mRNA表达显著下调、Bax mRNA表达显著上调,Bax/bcl-2表达比值显著升高(P<0.01),caspase-3蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论 熊果酸具有抑制人上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖并促进其凋亡的作用,其作用机制可能与熊果酸能够有效下调bcl-2 mRNA表达、上调Bax mRNA表达、提高Bax/bcl-2表达比值以及上调caspase-3蛋白表达有关。     

PARP-1抑制剂AG014699对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖及凋亡的影响

目的探讨PARP-1抑制剂AG014699对人卵巢癌细胞株SKOV3`增殖及凋亡的影响。方法①采用MTT法测定AG014699在不同浓度、不同时间对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖作用的影响;②用流式细胞仪测定AG014699在50μmol/L浓度下对人卵巢癌细胞株SKOV3作用24h后对细胞周期及凋亡的影响。结果①MTT测定:在24、48、72h时AG014699在10μmol/L分别测得的OD值与对照组相比,P<0.05,有统计学差异;②流式细胞仪测定:AG014699在50μmol/L浓度下对SKOV3作用24h能明显改变细胞的周期分布,诱导细胞凋亡。结论 AG014699能明显抑制人卵巢癌细胞株SKOV3的增殖并诱导其凋亡。     

大蒜油与顺铂对人卵巢癌SKOV_3细胞生长抑制的联合作用

目的研究大蒜油(garlicoil,GO)、顺铂(cisplatin,CDDP)对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用及二者合用时的联合作用。方法体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,分别用GO、CDDP、GO+CDDP处理24h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测GO、CDDP、GO+CDDP对SKOV3细胞的生长抑制作用,用Chou-Talalay联合指数法评价两药合用对SKOV3细胞生长抑制的联合作用。结果单独应用GO作用于SKOV3细胞24h后,MTT检测发现随着GO浓度的增加,抑制率明显增高。GO和CDDP合用时,二者各自对SKOV3细胞的生长抑制作用增强,GO单用时中效浓度(Dm)为670.5mg/L,与CDDP按浓度比1∶1合用时Dm为138.2mg/L,单用时的Dm是合用时的4.852倍;CDDP单用时Dm为7.088mg/L,与GO按浓度比1∶1合用时Dm为1.037mg/L,单用时的Dm是合用时的6.835倍。GO和CDDP合用时,在不同抑制率下联合指数CI均小于1,所以两药合用时对SKOV3细胞的生长起协同抑制作用。结论在本试验条件下,GO能抑制人卵巢癌SKOV3细胞的生长,同时与CDDP合用时表现为协同作用。     

姜黄素联合顺铂对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖的抑制作用

目的探讨姜黄素及其联合顺铂对体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3增殖的抑制作用。方法将培养的人卵巢癌SKOV3细胞分别单独(姜黄素组或顺铂组)及联合(姜黄素与顺铂联用组)加入不同浓度姜黄素(5、10、20、40μmol/L)、顺铂(2.5 mg/L)作用后,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测SKOV3细胞增殖情况。结果不同浓度姜黄素组随着药物浓度增加、作用时间延长,细胞的增殖抑制率上升,差异有统计学意义(P<0.05);联合用药组明显高于单一用药组(P<0.05),两药联合应用具有协同作用。结论姜黄素对卵巢癌SKOV3细胞增殖具有抑制作用,在一定范围内,这种抑制作用呈剂量-时间依赖性;姜黄素与顺铂联合应用具有协同作用,可提高SKOV3细胞对顺铂的敏感性,是一种理想的化疗增敏剂。     

齐墩果酸对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭、转移的影响及其作用机制研究

目的:探讨齐墩果酸抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭、转移的作用及其机制。方法:采用CCK-8法检测不同浓度齐墩果酸(10、20、40、60、80、100μmol/L)作用12、24、36、48 h对卵巢癌SKOV3细胞增殖能力的影响;采用Transwell实验观察低、高剂量齐墩果酸(20、40μmol/L)作用24 h对SKOV3细胞迁移及侵袭能力的影响;采用Western Blotting法检测低、高剂量齐墩果酸对SKOV3细胞中核因子κB p65(NF-κB p65)、肝再生磷酸酶3(PRL-3)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、上皮钙黏着蛋白E(E-cadherin)等蛋白表达的影响;运用脂多糖(LPS)诱导和NF-κB p65质粒转染SKOV3细胞,采用Western blotting法和实时荧光定量PCR考察低、高剂量齐墩果酸对NF-κB/PRL-3通路相关蛋白及其mRNA表达的影响。结果:随着齐墩果酸给药浓度的增加和作用时间的延长,SKOV3细胞的增殖能力有随之降低的趋势,各剂量组的细胞存活率均显著低于对照组(P<0.05或P<0.0...     

柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞P38MAPK及ERK1/2蛋白表达的影响

目的:探讨中药柚皮苷对人卵巢癌SK-OV3细胞P38MAPK及ERK1/2蛋白表达水平的影响.方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,分为空白对照组、柚皮苷10、20、40 μmol/L组、塞来昔布80 μmol/L组.Western Blot测定培养48 h后各组细胞中P38MAPK及ERK1/2蛋白表达水平.结果:Western Blot结果显示,与空白对照组相比,低浓度柚皮苷组(10、20 μmol/L)对SKOV3细胞P38MAPK及ERK1/2蛋白的表达无明显影响,而40 μmol/L柚皮苷及塞来昔布组可明显下调P38MAPK及ERK1/2蛋白表达,具有统计学差异(P＜0.05).结论:柚皮苷能抑制人卵巢癌SKOV3细胞P38MAPK及ERK1/2蛋白的作用,从而可能阻断卵巢癌的发生、发展.     

莪术油对直肠癌SW1463细胞株增殖、凋亡及Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨莪术油对直肠癌SW1463细胞株增殖、凋亡及相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2表达的影响。方法 水蒸气蒸馏法提取黔产莪术挥发油,配制成40、80、120、160、200、240、280 mg/L浓度梯度,干预SW1463细胞24、48、72 h,MTT法检测莪术油对SW1463细胞的增殖抑制率;Giemsa染色法观察莪术油对SW1463细胞凋亡形态的影响;蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测Capase-3、Bax与Bcl-2蛋白表达。结果 莪术油对SW1463细胞的增殖有明显抑制作用,并呈现时间-剂量相关性,24、48、72 h的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为144.33、134.11、120.04 mg/L;Giemsa染色可见细胞明显的凋亡形态学特征;莪术油干预SW1463细胞24 h后,与对照组比较,Caspase-3、Bax蛋白表达显著上调、Bcl-2蛋白表达显著下调（P<0.05）。结论 莪术油能明显抑制SW1463细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与上调Caspase-3和Bax蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达相关。     

莪术油治疗婴幼儿肺炎疗效观察

目的：了解莪术油治疗婴幼儿肺炎的疗效。方法：患儿随机分为两 ：治疗组35例,给予0．04％莪术油葡萄糖注射液100mg/公斤,1次／日静点;对照组20例,给予病毒唑注射液10mg/（公斤．次）1次／日静点,其它如抗感染、镇咳、止喘、激素的应用及输液等综合治疗两组均相同。结果：治疗组在镇咳、止咳、湿罗消失的时间明显少于对照组,其差异有统计学意义（P均＜0．01）;治疗组热退时间少于对照组,其差异有统计学意义（P＜0．05）。结率：莪术油治疗婴幼儿肺炎有效,安全,简便、易行,值得临床上进一步推广应用。     

莪术油注射液对宫颈癌细胞株Hela增殖及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的：探讨莪术油注射液对宫颈癌细胞Hela增殖的抑制作用及潜在作用机制。方法：采用CCK-8法筛选莪术油最佳给药剂量,并设立对照组和莪术油处理高、中、低剂量组。CCK-8法检测莪术油对Hela细胞生长曲线的影响;流式细胞术检测莪术油对Hela细胞周期的影响;Western Blot试验检测莪术油对Hela细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1蛋白表达的调节作用。结果：CCK-8试验表明,莪术油给药剂量越大,其对Hela细胞增殖的抑制作用越明显,以高剂量组为最优。流式细胞术试验表明,莪术油可将Hela细胞阻滞在G1期,使S期和G2期细胞比例明显降低。Western Blot试验结果显示,莪术油处理后Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1蛋白表达相较于对照组其表达明显降低。结论：莪术油注射液通过调节Wnt/β-catenin信号通路抑制宫颈癌细胞增殖。     

miR-218在上皮性卵巢癌细胞株SKOV3中的生物学功能

目的 探讨微小RNA-218(miR-218)在上皮性卵巢癌细胞株SKOV3中发挥的生物学功能.方法 采用实时定量PCR方法检测上皮性卵巢癌细胞株中miR-218的表达.通过转染miR-218模拟体、miR-218抑制剂外源性地增高或者降低miR-218在SKOV3中的表达,利用MTT、流式细胞术、癌细胞侵袭迁移实验观察miR-218对SKOV3增殖、凋亡和侵袭转移的作用.结果 miR-218能增强SKOV3增殖能力(P＜0.05),而与细胞凋亡、侵袭转移无相关性(P＞0.05).结论 miR-218在上皮性卵巢癌细胞株SKOV3中发挥调节细胞增殖的作用.     

莪术油葡萄糖注射液与5种药物配伍稳定性考察

目的：考察莪术油葡萄糖注射液与头孢唑林钠，头孢哌酮钠，哌拉西林钠，维生素C加地塞米松磷酸钠注射剂分别配伍的稳定性。方法：采用分光光度法测定配伍后莪术油含量的经时变化，HPLC法测定配伍后头孢唑林钠，头孢哌酮钠，哌拉西林钠含量的经时变化。结果：模拟临床用药浓度分别配伍，莪术油葡萄糖注射液与头孢哌酮钠配伍，莪术油在1h内分解达30％以上，为配伍不稳定体系，其余3项配伍较稳定，外观，pH值，含量无明显变化。结论：匠术油葡萄糖注射液与头孢哌酮钠配伍 分解，与其余4种注射剂分别配伍较稳定。     

莪术油对人胃癌SGC-7901细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨莪术油（zedoary turmeric oil）对体外培养胃癌SGC-7901细胞增殖及诱导凋亡的作用。方法胃癌SGC-7901细胞经常规培养,给予不同浓度的莪术油处理,观察细胞生长情况,MMT比色法检测细胞增殖,计算抑制率;流式细胞技术检测SGC-7901细胞的凋亡,并计算凋亡指数。结果莪术油对SGC-7901细胞增殖的抑制率随浓度的增加而增高（P〈0．01）,莪术油诱导SGC-7901细胞凋亡率较对照组显著增加（P〈0．01）。结论莪术油在体外可以抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,促进细胞凋亡。