大黄素葡甲胺对大鼠实验性肠黏连的治疗作用

大黄素为大黄的有效成分之一,大黄素能显著抑制醋酸所致的小鼠毛细血管通透性增加[1];促进豚鼠离体肠管收缩[2];呈剂量依赖性加强豚鼠结肠带平滑肌细胞电和收缩活动,其机制与抑制细胞膜KATP等钾通道的活性相关[3];另外大黄素有抑制大鼠肝纤维化形成的作用[4]。由于大黄素水溶性差,故将大黄素与葡甲胺反应,制成大黄素葡甲胺盐给药,具有水溶性好、pH适宜、稳定、使用方便等特点。药理研究发现大黄素静脉给药对大鼠实验性肠黏连有较好的治疗作用,为了对大黄素进一步开发及应用,探讨其作用机制,本实验就其对大鼠实验性肠黏连的治疗作用及机制…     

大黄素对肝脏疾病的防治作用与安全性研究进展

大黄素是一种蒽醌类衍生物,是从何首乌、大黄等中药中提取得到的主要活性单体.现代药理研究证明,大黄素具有广泛的药理活性,其中对于肝脏疾病如肝脏炎症、肝癌、肝纤维化以及对各类肝损伤等均有良好的防治作用.然而在研究过程中,大黄素对肝细胞的潜在毒性作用也逐渐显现.因此,本研究综合近年来大黄素在肝脏上的研究,对其药理作用、机制及...     

芦荟大黄素诱导斑马鱼肝毒性及作用机制研究

目的利用模式生物斑马鱼模型探索芦荟大黄素致肝毒性及作用机制。方法利用不同浓度芦荟大黄素处理斑马鱼48小时后,计算各组斑马鱼死亡率(%),用Origin 8.0软件绘制最佳的“死亡率—浓度”效应曲线,计算芦荟大黄素对斑马鱼肝脏毒性的最大非致死浓度(maximun non-lethal concentration,MNLC)和10%致死浓度(10%lethal concentration,LC 10)浓度;用NIS-Elements D 3.10高级图像处理软件进行图像分析并采集数据,计算各组斑马鱼肝脏面积、肝脏不透光度平均值和卵黄囊吸收延迟面积;利用CYP及Caspase试剂盒分别对各组斑马鱼CYP 3A4及凋亡相关酶Caspase3和Caspase9的活性进行检测,应用多功能酶标仪分析统计RLU信号强度,探讨芦荟大黄素致肝毒性的作用机制。结果(1)芦荟大黄素对斑马鱼的LC 10和MNLC浓度分别为312μM和229μM,呈现剂量—反应关系。(2)与空白组相比,各给药组斑马鱼的肝脏面积未发生明显改变,但随着芦荟大黄素剂量升高,斑马鱼的肝脏不透光度增加、卵黄囊吸收延迟面积增大。(3)芦荟大黄素能明显抑制斑马鱼体内CYP4503A4酶的表达,且能显著上调斑马鱼体内Caspase3和Caspase9蛋白的水平。结论芦荟大黄素能诱导斑马鱼肝毒性发生,作用机制可能与芦荟大黄素诱导肝细胞凋亡,主要通过激活凋亡相关蛋白实现,并且还与诱导斑马鱼Ⅰ相代谢酶的异常表达相关。     

决明子药用研究

决明子药用研究决明子所含化学成份中的大黄素、大黄酸对人体有平喘、利胆、保肝、降压功效，并有一定抗菌、消炎作用；大黄素葡萄涪贰、大黄素甲醚具有降低血清胆固醇和强心作用。决明子还含有β──胡萝卜素，在人体肝脏酶作用下，可转变成维生素Ａ；此外，尚含有铁、锌...     

大黄素对非酒精性脂肪肝小鼠肝脂质沉积的作用及机制

目的:研究大黄素改善非酒精性脂肪肝小鼠肝脂质沉积作用及分子机制。方法:建立非酒精性脂肪肝的C57BL6小鼠模型,随机分成模型组、大黄素组、罗格列酮组,空白对照组为正常喂养小鼠,每组5只。治疗4周后测定4组动物治疗前后的体质量变化以及血甘油三酯水平,比较4组动物治疗前后的肝脏湿重和病理变化,同时使用Western Blot方法检测脂联素受体2的表达情况。结果:与模型组比较,罗格列酮组治疗后的体质量、肝脏湿重、肝指数均下降,且大黄素组甘油三酯水平均明显降低(P0.05);肝组织脂质沉积明显减轻;脂联素受体2表达显著升高。结论:大黄素对于非酒精性脂肪肝脂质沉积具有较好改善作用,其作用机制与增加脂联素受体2的表达有关。     

基于肝微组织考察何首乌主要单体潜在肝毒性

该研究旨在建立大鼠原代肝微组织评价体系,并首次采用该体系评价何首乌中主要单体肝毒性作用。实验通过二步原位灌注法对大鼠原代肝实质细胞进行分离纯化,并利用肝实质细胞制备肝细胞微组织,最终采用超低吸附板及倒模法完成体外肝毒性评价体系的搭建。体系建立后,选取何首乌中主要单体成分大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚、大黄酸、大黄素及大黄素型单蒽酮,进行体外肝毒性评价。结果显示,大鼠肝原代细胞采用低吸附板法与模具灌注法可形成肝微组织,并具备较好的肝结构及功能,可用于待测药物长期给药后的肝毒性评价。应用该体系进行实验,结果发现何首乌中的5个待测单体均能明显影响大鼠原代肝微组织的增殖,并且呈现剂量-时间依赖关系,肝毒性作用大小依次为:大黄素型单蒽酮大黄酸大黄素大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷大黄素甲醚。实验结果进一步提示,大黄素型单蒽酮及大黄酸单体的原型可能为潜在的肝毒性成分,而大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚的代谢产物更具毒性风险。该研究表明,大鼠原代肝细胞微组织模型体系可实现体外细胞长期给药,与长期服用何首乌后导致肝损伤的临床特点相符合,同时实验结果为何首乌的临床应用及毒性成分研究提供了重要参考。     

大黄素抗肝癌作用机制的研究进展

大黄素是从大黄等多种中药中提取的有效成分之一,具有抗肿瘤、抑菌、抗炎、抗氧化、轻度泻下、保肝等多种作用,而大黄素在抗肝癌治疗的研究表明,其可能是一种潜力巨大的药物。通过分析2008-2019年大黄素抗肿瘤的相关文献,发现大黄素具有抑制肝癌细胞的增殖分裂,促进凋亡,抑制微环境中新生血管的生成及肝癌细胞的侵袭和迁移能力等作用。     

茵陈蒿汤治疗肝胆病的作用机制研究进展

茵陈蒿汤是临床上治疗肝胆病的有效方剂,茵陈蒿汤及其有效成分绿原酸、栀子苷、大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、和大黄素甲醚等,能改变肝内细胞膜表面结构及其渗透性,调节信号通路,调节某些与肝功能有关的蛋白酶的表达,抑制肝细胞凋亡和库普弗细胞以及星状细胞活化,因而具有较显著的抗肝损伤和抗肝纤维化作用。本文综述了近年来茵陈蒿汤用于肝胆病方面的临床及药理作用机制,对其主要有效成分、具体作用靶点进行进深入地探讨,并对其用药前景进行展望,为茵陈蒿汤的临床应用和基础研究提供了科学依据。     

斑马鱼模型筛选何首乌肝毒性的物质基础

目的:用斑马鱼模型探索何首乌肝毒性物质基础,为何首乌肝毒性作用机制研究提供一定的理论依据。方法:将对实验前期所筛选出来的大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷、芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷(质量浓度分别为0. 000 73,0. 002 22,0. 015 05,0. 002 36,0. 198 95,0. 072 73 g·L~(-1))这6种何首乌中的化学成分,继续使用肝脏荧光转基因斑马鱼为动物模型,对受精后72 h的幼鱼连续给药3 d。分别测定给药后1,2,3 d的斑马鱼体内丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),谷胱甘肽(GSH)的活力和总胆红素(TBIL)的含量,分别对其进行切片分析,观察斑马鱼肝脏组织病理学改变。结果:大黄素、大黄酸、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷对斑马鱼体内ALT,AST,GSH的活力和TBIL的含量无明显影响,其斑马鱼肝组织显示正常;芦荟大黄素能显著降低斑马鱼体内ALT,AST,GSH的活力(P 0. 01),显著升高TBIL含量(P 0. 01);芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷能显著降低斑马鱼体内ALT,GSH的活力(P 0. 01),明显升高TBIL含量(P 0. 05,P 0. 01),对斑马鱼体内AST的活力无明显影响,同时此二者的斑马鱼肝组织均出现大片片状坏死,肝组织细胞发生明显形态改变,肝细胞排列不规则等。结论:何首乌中的芦荟大黄素和芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷可对斑马鱼肝脏产生毒性作用,提示芦荟大黄素和芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷可能是何首乌的肝毒性物质基础。     

芦荟大黄素抑制肝癌细胞增殖与迁移的机制

目的探索芦荟大黄素抑制肝癌细胞的潜在作用机制。方法通过MTS、平板克隆形成、EdU染色观察芦荟大黄素对SMMC-7721和Hep3B肝癌细胞增殖的影响,Transwell细胞迁移实验观察芦荟大黄素对SMMC-7721细胞迁移的影响,Western blot观察肝癌细胞内Src/STAT3信号通路相关蛋白的表达,通过分子对接、分子动力学模拟和表面等离子共振技术,进一步研究芦荟大黄素与Src之间的结合作用。结果芦荟大黄素以浓度依赖性的方式抑制肝癌细胞增殖与迁移能力。Western blot结果提示,芦荟大黄素抑制肝癌细胞内Src/STAT3信号通路的激活以及下游增殖和迁移相关蛋白表达。分子对接、分子动力学模拟和表面等离子共振提示,芦荟大黄素与Src具有很强的结合能力。结论芦荟大黄素是一种有效的抗肝癌药物,通过抑制Src/STAT3信号通路抑制肝癌细胞增殖与迁移。     

大鼠口服虎杖后大黄素血药浓度及肝脏分布的研究

目的:建立大黄素体内含量测定方法,对虎杖主要药效成分大黄素在大鼠体内的药代动力学及在肝脏分布的经时变化进行研究,以反映虎杖药材在大鼠体内的作用规律.方法:采用HPLC方法检测生物样品中的大黄素含量,绘制血药浓度-时间曲线、肝脏药物浓度-时间曲线.结果:大黄素在大鼠体内药代动力学模型符合二房室模型,血药浓度给药后9 min达到峰值,实测的Cmax=3.973±0.535 μg/mL.半衰期约为11小时,肝脏药物浓度时间曲线显示,肝脏中药物浓度给药后10 min达到峰值,实测的Cmax=9.654±1.41 μg/g.给药24小时,血浆及肝脏中药物浓度均显著降低.结论:虎杖中大黄素在大鼠体内吸收入血迅速,并快速分布至肝脏.该研究可能对与大黄素结构相似的蒽醌类成分体内代谢的研究具有参考价值,有助于阐明虎杖药理作用的物质基础.     

大黄素改善脂多糖引起的胰岛素抵抗机制研究

目的观察大黄素（emodin）对脂多糖（LPS）引起的炎症与胰岛素抵抗改善的机制。方法在分化成熟的C2C12骨骼肌细胞中加入脂多糖,孵育不同时间,复制体外胰岛素抵抗模型;加入不用浓度大黄素孵育,用RT-PCR方法检测细胞中炎症因子的mRNA表达情况,用免疫蛋白印记技术检测丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路中细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）ERK和Phos-phor-ERK的表达情况,同时检测大黄素对AMPK和ACC的影响以及对氧消耗的影响。结果①大黄素呈剂量依赖性抑制脂多糖引起的IL-6、TNF-αmRNA表达;②大黄素呈剂量依赖抑制MAPK信号通路中ERK的磷酸化激活;③大黄素能激活C2C12骨骼肌细胞中AMPK和ACC的磷酸化;④大黄素抑制分化成熟的C2C12骨骼肌细胞的氧消耗。结论大黄素可抑制LPS引起的MAPK通路中ERK的激活,进而抑制炎症因子IL-6、TNF-α的分泌;同时可抑制分化成熟的C2C12细胞的氧消耗,激活AMPK和ACC,从而促进葡萄糖转运,最终改善炎症引起的胰岛素抵抗。     

大黄及其有效成分对人肺腺癌A549细胞的影响

目的：观察大黄及其有效成分大黄素对人肺腺癌A549细胞的影响,为临床抗肿瘤提供实验证据。方法：采用实时细胞分析系统和改良MTT方法,观察单味中药大黄（0.05μg/L、0.5μg/L、5μg/L）及其有效成分大黄素（16 nmol/L、80 nmol/L、400 nmol/L、2μmol/L、10μmol/L）对A549细胞的作用,同时观察FRAP/mTOR抑制剂、PI3K抑制剂、MAPKK抑制剂和Caspase-3抑制剂对上述作用的影响。结果：大黄及其有效成分大黄素能显著抑制A549细胞增殖,并呈剂量依赖性,动态IC50研究发现大黄素在55 h时IC 50值最低,反应此时刻抑制A549细胞效应最大,其中Caspase-3抑制剂可以明显阻断大黄素对A549细胞的抑制作用。结论：大黄及其有效成分大黄素能有效抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,呈剂量依赖性,证实大黄素是通过激活Caspase-3来抑制肺腺癌细胞的增殖。     

大黄素通过减轻氧化应激和肝细胞凋亡对脂多糖诱导急性肝损伤的保护机制研究＊

目的 观察大黄素对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的急性肝损伤大鼠的影响，并探讨其可能的作用机制。方法 40只雄性清洁级SD大鼠随机分为空白组（Control），模型组（Model）、大黄素低浓度组（Emodin L），大黄素高浓度组（Emodin H），每组10只。除空白组，其他组均腹腔注射LPS建立急性肝损伤模型，造模后四组均给予正常食水，另大黄素低浓度组给予浓度为20 mg·kg^-1的大黄素（ig，bid），大黄素高浓度给予浓度为40 mg·kg^-1的大黄素（ig，bid），空白组及模型组给予等体积蒸馏水（ig，bid），苏木精-伊红（HE）染色观察大鼠肝组织病理变化，大鼠血清中天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）的变化，大鼠肝脏中氧化应激指标谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA），运用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测肝细胞凋亡情况，免疫荧光标记法（IF）观察促凋亡相关因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的表达。免疫印迹试验（Western Blot）检测抗凋亡因子中B淋巴细胞瘤-2基因Bcl-2、促凋亡因子中抑癌基因p53的蛋白表达。结果 与Control组相比，LPS腹腔注射可以导致大鼠肝脏病理性损伤和肝功能异常，致使肝脏氧化应激明显增强，肝细胞凋亡数量明显增多，促凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）分泌明显增加，抗凋亡因子B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）蛋白表达受到抑制，促凋亡因子肿瘤抑制基因（p53）蛋白表达明显增强；而与模型组相比，大黄素组可以改善肝功能水平及肝脏病理变化，调节肝脏氧化应激，减轻肝细胞凋亡，减少半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的分泌，增强抗凋亡因子Bcl-2的蛋白表达，降低促凋亡因子p53的蛋白表达。结论 大黄素对LPS诱导的急性肝损伤起保护作用，其作用机制可能通过调节氧化应激和减轻肝细胞凋亡途径来实现。     

大黄素抑制血管平滑肌细胞增殖的研究进展

大黄素(emodin)具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节等多种药理作用,同时大黄素也能抑制血管平滑肌细胞的增殖。国内外的多项研究都已证实大黄素能明显抑制血管平滑肌细胞的增殖,抑制细胞的迁移,促进细胞凋亡,并从多个方面对其进行了相关机制的探讨。同时,结合临床的转化性研究和应用探索也已展开。现就大黄素抑制血管平滑肌细胞增殖的研究进展做一综述。     

Emodin inhibiting epithelial-mesenchymal transition in pulmonary fibrosis through the c-MYC/miR-182-5p/ZEB2 axis

Emodin is a natural anthraquinone compound, which is the main component found in the traditional Chinese herb Polygonum cuspidatum. The anti-fibrosis effects of Emodin have been reported. This study aimed to explore the specific mechanism of Emodin in the epithelial-mesenchymal transition (EMT) of pulmonary fibrosis. The pulmonary fibrosis mice models were constructed with bleomycin, the EMT models of alveolar epithelial cells were stimulated by TGF-β1, and Emodin was used for intervention. c-MYC and miR-182-5p were overexpressed or silenced by cell transfection. Our results demonstrated that Emodin attenuated pulmonary fibrosis induced by bleomycin in mice, and inhibited EMT, meanwhile downregulated c-MYC, upregulated miR-182-5p, and downregulated ZEB2 in vitro and vivo. Next, overexpression of c-MYC promoted EMT, while silencing c-MYC and overexpressing miR-182-5p inhibited EMT. Then, c-MYC negatively regulated the expression of miR-182-5p with a direct binding relationship. And miR-182-5p inhibited ZEB2 expression in a targeted manner. Finally, Emodin inhibited EMT that had been promoted by overexpression of c-MYC. In conclusion, Emodin could attenuate pulmonary fibrosis and EMT by regulating the c-MYC/miR-182-5p/ZEB2 axis, which might provide evidence for the application of Emodin in the treatment of pulmonary fibrosis.     

大黄素对大鼠原位肝移植急性排斥反应中 TNF-α，IL-10水平的影响

目的：探讨大黄素对大鼠肝移植急性排斥反应的作用机制。方法：以近交系大鼠建立原位肝移植模型,分为3组,每组各16对：BN→BN同基因对照组,Lewis→BN急性排斥组,Lewis→BN大黄素干预组。各组随机选取6只受体大鼠,于术后1,3,5,7 d的取尾静脉血样,ELISA法检测TNF-α,IL-10含量,并于第7日处死,检测病理组织学改变。其余每组各10只观察其生存状况和生存期。结果：大黄素干预组术后中位生存时间为25.6 d,较排斥组10.9 d明显延长(P<0.05);与排斥组相比,大黄素干预组肝脏组织病理排斥反应明显降低(P<0.01),外周血TNF-α的含量明显下降(P<0.05),IL-10上调,自术后3 d有统计学差异(P<0.05)。结论：大黄素能够有效抑制肝移植大鼠的急性排斥反应,其作用与降低外周血TNF-α的含量,上调IL-10水平有关。

     

大黄素对肝癌细胞SMMC-7721抑制作用及P53、C-myc蛋白的表达

目的 研究大黄素对肝癌细胞 SMMC-7721 的生长抑制作用和 P53、C-myc 蛋白的表达。方法 应用 MTT法观察大黄素、5-FU 对 SMMC-7721 的生长抑制作用,免疫组化法染色(SP 法)测定细胞凋亡时 P53、C-myc 蛋白的表达情况。结果 大黄素对肝癌细胞 SMMC-7721 有明显的生长抑制作用,其 IC50为 21.6 mol/L。大黄素对 SMMC-7721的抑制作用优于 5-FU(P<0.05);大黄素作用于细胞后,P53、C-myc 蛋白均有一定程度下调,而 C-myc 下调较 P53明显。结论 大黄素对 SMMC-7721 有明显的生长抑制作用,作用于 SMMC-7721 后 P53、C-myc 蛋白的表达均有下调。