胰岛素介导的内皮依赖性血管舒张功能与高血糖关系的实验研究

目的：研究不同浓度胰岛素，葡萄糖对培养血管内皮细胞一氧化氮（NO）产生的影响，探讨糖尿病时内皮依赖性血管舒张异常的作用机制。方法：用放免法测定内皮细胞cGMP水平来反映NO的量，半定量RT－PCR检测NO合酶（eNOS)mRNA水平。结果：胰岛素（0.18-6.0nmol/L)，葡萄糖（20mmol/L,40mmol/L)能增加内皮细胞cGMP产量，并呈浓度和时间依赖性；高浓度葡萄糖上调eNOS mRNA水平，而胰岛素对其无影响，在高浓度葡萄糖下，胰岛素（6.0nmol/L)刺激NO的生成作用明显降低。结论：胰岛素介导的内皮依赖性血管扩张与胰岛素刺激内皮细胞NO合成有关；血管内皮对胰岛素的敏感性减低是胰岛素抵抗的一部分；高浓度葡萄糖可能会抑制胰岛素介导的内皮依赖性血管舒张。     

老年大鼠主动脉对胰岛素敏感性的改变及其机制

目的观察大鼠主动脉对胰岛素敏感性的增龄改变并分析其可能机制。方法老年组采用老年（18月龄）SD大鼠20只,随机选取成年（15周龄）SD大鼠20只为对照组。采用离体血管灌流技术,观察胸主动脉对胰岛素反应性的变化,并同时测定两组主动脉血管一氧化氮（NO）释放量及血管一氧化氮合酶（eNOS）活性;免疫组织化学法及Western Blot法检测老年组及成年组胸主动脉eNOS的蛋白表达变化。结果胰岛素可以浓度依赖性舒张成年大鼠胸主动脉,舒血管作用具有内皮依赖性。与之相比,老年大鼠主动脉对胰岛素的舒张反应显著下降（P<0.05）。同时发现,与成年组相比,老年组NO释放量以及eNOS活性显著降低（P<0.05）,免疫组织化学染色显示老年组主动脉eNOS的蛋白表达显著降低;而Western Blot检测发现老年组血管eNOS磷酸化水平显著降低（P<0.05）。结论血管组织内源性eNOS-NO系统活性下降可能是衰老导致的血管胰岛素敏感性下降的重要机制。     

胰岛素抵抗和2型糖尿病大鼠主动脉内皮依赖性舒张功能及相关活性物质的变化

目的观察胰岛素抵抗和2型糖尿病大鼠胸主动脉内皮依赖性血管舒张功能和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、磷脂酰肌醇-3激酶（PBK）、蛋白激酶B（PKB）的变化,探讨胰岛素抵抗和高血糖状态下内皮功能障碍的发生机制。方法4～6周龄雄性SD大鼠高糖高脂喂养6周,建立胰岛素抵抗模型（IR组）,再从中取20只予小剂量链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型（DM组）,喂养8周后用正常血糖高胰岛素钳夹技术的葡萄糖输注率评价胰岛素抵抗,用大鼠离体主动脉环对乙酰胆碱的血管舒张反应来评价大鼠的内皮依赖性血管舒张功能,Gress重氮化反应法检测主动脉NO含量,免疫组化法检测主动脉eNOS阳性表达,RT—PCR方法检测主动脉PBK、PKB、eNOSmRNA表达,透射电镜检测大鼠主动脉超微结构变化,并检测空腹血糖、空腹胰岛素、甘油三酯和胆固醇水平,计算胰岛素敏感指数。结果（1）IR和DM组大鼠体重、空腹胰岛素、甘油三酯和胆固醇均较正常对照组显著高（P〈0．01）,胰岛素敏感指数、葡萄糖输注率显著低（P〈0．01）。（2）IR和DM组大鼠胸主动脉内皮依赖性血管舒张功能显著低于NC组（P〈0．05）,DM组又低于IR组,大鼠主动脉对乙酰胆碱诱导的最大舒张反应与空腹血糖、甘油三酯、胆固醇和空腹胰岛素呈显著负相关,与胰岛素敏感指数显著正相关（P均〈0．01）。（3）IR、DM组大鼠离体主动脉NO浓度及PBK、PKB、eNOSmRNA相对光密度较正常对照组显著低（P〈0．01）,而DM组上述指标又低于IR组（P〈0．05）。免疫组化显示IR、DM组主动脉eNOS阳性表达较正常对照组显著低（P〈0．01）。（4）IR和DM组大鼠胸主动脉透射电镜检查均可见内皮细胞和内皮下超微结构的病理改变。结论胰岛素抵抗和2型糖尿病大鼠存在内皮依赖性血管舒张功能下降和主动脉超微结构的病理改变,同时主动脉NO浓度、eNOS免疫组化阳性表达、PBK、PKB、eNOSmRNA表达也下降,提示PI-3K、PKB、eNOS表达下降致NO产生减少可能是胰岛素抵抗和高血糖内皮功能障碍的机制之一。     

罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠主动脉内皮功能的影响及其机制的研究

目的:观察罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张和一氧化氮(NO)含量、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、磷脂酰肌醇-3激酶及蛋白激酶B表达的影响。方法:4~6周龄雄性SD大鼠予高糖高脂喂养8周,建立胰岛素抵抗模型,分为对照组和治疗组,每组各15只,治疗组用罗格列酮[3mg/(kg.d)]干预8周,另取15只正常大鼠为正常组。实验终止时用葡萄糖输注率评价胰岛素抵抗,观察大鼠离体主动脉对乙酰胆碱依赖性血管舒张反应,Griess重氮化反应法检测主动脉NO含量,逆转录聚合酶链反应方法检测磷脂酰肌醇-3激酶、蛋白激酶B和eNOS mRNA表达,电镜观察主动脉超微结构。结果:对照组葡萄糖输注率、主动脉内皮依赖性舒张功能、NO浓度、磷脂酰肌醇-3激酶、蛋白激酶B、eNOS mRNA表达较正常组均显著降低(P<0.01),治疗组上述指标均显著升高(P<0.01)。透射电镜检查可见对照组主动脉内皮细胞和内皮下结构的病理改变,治疗组胸主动脉超微结构接近正常。结论:胰岛素抵抗大鼠存在内皮依赖性舒张功能紊乱和主动脉NO浓度、磷脂酰肌醇-3激酶、蛋白激酶B、eNOS mRNA表达下降,用罗格列酮治疗可改善其内皮功能,增强NO产生和磷脂酰肌醇-3激酶、蛋白激酶B、eNOS mRNA表达。     

胰岛素抵抗与血管内皮功能障碍

胰岛素抵抗和血管内皮功能障碍之间有重要联系，两者相辅相成，共同在代谢综合征和心血管疾病的发生发展中起重要作用。高血糖导致的葡萄糖中毒、血中游离脂肪酸水平升高和血脂异常导致的脂质毒性增加、与代谢和心血管疾病有关的炎性状态是引起胰岛素抵抗和血管内皮功能障碍的共同机制。采用多种措施改善胰岛素抵抗和血管内皮功能障碍对预防和治疗代谢性疾病和心血管疾病具有重要意义。     

胰岛素抵抗与血管内皮功能障碍

胰岛素抵抗和血管内皮功能障碍之间有重要联系,两者相辅相成,共同在代谢综合征和心血管疾病的发生发展中起重要作用.高血糖导致的葡萄糖中毒、血中游离脂肪酸水平升高和血脂异常导致的脂质毒性增加、与代谢和心血管疾病有关的炎性状态是引起胰岛素抵抗和血管内皮功能障碍的共同机制.采用多种措施改善胰岛素抵抗和血管内皮功能障碍对预防和治疗代谢性疾病和心血管疾病具有重要意义.     

人内皮型一氧化氮合酶重组腺病毒在小鼠肺内表达

一氧化氮合酶（NOS）是合成一氧化氮（NO）的关键酶，主要包括3个亚型：神经型（nNOS）、诱导型（iNOS）、内皮型（eNOS）。eNOS主要分布于血管内皮，通过催化NO的生成而在调节血管壁张力及维持血管壁构型方面发挥重要作用。各种引起内皮功能受损的原因均可使NOS生成减少，导致NO生成不足，破坏体内内皮素1／一氧化氮（ET-1／NO）的平衡。本研究从人脐静脉血管内皮成功克隆出人eNOS（heNOS）eDNA全长基因的基础上，构建了复制能力缺陷型heNOS重组腺病毒转移载体，并对其功能和转移途径进行初步研究，旨在探讨从基因角度补充NOS以维持体内ET-1／NO平衡，治疗因NO不足而导致的血管损伤性疾病的可能性。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张功能的影响

目的观察2型糖尿病（T2DM）大鼠胸主动脉内皮依赖性血管舒张功能和一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（eNOS）的变化及罗格列酮（RSG）治疗对其内皮功能的影响。方法SD大鼠经高糖高脂喂养6周后予小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM大鼠模型，糖尿病大鼠又分为对照（DM）组和RSG治疗组，RSG组用RSG干预8周，另选正常大鼠为正常对照（NC）组。实验终止时用正常葡萄糖高胰岛素钳夹技术的葡萄糖输注率（GIR）评价胰岛素抵抗，观察大鼠离体主动脉内皮依赖性血管舒张反应和主动脉NO、eNOS的变化。结果T2DM大鼠GIR、胸主动脉内皮依赖性血管舒张反应、主动脉NO含量及eNOS阳性表达较NC组显著降低（P〈0、01），RSG治疗后上述指标均显著升高（P〈0．05）。结论T2DM大鼠存在内皮依赖性血管舒张功能紊乱，RSG治疗可改善内皮功能，增强NO水平和eNOS的活性。     

胰岛素抵抗与血管内皮功能障碍共同发病机制的研究进展

胰岛素抵抗和血管内皮功能障碍是代谢性疾病和心血管疾病的重要危险因素,在肥胖、2型糖尿病等胰岛素抵抗状态下,均存在内皮依赖性血管舒张功能障碍,内皮源性一氧化氮产生减少,从而提出了内皮细胞胰岛素抵抗的新观点.其共同的发病机制--氧化应激、炎性反应、糖基化终末产物及己糖胺的生物合成途径成为近年来的研究热点,为以研究代谢综合征为代表的代谢异常和心血管疾病的发病机制提供了病理生理学基础.     

胰岛素抵抗与皿管内皮功能障碍共同发病机制的研究进展

胰岛素抵抗和血管内皮功能障碍是代谢性疾病和心血管疾病的重要危险因素，在肥胖、2型糖尿病等胰岛素抵抗状态下，均存在内皮依赖性血管舒张功能障碍，内皮源性一氧化氮产生减少，从而提出了内皮细胞胰岛素抵抗的新观点。其共同的发病机制——氧化应激、炎性反应、糖基化终末产物及己糖胺的生物合成途径成为近年来的研究热点，为以研究代澍综合征为代表的代谢异常和心血管疾病的发病机制提供了病理生理学基础。     

NADPH氧化酶源性活性氧在糖尿病及其血管并发症发生中的作用机制

2型糖尿病的发病机制为胰岛素抵抗和胰岛素分泌受损.最新的研究结果显示,氧化应激在糖尿病及其并发症的发病机制中起重要作用.在高游离脂肪酸(FFA)条件下,由于活性氧(ROS)产生过多引起的氧化应激可造成胰岛素抵抗和胰岛B细胞功能丧失,导致糖尿病的发生,而血糖升高进一步加重氧化应激,引发大血管和微血管病变,产生糖尿病并发症.通过研究氧化应激在糖尿病及其并发症发病中的作用机制,为防治糖尿病及其并发症提供新的理论依据.机体内多种酶体参与了ROS的生成,如NADPH氧化酶(NOX)、黄嘌呤氧化酶、线粒体呼吸链酶复合体、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及脂氧合酶(LOX)等.本研究旨在探讨NOX源性ROS在糖尿病及其血管并发症发生中的作用机制.     

抑制基质金属蛋白酶2改善血管内皮功能,预防胰岛素抵抗大鼠高血压

众所周知,胰岛素抵抗与高血压相关。研究者认为胰岛素抵抗性高血压和血管内皮功能障碍是血管基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)2活性增加的结果。由于MMP2能水解多种细胞外基质蛋白,研究者假设其通过降解内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)或其辅助因子:热休克蛋白90(heat shock protein,HSP90)而造成血管内皮功能受损。方法:该研究通过小牛冠状动     

胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段肾皮质血管内皮功能的改变

目的通过检测肾皮质内皮素1（ET-1）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达，研究胰岛素抵抗（IR）大鼠血糖正常阶段肾皮质血管内皮功能的改变。方法以免疫组织化学、RT-PCR方法检测IR大鼠模型肾皮质ET-1、eNOS蛋白和mRNA表达的改变。结果与正常大鼠相比，IR大鼠SBP、TG、FFA、Ins水平升高（P均〈0．01），胰岛素敏感指数、HDL-C降低（P均〈0．01）。FBG、2hBG在正常范围。HE染色IR组大鼠肾皮质出现组织学的异常改变，肾皮质ET-1蛋白及mRNA表达升高，eNOS蛋白和mRNA表达减低。结论IR大鼠模型在血糖正常阶段已存在肾皮质ET-1与eNOS平衡的异常，表明在IR早期已存在肾血管内皮功能的损害。     

心血管疾病中氧化应激与一氧化氮合酶脱耦联

<正>血管内皮细胞功能障碍是导致许多心血管疾病的共同病理生理基础,其突出表现为内皮依赖性血管舒张功能障碍,主要由一氧化氮(NO)减少及氧自由基增加所致。内皮型NO合酶(eNOS)脱耦联是导致NO水平下降和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平升高的重要机制,其中ROS水平升高又是造成eNOS脱耦联的主要原因。减少氧     

罗格列酮对高胰岛素培养的内皮细胞一氧化氮的影响及其机制研究

目的观察罗格列酮（RGZ）对高胰岛素培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）NO浓度和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、磷酯酰肌醇3激酶（P13K）和蛋白激酶B（PKB）表达的影响,探讨RGZ改善高胰岛素状态下内皮功能障碍的信号转导机制。方法高浓度胰岛素培养HUVEC72h,并用不同浓度的RGZ进行干预。检测NO浓度,PI3K mRNA的表达,PKB、eNOS总蛋白和PKB丝氨酸473（PKB-Ser473）、eNOS丝氨酸1177（eNOS-Ser1177）的磷酸化表达。结果高浓度胰岛素培养HUVEC能呈剂帚和时间依赖性地降低N0的浓度,抑制内皮细胞P13KmRNA表达和PKB-Ser473、eNOS-Ser1177的磷酸化。用RGZ干预能硅著升高高胰岛素培养的内皮细胞NO的浓度和PKB、eNOS的磷酸化,增强PI3KmRNA表达;eNOS和P13K阻断剂均能阻断RGZ对高胰岛素培养的内皮细胞中NO浓度的升高,PI3K阻断剂还能阻断RGZ对高胰岛素培养内皮细胞PKB、eNOS的磷酸化。结论高胰岛素能下调P13K／PKB／eNOs信号通路而抑制内皮细胞NO的产生,RGZ能通过上调PI3K／PKB通路而增强高胰岛素培养的内皮细胞eNOS的活性和NO的产生。     

抵抗素对内皮细胞NO生成的影响及Akt信号机制

目的探讨抵抗素对内皮细胞NO生成的影响及其可能的信号机制。方法分离、培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,以不同浓度抵抗素（15、50、100ng／ml）干预。荧光显微镜检测各组细胞中N0的生成,RT-PCR检测eNOS mRNA表达水平,Western blot检测Akt和eNOS磷酸化水平。结果15、50、100ng／ml抵抗素干预HUVECs 24h后,胰岛素刺激的内皮NO生成显著降低（三组分别为4．01±0．69、3．764±0．71、3．73±0．45,vs对照组P均〈0．05）,同时伴有内皮Akt和eNOS磷酸化水平的降低（us对照组P均〈0．05）,而eNOS mRNA表达无显著改变。结论抵抗素可通过P13K／Akt途径影响HuVECs eNOS磷酸化水平,进而调节内皮细胞NO生成,但该影响并非Akt依赖性。     

代谢综合征与血栓前状态

代谢综合征可通过胰岛素抵抗或中心性肥胖形成血栓前状态。胰岛素抵抗或中心性肥胖可导致纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）、纤维蛋白原、组织因子和凝血因子Ⅶ升高,一氧化氮（N0）生物活性减弱、血管内皮损伤,抑制血小板聚集的能力减弱,使血小板活化。因此,胰岛素抵抗或中心性肥胖通过影响凝血系统、纤溶系统、血小板和血管内皮等促进代谢综合征血栓前状态的形成。     

长期高脂饮食对SD大鼠收缩压的影响及机制

目的探讨长期高脂饮食能否诱发大鼠高血压及其机制。方法将8周龄雄性SD大鼠随机分为高脂组31只、对照组30只,分别予高脂饲料喂养和正常饲料喂养,喂养36周,每2周记录收缩压变化;36周后采血检测游离脂肪酸（FFA）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、还原性谷胱甘肽（GSH）水平;行正常血糖高胰岛素钳夹试验评价胰岛素敏感性（GIR）;观察离体主动脉环对乙酰胆碱或硝普钠的舒张反应（动脉环张力）;实时荧光定量PCR法检测主动脉内皮细胞一氧化氮合成酶（eNOS）mRNA表达水平。结果与对照组比较,高脂组收缩压、FFA、MDA、ROS水平明显升高,GSH水平、GIR、内皮依赖性动脉环张力、eNOS mRNA明显降低,P均〈0.05。结论长期高脂饮食可诱发高血压。可能机制为高FFA血症诱导机体氧化应激增强,抑制血管内皮细胞eNOS表达,导致内皮依赖性血管舒张功能降低。     

胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段心肌内皮素1、内皮型一氧化氮合酶表达的改变

高糖饲料喂养SD大鼠建立胰岛素抵抗（In）模型。12周时IR大鼠心室肌内皮素（ET）-1蛋白及mRNA表达升高，内皮型一氧化氮合酶（eNOS）蛋白和mRNA表达降低。表明高糖膳食诱导的IR大鼠在IR早期已存在心肌ET-1与eNOS平衡的异常。     

胰岛素抵抗大鼠血压升高机制的实验研究

目的:探讨胰岛素抵抗大鼠模型血压升高的机制。方法:通过给予高糖饮食及NG-硝基-左旋-精氨酸-甲基酯(L-NAME)喂养建立不同的胰岛素抵抗大鼠模型,观察大鼠血压及血清内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、超氧阴离子(O2-)和血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的变化。结果:实验前各组大鼠血压差异无统计学意义(P>0.05),而实验4周时,高糖组、L-NAME组的血压均明显高于对照组(均P<0.01)。高糖组(P<0.05)和L-NAME组(P<0.01)NO水平均低于对照组,而O2-升高(均P<0.05)。L-NAME组的eNOS活性低于对照组(P<0.05),高糖组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,高糖组大鼠血清SOD活性明显降低(P<0.01)。各组大鼠AngⅡ水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NO水平下降和氧化应激引起NO生物活性降低,在胰岛素抵抗大鼠模型高血压的发病机制中发挥重要作用。