APEl在宫颈癌的表达及其与锎-252中子放疗预后的关系

目的 探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)基因在官颈癌中的表达情况及其与临床病理和锎-252中子放射治疗预后的关系.方法 应用免疫组织化学法检测10例正常宫颈组织、15例子宫颈上皮内肿瘤(CIN)组织、89例宫颈癌组织(接受锎-252中子刀放疗)中APE1的表达,并分析其与宫颈癌临床病理及患者预后的关系.结果 宫颈癌组织APE1表达水平明显高于正常宫颈组织和CIN病例(P<0.01).APE1在正常官颈组织和CIN 病例均呈胞核表达,宫颈癌组织中APE1呈胞核表达(59例)、单纯胞浆表达(8例)或核浆共同表达(22例).APE1 表达强度与宫颈癌FIGO分期、病理分级和淋巴结转移情况有关(P<0.05),与年龄和病理分型无关.APE1亚细胞定位情况与FIGO分期、病理分级有关(P<0.01),与淋巴结转移情况无关.生存分析显示在APE1核表达组(中位生存时间70.9月)和APE1低表达组(中位生存时间75.8月)的生存时间明显长于APE1浆表达组(中位生存时间57.8月)和APE1高表达组(中位生存时间56.5月)(P=0.025,0.001).结论 APE1胞质异位表达可能与宫颈癌的发生、发展相关,APE1亚细胞定位和表达水平对锎-252中子放射治疗宫颈癌的疗效有提示作用.     

APE、VEGF在宫颈癌组织中的表达及其与MVD的关系

目的探讨DNA损伤修复基因脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶（apurinic/apyrimidinic endonuclase，APE）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在宫颈癌组织中的表达及其与肿瘤发生、发展以及血管生成的关系。方法采用免疫组织化学方法检测61例宫颈癌组织、24例宫颈上皮内瘤变组织和10例正常宫颈组织的APE、VEGF表达及微血管密度（microvessel density，MVD）。结果（1）APE在宫颈癌组织呈强阳性表达，主要定位于肿瘤细胞的胞核，61例宫颈癌组织中53例（86.9%）呈高表达，8例呈低表达，且显著高于正常宫颈组织及宫颈上皮内瘤变组织（P〈0.05）。宫颈癌组织VEGF高表达率及MVD计数与正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变组织比较，差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）宫颈癌组织APE高表达率与VEGF高表达率及MVD计数呈正相关（分别为r=0.795，P〈0.05；r=0.607，P〈0.05）；VEGF高表达率与MVD计数呈正相关（r=0.651，P〈0.05）。（3）宫颈癌组织中，APE表达与病理分级、临床分期（P〈0.05）有关，VEGF表达及MVD计数与病理类型有关（P〈0.05）。结论APE参与了诱导VEGF表达并促进肿瘤血管生成，APE和VEGF可作为宫颈癌的预后或癌前病变的监测指标。     

APE1在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及其与预后的关系

目的 了解脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1,APE1)在乳腺浸润性导管癌组织中的表达情况,分析其与患者临床病理学参数之间的关系,探讨APE1蛋白表达与乳腺浸润性导管癌患者预后的关系。 方法 收集2002年1月~2012年12月东南大学附属江阴医院,第二军医大学附属长海医院经治的病理确诊的乳腺浸润性导管癌患者组织标本133例。免疫组化法检测癌组织中APE1蛋白表达情况,并对其与临床病理参数的相关性进行分析。生存分析采用Kaplan-Meier法,生存率比较采用Log-rank检验。 结果 133例患者失访14例,有效随访病例为119例。患者中位年龄53岁, APE1蛋白阳性表达者96例(72.18%),阴性表达者37例(27.82%)。APE1蛋白阳性表达和雌激素受体状态、Her2表达以及分子分型相关(P<0.05),和年龄、肿瘤大小、有无淋巴结转移及组织学分级无关(P>0.05)。生存分析提示APE1蛋白阴性患者的总生存时间(OS)优于阳性表达患者(P<0.05)。 结论 乳腺浸润性导管癌患者APE1蛋白表达与雌激素受体表达、Her2表达、分子分型相关。相比于APE1阴性表达患者,阳性表达提示预后不良。     

252锎中子放疗对宫颈癌细胞凋亡的影响

目的研究宫颈鳞癌患者252锎中子照射前后肿瘤细胞凋亡的变化,初步探讨252锎中子治疗宫颈癌的机制及临床意义.方法采用TUNEL法检测20例宫颈鳞癌患者中子放疗前后的肿瘤细胞.结果发现凋亡指数(AI)和肿瘤细胞凋亡阳性的患者分别由放疗前的(4.22%±4.14)%和35%(7/20)上升至放疗后的(34.64±24.36)%和85%(17/20)(P<0.01),无论放疗前后,平均AI在各分期和各级间未见明显差别(P>0.05),经随访,全部患者中仅1例Ⅲb期患者出现复发,再次给予放疗后控制良好.并发症主要为放射性直肠炎,发生率10%.结论 252锎中子照射后可引起肿瘤细胞较强的凋亡反应,诱导细胞凋亡在252锎中子近距离照射治疗机制中具有重要意义.     

APE1 siRNA表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞APE1表达的抑制作用

目的构建DNA损伤修复基因脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶APE1 siRNA表达载体pSilence APE1,观察其对骨肉瘤细胞HOS和9901APE1蛋白表达的抑制作用.方法设计合成APE1 siRNA cDNA序列与线性化pSilence 2.0-U6质粒连接后构建APE1 siRNA表达载体pSilence APE1,经酶切鉴定和测序确认.应用免疫组化检测骨肉瘤细胞APE1蛋白的表达,同时应用免疫印迹检测其对APE1基因的敲低作用的量效和时效关系.结果通过双酶切鉴定和测序分析,成功构建了APE1 siRNA表达载体.免疫组化和免疫印迹证实pSilence APE1对骨肉瘤细胞APE1基因具有特异性"敲低"作用,其抑制APE1基因表达效率为72%～95%,而且其抑制作用以3.0μg pSilence APE1转染第3天最为显著.结论成功构建了APE1 siRNA表达载体pSilence APE1,并且该载体能有效地敲低骨肉瘤细胞APE1基因表达.     

早期宫颈癌锎-252中子单纯腔内治疗疗效观察

目的探讨早期宫颈癌锎-252中子单纯腔内治疗的疗效。方法 2001年12月至2005年7月对我院收治的21例ⅠA以下早期宫颈癌患者进行锎-252单纯腔内治疗,采用宫腔加穹隆三腔施源器,A点计划剂量为每次1000cGy,每5～6天1次,共5～6次,全疗程在5周内完成,宫颈表面总剂量为400～540Gy,A点总剂量为50～60Gy。3年随访率100%。结果 3年无复发生存率为100%（21/21）,3年无转移生存率为95.2%（20/21）。膀胱、直肠急性放射损伤：0级17例（80.9%）,Ⅰ级4例（19.1%）,无Ⅱ级以上急性放射损伤;晚期放射损伤：0级3例（100%）,无Ⅰ级以上远期放射损伤。结论锎-252中子单纯腔内治疗早期宫颈癌效果好,毒副反应轻,病人容易接受,可以在门诊治疗。是值得推广的方法,远期疗效尚需进一步观察。     

APE1免疫组化表达与恶性肿瘤相关性的 Meta 分析

目的：通过 Meta 分析系统评价肿瘤组织中脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)的免疫组化表达,进一步探讨其与恶性肿瘤的关系及临床意义。方法检索 PubMed、EMBASE、中国期刊全文数据库、万方数据库,检索时间为建库至2015年2月,使用 stata13.0软件对符合纳入标准的研究结果进行 Meta 分析。结果共纳入36篇文献,包括3374例患者和521例正常对照。Meta 分析显示,与正常组织相比,肿瘤组织中 APE1出现胞浆异位表达(OR =17.82);而且,APE1表达不论是阳性细胞数量,还是表达水平均显著高于正常对照组(OR=37.56,OR=47.56)。APE1的异位表达主要在卵巢上皮癌、胰腺癌、大肠癌、膀胱移行细胞癌和肺癌;APE1阳性表达增高主要在肝癌、胰腺癌、膀胱移行细胞癌、外周 T 细胞淋巴瘤和非小细胞肺癌。APE1在淋巴结转移肿瘤组的阳性表达高于未转移组(OR =4.10);APE1高表达的肿瘤患者,其化疗敏感性较低表达患者差(OR =6.45)。结论APE1的异位表达和(或)表达量增加与多种恶性肿瘤的发生、发展及预后具有显著的相关性。APE1可能是肿瘤诊断及预后的潜在标志物。     

APE1在卵巢上皮性癌中的表达及其临床意义

目的:探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)基因在卵巢上皮性癌中表达的相关性及其意义.方法:应用免疫组织化学检测10例正常卵巢、20例卵巢良性肿瘤、15例卵巢交界性肿瘤和120例卵巢上皮性癌组织中APEl的表达,并分析其与临床病理因素之间的关系.结果:卵巢癌组织中APE1呈胞核表达、单纯胞质表达或核质共同表达,胞质异位表达率(57.5%)明显高于正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤.APE1胞质表达与卵巢癌病理类型、肿瘤分化程度和HGO分期有关(P<0.05).APE1胞核表达的化疗有效率为77.4%,高于APE1胞质异位表达53.8%,APE1胞核表达的卵巢癌患者预后要优于APE1胞质异位表达的卵巢癌患者(P<0.05).结论:APE1表达在卵巢癌的发生发展中发挥重要作用,APE1的亚细胞定位对卵巢癌化疗的疗效和预后有一定临床应用前景.     

单纯锎-252中子腔内治疗早期宫颈癌追踪观察

目的 探讨单纯锎-252中子腔内治疗早期宫颈癌的临床疗效.方法 回顾性分析21例Ⅰ期以下早期宫颈癌患者单纯行锎-252腔内的治疗情况,采用专用的穹隆加宫腔三腔施源器,每5d~6d进行1次,A点10Gy/次,共5~6次,5周内完成,A点总剂量50~60Gy,施源器近宫颈表面总剂量400~540Gy.所有病例均行3年、5年、7年随访.结果 3年、5年、7年总生存率分别为100%(21/21)、100%(21/21)、90.5%(19/21),无复发生存率分别为100%(21/21)、100%(21/21)、90.5%(19/21).膀胱、直肠急性放射损伤:0级17例(80.9%),Ⅰ级4例(19.1%),无Ⅱ级以上;晚期放射损伤:0级21例(100%),无Ⅰ级及以上.结论 早期宫颈癌单纯行锎- 252 中子腔内治疗可行,无明显放射性损伤,值得临床应用.     

DNA损伤修复基因APE1表达与非小细胞肺癌术后治疗及预后关系的研究

目的 探讨脱嘌呤/嘧啶核酸内切酶APE1在非小细胞肺癌中的表达特点及其与术后治疗及患者生存的关系.方法 应用免疫组化方法检测103例非小细胞肺癌组织中APE1的表达,按染色强度将其分为低表达组和高表达组,并分析APE1的表达与术后治疗的生存关系.结果 正常肺组织及肺癌组织均有APE1表达,但正常肺组织以胞核表达为主,肺癌组织主要在胞浆表达;APE1高表达组无疾病进展期为(16.6±8.3)个月,而APE1低表达组无疾病进展期为(37.6±11.4)个月(P＜0.05).APE1高表达组的2年和3年及5年生存率亦显著低于APE1低表达组.结论 APE1基因表达增强可能是导致非小细胞肺癌患者放化疗效果差、预后不良的重要因素.     

人类脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1在三阴性乳腺癌中的表达研究

目的 检测人类脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic/apyrimidinic endonuclease/redox effector factor1,APE-1/REF-1)在乳腺癌中的表达,分析其与乳腺癌的临床病理特征的关系,及APE-1对三阴性乳腺癌患者预后的影响。方法 采用免疫组化Envision两步法检测323例乳腺癌中APE-1蛋白的表达,其中108例为三阴性乳腺癌。计数资料采用χ²检验和Fisher精确检验。采用Kaplan-Meier法进行生存分析及Log-rank检验进行生存率的比较,并用COX比例风险回归模型进行多因素分析。结果 APE-1在乳腺癌组织较癌旁组织有更高的表达,且在非三阴性乳腺癌中与肿瘤大小、腋窝淋巴结状态、临床分期、雌激素受体、人类表皮生长因子2型受体的表达显著相关(P<0.05)。在三阴性乳腺癌中,APE-1表达与肿瘤大小(P=0.006)呈正相关,且APE-1低表达组有较好的生存率(P=0.007)。腋窝淋巴结阳性的三阴性乳腺癌患者中,APE-1低表达组有较好的预后(P=0.042)。结论 APE-1是影响三阴性乳腺癌患者预后的独立因子,可能成为三阴性乳腺癌的潜在治疗靶点。     

术前放疗对宫颈癌中 Twist 表达的影响及其相关性研究

目的：探讨Twist与宫颈癌的相关性及术前放疗对其表达的影响。方法从2010年6月～2013年6月在我科住院的宫颈癌患者中筛查符合纳入标准的病例40例。取其宫颈癌放疗前活检钳取组织标本、放疗并手术后组织标本，分为放疗前组、放疗后组，采用免疫组织化学方法检测Twist的表达，并观察表达的变化。结果 Twist的表达在放疗后与放疗前分别为75％和45％，有明显减弱趋势，差异有显著性（χ2＝7．5，P＜0．05）。结论宫颈癌的发生发展与Twist有密切关系，宫颈癌为放疗敏感性肿瘤，Twist对放射线诱导的宫颈癌细胞凋亡具有重要的调控作用。     

荧光分析法测定人体血液样品中脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)的活性

目的 开发一种可快速、灵敏地检测生物样品中脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1,APE1)含量的荧光分析方法。方法 根据APE1所具有的脱碱基核酸内切酶活性,合成了一种用荧光基团与猝灭基团标记的含脱碱基位点的DNA荧光探针。在合适的缓冲体系下,APE1将该DNA探针水解并释放出荧光基团,根据荧光信号上升速率实现对APE1活性的定量检测。在此基础上,本研究改进了检测APE1时溶液缓冲液的条件,使得该荧光探针对APE1的响应更为灵敏,并进一步通过密度梯度离心法从人全血样品提取了外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用改进后的荧光探针法定量测定了其蛋白提取液中APE1的含量。最后,使用该荧光探针法测定了临床血液样本中APE1的含量。结果 本研究建立的方法对APE1的最低检测限和功能灵敏度均为0.005 U/mL(3 pg/mL),线性范围为6 pg/mL~1.2 ng/mL。利用该方法测定了8份人血液样品中PBMCs蛋白中APE1的含量,测得每微克PBMCs蛋白中APE1的含量分布为0.061~0.40 ng,平均含量为0.16 ng APE1,加标回收率为98%±5%(n=3)。用该方法对102份正常人(男51例、女51例,年龄59~75岁)血清样品中的APE1含量进行了检测,得到这些血清样品中APE1含量的分布范围为0.13~0.34 ng/mL,加标回收率为96%±15%(n=3)。结论 本研究发展的荧光分析法操作简便、灵敏度高、所需生物样品量小,能够快速、准确地测定血液等生物样本中的APE1含量,解决了原有方法检测低含量血清样品时误差较大的问题,有良好的临床检验应用前景。     

钾通道阻断剂四氨基吡啶增加宫颈癌细胞对中子照射的敏感性

目的 研究钾通道阻断剂四氨基吡啶(4-amino-pynidine,4-AP)对宫颈癌HeLa细胞中子照射的影响.方法 宫颈癌HeLa细胞分别设小同浓度(0、1、5、10、20 mmol/L)4-AP组,0.67 Gy 252Cf中子照射后48 h,用MTT法和流式细胞仪检测各组细胞活性、凋亡率.0、20 mmol/L 4-AP组自照射后24、48、72 h分别用RT-PCR法、Western blot法检测HIF-1α mRNA及蛋白表达情况.结果 在中子照射48 h后,4-AP浓度为0、1、5、10、20 mmol/L时,对HeLa细胞增殖的抑制率分别为0、(38.81±3.45)%、(46.63±3.88)%、(63.58±6.19)%、(77.51±8.87)%,凋亡率(%)分别为(3.15 ±0.85)%、(8.01±1.19)%、(16.00±1.58)%、(47.20±3.18)%、(62.56±4.27)%,差异有统计学意义(P＜0.05).说明4-AP能抑制HeLa细胞的增殖,诱导凋亡,并呈现明显的剂量依赖性.当4-AP浓度大于5 mmol/L时,其作用明显(P＜0.01).0.67 Gy 252Cf中子照射0、24、48、72 h后,4-AP浓度为0 mmol/L组,HIF-1α mRNA/β-actin值分别为(0.423±0.116)、(0.464±0.111)、(0.487±0.121)、(0.415±0.099),Western blot灰度扫描结果HIF-1α/β-actin分别为(0.723±0.116)、(0.664±0.111)、(0.617±0.121)、(0.515±0.099),HIF-1α mRNA及蛋白表达均无明显降低,差异均无统计学意义(P＞0.05).4-AP浓度为20 mmol/L组,HIF-1α nRNA/β-actin值分别为(0.401 ±0.121)、(0.364±0.142)、(0.257±0.137)、(0.165±0.099),Western blot灰度扫描结果HIF-1α mRNA/β-actin分别为(0.879±0.117)、(0.645±0.115)、(0.312±0.114)、(0.130±0.118),HIF-1α mRNA及蛋白表达均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 钾通道阻断剂4-AP能降低中子放射治疗后缺氧诱导因子(HIF-1α)表达,降低HeLa细胞增殖,促进凋亡,提高HeLa细胞中子射线的敏感性.     

宫颈癌组织中RCAS1的表达及其临床意义

目的：研究RCAS1在宫颈癌组织中的表达及其与宫颈癌的临床病理特征之间的关系。方法选取2008年1月-2011年3月在该院行手术治疗的宫颈癌组织标本和宫颈良性病变组织标本,应用免疫组化法检测RCAS1蛋白的表达表达量,并研究RCAS1蛋白和宫颈癌临床病理特征之间的关系。结果宫颈癌组织中RCAS1阳性表达率(86.15%)显著高于良性宫颈组(19.35%)差异有统计学意义(字2=40.946,P=0.000<0.05)。 RCAS1的表达与组织类型无关,差异无统计学意义(字2=0.700,P=0.403跃0.05),与临床分期无关,差异无统计学意义(字2=1.319,P=0.251跃0.05)。低分化癌组织中RCAS1的表达显著高于高分化癌,差异有统计学意义(字2=10.877,P=0.001<0.05)和中分化癌差异有统计学意义(字2=10.819,P=0.001<0.05)。伴有淋巴结转移者RCAS1的表达率显著高于无淋巴结转移者,差异有统计学意义(字2=8.715,P=0.003<0.05)。结论RCAS1在宫颈癌的发生发展中具有重要意义,RCAS1的表达水平和宫颈癌组织的恶性程度和侵袭力相关。     

YB-1在中晚期宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的研究YB-1在中晚期宫颈癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,探讨YB-1在宫颈癌侵袭、转移和进展中的作用．方法采用免疫组化法检测中、晚期宫颈癌组织微阵列芯片78例组织标本中YB-1的表达情况,分析其表达与宫颈癌淋巴转移、FIGO分期、分化程度的关系．结果（1）78例宫颈癌组织中YB-1的阳性表达率为24/78（30．8％）;（2）YB-1在宫颈癌组织中表达与FIGO分期和分化程度密切相关,随着FIGO分期的变晚、分化程度的降低其表达逐渐增高（P〈O．05）;YB-1在宫颈癌组织中表达与淋巴转移无关,有淋巴转移组和无淋巴转移组YB-1表达差异无统计学意义（P〉O．05）．结论YB-1在宫颈癌组织中表达可能与宫颈癌的局部侵袭、转移和进展密切相关．     

252锎中子后装在宫颈癌术前辅助放疗中的作用

 【目的】 研究²⁵²锎中子腔内后装在宫颈癌术前辅助放疗中的作用。【方法】 收集2003年01月至2010年04月中山大学附属第三医院、中山大学附属第一医院妇科收治的Ⅰb2 ~ Ⅱb期的54例宫颈癌,分为两组,其中 ²⁵²锎组24例,为局部肿块直径 ≥ 4 cm,术前采用²⁵²锎中子腔内后装放疗;直接手术组30例,为局部肿块直径 < 4 cm,未行术前辅助治疗,直接行宫颈癌根治术。观察²⁵²锎组放疗前后肿瘤局部变化及放射性副反应,并比较²⁵²锎组与直接手术组术中情况。【结果】 ²⁵²锎组放疗前肿瘤平均直径46.29(S = 6.28) mm,放疗后肿瘤平均直径18.63(S = 9.46) mm,两者比较,差异有统计学意义(P < 0.05); ²⁵²锎组放疗后骨髓抑制3例(12.5%),放射性直肠炎1例(4.2%),放射性膀胱炎2例(8.3%),无严重的放射性损伤发生。²⁵²锎组平均手术时间258(S = 45)min,与直接手术组266(S = 60)min相比,其差异无统计学意义(P > 0.05);²⁵²锎组术中平均出血量为462(S = 166)mL,与直接手术组667(S = 381)mL相比出血量明显减少,差异有统计学意义(P < 0.05)。【结论】 ²⁵²锎中子腔内后装在宫颈癌术前辅助放疗中可缩小局部肿瘤、改善手术条件,且并发症少,有较好的临床使用前景。