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目的通过人工抗原的构建,制备抗甘草酸二铵(DG)的特异性抗血清。方法采用碳二亚胺法将DG与牛血清蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)共价偶联,分别合成免疫抗原DG-BSA和包被抗原DG-OVA。用合成的人工抗原免疫家兔,制得抗甘草酸二铵的特异性抗血清,并通过酶联免疫方法(ELISA)对抗血清进行鉴定。结果制备了抗甘草酸二铵的多克隆抗体,获知理想的包被抗原的浓度为200ng/mL,抗血清的工作浓度为1:10000,雌、雄家兔抗血清的效价分别为1:51200和1:25600。结论采用化学反应构建人工抗原的方法,可以制备出针对甘草酸二铵的特异性抗血清,从而为甘草酸二铵的鉴定及体内代谢的免疫学分析研究奠定了基础。 相似文献
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新型重组人IFN-λ2的高效表达、纯化与抗病毒活性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的在大肠埃希菌中高效表达重组人干扰素λ2(rhIFNλ2),并对其抗病毒活性进行初步研究。方法根据大肠埃希菌的偏爱密码子人工设计合成人干扰素λ2(hIFNλ2)的高表达基因,将其克隆到原核表达载体pBV220,在大肠埃希菌中进行表达,表达产物经变性、复性、阳离子交换层析及分子筛层析纯化,测定其抗病毒活性、种属特异性及抗HBV活性。结果在大肠埃希菌表达的目的蛋白占细胞总蛋白量的15%左右,纯化后的纯度达到90%以上,在WISH细胞上抗VSV活性约为1.5×106IU/mg。与rhIFNα2b比较,表达产物在非灵长类细胞上的抗病毒活性较在灵长类细胞上弱,目的蛋白在HepG2.2.15细胞上表现有与rhIFNα2b相似的抗HBV活性。结论hIFNλ2可以在大肠埃希菌内实现高效表达,表达产物具有抗病毒活性,有与rhIFNα2b相似的抗HBV活性,本型IFN有较严格的种属特异性。 相似文献
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目的制备人干扰素κ(hIFNκ)并初步研究其生物学活性。方法克隆hIFNκ的cDNA并根据大肠埃希菌的密码子偏好性人工合成了hIFNκ基因,在大肠埃希菌DH5α中高效表达、纯化后测定了rhIFNκ的多种生物学活性,包括抗病毒活性、抗细胞增殖活性、种属特异性以及NK细胞调节活性。结果成功地获得了高纯度的rhIFNκ,纯度在90%以上。利用WISHVSV系统检测rhIFNκ的抗病毒活力为2.0×106IU/mg。与rhIFNα2b的比较发现,rhIFNκ无论在抗病毒活性、细胞生长抑制,还是在促NK细胞活性方面均弱于前者。结论rhIFNκ在不同种属来源细胞上的抗病毒活性因种属来源而异,不同的病毒对rhIFNκ的敏感性是不同的。 相似文献
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甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪肝大鼠的治疗作用 总被引:1,自引:0,他引:1
Objective To study therapeutic effects and underlying mechanisms of diammonium glycyrrhizinate lipid ligand (DGLL) on nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD). Methods Sixty SD rats were randomly divided into six groups(10 rats per group): the model group, 3 DGLL-treated (30, 60, 120mg/kg) groups, the positive control [treated with biphenyldicarboxylate (200mg/kg)] group and normal control group. The stomach of the rat of the model group was irrigated with high lipid emulsion. The rats of DGLL groups were irrigated with relative dose of DGLL. After nine weeks, the changes of total cholesterol (TC), triglyceride (TG), low density lipoprotein (LDL), high density lipoprotein (HDL) in serum and the contents of malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD) in liver homogenate were measured; the NF-κB p65 level in liver tissues was observed by immunohistochemistry, respectively. The expressions of NF-κB p65 and I-κBα in liver were determined by Western blotting. BR>Results Compared with the model group, the levels of TC,TG,LDL,MDA were decreased, meanwhile the activity of HDL and SOD were enhanced, the level of NF-κB in liver tissues was ameliorated remarkably by administration of DGLL. Meanwhile, th 相似文献
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甘草酸二铵对大鼠心肌缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 :观察甘草酸二铵 (DG)对大鼠心肌缺血再灌注 (IR)损伤后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法 :雄性wistar大鼠2 4只 ,随机分为假手术组 ;IR组 ;DG组 ( 2 0mg/kg)。每组 8只。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的带荧光的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法、westernblot法和免疫组化法检测大鼠心肌缺血 3 0min再灌注 6h心肌凋亡细胞及凋亡相关基因Bcl 2、Bax蛋白表达的变化。结果 :与假手术组比较 ,IR组心肌细胞凋亡指数 (AI)、Bax蛋白的阳性表达明显增加 (P均 <0 .0 1) ;与IR组比较 ,DG治疗后AI和Bax蛋白的阳性表达明显下降 (P <0 .0 1) ,而Bcl 2蛋白的阳性表达明显上调 (P <0 .0 1)。结论 :DG具有保护大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用 ,其作用机制可能与其下调Bax蛋白表达 ,上调Bcl 2蛋白表达抑制心肌细胞凋亡有关 相似文献
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目的 观察甘草酸二铵肠溶胶囊(天晴甘平)治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的临床疗效.方法 88例NASH患者,随机分为治疗组48例和对照组40例.治疗组给予甘草酸二铵肠溶胶囊,对照组给予肌苷片、复合维生素等.治疗16周后,比较分析两组临床症状、肝功能及B超的变化.结果 治疗组临床症状改善率(85.4%,41/48)明显高于对照组(42.5%,17/40),差异有统计学意义(P<0,01);在改善肝功能方面,治疗前后比较,对照组无明显改善(分别P>0.05),而治疗组能明显降低ALT和AST(均P<0.01).治疗后两组比较,治疗组显著优于对照组(均P<0.01)改善B超方面,治疗组(39.6%,19/48)亦显著优于对照组(17.5%.17/40)(P<0.05).结论 甘草酸二铵肠溶胶囊治疗非酒精性脂肪性肝炎能减轻症状,改善肝功能和B超改变,因而具有较好的疗效,值得临床应用. 相似文献
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中药抗病毒胶囊对Ⅱ型单纯疱疹病毒作用的电镜观察 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 探讨抗病毒胶囊治疗生殖器疱疹的作用机理。方法 运用透射电镜采用负染方法 ,观察药物与单纯疱疹病毒Ⅱ型 (HSV Ⅱ )相互作用后病毒颗粒形态改变情况。结果 病毒颗粒变形 ,大小不均匀 ,包膜裸露或破损以及病毒颗粒凝集融合成块 ,结构模糊不清。结论 抗病毒胶囊在体外对HSV Ⅱ病毒颗粒的形态结构、表面成分和分散均有显著破坏作用。 相似文献
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中药抗病毒胶囊对Ⅱ型单纯疱疹病毒作用的电镜 … 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探讨抗病毒胶囊治疗生殖器疱疹的作用机理。方法 动用透射电镜采用负染方法,观察药物与单纯郊疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)相互作用后病毒颗粒形态改变开矿情况。结果 病毒颗粒变形,大小不均匀,包膜裸露或破损以及病毒颗粒凝集融合成协,结构模糊不清。结论 抗病毒胶囊在体外以HSV-Ⅱ病毒颗粒的形态结构、表面成分和分散均有显著破坏作用。 相似文献
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目的 研究2009年深圳市收治的甲型H1N1流感确诊病例排毒规律和抗病毒治疗疗效.方法 75例患者均经两次鼻咽拭子甲型H1N1流感病毒核酸检测阳性(RT-PCR),此后每天检测病毒核酸直至连续两天均阴性.第1次病毒检测阳性后立即随机分三组抗病毒治疗,分别为奥司他韦(Oseltamivir)(组Ⅰ)、中药(组Ⅱ)和奥司他韦联合中药(组Ⅲ)抗病毒治疗,5 d为一疗程.应用流式细胞仪检测T细胞亚群和IL-17表达.结果 75例患者中,78.7%(59/75)在起病后甲型H1N1流感病毒核酸阳性持续≤7 d,平均年龄为(22.25±10.38)岁;21.3%(16/75)病毒持续>7 d,年龄为(17.16±13.66)岁.对其中56例患者细胞与体液免疫功能进行分析,发现其IL-17表达明显低于季节性流感和健康人(P<0.01).进一步研究发现,10例病毒持续>7 d的患者IL-17表达值(1.91±0.80)明显低于46例病毒持续≤7 d者IL-17表达(3.05±1.59)(P<0.05),也明显低于季节性流感(P<0.01)和正常对照组(P<0.001).比较三治疗组抗病毒治疗5 d疗程结束时病毒核酸转阴率,分别为组Ⅲ92.86%,组Ⅰ71.43%,组Ⅱ46.15%,组Ⅱ明显低于前两组(分别为P<0.01,P<0.05).组Ⅲ经治疗后体温恢复正常时间较组Ⅰ、组Ⅱ缩短(P<0.05).结论 IL-17和年龄与甲型H1N1流感病毒感染及排毒时间长短可能存在一定关系.奥司他韦联合中药治疗在抗病毒疗效和减轻症状方面均有其独特优势. 相似文献
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乙型肝炎病毒大蛋白检测在拉米夫定抗病毒治疗中的应用研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 通过检测拉米夫定治疗患者血清中的乙型肝炎病毒大蛋白(HBV-LP),同时检测乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)载量,探讨拉米夫定治疗过程中HBV-LP与HBV-DNA的关系,观察乙型肝炎病毒大蛋白用于评估拉米夫定抗病毒治疗的应用效果.方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法对HBV-LP进行检测;采用荧光定量PCR方法对HBV-DNA进行检测.结果抗病毒治疗有效的患者HBV-DNA和HBV-LP下降趋势一致,HBV-LP出现阴转的时间要晚3个月于HBV-DNA阴转;抗病毒治疗无效的患者HBV-DNA和HBV-LP都是始终没有出现阴转;抗病毒治疗效果反复组中患者HBV-LP始终没有出现阴转,HBV-DNA则暂时阴转.结论拉米夫定抗病毒治疗过程中动态检测乙型肝炎病毒大蛋白可用于评估抗病毒治疗效果. 相似文献
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目的研究丙型肝炎病毒血清型对慢性丙型肝炎于扰素抗病毒疗效的影响。方法对慢性丙型肝炎患者的血清进行ALT检测,采用Cobas amplicor monitor test,version 2.0(v2.0)试剂进行HCVRNA定量和Abbott公司的Murex HCV Serotyping 1-6 Assay试剂进行HCV血清学分型检测。对慢性丙型肝炎患者进行聚乙二醇于扰素a-2a(派罗欣)与罗荛愫(Roferon—A)治疗24周和24周随访结束的生化指标和病毒学应答进行观察,分析不同HCV血清型患者在抗病毒治疗后生化和病毒学应答的差异。结果98例患者共检出血清6型2例、5型1例、4型1例、3型10例、2型23例和1型44例,仍有17例未能分出血清型。派罗欣治疗组24周治疗结束时各血清型和未分型组之间的ALT复常率和病毒应答率无差异,而48周随访结束血清非1型的ALT复常率(76.2%)和持续病毒应答率(66.7%)高于血清1型,血清1型ALT复常率和持续病毒应答率分别为27.3%和27.3%,差异有统计学意义(P=0.035)。罗荛愫组末分型组、血清1型和非1型之间24周治疗结束时和随访结束时的ALT复常率和病毒学应答率均无差异。结论在6个月的IFN抗病毒疗程时,HCV血清型仅在派罗欣治疗组影响慢性丙型肝炎抗病毒治疗的持续病毒应答率。 相似文献
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目的观察局部使用肿瘤坏死因子α反义寡核苷酸(TNF-α-ASON)对小鼠眼内单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)-1感染的影响。方法将HSV-1注入小鼠前房建立动物模型。分别于建模前1d,建模后1d和4d结膜下注射TNF-α-ASON和PBS。8d和10d后观察两组小鼠眼部的炎症改变,测定病毒复制和眼内TNF-α含量。结果与对照组相比,8d时实验组葡萄膜炎发病率和眼内TNF-α含量显著降低(P〈0.01),眼内HSV-1滴度无明显改变;10d时葡萄膜炎发病率和眼内HSV-1滴度都显著升高。结论局部使用TNF-α-ASON可以显著降低HSV-1感染小鼠眼内TNF-α含量,降低视网膜炎发病率。TNF-α在眼内具有抑制HSV-1复制的作用。 相似文献
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目的探讨苦参素联合甘草酸二铵对慢性乙型肝炎(CHB)患者特异性细胞免疫的影响。方法63例CHB患者随机分为2组,苦参素联合甘草酸二铵组(联合组)32例,用苦参素葡萄糖注射液600mg,静脉滴注,每日1次,1个月后改为苦参素胶囊200mg口服,每日3次,2个月。甘草酸二铵注射液150mg加入10%葡萄糖注射液250ml中静脉滴注,每日1次,1个月后改为甘草酸二铵胶囊150mg口服,每日3次,2个月;苦参素组(单用组)31例,只用苦参素,用法用量同治疗组。比较两组患者的HBV特异性细胞毒T细胞(CTL)、T细胞亚群、Th1、Th2水平的变化和HBV-DNA、HBeAg阴转率。结果联合组治疗3个月后,HBV特异性CTL、CD4+、Th1高于治疗前,也高于单用组治疗后(P〈0.01)。HBV-DNA和HBeAg阴转率两组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论苦参素联合甘草酸二铵能进一步提高CHB患者的HBV特异性CTL、CD4+和Th1水平。 相似文献
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目的:观察羊栖菜多糖及其分离产物对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和柯萨奇病毒(CVB3)所引起细胞病变(CPE)的抑制作用及其机理。方法:采用MTT比色法,测定羊栖菜多糖及其分离产物对Vero细胞的细胞毒性,并在对细胞的最大无毒浓度(MNCC)范围内,采用体外细胞培养法研究羊栖菜多糖样品对上述两种病毒的抑制作用。在此基础上采用分组实验初步探讨了多糖样品的抗病毒机理。结果与结论:①羊栖菜多糖样品对Vero细胞的毒性较小,CC50均大于5000mg/L。②除ALG外,其它样品对HSV-1均有明显的抗病毒作用,且随着纯度的提高,样品抗病毒作用随之增强,其中F1、F2和F4抗病毒效果优于ACV。③羊栖菜多糖样品对CVB3的抗病毒效果均明显优于病毒唑,纯化后的样品F1、F2和F4抗CVB3作用显著。④从分组实验中可知,羊栖菜多糖样品不仅具有直接杀灭病毒作用,而且还可进入细胞或吸附在细胞表面,从而达到抑制或杀伤病毒的效果。 相似文献