α_2肾上腺素受体在神经病理性疼痛大鼠脊髓背角中的表达

目的:研究α2肾上腺素受体(α2-AR)不同亚型在神经病理性疼痛大鼠中的表达变化规律及其在神经病理性疼痛形成中作用。方法:雄性6周龄SD大鼠分为对照组、假手术组和保留性脊神经损伤模型组(spared nerve injury,SNI组)。采用蛋白质免疫印迹法(Western blot法)和RT-PCR法测定α2A-AR、α2B-AR和α2C-AR在腰膨大段脊髓背角中的表达。结果:(1)在蛋白水平三个亚型在正常大鼠均有表达,主要是以α2A-AR为主;(2)与正常组和假手术组比较,SNI神经病理性疼痛组α2A-AR的蛋白表达明显下调(P<0.01,n=6),而α2B-AR和α2C-AR蛋白表达则没有明显的变化(P>0.05,n=6)。(3)在m RNA水平,三个亚型在三组表达没有明显的变化(P>0.05,n=5)。结论:在神经病理性疼痛条件下,脊髓背角α2A-AR受体亚型明显下调,α2B-AR和α2C-AR没有明显变化,表明这种下调仅发生在翻译水平而非转录水平。α2A-AR下调可能在外周神经损伤所引起的神经病理性疼痛中发挥作用。     

鞘内应用普瑞巴林对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及其电生理学机制研究

目的:研究鞘内应用普瑞巴林(pregabalin,PGB),一种新型抗癫痫药,对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及其可能的机制。方法:(1)雄性SD大鼠鞘内置管,手术成功后进行坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI)手术。术后10 d用von Frey纤维丝测定机械痛敏,将筛选出造模成功的SNI神经病理性疼痛大鼠,按体重随机分为两组(n=10),通过鞘内插管分别鞘内给予(i.t.)普瑞巴林100μg/d或等体积的生理盐水(saline,NS)作阴性对照,连续3 d给药。在每次给药后24 h测定大鼠后爪的50%缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT)及鞘内给药前后大鼠的运动功能。(2)通过在体细胞外记录的电生理学方法,观察脊髓背表面给予普瑞巴林100μg对SNI大鼠脊髓背角广动力范围,(wide dynamic range,WDR)神经元C纤维诱发放电的影响。结果:(1)与NS组相比,鞘内应用普瑞巴林100μg/d,连用3 d,能显著增加SNI大鼠术侧后爪的50%PWT,起到显著的镇痛作用(P<0.001,n=10),给药前后大鼠的运动功能没有明显改变(P>0.05,n=10)。(2)与NS组相比,脊髓背表面给予普瑞巴林100μg可以显著抑制SNI大鼠WDR神经元的C纤维诱发放电(P<0.001,n=9)。结论:鞘内应用普瑞巴林100μg/d可以对SNI大鼠产生显著的镇痛作用而不影响其运动功能,该机制可能与通过WDR神经元的C纤维诱发放电有关。     

脊髓电刺激对神经病理性疼痛镇痛作用及相关机制研究

目的:探索脊髓电刺激(spinal cord stimulation, SCS)对小鼠神经病理性疼痛的镇痛作用并阐明相关机制。方法:30只健康成年雄性野生型CD1小鼠随机分为对照组(Sham)、坐骨神经结扎损伤组(chronic constriction injury, CCI)和治疗组(CCI+SCS),每组10只。通过行为学观察SCS对外周神经损伤引起的机械痛敏和热痛敏的缓解情况,以及对小鼠运动功能影响程度;采用电生理方法记录各组小鼠背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)中小神经元的兴奋性;通过酶联免疫吸附试验测定DRG内炎性因子TNF-α的表达水平。结果:与对照组比较,CCI组小鼠机械痛阈值和热痛阈值明显降低(P <0.05)。治疗组与CCI造模组比较,SCS可提高小鼠的机械痛和热痛阈值。同时,各组转棒实验评分无差异。电生理及酶联免疫吸附试验结果提示外周神经损伤后,同侧小鼠背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)神经元的兴奋性增强,同时DRG内TNF-α的释放增加,治疗组与CCI组比较,SCS可以明显抑制DRG神经元的兴奋性增强(P <0.05)和DRG内TNF-α的释放增加(P <0.05)。结论:SCS通过抑制外周神经损伤导致的DRG神经元的兴奋性增强,从而有效地减缓小鼠CCI导致的机械感觉过敏和热痛敏,并可减少CCI小鼠DRG中TNF-α的表达水平。     

α2肾上腺素受体与痛觉调制

α2肾上腺素受体(alpha-2 adrenoceptor,α2-AR)广泛分布于中枢神经系统和外周神经组织,通过耦联Gi/Go蛋白介导一系列重要的生理应答和药理学效应.近年的研究发现,α2-AR在疼痛调节中有着不可忽视的作用.α2-AR与离子通道、胶质细胞、细胞信号通路和递质/受体系统的相互作用可能是其对疼痛调节的相关机制.有关α 2-AR的深入研究对临床的顽固性疼痛治疗有着重要意义.     

高压氧对神经病理性痛大鼠的疼痛行为学影响

目的:观察高压氧(HBO)对神经病理性痛大鼠的疼痛行为学影响及有效性.方法:40只雄性SD大鼠随机分成5组:即空白对照组(C组)、假手术组(M组)、坐骨神经慢性缩窄手术组(CCI组)、高压氧预处理组(Pre-H组)与高压氧干预组(Post-H组),对其疼痛行为学指标进行比较.结果:Pre-H组和Post-H组的机械性缩足反射阈值(MWT)较CCI组明显升高;热缩足反射潜伏期(TWL)较CCI组明显延长.HBO在热痛模型中显示的作用大子机械痛模型;Pre-H的作用大于Post-H.结论:高压氧对CCI大鼠神经病理性疼痛有一定的抑制作用.     

电针治疗对神经病理性疼痛中嘌呤能受体的影响及其作用机制研究

目的 观察电针对CCI大鼠脊髓背角小胶质细胞激活和P2X4受体表达的影响，并进一步探讨同时干预CCPA特异性作用受体A1受体与P2X4受体是否在电针痛觉调制中存在强化镇痛效应。 方法 选取成年清洁级健康Sprague-Dawley（SD）雄性大鼠40只，体重150~180 g。按随机数字表法分为假模组、CCI模型组、电针组、腺苷A1受体激动剂2-氯环戊腺苷(CCPA)组和电针CCPA组，每组大鼠8只。CCI模型组、电针组、CCPA组和电针CCPA组均建立大鼠CCI模型，假模组仅暴露坐骨神经。造模成功后，CCPA组和电针CCPA组均行足三里和阳陵泉两穴位注射CCPA 20 μl，0.1 mm/L；电针组和电针CCPA组（穴位注射后）则接受电针治疗；假模组和CCI模型组不做CCPA和电针干预。于造模前和造模成功20 d后，对5组大鼠进行痛阈测定，包括机械缩足反射阈值（MWT）和热缩足反射潜伏期（TWL）。于痛阈测定结束后，即刻处死大鼠，取出L4～L6脊髓段，采用双标免疫组织化学染色法分析5组大鼠每个P2X4R、OX42阳性细胞的平均荧光强度。OX42和P2X4受体的荧光密度与痛阈差值的相关性采用Spearman秩相关系数进行分析。 结果 造模成功20 d后，CCI模型组大鼠的MWT值和TWL值均显著低于假模组、电针组、CCPA组和电针CCPA组，差异均有统计学意义（P<0.01）。造模成功20 d后，CCI模型组大鼠脊髓组织中P2X4和OX42的表达显著高于假模组、CCPA组、电针组和电针CCPA组，差异均有统计学意义（P<0.01）。通过分析OX42和P2X4受体的荧光密度与痛阈差值的相关性，确定OX42和P2X4受体的荧光密度与痛阈差值呈明显的正相关，相关系数分别为0.907、0.717，差异均有统计学意义（P<0.01）。 结论 CCI后大鼠痛觉过敏与脊髓背角P2X4受体表达和小胶质细胞的活化相关，CCPA和电针治疗均可降低P2X4受体的表达，抑制小胶质细胞的活化，同时干预CCPA作用受体A1受体和P2X4受体可增强电针的镇痛效应。     

氟吡汀对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及其机制研究

目的:探讨钾离子通道开放剂氟吡汀对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及交感芽生的影响,为神经病理性疼痛药物治疗提供理论依据。方法:成年雄性SD大鼠18只,体重250³50 g,按随机数字表法随机分为3组,每组6只:假手术组(S组),对照组(C组),氟吡汀组(F组)。S组大鼠暴露腰5(L5)脊神经,但不结扎。其余组大鼠暴露L5脊神经并结扎,建立疼痛模型。S组和C组大鼠腹腔注射生理盐水2 ml/kg,F组大鼠腹腔注射氟吡汀5 mg/kg,并连续给药7 d。各组大鼠术前3 d及术后1、3、5、7 d检测机械痛阈(paw withdrawal pressure threshold,PWPT)和缩足反射潜伏期(paw withdrawal latency,PWL)。术后第7 d,各组大鼠取手术侧L5背根神经节采用免疫荧光染色标记法检测背根神经节内篮状结构变化。结果:与S组比较,C组大鼠PWPT和PWL术后第1 d起显著降低(P<0.05),维持至术后第7 d。与C组比较,F组大鼠术后第3 d起PWPT和PWL明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。与C组比较,经过氟吡汀治疗后,F组大鼠术后第7 d手术侧L5背根神经节内篮状结构显著减少(P<0.05)。结论:氟吡汀通过抑制背根神经节内交感芽生以减轻神经病理性疼痛。     

经皮神经电刺激激活外周α2A肾上腺素受体

经皮神经电刺激（TENS）广泛用于急慢性疼痛的治疗。已知TENS可激活脊髓的阿片能和5-HT能受体以及脊髓以上的阿片受体。当阿片受体与α2A和α2C肾上腺素受体同时被激活时，可以产生协同镇痛作用。因此，α2受体极有可能与阿片受体和5-HT受体一起参与TENS的镇痛作用。然而，小鼠脊髓中的仅：肾上腺“素受体并未参与TENS的镇痛作用。那么，其他部位的α2肾上腺素受体是否参与TENS的镇痛作用呢？     

脊髓损伤患者神经病理性疼痛经历的质性研究

目的了解脊髓损伤患者继发神经病理性疼痛的经历,为制订有效的镇痛方案奠定基础。方法采用现象学研究方法对6例脊髓损伤继发神经病理性疼痛的患者进行半结构式访谈,用Colaizzi分析法分析脊髓损伤继发神经病理性疼痛患者的疼痛经历。结果脊髓损伤继发神经病理性疼痛患者的疼痛经历分为3个主题:不确定的疼痛体验、疼痛情感错综复杂和重拾信心应对疼痛。结论脊髓损伤继发神经病理性疼痛不同于一般的慢性疼痛,其是一种顽固且不确定的疼痛。目前医护人员对脊髓损伤继发神经病理性疼痛缺乏规范与系统的管理,尤其是护理人员缺乏相关的专业知识;而患者对疼痛的正面应对方式也需要正确指导。     

利塞膦酸钠对神经病理性疼痛大鼠模型的抗炎镇痛作用

目的:探讨利塞膦酸钠(risedronate)对神经病理性疼痛大鼠模型的镇痛作用及其对脊髓和背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)中促炎症细胞因子表达的影响。方法:将大鼠按随机数字表法分为六组(n=8):手术组(SNL+saline)、利塞膦酸钠低剂量治疗组[R (L)]、中剂量治疗组[R (M)]、高剂量治疗组[R (H)]、假手术组(Sham+saline)及空白对照组(Control+RIS),建立L5脊神经结扎模型(spinal nerve ligation, SNL),并皮下注射利塞膦酸钠(0.1、0.5、1 mg/kg),测定各组大鼠术前及术后不同时间点的热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency, TWL)和机械性撤足阈值(mechanical withdraw threshold,MWT),并运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测连续用药后各组大鼠脊髓及DRG促炎症细胞因子的表达变化。结果:SNL+saline组、R (L)组、R (M)组及R (H)组在术后各时间点MWT和TWL水平均明显下调(P <0.05),但R (L)组、R (M)组及R (H)组下降幅度小于SNL+saline组(P <0.05)。持续用药7 d后,SNL+saline组脊髓及DRG中促炎性细胞因子的表达与SNL+saline组相比较明显上调(P <0.05),但在R (M)组的表达明显下调(P <0.05)。结论:利塞膦酸钠可缓解大鼠神经病理性疼痛,抑制炎症反应,具有镇痛作用。     

蛛网膜下腔应用Ro 25-6981对神经病理痛大鼠的镇痛作用及其电生理学机制研究

目的:研究蛛网膜下腔应用Ro 25-6981,一种选择性的NMDA受体NR2B亚基(NR2B)的拮抗剂,对神经病理痛大鼠的镇痛作用及其可能的机制。方法:(1)雄性SD大鼠蛛网膜下腔置管,手术成功后进行L5脊神经结扎(SNL)手术。术后7天用vonFrey纤维丝测定机械痛敏,筛选出造模成功的SNL神经病理痛大鼠,随机分为三组,通过蛛网膜下腔插管分别鞘内给予(i.t.)Ro25-698110.0μg(20μl)、100.0μg(20μl),或等体积的生理盐水作对照。在给药后第30min、60min、90min和120min测定大鼠后爪的50%缩足阈值(PWT)及鞘内给药前后大鼠的运动功能。(2)通过在体细胞外记录的电生理学方法,观察脊髓背表面给予Ro 25-6981100.0μg对大鼠脊髓背角广动力范围(WDR)神经元放电的影响。结果:(1)与生理盐水组相比,鞘内应用Ro 25-698110.0μg对SNL大鼠的50%PWT和机械痛敏翻转百分率(%MPE)没有明显的影响(P>0.05,n=8),而100.0μg却能显著增加SNL大鼠的50%PWT和%MPE,起到明显的镇痛作用(P<0.05,n=8),并且在上述两种剂量下鞘内给药前后,动物的运动功能没有出现显著改变(P>0.05);(2)与生理盐水组相比,脊髓背表面给予Ro 25-6981100.0μg对WDR神经元的Aβ纤维诱发放电没有显著影响(P>0.05,n=6),但是可以显著抑制C纤维诱发放电(P<0.05,n=6)。结论:鞘内应用选择性的NR2B拮抗剂Ro 25-6981100.0μg可以对SNL大鼠产生明显的镇痛作用,而不影响动物的运动功能;这种镇痛作用可能是通过拮抗脊髓背角的NMDA受体NR2B亚基,进而抑制WDR神经元的C纤维诱发放电所产生的。     

臭氧对糖尿病神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用

目的:探讨臭氧皮下注射对糖尿病神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用。方法:Wistar大鼠,单次腹腔注射链脲菌素65 mg/kg,同时给予高糖高脂饮食复制糖尿病神经病理性疼痛模型。造模2周后,将20只模型大鼠随机均分为糖尿病神经病理性疼痛组(DNP组)和臭氧治疗组(O3组),另取同时饲养的10只大鼠作为对照组(C组)。O3组于模型成功后6周内每3天进行一次皮下臭氧注射(35μg/ml,0.5 ml),其余两组同样时间点注射同剂量空气。在气体注射前、注射后第2、4和6周分别测定大鼠右后足缩足反应阈值(paw withdraw threshold,PWT)、热缩足潜伏期(paw withdraw latency,PWL)、运动神经传导速度(motor nerve conduction velocity,MNCV)和感觉神经传导速度(sensorynerve conduction velocity,SNCV)。结果:与C组比较,DNP组大鼠在第2周末,PWT和PWL明显低于C组(P<0.05),差异有统计学意义。O3组在第2、4、6周注射臭氧后PWT和PWL显著升高,同时MNCV和SNCV也有显著升高(P<0.05)。结论:35μg/ml臭氧皮下注射可减轻DNP大鼠后足PWT、PWL,改善MNCV和SNCV,对糖尿病神经病理性疼痛大鼠有镇痛作用。     

牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物不同穴位注射对神经病理性疼痛大鼠的疗效比较

目的:比较不同穴位注射牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物(神经妥乐平)治疗大鼠神经病理性疼痛的疗效。方法:构建L5脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)模型大鼠,将成功模型随机分为5组(n=10),分别为SNL组、神经妥乐平+L5夹脊穴组、神经妥乐平+L5环跳穴组、神经妥乐平+L5委中穴组及神经妥乐平+L5足三里穴组,于穴位注射0 d、1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d测定大鼠双足50%机械缩足反应阈值。结果:神经妥乐平注射四个不同的穴位均有较好的镇痛作用,四个穴位镇痛强度之间无显著差异。结论:在本实验条件下,委中、环跳、足三里、L5夹脊穴注射神经妥乐平治疗神经病理性疼痛均有较好的镇痛疗效。     

乳铁蛋白对SNL神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用

目的:研究乳铁蛋白对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用。方法:SD大鼠40只,随机分为5组(n=8)。结扎L5、L6脊神经(SNL)模型制成后第5天,分别腹腔注射生理盐水1ml(组Ⅰ)或乳铁蛋白0.5g/kg(组Ⅱ)、1g/kg(组Ⅲ)、2g/kg(组Ⅳ)溶于生理盐水1ml腹腔注射,腹腔内注射乳铁蛋白1g/kg 纳洛酮2mg/kg(组Ⅴ)。观察给药前和给药后不同时间点各组大鼠机械性痛敏实验的压力阈值(PPT)和热敏实验的潜伏期(PWL)。结果:与组Ⅰ比较,组ⅡPPT和PWL差异无统计学意义;组Ⅲ、Ⅳ给药后30～180min PPT升高,30～60min PWL延长。组Ⅴ与组Ⅰ比较,PPT和PWL差异无统计学意义,与组Ⅴ相比,组Ⅲ、组Ⅳ给药后30～180min PPT增加,30～60min PWL延长。结论:乳铁蛋白通过阿片受体介导,对神经病理性疼痛大鼠产生镇痛作用。     

干扰素-α对小鼠神经源性痛的镇痛作用

目的:研究干扰素-α(IFN-α)对神经源性痛的镇痛作用及可能机制,为临床治疗神经源性痛筛选新的、毒副作用小的镇痛药物奠定基础。方法:单侧L5/L6脊神经结扎痛模型小鼠腹腔注射不同剂量IFN-α(1.0,2.5和5.0×106U/kg)后,利用机械刺激和冷刺激诱发的痛觉超敏实验测定模型小鼠患侧脚掌给药前后的痛阈变化;同时,通过给药前30m in注射纳洛酮(1mg/kg)观察阿片受体拮抗剂对其镇痛作用的影响。结果:腹腔注射IFN-α可产生剂量依赖性镇痛作用,其中5.0和2.5×106U/kg IFN-α均可产生明显的镇痛作用,镇痛效应分别维持60和30 m in,而1.0×106U/kgIFN-α无明显的镇痛作用。IFN-α产生的镇痛效应可被阿片受体拮抗剂纳洛酮完全阻断。结论:IFN-α对小鼠神经源性痛具有镇痛作用,其镇痛效应可能通过阿片受体介导。     

右美托咪啶对糖尿病神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用

目的:探讨腹腔注射右美托咪啶(dexmedetomidine,DEX)对糖尿病神经病理性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP)大鼠的镇痛作用以及对脊髓背角P2X3受体表达的影响。方法:建立DNP大鼠模型,检测大鼠机械痛阈;给予腹腔注射DEX(12.5、25、50μg/kg.d)后,观察DEX对DNP大鼠的镇痛作用;免疫组化法检测大鼠L4~6脊髓背角P2X3受体表达变化。结果:糖尿病大鼠建模成功后28 d,糖尿病大鼠与正常大鼠比较机械痛阈值明显下降;从建模后35 d开始,DNP大鼠连续7 d给予腹腔注射DEX后其机械痛阈值显著升高,脊髓背角P2X3受体表达显著下调;机械痛阈值升高幅度以及脊髓背角P2X3受体表达下调幅度与DEX剂量相关。结论:腹腔注射DEX通过下调DNP大鼠脊髓背角P2X3受体表达,对DNP大鼠产生镇痛作用。