高效液相色谱法测定草乌类药用植物活性成分含量

目的 采用高效液相色谱测定草鸟类药用植物中中乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量,对草鸟类植物进行质量与资源评价.方法 建立高效液相色谱方法,采用Phenomenex ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-醋酸铵缓冲溶液(pH10.5)(54:46)为流动相,流速为1.0 mL·min-1;检测波长为240 mm.结果 中乌头碱在0.28～2.80μg内呈良好的线性关系(r=0.9991),平均回收率为98.9%(n=5),RSD=0.93%;乌头碱在0.136～1.36μg内呈良好的线性关系(r=0.999 2),平均回收率为97.4%(n=5),RSD=1.18%;次乌头碱在0.248～2.48 μg内呈良好的线性关系(r=0.999 1),平均回收率为98.4%(n=5),RSD=1.11%.北乌头、乌头与小白掌含有中乌头碱、乌头碱、次乌头碱3种生物碱;多根乌头含有中乌头碱、乌头碱2种生物碱;其他的样品含微量或几乎没有.多根乌头的3种生物碱总量最高.结论 本方法分离效果好,分析速度快,方法稳定,结果准确.     

草乌提取物乌头碱和新乌头碱的透皮速率测定

目的:测定草乌提取物中乌头碱、新乌头碱的透皮速率。方法:用改良Franz扩散池法收集草乌提取物的透皮接受液,用高效液相色谱法测定其中乌头碱、新乌头碱的透皮速率。结果:在促透剂氮酮和丙二醇各为4%的条件下,浓度为600mg/ml的草乌提取物中乌头碱、新乌头碱24h的累积渗透量分别为165.819和487.747μg/cm2;透皮速率常数分别为18.391和78.805μg·cm-2·h-1。结论:草乌提取物中乌头碱、新乌头碱在氮酮和丙二醇的促透作用下能较好地透过大鼠皮肤,透皮吸收过程符合Higuchi方程。     

夏桑菊颗粒不同干燥方式对指标成分含量的影响

目的:优选夏桑菊颗粒浸膏的干燥方式。方法:夏桑菊颗粒药材经提取、浓缩后制得浸膏,将浸膏均分成3份,每份分别采用真空干燥、喷雾干燥、微波干燥等干燥方式,将干燥后的浸膏粉采用高效液相色谱法进行绿原酸、迷迭香酸以及蒙花苷的含量测定。色谱条件:色谱柱为Waters Symmetry Shield RP18(5μm,4. 6 mm×250. 0 mm)柱,以乙腈(A)-(体积分数) 1. 0%醋酸溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速为0. 9 m L·min~(-1),柱温为35℃,检测波长为320 nm。结果:绿原酸、迷迭香酸以及蒙花苷的线性范围分别为0. 050 4～1. 260 0μg、0. 031 2～0. 780 0μg、0. 051 2～1. 280 0μg,平均加样回收率分别为98. 3%(RSD=1. 16%)、98. 6%(RSD=1. 72%)、98. 0%(RSD=1. 01%);真空干燥、喷雾干燥和微波干燥所得样品中,绿原酸的含量分别为0. 259 mg·g~(-1)、0. 307 mg·g~(-1)、0. 284 mg·g~(-1),迷迭香酸的含量分别为0. 361mg·g~(-1)、0. 383 mg·g~(-1)、0. 396 mg·g~(-1),蒙花苷的含量分别为0. 166 mg·g~(-1)、0. 230 mg·g~(-1)、0. 216 mg·g~(-1)。结论:该方法可用于评价夏桑菊颗粒不同干燥方式的优劣,3种干燥方式对指标成分的影响为:真空干燥微波干燥喷雾干燥。     

HPLC-MS法同时测定钩藤药材中四种生物碱含量

目的:建立钩藤药材中四种生物碱的高效液相色谱-质谱联用含量测定方法。方法:色谱条件:HaloC_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm),1%乙酸-水(氨水调pH=5.5)-甲醇-乙腈为流动相,梯度洗脱,流量0.3 mL·min~(-1),柱温35℃。质谱条件:电喷雾离子源,正离子检测方式,多反应监测模式,干燥气温度350℃,干燥气流量9 L·min~(-1),雾化器压力35 psi,毛细管电压4 000 V。结果:钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱和异去氢钩藤碱含量分别为355.5μg·g~(-1)、143.9μg·g~(-1)、93.3μg·g~(-1)、202.7μg·g~(-1)。结论:该方法结果准确,重现性好,可用于测定钩藤药材中的生物碱含量。     

诃子制草乌HPLC特征图谱研究及指标性成分定量测定

目的建立诃子制草乌的HPLC特征图谱及指标性成分的定量分析方法,分析辅料炮制对草乌物质基础的影响。方法采用HPLC色谱法,色谱柱Waters SunFire C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.1%甲酸乙腈-10 mmol/L的乙酸铵溶液(含0.1%甲酸),梯度洗脱,体积流量1mL/min;柱温为35℃,进样量10μL。特征图谱检测波长为254 nm,定量检测波长分别为271 nm和235 nm,对诃子制草乌进行特征图谱分析及指标性成分的定量研究。结果建立了诃子制草乌的HPLC特征图谱,确定了28个共有峰,其中17个峰来自生草乌,11个峰来自炮制辅料诃子。对照品指认了新增加的6号峰和18号峰分别为没食子酸和诃子鞣酸。本试验建立的HPLC特征图谱分析方法可同时定量检测诃子制草乌中没食子酸、诃子鞣酸、苯甲酰新乌头原碱和新乌头碱的含量。结论建立的草乌及其炮制品的HPLC特征图谱方法简便、可靠,可对生草乌、制草乌及诃子制草乌进行快速鉴别区分,较为全面的反映草乌及不同炮制品的物质组成差异。     

HPLC同时测定参附汤中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含量的研究

[目的]建立参附汤中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量测定方法。[方法]采用Hypersil BDS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,柱温25℃,流动相为甲醇、0.1%三乙胺,梯度洗脱,流速:1.0mL.min-1,检测波长237nm。[结果]新乌头碱在0.005~0.5mg.mL-1范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率98.49%,相对标准偏差(RSD)为2.31%;乌头碱在0.005~0.5mg.mL-1范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.88%,RSD为1.57%;次乌头碱在0.005~0.5mg.mL-1范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.67%,RSD为1.75%。[结论]该方法学考察符合定量要求,结果准确,可用于同时测定参附汤中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量,为参附汤的质量控制提供依据。     

麻附甘胶囊中单酯型生物碱含量测定及双酯型生物碱限度检查

目的:建立麻附甘胶囊中单酯型生物碱的含量测定及双酯型生物碱限度检查的方法。方法:采用Agela苯基柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈∶0.1%磷酸(22∶78)为流动相;检测波长为232 nm测定双酯型生物碱含量;采用Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以A:乙腈-四氢呋喃(25∶15),B:0.03 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(含0.1%磷酸),A∶B(25∶75)为流动相;检测波长为232 nm对双酯型生物碱进行限度检查。结果:苯甲酰新乌头原碱在0.066~0.654μg范围内线性关系良好,r=0.9999;苯甲酰乌头原碱在0.016~0.16μg范围内线性关系良好,r=0.9998;苯甲酰次乌头原碱在0.016~0.16μg范围内线性关系良好,r=0.9998;双酯型生物碱检测限分别为:乌头碱8 ng,次乌头碱8 ng,新乌头碱8 ng。结论:该方法准确稳定,重复性好,可为麻附甘胶囊质量控制提供参考。     

液相色谱-质谱法测定云南草乌中双酯型生物碱的含量

［摘要］ 目的 采用液相色谱-串联质谱法测定云南4种不同产地草乌中双酯型生物碱（乌头碱、次乌头碱、新乌头碱）的含量．方法　草乌块根粉碎后经甲醇浸泡,用液相色谱-串联质谱仪检测,分别采用多个特征离子和外标标准曲线法对3种乌头碱进行定性、定量分析．结果　乌头碱、次乌头碱、新乌头碱在1～100 ng/mL范围内线性关系良好（r分别为0.999 9,1.000 0和 0.999 9）,检出限分别为0.33 ng/mL、0.15 ng/mL和0.03 ng/mL;回收率均高于98%,日内及日间精密度均小于5%．测定结果表明,4种草乌中均含有乌头碱、次乌头碱和新乌头碱,但含量有差异．结论　液相色谱-串联质谱法简便快速,可试用于生物样品中乌头碱、次乌头碱和新乌头碱的检验．     

高效液相色谱法测定草乌叶中新乌头碱、乌头碱和次乌头碱

目的 建立以高效液相色谱法同时测定蒙药草鸟叶中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的方法.方法 Extend-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.3 mol/L三乙胺(65:35),体积流量为0.8 mL/min,检测波长为235 nm,柱温为35℃.结果 经过方法学考察,本测定方法具有一定的专属性、准确性、重现性和可行性,新乌头碱、乌头碱、次乌头碱分别在1～5、0.35～1.75、0.5～2.5 μg呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.43%、98.98%、98.82%,RSD分别为1.38%、0.89%、1.03%.结论 本方法简便、准确、分离效果好、线性范围宽、灵敏度高,可用于本品的质量控制.     

高效液相串联质谱法测定制草乌中单酯型生物碱的含量

目的: 采用高效液相色谱－三重四极杆质谱串联法( HPLC－MS /MS) 技术,建立检测制草乌中单酯型
生物碱含量的分析方法。方法: 液相色谱采用Waters XTerra C₁₈色谱柱( 150mm×2．1mm,3．5μm) ; 流动相: 乙腈
( 含0．1%甲酸) －水( 含0．1%甲酸) ( 60: 40) ; 流速: 0．3mL/min; 柱温: 30℃。结果: 建立了HPLC－MS /MS 技术测定
制草乌中单酯型生物碱含量的方法,苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和苯甲酰新乌头原碱线性范围分别为
21．56～ 431．1ng /mL,19．56～ 391．2ng /mL,19．33～ 386．5ng /mL,线性关系良好,r＞0．995,平均加样回收率在93．0% ～
111．7%之间,相对标准偏差( RSD) 在4．4%～ 5．5%之间,并测定了不同来源制草乌中单酯型生物碱含量。结论:
液－质联用方法具有灵敏度高、专属性强的特点,适用于单酯型生物碱的检测。     

HPLC测定不同品种牛大力中刺桐碱、芒柄花素和高丽槐素的含量

【目的】比较不同品种牛大力中刺桐碱、芒柄花素及高丽槐素的含量差异,为选育牛大力优良品种提供参考依据。【方法】采用HPLC法测定牛大力不同药用部位中刺桐碱、芒柄花素及高丽槐素的含量,并根据各药用部位的占比,还原牛大力的整体含量。【结果】不同品种牛大力的刺桐碱含量由高到低依次为大叶牛大力(3.889 mg·g~(-1))中叶牛大力(3.579 mg·g~(-1))小叶牛大力(1.357 mg·g~(-1)),高丽槐素量的大小依次为大叶牛大力(0.295 mg·g~(-1))小叶牛大力(0.213 mg·g~(-1))中叶牛大力(0.181 mg·g~(-1)),而芒柄花素的含量基本一致,且均低于0.02 mg·g~(-1)。【结论】不同品种牛大力刺桐碱、芒柄花素及高丽槐素的含量存在较大差异,大叶牛大力的品质最优,其次为中叶牛大力。     

秦艽花的质量标准规范化研究

目的:建立藏药秦艽花的质量标准。方法:运用薄层色谱法对秦艽花进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定秦艽花中龙胆苦苷的含量,色谱柱为DIKMA Diamonsil C18(250×4.60mm,5μm)柱,流动相为甲醇-水(25:75),检测波长为275nm,流速1.0mL·min-1,柱温30℃。结果:薄层鉴别斑点清晰,重复性好;高效液相色谱法测定龙胆苦苷在0.912μg~4.560μg之间呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.62%,RSD为1.21%。结论:该方法简单可行,重复性好,可作为藏药秦艽花的质量控制方法。     

HPLC法测定生附子及其炮制品中乌头碱及次乌头碱的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定生附子中乌头碱及次乌头碱的含量的方法。方法:采用色谱柱为:Welchrom-C18,5.L,4.6×250mm,流动相:甲醇:水:三乙胺(72:28:0.037),流速:1.0mL/min,柱温30℃,检测波长分别为235、233nm。结果:乌头碱在0.00376～0.0188mg.mL-1范围内线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为96.10%;RSD=1.06%;次乌头碱在0.01818～0.04242mg范围内线性关系良好,r=0.9999;100%、120%、80%加样平均回收率为100.5%,RSD值为1.53%。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于附子中乌头碱及次乌头碱的含量测定。     

莱菔子水煎液中芥子碱硫氰酸盐与萝卜硫苷含量测定

目的:建立莱菔子水煎液中芥子碱硫氰酸盐与萝卜硫苷含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱选用Agilent Zorbax SB-C_(18)色谱柱,流动相为0.08 mol·L~(-1)磷酸二氢钠水溶液和乙腈(88∶12),流速为1.0 mL·min~(-1),检测波长设置为225 nm,进样量为20μL。结果:芥子碱硫氰酸盐和萝卜硫苷的线性范围分别为0.0005～0.05 mg·mL~(-1)和0.0005～0.005 mg·mL~(-1),平均回收率分别为95.55%(RSD=0.66%)和96.74%(RSD=1.03%)。结论:高效液相色谱法可以用于莱菔子水煎液中芥子碱硫氰酸盐与萝卜硫苷含量的测定,该法操作简便,具有较高的灵敏度和精密度。     

高效液相色谱法同时测定牡蒿叶中4个绿原酸类成分含量

[目的]通过响应面法优化提取工艺,并结合高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定牡蒿叶中4个绿原酸类成分的含量,探究其开发利用价值。[方法]采用Thermo Scientific Syncronis Amino色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)色谱条件为流动相乙腈:0.1%甲酸水(40:60,V/V),流速1mL·min~(-1),柱温25℃检测波长325nm;以绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C的总含量为响应值乙醇浓度、液料比、超声功率为主要因素采用Box-Behnken响应面法对牡蒿叶中4个绿原酸类成分进行优化提取,并测定其含量。[结果]以乙腈:0.1%甲酸水(40:60,V/V)等度洗脱,流速1mL·min~(-1),柱温25℃检测波长325nm,牡蒿叶中绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C分离度良好,在6.25～200.00μg·mL~(-1)浓度范围内线性关系良好加样回收、精密度、稳定性和重复性均符合要求。优化得到的最佳提取工艺为:乙醇浓度60%,液料比40:1(单位mL·g~(-1))超声功率250W频率53kHz室温超声20min。通过HPLC法测得绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C含量分别为14.317 0mg·g~(-1)、27.945 2mg·g~(-1)、1.2304mg·g~(-1)和5.066 5mg·g~(-1),合计总量达48.559 0mg·g~(-1)。[结论]HPLC法测得牡蒿叶中绿原酸类成分含量较为丰富。采用响应面法优化提取工艺,能够显著提高牡蒿叶中4个绿原酸类成分提取率具有较好潜在开发应用价值。     

蟾酥商品药材中5-羟色胺含量测定

目的:建立蟾酥药材中5-羟色胺的含量测定方法。方法:HPLC法,色谱柱Diamonsil-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),0.05 mol·L~(-1)磷酸二氢钾缓冲液-甲醇94∶6(V/V),p H 3.5为流动相,柱温30℃,流速1.0 m L·min~(-1),检测波长296 nm,测定10批蟾酥药材中5-羟色胺含量。结果:10批样品中均检测出5-羟色胺,其含量在0.3926~50.06 mg·g~(-1)。结论:该方法简便、可靠,可作为蟾酥药材质量控制的方法。     

新乌头碱、次乌头碱和乌头碱含量测定中对高效液相色谱法的应用价值

目的探讨采用高效液相色谱法测定白附片中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱含量的应用价值。方法选用反相离子对HPLC法,采用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18柱(5μm,4.6×250mm);流动相:乙腈-5mmol-1Na H2PO4溶液,调整磷酸至p H(52:50),内含有6mmol-1的十二烷基磺酸钠(SDS);流速为1.0m L·min-1;检测波长为234nm。结果白附片中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱可完全分离,且能准确测定。结论此方法具有较高准确度,在白附片中生物碱含量测定中具有良好的应用价值。     

采用HPLC法测定如意金黄散中盐酸小檗碱的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定如意金黄散中盐酸小檗碱含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,以盐酸小檗碱为对照品,色谱柱为Agilent C18(150mm×4.6mm,5μm),柱温为25℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(45∶55)(每100m L加十二烷基磺酸钠0.1g),流速为1.0m L·min-1,检测波长为265nm。结果:盐酸小檗碱的线性范围为0.0540~1.0800μg(R=0.9999),平均回收率为100.52%(N=3),四批样品含量测定结果均值为:本品每1g含盐酸小檗碱为0.71mg。结论:本方法专属性强,重现性佳,且稳定,可靠。     

生半夏对生川乌中生物碱溶出量的影响

目的:测定生川乌与不同比例的生半夏配伍水浸液中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量.方法:将生川乌与生半夏分别按1∶0、1∶0.125、1∶0.25、1∶0.5、1∶0.75、1∶1、1∶2的比例配伍,采用HPLC法测定各比例配伍样品中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量.色谱条件为:Hypersil BDS C18(5μm,4.6mm×250mm)色谱柱,流动相为甲醇∶水∶氯仿:三乙胺(70∶30∶2∶0.1),流速为1.0ml/min,柱温30℃,检测波长235nm.结果:乌头碱在1.5μg/ml-25.0μg/ml(r=0.9996)、新乌头碱在17.0μg/ml-85.0μg/ml(r=0.9998)、次乌头碱在16.0μg/ml-160.0μg/ml(0.9996)范围内线性关系良好.随着生半夏配伍比例的增加,生川乌中3种生物碱的溶出量逐渐降低.结论:生半夏可降低生川乌水浸液中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的溶出量.     

LC-MS/MS测定乌头属中药中8个生物碱含量

目的 :建立LC-MS/MS测定乌头属中药8种生物碱含量的方法。方法 :以甲醇-水(水相含0.1%甲酸和2.5 mM醋酸铵溶液)为流动相,C18柱分离,采用ESI(+)源,MRM监测,对制川乌、制草乌、制附子药材饮片中的双酯型生物碱(乌头碱、新乌头碱、次乌头碱),单酯型生物碱(苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱),胺醇型生物碱(乌头原碱、新乌头原碱)进行含量测定。结果 :上述8种生物碱的线性关系良好,精密度、重复性的RSD都低于6%,加样回收率为95.77%~101.90%。结论 :该方法简便、快速、精密度高、重复性好,可应用于乌头属中药的质量控制。