儿童急性呼吸道感染中流感嗜血杆菌的检测与分型

目了：为了解儿童急性呼吸道感染中的流感嗜血杆菌与生物分型及其对抗生素的敏感情况。方法：对78例急性呼吸道感染儿童采用常规方法进行了培养，药敏试验与生物分型。结果：共分离出流感嗜血杆菌33株，检出率为42．3％，在对所有分离株进行的生物分型结果中，共捡出5型，其中以Ⅳ，Ⅵ型居多，分别为Ⅳ型8例(24．2％)Ⅵ型13例(39．4％)。33株分离出的流感嗜血杆菌中，全部菌株对氯霉素，氧氟沙星敏感，头孢拉定株21(63．6％)、头孢唑林19株(57．6％)、去甲万古霉素23株(69．7％)、苯唑青霉素31株(93．4％)、复方磺鞍甲基异唑11株(33．3％)、红霉素4株(13．2％)。结论：儿童急性呼吸道感染中流感嗜血杆菌有较高的检出率，以生物Ⅵ型和Ⅳ型居多。流感嗜血杆菌存在着严重的耐药倾向。     

下呼吸道标本苛养菌的分离培养及耐药性研究

目的：了解呼吸道感染住院病人流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌及肺炎链球菌的感染和耐药性以及流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌β-内酰胺酶的产生率。方法：收集呼吸道感染患者的痰标本共1263份，按细菌学常规方法进行分离培养、鉴定和药敏试验，以Nitroceiin纸片法测定β-内酰胺酶的产生率。结果：1263份痰标本中共分离出流感嗜血杆菌139株，副流感嗜血杆菌85株，肺炎链球菌228株。139株流感嗜血杆菌产β-内酰胺酶51株(36．69％)，85株副流感嗜血杆菌产β-内酰胺酶32株(37．65％)。139株流感嗜血杆菌对氨苄西林、四环素、SMZ高度耐药，对利福平和阿奇霉素的耐药率为0．00％。85株副流感嗜血杆菌对氨苄西林、四环素和氧氟沙星耐药严重，对利福平的耐药率为0．00％。228株肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、四环素、SMZ耐药率相当高，对青霉素中介率高达23．25％。结论：呼吸道苛养菌对多种抗生素具有较明显的耐药性，临床微生物室应加强对呼吸道标本中苛养菌的常规分离培养及药敏试验，指导临床医生合理使用抗生素以延缓耐药率的快速上升。     

Comparison of culture and PCR assay for detection of susceptibility bacteria of pneumonia in children

目的 探讨PCR法和培养法对儿童肺炎易感细菌检测的应用价值.方法 采用PCR法及细菌培养法对113例呼吸道感染患儿的临床标本进行检测,对两种检测方法的结果进行比较.结果 113例临床标本中,培养法检测阳性率46.9％(53/113),其中流感嗜血杆菌2例,大肠埃希菌8例,肺炎克雷伯菌15例,肺炎链球茵3例,金黄色葡萄球菌12例,表皮葡萄球菌6例,铜绿假单胞菌7例.PCR法检测阳性率69.9％(79/113),在79例阳性标本中检出病原菌85株,其中73例标本检测出单一病原.6例标本为混合感染.流感嗜血杆菌18例,大肠埃希菌8例,肺炎克雷伯菌17例.肺炎链球菌16例,金黄色葡萄球菌10例.表皮葡萄球菌10例,铜绿假单胞菌6例.结论 与培养法相比,PCR法可以提高肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等较难培养细菌的检出率,应将PCR法与培养法结合作为肺炎易感细菌的检测方法.为临床医师合理选择抗生素奠定基础.     

PCR法与培养法检测儿童肺炎易感细菌结果比较

目的探讨PCR法和培养法对儿童肺炎易感细菌检测的应用价值。方法采用PCR法及细菌培养法对113例呼吸道感染患儿的临床标本进行检测,对两种检测方法的结果进行比较。结果 113例临床标本中,培养法检测阳性率46.9%(53/113),其中流感嗜血杆菌2例,大肠埃希菌8例,肺炎克雷伯菌15例,肺炎链球菌3例,金黄色葡萄球菌12例,表皮葡萄球菌6例,铜绿假单胞菌7例。PCR法检测阳性率69.9%(79/113),在79例阳性标本中检出病原菌85株,其中73例标本检测出单一病原,6例标本为混合感染。流感嗜血杆菌18例,大肠埃希菌8例,肺炎克雷伯菌17例,肺炎链球菌16例,金黄色葡萄球菌10例,表皮葡萄球菌10例,铜绿假单胞菌6例。结论与培养法相比,PCR法可以提高肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等较难培养细菌的检出率,应将PCR法与培养法结合作为肺炎易感细菌的检测方法,为临床医师合理选择抗生素奠定基础。     

2009~2010年广州地区儿童呼吸道合胞病毒感染分析

目的 应用实时荧光PCR方法检测呼吸道合胞病毒,分析2009~2010年广州地区儿童感染呼吸道合胞病毒的状况。方法 以呼吸道合胞病毒的N基因序列为参考,设计特异性引物和TaqMan荧光探针,建立实时荧光PCR方法,进行灵敏度和特异性检测。采用实时荧光PCR方法,对2009~2010年两年本院门诊或住院部急性呼吸道感染患儿的21458份咽拭子样本进行了检测。结果 （1）实时荧光PCR方法具有较好的特异性和灵敏度,与其他常见呼吸道病毒无交叉反应。（2）2009年的10477例临床标本中实时荧光PCR方法检测全年的呼吸道合胞病毒阳性率为7.25％,流行高峰在3月份,感染率为20.04%;2010年检测的10981例临床标本中,呼吸道合胞病毒阳性率为9.73％,有两个流行高峰,一个在2月,感染率为29.56％,另一个高峰在12月份,感染率达到22.20％。结论 本研究建立的实时荧光PCR方法具有简便快捷、特异、敏感的特点,适用于临床呼吸道合胞病毒的检测。2009~2010年呼吸道合胞病毒依然是广州地区儿童急性呼吸道感染的主要病原。     

MP快速液体培养法在儿童支原体肺炎诊断中的应用

目的：探讨MP快速液体培养法在儿童支原体肺炎诊断中的应用价值。方法：采用MP快速液体培养法对1089例临床拟诊为呼吸道感染的患儿的咽拭子进行培养；ELISA法检测血清MP IgM抗体856次；PCR法检测MP DNA608例次。对检测结果与临床诊断进行分析。结果：MP快速液体培养法阳性467例，阳性率由42．9％（467／1089）。血清MP IgM抗体阳性率为31．9％（273／856）；PCR法阳性率为38．8％（236／608）。结论 MP快速液体培养法快速，简例，对肺炎支原体感染的早期诊断具有重要的参考价值，适应一般实验室开展应用。     

广元市238例住院儿童呼吸道感染病原谱检测与流行特征分析

目的 建立广元市儿童急性呼吸道感染病原谱，为儿童呼吸道感染疾病的临床诊治和精准防控提供依据。方法 选取2021年广元市流感哨点监测医院238例住院儿童严重急性呼吸道感染病例，采用实时荧光定量PCR法对病例样本进行22种呼吸道病原体核酸检测，并对其流行特征进行分析。结果 238例严重急性呼吸道感染住院儿童，呼吸道病原体核酸检测总阳性率为95.38%(227/238),其中混合感染175例，占阳性样本的77.09%(175/227)。共检出18种感染性病原体，以肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肠道病毒、人鼻病毒、呼吸道合胞病毒为主。男童病原体阳性率(93.91%)与女童病原体阳性率(96.74%)差异无统计学意义(χ²=1.084,P>0.05)。病原体阳性检出率由高到低依次为3～<6岁(98.59%)、1～<3岁(97.89%)、0～<1岁(87.23%)、6～<12岁(92.00%)(χ²=10.747,P<0.05)。呼吸道病原体全年各季节以肺炎链球菌阳性率最高，流感嗜血杆菌次之；除以上两者外，春夏季以肠道病毒...     

儿童呼吸道感染流感嗜血杆菌耐药性分析

目的：了解儿童呼吸道感染嗜血杆菌的致病情况及其对抗生素的耐药性。方法：将镜检合格的痰培养标本进行分离鉴定及药敏试验，其结果全部输入计算机，并采用ATB Expression统计软件进行统计。结果：2001年3月－2002年5月我院儿童呼吸道标本培养阳性菌株451例，共分离出107例流感嗜血杆菌，阳性率为23．7％；其中产β－内酰胺酶菌株10例，占9．3％；对抗和素环丙沙星、阿奇霉素、头孢噻肟、奥格门丁等的敏感率均＞70％，复方新诺明、红霉素的耐药率均＞60％。结论：流感嗜血杆菌在儿童呼吸道感染中占重要地位。对流感嗜血杆菌及其产酶菌株的抗菌素使用，临床应考虑首选药物或联合用药及其抗菌素的耐药性，参考药敏试验结果，尽量使抗菌素的使用合理化、规范化。     

呼吸道嗜血杆菌的培养及药敏结果分析

目的：了解本院临床和门诊呼吸道患者痰培养中嗜血杆菌的检出情况，并进行药敏分析，为选用抗先素提供临床依据。方法：改良哥伦比亚巧克力培养基，血平板分离痰标本，采用烛缸法培养，以K—B纸片扩散法作药敏检测。结果：从829份痰标本中分离出169株嗜血杆菌，分离率为20．4％，流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌对氨苄西林的耐药率为26．3％和18．7％，对环丙沙星的耐药率分别为5．3％和28．7％，对四环素的耐药率分别为10．5％和22．0％，而对阿奇霉素、第二、三代头孢菌素的敏感率均高于90％。结论：呼吸道疾病患者痰标本嗜血杆菌的检出率较高。并且以副流感嗜血杆菌为主。临床治疗呼吸道疾病时应注意噜血杆菌感染厦其耐药性，给予合理治疗。     

住院呼吸道感染患儿嗜血杆菌检出率及耐药性调查

目的：了解呼吸道感染患儿嗜血杆菌的检出及耐药情况。方法：对我院2002年6月呼吸内科住院的急性呼吸道感染患儿55例，用低压吸引器接一次性吸痰管，吸取患儿咽喉部痰液进行培养分离嗜血杆菌，采用法国生物梅里埃公司ATBNH药敏条件进行药敏分析。结果：嗜血杆菌检出率29．1％，对头孢三代类、阿奇霉素、环丙沙星、泰能、氨曲南等抗生素敏感，对红霉素、复方新诺明、氨苄西林等出现不同程度的耐药，其耐药率分别为81．2％、68．8％、31．2％。结论：本地区儿童呼吸道感染以嗜血杆菌感染率较高，且以副流感嗜血杆菌感染为主，临床上应首选头孢三代、阿奇霉素、泰能等类抗生素治疗为宜。     

儿童流感嗜血杆菌氨苄青霉素耐药基因的研究

目的研究儿童流感嗜血杆菌（HI）对氨苄青霉素的耐药状况，并从分子生物学的角度研究其耐药机制。方法对儿童痰标本及咽拭子中分离的55株HI菌株进行β-内酰胺酶检测，PCR扩增β-内酰胺酶基因TEM-1、ROB-1的编码基因，并进行核酸序列测定与分析。结果分离的55株HI有17株产生β-内酰胺酶，并对氨苄青霉素耐药，耐药率30．9％。未发现β内酰胺酶阴性而对氨苄青霉素耐药的菌株。PCR法检测产酶HI中β-内酰胺酶基因TEM-1阳性率为100％，不产酶HI中无TEM-1阳性者。在32株菌株（17株产酶菌和15株不产酶菌）中未检测到ROB-1基因。结论流感嗜血杆菌是急性下呼吸道感染的主要病原体之一，对氨苄青霉素的耐药率较高。流感嗜血杆菌对氨苄青霉素的耐药主要由质粒介导的TEM-1型β-内酰胺酶所致。     

流感嗜血杆菌致儿童下呼吸道感染临床特征及其药敏分析

目的了解流感嗜血杆菌致儿童下呼吸道感染临床特征及药敏分析，为临床抗感染治疗提供理论依据。方法对复旦大学儿科医院2003年1月至2004年12月间住院的下呼吸道感染患儿采用一次性鼻导管深插气管（10～15cm）负压吸取痰液细菌培养，并进行药敏分析。结果①2003年及2004年分别培养流感嗜血杆菌阳性菌株102株及53株（共155个病例）。②48例的年龄〈6月，占31．4％，有144例儿童在5岁以内，占92．9％。③季节分布，1至4月份分别有26，23，45，24例，占全年病例的76．1％。④呼吸道合胞病毒（RSV）和支原体为最主要的两种合并感染病原体，分别为33例（21．4％）和13例（8-4％）。⑤两年药敏分析平均耐药率：氨苄西林为25．5％，头孢唑林、头孢克洛、头孢噻污的耐药率分别为23.2％、8．6％和5．8％，氯霉素的耐药率为17．8％，AMP／舒巴坦的耐药率为15．0％，环丙沙星耐药率为3．9％，阿奇霉素的耐药率仅为3．3％，而复方新诺敏耐药率高达60．8％。结论流感嗜血杆菌感染致儿童下呼吸道感染最易发生在5岁以下，且以1至4月份为高发季节。6个月以下儿童亦表现为易感人群。流感嗜血杆菌对各种常用抗生素耐药率继续呈不同程度上升表现。     

多重PCR检测支气管肺泡灌洗液中细菌性病原体的研究

目的评价呼吸道感染患者肺泡灌洗标本进行多重PCR检测的准确性。方法选取2006～2009年本院住院的158例儿童为研究对象,同时选用需要接受纤维支气管镜检查的30例同龄非感染患儿作为对照。所有儿童24h内接受标准的纤维支气管镜介导的支气管肺泡灌洗。用多重PCR检测灌洗液中肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎支原体和肺炎嗜衣原体。并用细菌培养等常规方法对这些患者的肺泡灌洗液进行分析。结果常规细菌学诊断方法显示,肺炎链球菌,流感嗜血杆菌,肺炎支原体,肺炎嗜衣原体在下呼吸道感染病人中分别占14％,21％,3．2％,和0％。而应用肺泡灌洗液多重PCR这种诊断方法,这些病原体在这些病人中分别占了28％,47％,4％和1％,其敏感性分别为87％。90％,100％和0％,特异性分别为81％,64％,100％和99％。在104位检查前服用了抗生素的支气管镜检患者中,肺炎链球菌通过细菌培养来确诊占2．9％,而通过多重PCR则为31％。在对照组中多重PCR鉴别肺炎链球菌的比例为17％．流感嗜血杆菌为40％。结论在下呼吸道感染病人中,支气管肺泡灌洗液结合多重PCR能够有效的用来鉴别肺炎链球菌,流感嗜血杆菌,肺炎支原体,肺炎嗜衣原体,这在已经用抗生素治疗的病人中尤为有效。     

儿童上呼吸道感染副流感嗜血杆菌的鉴定及耐药性分析

目的：了解儿童上呼吸道感染副流感嗜血杆菌的耐药情况,指导临床合理用药。方法：收集急性上呼吸道感染儿童鼻咽分泌物进行培养,采用APINH鉴定卡和ATBNH药敏条进行细菌鉴定和抗生素试验,β-内酰氨酶试验采用Cefinase纸片法。结果：呼吸道感染患儿咽部嗜血杆菌共检出121株,其中副流感嗜血杆菌50株,占嗜血杆菌的41.4%。8个生物型中,以Ⅱ、Ⅲ型为主,Ⅱ型占副流感嗜血杆菌的22.0%,Ⅲ型占副流感嗜血杆菌的32.0%。检测菌株对氨苄西林和复方新诺明耐药率较高,分别为54.0%和62.0%,检出β-内酰胺酶11株,产酶率为22.0%。结论：上呼吸道感染副流感嗜血杆菌的生物型以Ⅱ、Ⅲ型为主。对副流感嗜血杆菌引起的感染应首选头孢噻肟、头孢呋辛、头孢克洛;对产酶菌株的抗生素使用,临床应考虑复方阿莫西林或联合用药,以使抗生素的使用合理化、规范化。     

荧光定量PCR方法检测母乳中人类巨细胞病毒

目的：比较荧光定量PCR(FQ-PCR)方法与定性PCR方法的敏感性，同时通过应用FQ-PCR方法了解HCMV感染患儿母乳中HCMV感染情况。方法：用FQ-PCR方法与普通定性PCR方法共同检测94份尿液中HC-MVDNA，将两种方法进行比较。用FQ-PCR方法检测76例HCMV感染患儿母乳中HCMVDNA。结果：FQ-PCR方法检测阳性率为60．6％，定性PCR方法检测阳性率33．3％，FQ-PCR方法优于定性PCR方法。应用FQ-PCR方法检测HCMV感染患儿母乳的HCMV阳性率为72．37％。结论：FQ-PCR方法优于PCR方法，应用FQ-PCR检测母乳中HCMV是一种方便、快捷的方法。HCMV感染患儿母乳HCMV阳性率高，是HCMV感染的一种重要的传播途径。     

祛湿清经方治疗湿热下注型原发性中度痛经60例

目的应用多种检测方法对临床儿童患者非典型呼吸道病原体进行检测,并对检测结果进行分析和方法评价,为临床提供呼吸道感染性疾病病因诊断依据。方法应用IFA法检测儿童常见9种呼吸道病原体的IgM抗体,同时应用GICA法对流感病毒抗原、快速培养法对MP进行检测,并分析比较检测结果。结果453例样本中,9种IgM抗体总共检出94例,阳性率20．8％。其中应用GICA法检测FluA和FluB抗原与IFA法检测抗体总体一致率分别达98．9％和99．6％（Kappa值〉0．75,一致性满意）,培养法检测MP与PCR法总体一致率达97．6％（Kappa值〉0．75,一致性满意）。结论非典型病原体是儿童呼吸道感染的重要病原体,应用IFA抗体检测、流感病毒GICA抗原检测、MP快速培养法能够为临床提供早期诊断和正确治疗的依据。     

急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物中腺病毒DNA检测

对56例已经病毒分离方法检测的急性呼吸道感染患儿NPS抗原片及30例NPS新鲜标本,进行PCR方法检测,与病毒分离方法比较,PCR方法的敏感性、特异性和诊断符合率分别为100％、96.0％和98.21％。PCR方法诊断NPS标本中Adv敏感性高,尤其适用于早期Adv感染的快速诊断。86例NPS标本中共检出13例阳性,阳性率为15.1％。     

儿童呼吸道感染流感嗜血杆菌药物敏感性分析

目的了解桂林地区儿童呼吸道感染流感嗜血杆菌（Hi）对常用抗生素的耐药情况,指导临床合理使用抗生素。方法对1088例呼吸道感染患儿的痰及咽拭子标本进行Hi分离培养、鉴定,用K-B纸片扩散法进行药敏分析。β-内酰胺酶实验采用Nitroeefin纸片法。结果1088份标本共分离出155株Hi,检出率14．25％;β-内酰胺酶阳性率为18．71％（29／155）。检出菌株对氨苄西林／舒巴坦、氨曲南、左氧氟沙星、环丙沙星、头孢菌素类、氯霉素、亚胺培南敏感率高,分别达92．31％-100％。耐药率较高的为：复方新诺明59．86％、红霉素34．86％、氨苄西林34．19％、利福平28．24％。结论本地区儿童呼吸道感染Hi的耐药形势较严峻,产β-内酰胺酶较高。临床用药应根据药敏结果合理使用抗生素。     

反复呼吸道感染患儿血清IgG亚类检测

了解IgG亚类在反复呼吸道感染患儿发病中的变化。方法：利用免疫扩散法检测42例反复呼吸道感染患儿血清IgG及亚类，与健康体检儿童（对照组）比较。结果：反复呼吸道感染患儿血清IgG、IgG1与对照组无差异，IgG2、IgG3、IgG4均较对照组低，差异有显著性（P＜0．05－0．001）。42例IgG亚类缺陷20例，占47．62％（20／42），结论：IgG、IgG4为主。结论：反复呼吸道感染可有IgG亚类缺陷，IgG亚类比总IgG更能反映反复呼吸道感染患儿免疫功能状态。     

LAMP法和传统培养法检测下呼吸道感染常见病原体的比较研究

目的 应用恒温扩增(LAMP)芯片法对下呼吸道感染患者痰标本13种常见病原体进行核酸检测,并与传统培养法比较,调查病原体的分布特点,研究LAMP技术对下呼吸道感染病原体检测的临床意义.方法 收集2019年7月至2019年12月在青岛市市立医院住院的疑似下呼吸道感染患者痰液标本2430例,LAMP芯片法检测病原体,其中1905例同时行细菌培养.分析下呼吸道感染病原体的分布特点,并与传统培养法进行比较,对两种检测方法的病原检出种类、数量和检测一致性进行对比.结果 2430例标本通过LAMP芯片法检出阳性1132例,阳性率46.58％.单一病原感染653例(26.87％),混合感染479例(19.71％).LAMP芯片法检出的主要病原菌为流感嗜血杆菌(16.30％)、肺炎克雷伯菌(9.75％)、耐甲氧西林葡萄球菌(9.05％),未检测到嗜肺军团菌.传统培养法检出阳性440例,阳性率23.10％,单一病原感染338例(17.74％),混合感染102例(5.35％).传统培养法检出的主要病原菌为铜绿假单胞菌124例(6.51％)、鲍曼不动杆菌117例(6.14％)、肺炎克雷伯菌105例(5.51％).两种方法的铜绿假单胞菌阳性率具有较高的一致性(Kappa=0.658),鲍曼不动杆菌、大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌阳性率具有中等一致性(0.4相似文献