结核分枝杆菌耐药分子机制及耐药基因检测方法研究进展

近年来 ,在全球范围内 ,结核分枝杆菌耐药率不断上升 ,高耐药和多耐药菌株不断出现和传播 ,对化疗疗效及结核病流行产生很大影响 ,药物敏感性检测更显重要。在临床实验室 ,目前分枝杆菌药物敏感性检测仍采用常规方法 ,即绝对浓度法 ,比例法和抗性比率法。但这些方法均以细菌生长为终点判断结果 ,由于结核分枝杆菌生长缓慢 ,在得到分离培养物后仍需 1～ 2个月方能获得结果 ,急需建立快速、准确、可靠的药物敏感性试验方法。近年来 ,随着分子生物学理论和技术的发展 ,结核分枝杆菌的耐药机制及耐药的分子基础大部分已被阐明 ,建立了快速检测结…     

结核分枝杆菌耐药表型与耐药基因型相关性研究进展

20世纪80年代以来,结核病（tuberculosis,TB）疫情呈全球性回升趋势,我国作为全球最大的发展中国家,同时也是全球TB疫情最严重的国家之一［1］。随着全球耐药结核病（drug resistant tuberculosis,DR TB）的出现和传播,特别是耐多药结核病（multidrug resistant TB,MDR TB）、广泛耐药结核病（extensively drug resistant TB,XDR TB）,以及全耐药结核病（totally drug resistant TB,TDR TB）发生率的增高,全球TB的有效治疗和控制受到严重威胁。深入研究结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）的耐药分子机制,发现基因突变是MTB产生耐药的重要原因。现就各抗结核药物的耐药表型与耐药基因型的相关性研究进行综述。     

实时荧光定量PCR检测耐药结核分枝杆菌中耐药相关基因whiB7的表达

目的探讨结核分枝杆菌耐药性与whiB7基因表达水平之间的关系。方法以耐受利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇和氟喹诺酮的结核分枝杆菌临床分离株为研究对象,利用实时定量PCR的方法,检测药物刺激结核分枝杆菌后whiB7基因表达水平的变化。结果除利福平刺激相应的菌株后,whiB7基因的表达水平变化不明显外,其余药物的刺激均会引起结核分枝杆菌耐药株的whiB7基因表达水平发生显著变化。结论结核分枝杆菌的whiB7基因是对多种抗生素刺激发生反应的基因,推测whiB7的表达参与结核分枝杆菌的耐药过程。     

结核分枝杆菌对常见的一线和二线药物耐药机制的研究进展

结核分枝杆菌是引起结核病(TB)的病原体,可侵犯全身各种器官,病死率较高。而结核病的耐药性已成为了一个日益严重的公共卫生问题,严重威胁着结核病的防治。治疗结核病主要的一线和二线药物包括异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、链霉素和喹诺酮类等,深入了解这些抗结核药物的耐药机制可进一步指导抗结核新药的研制。     

结核分枝杆菌毒力基因研究进展

结核病是目前全球重点控制的传染病之一,结核分枝杆菌(简称结核杆菌)具有强大的致病性和传染力,而要彻底了解和控制结核杆菌,对其毒力基因的认识就显得非常重要。近年来世界各国投入了很大的人力物力研究结核杆菌的毒力基因。对毒力基因的认识将促进结核的疫苗研制、临床诊断与控制,具有十分重要的抗结核战略意义。     

结核分枝杆菌异烟肼耐药与KatG基因相关性

目的 探讨新疆地区结核分支杆菌异烟肼(INH)耐药与结核杆菌KatG基因突变和缺失的关系。方法 收集结核病患者的痰标本238份,分离培养结核杆菌分离株60株,其中异烟肼敏感株28株,耐药株32株,抽提临床菌株DNA和H37RV标准株DNA,应用聚合酶链反应-单链多态构象分析(PCR-SSCP)和测序方法对结核分支杆菌KatG基因突变进行检测。结果 238份肺结核病人痰标本,涂片抗酸杆菌阳性60例,阳性率25.2%;以结核分支杆菌H37RV为对照,28株药物敏感株的KatG,基因扩增产物273片段单链多态构象分析(SPSS)图谱均正常,32例耐INH分离株中32株KatG基因扩增阳性,其中11株SSCP图谱与H37RV株有差异,KatG突变率为34.37%。结论 新疆地区结核杆菌INH耐药率仍属于高耐药区域,新疆地区结核分支杆菌INH耐药的产生可能是其KatG基因突变所致。     

结核分枝杆菌毒力基因研究进展

结核病是目前全球重点控制的传染病之一，结核分枝杆菌(简称结核杆菌)具有强大的致病性和传染力，而要彻底了解和控制结核杆菌，对其毒力基因的认识就显得非常重要。近年来世界各国投入了很大的人力物力研究结核杆菌的毒力基因。对毒力基因的认识将促进结核的疫苗研制、临床诊断与控制，具有十分重要的抗结核战略意义。     

青海地区结核分枝杆菌快速检测及耐药特征研究

目的探讨青海地区耐药结核分枝杆菌(MTB)的相关基因型特点,为开展耐药结核病快速诊断提供依据。方法选择2011年6月-2012年12月西宁市区、农村和农牧区结核病患者的MTB标本各300份,采用MTB微量最低抑菌浓度(MIC)法对耐药结核病进行快速诊断,同时用传统的罗氏药敏法作为对照,采用测序方法分析耐药MTB在不同人群中的分布率,了解青海地区MTB耐药的基因突变特征,基因突变分布和主要流行突变位点。结果西宁市区与农牧区单一耐药及多耐药MTB耐药率比较,牧区明显高于西宁市区和农村,差异有统计学意义(P<0.05);rpoB、katG、gyrA突变率西宁市区分别为52.83%、52.83%、37.74%,农村分别为70.97%、62.90%、45.16%,牧区分别为92.55%、86.17%、81.91%,牧区的基因突变率与西宁市区、农村比较,差异有统计学意义(P<0.05);利福平最常见的突变位点为drpoB(531)占43.66%,异烟肼最常见的突变位点为katG(315),占61.27%;氧氟沙星最常见的突变位点为gyrA占59.52%。结论对青海地区耐药结核分枝杆菌的耐药特征有了进一步了解,为临床医师治疗结核病合理选药提供了依据。     

丽水市结核分枝杆菌5种耐药基因突变分析

目的:了解丽水市结核分枝杆菌耐药相关基因rpoB、katG、embB、rpsL和gyrA突变特点。方法:采用PCR-DNA直接测序法,对47株结核菌分离株5个耐药相关基因主要耐药位点突变进行分析。结果:药敏试验共获得耐药结核菌18株,总耐药率为38.30%;序列分析13株存在一个或多个突变位点,未发现碱基的插入或缺失,突变率为27.66%,二者吻合率72.22%。结论:丽水市结核杆菌趋向于耐多种药物,与多个基因突变相关。点突变是本地区结核菌产生耐药性的主要形式。     

深圳市结核分枝杆菌异烟肼耐药流行株的基因分析

异烟肼(INH)和利福平(RFP)是抗结核药中的一线药物,近年来出现了大量耐药结核分枝杆菌,在中国INH-耐药率高达17.6%[1].INH耐药相关的最主要基因为katG,其次为inhA、ahpC和inhA94.为了解深圳地区INH耐药流行株的主要基因突变类型,本研究对深圳地区303株结核分枝杆菌的katG、inbA、oxyR-ahpC基因进行序列分析.     

绵阳市结核分支杆菌耐药性分析

目的了解绵阳市结核分支杆菌耐药情况,为耐药结核病的预防控制提供依据。方法采用比例法对79株结核分支杆菌进行一线抗结核药物:异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)耐药性检测。结果共检测出耐药菌17株,总耐药率为21.52%,多耐药率为12.66%,耐多药率为6.33%。初治耐药率为18.64%,获得性耐药率为30.00%。单耐药顺序为:INH>SM>RFP>EMB,耐药率分别为15.19%,12.66%,7.59%和7.14%。耐药在性别和年龄组方面无统计学意义。结论绵阳市结核分支杆菌耐药率低于全国平均水平,应进一步加强耐药菌监测以指导临床合理用药。     

结核分支杆菌药敏和耐药基因检测的临床应用和分析

目的 采用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（PCR－SSCP）检测结核分支杆菌耐药基因（rPOB、katG和rPSL),评估它的临床应用价值。方法 通过Bactec-960快速培养,PCR－SSCP和药物敏感试验了解114例肺结核病人结核分支杆菌耐药情况,分析了临床治疗效果。结果 近1／3的初治肺结核病人至少耐一种抗结核药物,RFP、INH和SM敏感株rPOB、katG和rPSL基因突变率分别为6．5％、11．4％和27．2％,耐药株基因突变率分别为60．2％、45．7％和62．7％,耐药基因突变率随着耐药浓度增而高而增高。药敏试验联合耐药基因检测指导治疗效果满意。结论 耐药基因检测指导治疗是一种新探索,与药敏试验联合应用可互相弥补,可能成为临床指导用药的好方法。     

结核分枝杆菌L型的研究进展

结核分枝杆菌L型即细胞壁缺陷型,由于细胞壁缺损程度不同,常表现为形态多样,染色多变,且对渗透压敏感,在等渗的普通培养基中不能生长,因而容易导致结核病误诊、漏诊、复发或播散.该文对结核分枝杆菌L型的形成、生物学特性、临床和流行病学以及检测方法等方面进行综述.     

自贡市肺结核患者结核分枝杆菌耐药性分析

目的 分析自贡市2010-04/2011-08检出肺结核病例结核分枝杆菌的耐药性,为预防及临床治疗提供科学依据.方法 通过将全市6个区县结核病监测点纳入的初、复治涂阳肺结核患者,采用比例法对异烟肼(H)、利福平(R)、乙胺丁醇(E)、链霉素(S)4种药物进行敏感性检测.结果 调查符合要求对象232例,总耐药47例(20.26％),其中单耐药15例(6.47％),多耐药7例(3.02％),耐多药25例(10.78％),复治组耐药率和耐多药率明显高于初治组(P＜0.05);耐药患者中耐单药顺位依次为H＞R＞S＞E,复治组REP耐药率明显高于初组(P＜0.05).结论 自贡市耐多药结核病防治工作形势依然严峻,耐多药结核病防治工作将是今后结核病防治工作的重点;既往治疗史是发生耐药结核病最重要的因素;制定合理个体化治疗方案,有助于合理用药、降低耐药率,使病例尽早康复.     

结核杆菌初始耐药对化疗效果的影响

目的 了解结核杆菌初始耐药对化疗的影响。方法将我院2001年1月-2005年12月4年间未用过抗结核药或用药未超过1月、有药物敏感性测定、门诊随访记录资料完整的肺结核患者分为耐药组(134例)及敏感组(162例),进行对比分析。结果痰菌阴转率前者为77.6%、后者为96.9%,2年细菌学复发率10.8%及3.5%。耐1药者痰菌阴转率89.1%;耐2药及3药者各为72.7%及54.5%。结论初始耐药,尤其耐多药是化疗失败的主要原因。     

宁波市不同年龄段结核分枝杆菌耐药性研究

目的分析不同年龄组结核分枝杆菌耐药情况,探讨当前结核病耐药性发展趋势。方法根据年龄将1 118例肺结核患者分为青年组(18~39岁),中年组(40~59岁)和老年组(≥60岁);采用WHO/IUATLD规定的1%比例法进行异烟肼(H)、利福平(R)、链霉素(S)、乙胺丁醇(E)4种抗结核药物的耐药性测定。结果青年组、中年组、老年组初始耐药率分别为30.6%、32.2%、23.3%,获得性耐药率分别为72.2%、63.3%、36.1%,各组间差异均无显著性(P>0.05)。青年组与老年组初始耐药频度从高到低依次为S、H、R、E,中年组为H、S、R、E。中年组耐R最高为9.4%。中、老年组获得性耐药顺序均为H、R、S、E,青年组为H、S、R、E。青年组耐R最高为44.3%。初始及获得性耐多药率均以中年组最高,分别为6.5%和38.3%。结论不同年龄组初始及获得性耐药均有所不同,须加强不同年龄组耐药率的监测,完善现行的结核病防治策略。     

656株结核分支杆菌耐药状况分析

目的了解天津市结核病患者的耐药状况,为耐药结核病防治提供参考依据。方法选用2008年1月至2009年6月在天津市结防机构就诊的结核分枝杆菌分离培养阳性肺结核患者。采用“世界卫生组织国际防痨与肺部疾病联合会”推荐的比例法,对研究对象初次分离培养获得的菌株进行利福平（rifampiein,RFP）、异烟肼（isoniazid,INH）、链霉素（streptomycin,SM）和乙胺丁醇（ethambuol,EMB）的药物敏感实验。运用横断面调查的方法描述耐药结核病的流行情况。结果共纳入肺结核患者656例,总耐药率为26．98％,复治患者耐药率明显高于初治患者耐药率（x2=13．54,P=-0．000）;耐药顺位为链霉素〉异烟肼〉利福平〉乙胺丁醇;初、复治患者均以单耐药为主;总耐多药率为6．25％,复治患者耐多药率明显高于初治患者（x2=47．09,P=0．000）。结论天津市结核病患者耐药流行情况尚不严重,以单耐药为主要耐药形式,复治患者为主要耐药人群。今后应特别加强对初治病人的治疗管理,严格执行结核病控制策略,减少复治病例,加强耐药结核病监测,有效预防和控制耐药结核病的产生和蔓延。     

Acquired Drug Resistance in Mycobacterium tuberculosis and Poor Outcomes among Patients with Multidrug-Resistant Tuberculosis

Rates and risk factors for acquired drug resistance and association with outcomes among patients with multidrug-resistant tuberculosis (MDR TB) are not well defined. In an MDR TB cohort from the country of Georgia, drug susceptibility testing for second-line drugs (SLDs) was performed at baseline and every third month. Acquired resistance was defined as any SLD whose status changed from susceptible at baseline to resistant at follow-up. Among 141 patients, acquired resistance in Mycobacterium tuberculosis was observed in 19 (14%); prevalence was 9.1% for ofloxacin and 9.8% for capreomycin or kanamycin. Baseline cavitary disease and resistance to >6 drugs were associated with acquired resistance. Patients with M. tuberculosis that had acquired resistance were at significantly increased risk for poor treatment outcome compared with patients without these isolates (89% vs. 36%; p<0.01). Acquired resistance occurs commonly among patients with MDR TB and impedes successful treatment outcomes.     

苍南县92株结核杆菌耐药情况分析

为了解苍南县结核杆菌耐药情况,我们于2001～2003年开展了全县范围的初、复治涂阳患者结核杆菌耐药情况的调查.