α-synuclein与帕金森病

α synuclein是路易小体的主要成分 ,可能通过破坏多巴胺存储与释放、增加氧化应激等机制 ,在多巴胺神经元变性中起作用。     

α-synuclein基因多态性与帕金森病

帕金森病（Parkinson disease，PD）是继阿尔茨海默病之后的最常见的与年龄相关的神经变性病，65岁以上人群约1％～2％患病。临床上以静止性震颤、肌强直、运动不能、姿势障碍为特征；病理上为黑质多巴胺能神经元选择性进行性缺失及胞质内包涵体路易小体形成为特征性改变，其他病理改变还包括蓝斑、基底核、下丘脑、大脑皮质、迷走神经背核、中枢及周围自主神经核的病变。病因至今未明，但认为可能与氧化应激、线粒体功能紊乱、活性氧产生过度、环境毒素、遗传因素有关，但没有单一因素可以完全解释发病机制，多数人认为可能是环境和遗传因素共同作用的结果。     

帕金森病发病机制中α-synuclein的研究进展

帕金森病(PD)一种常见的神经系统变性疾病,在其路易氏体(LB)中发现有大量的α-synuclein及其片断。研究α-synuclein的生理特点、致病机制及其影响因素将会对PD发病机制的认识和治疗提供理论依据。     

α-synuclein在阿尔茨海默病脊髓内的表达

目的 观察阿尔茨海默病和正常老龄脊髓组织标本α-synuclein相关病理改变特点.方法 采集3例阿尔茨海默病(2例经典阿尔茨海默病、1例伴路易小体阿尔茨海默病)和7例老龄非痴呆性尸体的脊髓组织标本,常规HE染色和免疫组织化学染色观察α-synuclein在脊髓组织中的表达情况.结果 在伴路易小体阿尔茨海默病患者的延髓迷走神经背核、中脑红核以及脊髓组织中同时发现α-synuclein相关病理改变,胸髓侧角中间外侧柱和骶髓灰质腹侧前外侧部组织中可见少至中量Lewy小体和散在分布的Lewy轴索样结构.结论 伴路易小体阿尔茨海默病患者脊髓内有α-synuclein表达阳性的Lewy小体或Lewy轴索样结构存在,且与脑组织α-synuclein相关病理改变存在明显相关性.     

α-synuclein基因突变在英国散发性帕金森病病人中的作用

特发性帕金森病是一种常见的神经系统变性病,具有特征性的神经病理改变,终身发病率达2％。与残存神经元中的Lewy体有关的神经变性改变集中在黑质、基底核、脑神经运动核、下丘脑、大脑皮层和自主神经系统。导致这一神经变性的发病机制尚不明了,但越来越多的证据表明遗传易感性起着一定作用。     

α-synuclein和帕金森病的关系研究进展

近年来,大量研究显示SNCA基因突变等多方面的原因可导致α-synuclein异常聚集,而其和家族型和散发型帕金森病有密切关系,但是具体机制还不清楚.病理性的α-synuclein是路易小体和路易轴突的主要成分,而后两者在脑内的沉积是帕金森病的标志.帕金森病相关基因突变引起α-synuclein的聚集,其低聚物和聚集物可能干扰正常细胞功能和促进多巴胺神经元变性.本文综述了近年来关于病理性α-synuclein参与帕金森病病理生理过程及相应干预措施的研究进展以及针对α-synuclein的治疗.     

过表达野生型和突变型α-synuclein的细胞毒性实验研究

αsynuclein是一个广泛分布于中枢神经系统突触前末梢的小分子蛋白,近年来发现αsynuclein基因突变G2 0 9A或G88C可引起家族性帕金森病(PD) ,但αsynuclein在神经元变性过程中的作用目前尚不清楚。本试验构建了野生型和突变型αsynuclein真核表达质粒pEGFP N1/αsynuclein(wt/mut) ,并在PC12细胞中瞬时表达,观察野生型和突变型αsynuclein在细胞内的分布情况,了解αsynuclein(wt/mut)对PC12细胞形态和活性的影响。材料和方法:使用Trizol试剂盒从胎脑组织中提取总RNA ,逆转录聚合酶链式反应(RT PCR)获取αsynucleincDNA ,通过重叠…     

帕金森病患者皮肤神经磷酸化α-突触核蛋白研究

目的探讨帕金森病患者磷酸化α-突触核蛋白(phosphorylated α synuclein,p-α-syn)在皮肤神经中的沉积特点,以及其作为帕金森病外周生物标志物的可能性。方法纳入2017年6月1日至2018年8月31日就诊于郑州大学第一附属医院神经内科的15例帕金森病患者及同期年龄匹配的健康志愿者31名,进行13项小纤维神经病和症状问卷(SFN-SIQ)评分。将帕金森病患者按照主要临床表现分为运动迟缓(n=7)和静止性震颤(n=8)2个亚组,并以Hoehn-Yahr分级评价病情的严重程度,其中0~2.5级为早期组(n=11),3.0~5.0级为中晚期(n=4)。采用环形钻孔器取帕金森病患者小腿和颈部皮肤,健康对照组只取小腿部位皮肤,进行免疫组织化学和免疫荧光染色,观察p-α-syn在皮肤神经中的沉积情况并计数穿过单位长度基底膜的神经纤维数量即表皮内神经纤维密度(intraepidermal nerve fiber density,IENFD)。结果12/15的帕金森病患者表皮下神经丛、真皮神经束、汗腺、立毛肌、血管或毛囊周围神经中可见点状或线状p-α-syn沉积,健康对照组皮肤中未见沉积。p-α-syn在单个部位沉积的阳性率分别为小腿6/15、颈部7/15,总阳性率为12/15。帕金森病组的IENFD为(6.85±1.94)根/mm,较对照组[(10.45±3.70)根/mm]明显下降(t=-3.303,P=0.002),与SFN-SIQ评分呈负相关(r=-0.561,P=0.046)。疾病早期与中晚期患者之间,以及以震颤和以运动迟缓为主要表现的患者之间比较,p-α-syn沉积阳性率和IENFD差异均无统计学意义。结论p-α-syn在帕金森病患者皮肤神经纤维中沉积,伴随IENFD明显下降。提示皮肤神经中p-α-syn沉积可能是帕金森病固有的外周病理改变,有作为帕金森病患者诊断外周生物标志物的可行性。     

帕金森病动物模型的研制

对各种帕金森病（PD）动物模型的制备原理，方法做一简要介绍，并就各种模型的特点给予评价。重点述及性能稳定，目前常用的6-羟基多巴胺（6-OHDA）偏则大鼠PD模型和1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）制备的猴模型和小鼠模型。     

建立帕金森病动物模型的研究进展

帕金森病(Parkinson’s disease PD)是老年人常见的中枢神经系统退行性疾病，其主要的临床表现为静止性震颤、肌强直和运动迟缓．患者的生活质量急剧下降。目前，在60岁以上人群中其发病率达1%。随着老龄化社会的到来．其发病率呈上升趋势。因此．对PD的研究越来越受到关注．无论研究其发病机制，还是探索新的治疗方法都离不开PD动物模型。本文综述不同动物PD模型的制备和评价方法，应用范围和研究新的进展。     

α-synuclein蛋白及LRRK2在帕金森患者血清中的表达及临床研究

目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein)、富亮氨酸重复激酶2(leucine-rich repetitive kinase2,LRRK2)在帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者血清中的表达及临床价值研究。方法选取2016年1月-2018年12月皖南医学院弋矶山医院收治的PD患者90例,根据是否腔隙梗死将患者分为腔梗患者25例,无腔梗患者65例;根据空腹外周血高同型半胱氨酸(hyperhomocysteine,Hhcy)将患者分为:Hhcy血症患者29例,正常Hcy患者61例;按Hoehn-Yahr(H-Y)分级修正量表将患者分为:PD1-2级36例、PD2.5-3级34例、PD4-5级20例。另外选取同期在本院进行健康体检的健康老人90例。对比两组研究对象的一般资料、LRRK2、α-synuclein表达水平,并对PD患者各个亚组进行比较,分析LRRK2、α-synuclein表达水平和PD患者严重程度的关系,采用Pearson分析LRRK2、α-synuclein之间的相关性。结果健康对照组、PD两组研究对象性别、年龄、体质量比较,差异无统计学意义(P0.05);PD组的LRRK2、α-synuclein表达水平均高于健康对照组,与无合并高血压患者相比,合并高血压患者LRRK2、α-synuclein水平较高(P0.05)。与无腔隙梗死患者相比,合并腔隙梗死患者LRRK2、α-synuclein水平较高,差异有统计学意义(P0.05)。与无Hhcy血症患者相比,Hhcy血症患者LRRK2、α-synuclein水平较高(P0.05)。与1~2级相比,2.5~3 级、4-5 级 LRRK2、α-synuclein 表达水平升高(P 0.05);与 2.5-3 级相比,4-5 级 LRRK2、α-synuclein表达水平升高(P 0.05)。LRRK2、α-synuclein 之间均呈正相关(r=0.246,P=0.019)。结论 LRRK2、α-synuclein在PD患者血清高表达,且与患者严重程度有关,为临床PD的诊断提供参考。     

RNA干扰技术阻断α-synuclein过表达诱导的细胞凋亡

BACKGROUND： Overexpression of α-synuclein can induce cell apoptosis. RNA interference （RNAi） may block specific gene function and cause gene silencing. OBJECTIVE： To construct a specific and effective RNAi plasmid for the α-synuclein gene and investigate if RNAi can block apoptosis in HEK293 cells, induced by overexpression of wild-type α-synuclein.
DESIGN, TIME AND SETTING： A contrast experiment based on genetically engineered cytobiology was performed at the State Key Lab of Medical Genetics of China, Xiangya Medical College of Central South University, between October 2004 and October 2008.
MATERIALS： HEK293 cells and pBSHH1 plasmid were provided by the State Key Lab of Medical Genetics of China; OligDNA sequence by Sagon Bioengineering Company, Shanghai; Lipofectamine 2000 by Invitrogen, USA; α-synuclein monoclonal antibody, Hoechst 33258, and MTT by Sigma, USA; Horseradish peroxidase-coupled goat anti-rat IgG by KPL, USA; FACSan flow cytometry by BD, USA.
METHODS： Four target sites were used to construct hairpin RNA pBSHH1 vectors - pSYNi-1, pSYNi-2, pSYNi-3 and pSYNi-4 - which were cloned in the pBSHH1 plasmid. HEK293 cells were transfected using Lipofectamine 2000. In addition, a non-transfect group and a negative plasmid transfect group were established. The cultured HEK293 cells were processed as follows： transfection of blank plasmid （blank control group）, transfection of α-synuclein-pEGFP and RNAi negative vector （negative control group）, and transfection of α-synuclein-pEGFP and pSYNi-1 （transfection group）. Cells in all groups were transfected with Lipofectamine 2000 for 48 hours.
MAIN OUTCOME MEASURES： Expression of α-synuclein mRNA and protein were detected by RT-PCR and Western blot. Cell morphology was observed under an inverted fluorescence microscope; cell viability was measured using MTT method; and cell apoptosis was determined with Annexin V-PE flow cytometry.
RESULTS： α-synuclein mRNA and protein expressions were significantly decreased in the pSYNi-1 group when compared with the non-transfect and negative plasmid transfect groups （P 〈 0.05）. The expressions were partially decreased in the pSYNi-2 group, but there was no significant difference in the pSYNi-3 and pSYNi-4 groups. Hoechst staining indicated that cell nuclei were enlarged in the negative control group, coloring was not uniform, and chromatin was accumulated and appeared spot-like. The nucleus coloring was uniform in the transfection group compared to negative control group. Cell viability in the negative control group was significantly lower than blank control group with cell apoptosis being significantly increased （P 〈 0.05）. In comparison with negative control group, cell viability was significantly increased in the transfection group and cell apoptosis was significantly decreased （P 〈 0.05）.
CONCLUSION： pSYNi-1 can inhibit α-synuclein gene expression and block apoptosis of HEK293 cells induced by overexpression of wild-type α-synuclein.     

帕金森病MPTP慢性动物模型的研究进展

帕金森病(Parkinson s disease,PD)是一种常见的神经系统退行性疾病,其病因是黑质致密部多巴胺神经元的大量丢失,临床表现为静止性震颤、肌张力增高、远动障碍、姿势异常等。过去人们对帕金森病的病因学研究有着浓厚的兴趣,但是并没有找出导致该病的直接因素,然而大部分暴露于1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)的农民以及被吸毒者误用后均出现了帕金森症状[1],这使得人们对MPTP产生了重视。帕金森病的主要病理改变是黑质致密部多巴胺神经元进行性的缺失,多巴胺明显减少,残存神经元内出现Lewy小体。Lewy小体为残存神经元内的一种嗜…     

α-突触核蛋白过表达转基因帕金森病动物模型研究进展

帕金森病是最常见的神经变性疾病之一。帕金森病动物模型是解释疾病病因学根本机制,开发新的神经保护药物和治疗策略研究的必不可少的工具。该文综述了目前常用的几类帕金森病α-突触核蛋白过表达转基因动物模型及其优缺点。转基因动物模型是目前最为重要的帕金森病动物模型;较全面地反映帕金森病病因及发病机理、病理特点,将是帕金森病动物模型研究新时代的开始,也是今后研究探讨的方向。     

帕金森病患者不同脑区的代谢变化及其意义

目的：应用磁共振波谱（1H-MRS）测定帕金森病（PD）患者不同脑区代谢产物的变化,探讨其与PD运动症状的关系,在活体上验证Braak病理分级。方法：临床确诊的PD患者为PD组;与PD组年龄、性别、文化程度相匹配的为正常对照组,两组各10例,应用Hoehn-Yahr分级及UPDRS评价PD运动功能,1H-MRS测定延髓、受累较重侧中脑、壳核及皮质运动区感兴趣区的代谢产物含量,分析代谢产物含量与PD运动评分的关系。结果：PD组中脑及壳核NAA/Cr比值明显低于正常对照组（P〈0.05）;中脑Cho/Cr比值明显高于正常对照组（P〈0.05）。其余部位的NAA/Cr和Cho/Cr比值,PD组与正常对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。NAA/Cr和Cho/Cr比值与PD患者Hoehn-Yahr分级、UPDRS总分、UPDRS运动评分、症状严重侧肢体运动评分均无相关性（P〉0.05）;PD组延髓、中脑、壳核及皮质运动区之间NAA/Cr相对值、Cho/Cr相对值均差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：1H-MRS测定的PD脑代谢产物含量与PD病情无关,不能反映Braak病理分级。     

离体帕金森病动物模型制作的研究

目的 :研究用 6 -羟多巴胺 (6 - OHDA)对中脑黑质多巴胺能神经元的选择性神经毒性作用建立离体帕金森病实验模型的方法。方法 :用 6 - OHDA(浓度分别为 0 .0 1m M、 0 .0 5 m M、 0 .1m M)孵育大鼠离体脑片 1小时 ,用抗酪氨酸羟化酶免疫组织化学方法观测黑质阳性细胞体及突起的变化。结果 :随着 6 - OHDA浓度的增加 ,离体脑片黑质 TH阳性细胞突起及纤维数逐渐减少。结论 :6 - OHDA孵育大鼠离体脑片可复制成帕金森病离体模型。     

MPTP的毒性机制与帕金森病动物模型

摘要:1-甲基-4-苯基-1、2、3、6-四氢吡啶(MPTP)具有特异性的神经毒性,其经单胺氧化酶B催化代谢为MPP~+,通过抑制线粒体氧化呼吸链、产生反应氧族和一氧化氮等导致黑质多巴胺能神经元坏死、凋亡,在多种动物中产生类似于帕金森病的症状和病理改变,是目前最常用的帕金森病动物模型。     

Fe3+与PC12细胞α-synuclein蛋白聚集关系的研究

近年研究表明，α-synuclein蛋白的聚集可能在帕金森病(Parkinson disease，PD)的发病中起到重要作用，因此，了解该蛋白发生聚集的原因对进一步明确PD的发病机制有重要意义。体外实验发现，氧化应激可以使重组的野生型α-synuclein蛋白发生聚集；众所周知，PD患者中脑部位铁水平增高，铁能够介导氧化还原反应造成氧化应激状态，因此，我     

七氟烷对新生大鼠海马caspase-3和磷酸化ERK表达的影响

目的评价磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)在七氟烷致新生大鼠海马神经细胞凋亡中的作用。方法出生7 d的健康清洁级雄性SD大鼠36只,体质量11～18 g,采用随机数字表法分为对照组(C组,n=18)和七氟烷麻醉组(S组,n=18)。C组每天同一时间吸入2 h的30%氧气;S组吸入2 h的3.4%七氟烷。2 d后处死大鼠采用Western blotting法检测活化caspase-3和p-ERK的表达。结果与C组比较,S组活化caspase-3的表达上调,p-ERK的表达下调(P0.05)。结论七氟烷通过下调p-ERK的表达促进新生大鼠海马神经细胞凋亡。