MALDI-TOF-MS技术筛查原发性小肝细胞癌血清特异蛋白

目的应用基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对原发性小肝细胞癌(小肝癌)患者与正常人血清蛋白质谱进行分析,得到高敏感性和特异性的血清蛋白,且能将小肝癌与正常人较准确的分开,建立诊断模型指纹图谱。方法采用德国Bruker公司的基质辅助激光解析电离质谱仪(MALDI-TOF-MS)分别检测35例原发性小肝癌患者与50名正常人血清蛋白质相对含量,运用FlexAnalysis和BioTools软件对两组血清蛋白质谱进行分析,寻找差异蛋白,再通过分析软件对其进行交叉验证,得到具有诊断意义的特异性蛋白标志物。结果检测到蛋白质质荷比(M/Z)在0～100000 Da范围内,小肝癌组与正常人组有差异的蛋白质峰为55个(P<0.05),交叉验证结果显示以M/Z值为7771.17 Da的蛋白质,具有较高敏感性和特异性,可将正常人及小肝癌患者准确分开,且M/Z值为7771.17 Da蛋白质在小肝癌组中低表达,在正常人组中高表达。再以M/Z值为7771.17Da的蛋白质作为生物标记,随机抽取小肝癌与正常人血清标本进行双盲验证,结果表明M/Z值为7771.17Da蛋白质作为生物标记物可以将小肝癌与正常人准确地分组,其敏感性为91.0%,特异性为70.0%。结论 MALDI-TOF-MS技术对小肝癌患者组、正常人组血清蛋白质谱进行分析,可得到原发性小肝癌早期诊断特异性、敏感性较高的血清特异性蛋白。     

应用SELDI-TOF-MS技术分析肝癌患者血清蛋白质谱的手术前后变化

目的研究肝癌患者血清蛋白质谱的变化,从而筛选特异性生物标志物,建立肝癌诊断模型。方法选用IMAC30蛋白质芯片和SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术,对47例原发性肝癌患者手术前后和81名正常人的血清蛋白质谱进行分析。获得的蛋白质谱采用Ciphergen公司的Biomarker wizard和Biomarker Patterns软件分析,建立区分肝癌患者与正常人血清蛋白质谱诊断模型。结果通过对肝癌患者术前血清与正常人血清蛋白质谱分析,发现共有28个蛋白质表达量差异显著(P<0.05)。并获得分子量为9492.93Da的蛋白质组成的模板,可将肝癌与正常人正确分组,其敏感性为97.9%(46/47),特异性为97.5%(79/81)。术后血清蛋白质谱中,原高表达的蛋白质明显下调。结论血清中可以筛选到诊断肝癌的特异性生物标志物并可用于预后的判断。SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术为建立蛋白质模板用以早期诊断肝癌提供了可靠的技术平台。     

创伤性颅脑损伤患者血清LGT蛋白质组动态变化及临床意义探讨

目的探讨创伤性颅脑损伤(TBI)患者血清LGT蛋白质组的动态变化规律,初步分析其在TBI患者病情判断及预后评估中的临床意义。方法将我院收治的69例TBI患者和30名门诊体检者血清用蛋白质指纹仪及WCX2蛋白质芯片检测血清LGT蛋白质组,共检测212人次。在指纹图上,质荷比(M/Z)为相对分子质量11100～11900之间出现一峰簇样指纹标志且蛋白峰值>5%为阳性诊断标准,依据LGT蛋白质组动态变化共分为4组,观察4组中的病死率。计量资料采用SNK-q检验和Wilcoxon秩和检验,计数资料采用χ2检验,相关性分析采用Spearman相关分析。结果入院初LGT蛋白质组丰度在重度颅脑损伤组[(13.5±9.3)%]和轻中度颅脑损伤组[(5.2±4.9)%]明显高于健康对照组[(1.6±0.5)%,P均<0.01];重度颅脑损伤组LGT蛋白质组丰度明显高于轻中度颅脑损伤组(P<0.01),而健康对照组血清中无表达。LGT蛋白质组丰度与预后呈负相关(r=-0.415,P<0.01),死亡组LGT蛋白质组丰度[(15.2±12.2)%]明显高于存活组[(8.5±6.4)%,P<0.01]。LGT蛋白质组持续阳性组病死率70%,持续阴性组病死率为5%,LGT蛋白质组经治疗由阳性转成阴性组病死率为8%,LGT蛋白质组经治疗由阴性转成阳性组病死率为43%。结论 LGT蛋白质组为TBI患者病理状态下合成的一组蛋白质,与病情严重程度及预后密切相关,对TBI患者病情判断及预后评估可能有重要的临床指导意义。     

质谱技术分析联合用药抗大鼠肝纤维化的作用

目的:应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption/ionizationtime of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术分析联合用药抗大鼠肝纤维化的肝组织中蛋白质的表达差异。方法:采用CCl4造成大鼠肝纤维化模型,试验分为正常对照组、模型组和联合用药治疗组。在试验的第10周末取大鼠肝组织,提取肝组织总蛋白质,应用SELDI-TOF-MS检测肝组织差异表达的蛋白。结果:SELDI-TOF-MS共检测到176个蛋白峰,其中表达差异2倍以上的蛋白有12个,包括在模型组中表达有降低趋势的10个蛋白质和升高趋势的2个蛋白质;经过联合用药治疗后,这些蛋白表达恢复到正常水平。对这12个差异表达蛋白进行蛋白质组数据库的检索,获得4个蛋白质,涉及负调控细胞生长、抑制细胞增殖和参与细胞信号转导。结论:联合用药能够通过调节大鼠肝脏组织蛋白质的表达,改善和修复肝脏功能。     

芪归糖痛宁颗粒的UPLC指纹图谱研究

目的:建立芪归糖痛宁颗粒的UPLC指纹图谱。方法:色谱柱为Acquity BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液(梯度洗脱),柱温为26Ⅰ,流速为0.25 ml/min,检测波长为254 nm。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004A版)对10批样品的相似度进行评价。结果:芪归糖痛宁颗粒的UPLC指纹图谱共有13个共有峰,方法测定的重复性、精密度和稳定性良好;10批样品的相似度均>0.99。结论:所建指纹图谱可用于芪归糖痛宁颗粒的质量控制。     

综合医院创建无痛病房对癌痛患者生存质量改善的临床研究

目的探讨综合医院创建无痛病房对癌痛患者生存质量改善的影响。方法选择2011年8月~2013年8月因癌痛到我院就诊的患者600例,按照随机数字表法分为对照组300例和实验组300例。对照组行传统护理干预,实验组创建"无痛病房",行规范化癌痛干预,对比两组癌痛缓解情况和生存质量。结果实验组在癌痛部分缓解率、完全缓解率分别为41.7%、49.6%,明显高于对照组的21.0%、18.0%(x2=29.777,P0.01;x2=67.191,P0.01)。干预后,实验组、对照组QOL评分均高于干预前(t=40.151,P0.01;t=65.514,P0.01);干预后,实验组QOL评分显著高于对照组(t=30.199,P0.01)。结论在癌痛患者中,创建无痛病房,实施规范化癌痛干预可以有效地缓解癌痛,提高生存质量。     

肝硬化患者血清蛋白组学研究

目的比较肝硬化组与健康对照组以及肝硬化A、B、C级之间的血清蛋白组学,寻找用于肝硬化早期诊断、疗效预测的特异性蛋白标志物。方法应用美国CipherGen公司表面增强激光解析电离飞行时间质谱仪和蛋白芯片获得肝硬化患者及健康人血清中的蛋白质指纹图谱,用Biomarker Wizard软件进行分析,筛选出差异表达的蛋白峰。结果肝硬化组与健康对照组共有16种蛋白质差异有统计学意义,A级与B级、C级之间的差异蛋白分别为1、9种,B级与C级之间无差异蛋白表达。结论表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)在肝硬化的诊断及病情判断等方面具有一定价值。     

应用Clin Prot 系统分析结肠腺癌患者血清蛋白表达谱

目的 寻找可能与结肠腺癌相关的血清候选蛋白,为结肠腺癌的综合防治提供重要的理论基础和手段.方法 收集36 例结肠腺癌患者和22 例正常对照组血清,经Clinprot 磁珠纯化,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-FOF-MS） 分析建立相应的蛋白质指纹图谱,应用Clinpro Tools 生物信息学方法研究其血清蛋白表达谱.对不同质荷比（M/Z） 的差异蛋白通过在数据库中的分析比对,筛选出可能与结肠腺癌发病相关的血清候选蛋白.结果 结肠腺癌和正常对照组血清样本蛋白丰度平均变异系数为0.229,与对照组比较,结肠腺癌组有15 种蛋白上调,7 种蛋白下调.选取差异最为明显的两个蛋白：M2369.93Da 和M6051.12,建立结肠腺癌组和正常对照组差异表达蛋白平均谱图,采用GA 模型算法,选取差异蛋白,结肠腺癌阳性和阴性识别率为79.7%,准确性结肠癌阳性组为96.1%,结肠癌阴性组为85.5%,预测能力为72.8%.结论 通过液体蛋白芯片飞行时间质谱系统作为分析工具,发现15种蛋白上调,7 种蛋白下调,这些蛋白可能为潜在的结肠腺癌肿瘤标志物.     

甲状腺乳头状癌中ret癌基因的表达

目的观察研究人类甲状腺乳头状癌中ret癌基因的表达及其意义。方法选取本院2010年3月至2016年6月近6年肿瘤科收治的43例甲状腺乳头状癌确诊患者(乳头状癌组)及其癌旁正常组织(对照组),选取同期30例甲状腺滤泡型癌(滤泡型癌组),29例甲状腺腺瘤(腺瘤组)术后病理标本(甲状腺组织)。通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测两组4组入选者中ret癌基因的活化情况。结果入选甲状腺乳头状癌的43例患者中共出现14例(32.56%)ret/ptc癌基因呈阳性表达。滤泡型癌组、腺瘤组与对照组经检测ret/ptc癌基因均呈阴性表达。ret/ptc癌基因呈阳性表达的患者平均年龄显著小于ret/ptc癌基因呈阴性表达的患者(P<0.05)。结论甲状腺乳头状癌与ret癌基因的活化表达有着重要联系,ret癌基因的活化可能与该病的发生发展有关。且ret/ptc癌基因呈阳性平均年龄较小,其肿瘤呈现的体积较小发展程度较轻,其肿瘤组织细胞分裂繁殖能力较弱,经治疗患者远期预后能力较强,ret癌基因的活化表达可成为判定患者甲状腺乳头状癌的生物学行为指标。     

LGT蛋白质组在创伤性颅脑损伤患者血清中的表达及对病情评估的意义

目的探讨LGT蛋白质组在创伤性颅脑损伤(TBI)患者血清中的表达,初步分析其对病情判断的临床意义,并分析多种临床因素对LGT蛋白质组表达的影响。方法采用表面加强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI)技术检测105例TBI患者和20名健康对照者血清LGT蛋白质组的表达,比较LGT蛋白质组在不同程度颅脑损伤组和对照组之间的表达差异,并分析手术、濒死等因素对LGT蛋白质组表达的影响。结果在TBI患者血清中存在LGT蛋白质组的表达。在不同损伤程度患者中,重型TBI组和轻中度TBI组LGT蛋白质组丰度明显高于健康对照组(P<0.01);重型TBI组LGT蛋白质组丰度明显高于轻中度TBI组(P<0.01),重型TBI组LGT蛋白质组阳性率明显高于轻中度TBI组(χ2=9.825,P=0.002)。手术后LGT蛋白质组丰度较术前降低,差异有统计学意义(P<0.05)。濒死患者血清蛋白指纹谱明显低平,波峰减少显著,无LGT蛋白质组的表达。结论 TBI患者血清中存在LGT蛋白质组表达谱。LGT蛋白质组丰度的变化反映了颅脑损伤的严重程度,LGT蛋白质组的表达和手术、濒死等因素密切相关,对患者病情判断有重要意义。     

飞行质谱技术筛选有家族史食管癌患者的血清标志蛋白

目的探讨有家族史食管癌患者血清蛋白的表达差异及其与食管癌遗传易患性之间的关系。方法应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术结合铜离子蛋白芯片获得20例有家族史和26例无家族史食管癌患者的血清蛋白质谱。将获得的蛋白质谱采用Ciphergen公司的Biomarker Wizard和Biomarker Pattern软件分析。结果共找到10个表达差异蛋白,且此10个蛋白的含量在家族史阳性组均显著上调。其中,以质荷比为5344.77和7571.19建立的分类树模型能有效区别家族史阳性者和阴性者。在学习模式下分组正确率达到100%,在测试模式下分组正确率分别为100%(20/20)和96.2%(25/26)。结论质荷比为5344.77和7571.19的两个蛋白可能是影响食管癌遗传易患性的重要血清相关蛋白。     

Identification of serum biomarkers for lung cancer using magnetic bead-based SELDI-TOF-MS

Aim:

To identify novel serum biomarkers for lung cancer diagnosis using magnetic bead-based surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrum (SELDI-TOF-MS).

Methods:

The protein fractions of 121 serum specimens from 30 lung cancer patients, 30 pulmonary tuberculosis patients and 33 healthy controls were enriched using WCX magnetic beads and subjected to SELDI-TOF-MS. The spectra were analyzed using Bio-marker Wizard version 3.1.0 and Biomarker Patterns Software version 5.0. A diagnostic model was constructed with the marker proteins using a linear discrimination analysis method. The validity of this model was tested in a blind test set consisted of 8 randomly selected lung cancer patients, 10 pulmonary tuberculosis patients and 10 healthy volunteers.

Results:

Seventeen m/z peaks were identified, which were significantly different between the lung cancer group and the control (tuberculosis and healthy control) groups. Among these peaks, the 6445, 9725, 11705, and 15126 m/z peaks were selected by the Biomarker Pattern Software to construct a diagnostic model for lung cancer. This four-peak model established in the training set could discriminate lung cancer patients from non-cancer patients with a sensitivity of 93.3% (28/30) and a specificity of 90.5% (57/63). The diagnostic model showed a high sensitivity (75.0%) and a high specificity (95%) in the blind test validation. Database searching and literature mining indicated that the featured 4 peaks represented chaperonin (M9725), hemoglobin subunit beta (M15335), serum amyloid A ({"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"M11548","term_id":"340238","term_text":"M11548"}}M11548), and an unknown protein.

Conclusion:

A lung cancer diagnostic model based on bead-based SELDI-TOF-MS has been established for the early diagnosis or differential diagnosis of lung cancers.     

癌痛规范化示范病房中癌痛治疗药物的用药分析

目的了解某三甲医院肿瘤科癌痛治疗药物的使用情况,以提高癌痛治疗药物合理使用的水平。方法采用回顾分析法,统计分析某医院肿瘤科住院患者2014~2018年癌痛治疗药物的金额,DDDs、构成比及癌痛病例抽查点评。结果癌痛治疗药物中三阶梯强阿片类药物的销售总金额及DDDs都位居首位;2015年"癌痛规范化治疗病房"评审活动以来,强阿片药物金额构成比占90%以上,DDDs构成比占74%以上;剂型以无创途径给药为主,DDDs构成比在95%以上,注射剂型的DDDs构成比低于5%;三阶梯强阿片类用药中,速效吗啡DDDs构成比低于4%,2015年以后芬太尼透皮贴剂DDDs构成比在60%~80%之间,羟考酮缓释片DDDs构成比在17%~35%之间,吗啡缓释片DDDs构成比小于2%;通过评审活动,该肿瘤病区癌痛治疗用药不合理情况明显减少。结论该肿瘤病区癌痛治疗用药符合WHO三阶梯止痛原则。     

SELDI—TOF—MS技术在消化系统肿瘤诊断中的应用

表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（surface enhanced laser desorption／ionization—time of flight-mass spectrometry，SELDI—TOF—MS）技术是随着蛋白质组学的兴起而出现的新技术，是一种基于蛋白质芯片和质谱技术的多种疾病标志物的分析平台。SELDI-TOF—MS技术是一种操作简单、方便快捷、样本用量少、敏感性高、特异性强的高通量的研究蛋白组学的方法。为此，本文就SELDI—TOF—MS技术的原理、特点及其在消化道肿瘤诊断中的应用作以下综述。     

氨酚羟考酮不同给药模式治疗中、重度癌性疼痛及其爆发痛的 临床疗效观察

[摘要]目的：观察氨酚羟考酮在不同给药模式下,对控制中、重度癌性疼痛及其爆发痛的疗效进行临床观察,以期确定氨酚羟考酮作为第二阶梯药物在中、重度癌性疼痛的应用范围和给药方法。方法：选择不同部位肿瘤患者198人,并经过第一阶梯治疗疗效不满意（应用非甾体类服镇痛药后VAS≥5）。随机将患者分为3组：单纯氨酚羟考酮模式组（组I,n=78）;氨酚羟考酮背景药量+必要时给药模式组（组II,n=61）;羟考酮缓释剂型背景药量+氨酚羟考酮必要时给药模式组（组III,n=59）。观察指标：药物观察时间为12周。① 用药前后VAS评分;② 爆发痛次数及程度控制VAS评分;③ 药物副作用;④ 疼痛控制满意率（生活质量评分）;⑤ 根据药物疗效,各组晋级入组人数比例比较。结果：① 2周内：组I,组II,组III内用药前后VAS评分比较均有明显下降,具有统计学意义。第3周：组I用药后VAS评分值上升,与治疗前比较无显著性统计学意义;而组II和组III内用药后与治疗前仍显示良好的控制水平（P＜0.05）,且后两组组间治疗后VAS评分值比较无统计学差异;此时组I与组II、组III治疗后VAS评分值比较出现显著性统计学差异。② 3周内组II和组III爆发痛次数及程度控制VAS评分均明显低于组I（P＜005）,组II和组III两组间比较无统计学意义。此结果持续至治疗后第10周（11~12周由于氨酚羟考酮药物极量问题,故转入组III）。③ 所有治疗组在治疗观察期间恶心、呕吐、头晕、便秘、尿潴留、皮肤瘙痒各组内治疗前后和治疗后组间比较无统计学意义。④ 2周内：组I,组II,组III内用药前后比较生活质量均有明显提高,具有统计学意义。第3周组I用药后与治疗前比较无统计学显著差异,但第3周至第10周组II和组III内用药后患者生活质量维持改善状态（P＜0.05）。⑤ 转组比例显示：第3周至第10周组I内67/78（86%）转入组II,转组后各观察指标明显改善,与组II原组病例比较无统计学差异;组II于第11周有21/61（35%）转入组III,调整后应用10mg羟考酮缓释剂型+氨酚羟考酮必要时给药,并达到原治疗后水平。第11周组III内有17/59（28%）调整后应用10mg羟考酮缓释剂型,并达到原治疗后水平。结论：① 氨酚羟考酮背景药量+必要时给药方式对中、重度癌性疼痛伴爆发性疼痛具有较好的镇痛控制作用;② 氨酚羟考酮必要时给药可以有效控制癌性爆发痛的疼痛程度。③ 临床应用具有较好的安全性和临床顺应性。     

The treatment of cancer pain

Pain is probably one of the most common cancer symptoms. In addition to being a major source of suffering and disability, cancer pain is extremely frightening for patients and their families. This review discusses the current options for treating cancer pain, focusing on the pharmacological agents currently available and briefly exploring some of the surgical options for pain management. The authors propose to adjust the World Health Organization (WHO) pain management ladder from its current three-step approach to a more sophisticated five-step algorithm that includes physical and psychological modalities along the entire continuum of care and adds two more steps related to neuromodulative and neurodestructive procedures once the opioids fail.     

Pharmacological management of cancer pain in the elderly

Existing studies indicate a high prevalence rate and poor management of cancer pain in the elderly. Pain is often considered an expected concomitant of aging, and older patients are considered more sensitive to opioids. Despite the well known pharmacokinetic changes in the elderly, the complex network of factors involved in the opioid response make the evaluation of a single element, such as age, more difficult.Notwithstanding such difficulties, appropriate analgesic treatment is able to control cancer pain in the elderly in most cases. Skills necessary to optimise pain control in older cancer patients include the ability to objectively assess functional age (not necessarily related to chronological age since the rate of decline is variable), understand the impact of coexisting conditions, carefully manage the numbers and types of drugs taken at the same time and adequately communicate with patients and relatives.The most common treatment of cancer pain consists of the use of regularly given oral analgesics. The elderly are at increased risk of developing toxicity from NSAIDs, and the overall safety of these drugs in frail elderly patients should be considered. When older patients have clear contraindications to NSAIDs, manifest signs of toxicity from these agents, or find that pain is no longer controlled with this class of drugs, opioids should be started. A variety of opioids are available, and they differ widely with respect to analgesic potency and adverse effects among the elderly.Although the aged population requires lower doses of opioids, only careful titration based on individual response can ensure the appropriate response to clinical demand. Elderly patients are potentially more likely to be affected by opioid toxicity because of the physiological changes associated with aging. Nevertheless, appropriate dosage and administration may limit these risks. Cancer patients with pain who do not respond to increasing doses of opioids because they develop adverse effects before achieving acceptable analgesia may be switched to alternative opioids. Despite the favourable effects reported with opioid switching, monitoring is crucial, particularly in the elderly or patients who are switched from high doses of opioids. Adjuvant analgesics, including antidepressants, antiepileptics, corticosteroids and bisphosphonates may help in the treatment of certain types of chronic pain.With an appropriate and careful approach, it should be possible to reduce or eliminate unrelieved cancer pain in most elderly patients and, consequently, to enhance their quality of life. Older patients with cancer should be continuously assessed for cancer pain, both before and after analgesic treatment.