方格星虫延缓衰老作用研究

目的：研究方格星虫提取物的延缓衰老作用。方法：SD大鼠口服给药30d后，采用硫代巴比妥酸显色法(TBA法)测定受试大鼠血清丙二醛(MDA)含量，采用羟胺法测定血清SOD活性。采用果蝇生存试验测定方格星虫提取物对0regon K野生型黑腹果蝇生存时间的影响。结果：方格星虫提取物经口给予SD大鼠不同剂量的方格星虫提取物30d后，大鼠血清MDA含量显著降低，血清SOD活性显著增强。方格星虫提取物显著延长雌雄果蝇的平均寿命，显著延长雄果蝇的最高寿命。结论：方格星虫提取物具有明显的延缓衰老作用。     

裸体方格星虫甲醇提取物的化学成分研究

目的 对裸体方格星虫(Sipunculus nudus Linnaeus)甲醇提取物的化学成分进行分离鉴定.方法采用溶剂萃取,硅胶柱色谱及半制备HPLC等分离手段对其甲醇提取物的化合物进行分离,通过理化性质及波谱学手段对所得化合物进行化学结构鉴定.结果与结论分离并鉴定了4个化舍物:胆甾醇(1)、硬脂酸(2)、环(丙氨酸-脯氨酸)(3)、脱氧胸苷(4).这4个化合物均为首次从裸体方格星虫中分离得到.     

方格星虫多糖对运动小鼠抗疲劳作用实验研究

目的探讨方格星虫多糖对小鼠的抗疲劳作用。方法将小鼠随机分组,采用小鼠负重游泳实验,以方格星虫多糖0.2,0.4,0.6g.kg-1灌胃给药,测定各组游泳时间,并对游泳后小鼠的血清尿素氮、乳酸脱氢酶、肝糖原、肌糖原、超氧化物歧化酶、丙二醛等指标进行检测。结果与对照组相比,星虫多糖各剂量组明显延长了小鼠的游泳时间。相应剂量给药小鼠血清尿素氮有明显减低,乳酸脱氢酶显著升高,肝糖原、肌糖原也呈上升趋势,低剂量用药能显著提高SOD活性和降低MDA含量。结论星虫多糖对小鼠有明显抗疲劳效果。     

方格星虫多糖对小鼠免疫功能的影响

目的研究方格星虫多糖(Sipunculus nudus polysaccharides,SNP)对小鼠免疫功能的调节作用。方法采用ConA诱导淋巴细胞转化试验和NK细胞活性测定试验测试方格星虫多糖对小鼠细胞免疫功能的影响;采用血清溶血素水平检测和抗体形成细胞数检测方法测试SNP对小鼠体液免疫的影响;采用碳廓清试验测试SNP对小鼠非特异性免疫的影响。结果 SNP能明显提高小鼠的细胞免疫和体液免疫功能,促进小鼠碳廓清速率和小鼠肝脏与脾脏对异物的吞噬功能。结论 SNP可提高小鼠的免疫功能。     

气相色谱法分析方格星虫多糖的单糖组成

目的:研究方格星虫多糖的单糖组成。方法:采用3 mol.L-1三氟乙酸将方格星虫多糖水解成单糖,然后与盐酸羟胺进行衍生化反应,采用气相色谱法对其单糖组成进行分析。结果:方格星虫多糖的单糖组成主要为阿拉伯糖和葡萄糖,其质量分数分别为7.91%和79.32%。结论:此法简单、快速,重现性好,可用于方格星虫多糖的单糖组成分析。     

不同产地裸体方格星虫脂肪酸类成分资源化学评价研究

目的 对裸体方格星虫样品中脂肪酸类成分进行比较研究。方法 采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对12个裸体方格星虫样品中的26种脂肪酸进行了含量测定,并进一步对各样品中的各成分的含量进行了主成分分析。结果 对裸体方格星虫样品的测定结果显示各样品26种脂肪酸类成分总含量范围为198.20?578.05 ?g/g,总含量最高的样品是海南三亚的裸体方格星虫体腔液样品（S12）;各产地样品中脂肪酸类成分总含量均呈现体腔液部位高于外壁 内脏部位。测定样品的26种脂肪酸中,不饱和脂肪酸总含量高于饱和脂肪酸总含量;多不饱和脂肪酸中,亚油酸和?-亚麻酸含量最高,分别占总含量的1.54%?5.65%和1.61%?4.94%;单不饱和脂肪酸中顺芥子酸含量最高,分别占各样品总含量的14.66%?46.41%;基于26种脂肪酸的含量测定结果对12个裸体方格星虫样品的PCA分析结果显示不同产地裸体方格星虫的外壁 内脏样品相互接近,体腔液样品差别较大。结论 裸体方格星虫中脂肪酸不仅种类多样、含量丰富,而且具有多种重要活性作用的不饱和脂肪酸比例合理。本研究中对脂肪酸类成分的研究结果将对进一步开发利用裸体方格星虫提供一定的理论基础。     

光裸方格星虫纤溶酶SNFE的抗凝作用及机制研究

目的:研究光裸方格星虫纤溶酶SNFE的抗凝作用及机制,为SNFE的进一步开发利用提供参考。方法:将40只小鼠随机分为空白对照组(生理盐水)、血栓通组(阳性对照,15 mg/kg)和SNFE低、高剂量组(15、30 mg/kg),每组10只,尾iv给药后分别测定断尾出血时间(BT)和凝血时间(CT),以考察SNFE的抗凝作用。大鼠腹主动脉取血后,将试验分为空白对照组、阳性对照组和SNFE低、中、高质量浓度组(0.25、0.50、1.00 mg/mL),分别测定体外血浆的凝血酶原时间(PT)和复钙时间(PRT)(以尿激酶为阳性药物,10万U/mL)及二磷酸腺苷(ADP)诱导剂作用下的血小板5 min内的最大聚集率(PAG)(以阿司匹林为阳性药物,0.50mg/mL),以分析SNFE的抗凝作用机制。结果:与空白对照组比较,各给药组小鼠的BT、CT均延长,其中血栓通组和SNFE高剂量组差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);阳性对照组和SNFE中、高浓度组大鼠血浆PT及各给药组大鼠血浆PRT均显著延长(P<0.05或P<0.01);各给药组大鼠PAG均显著降低(P<0.01)。结论:光裸方格星虫纤溶酶SNFE可能通过抑制内、外源性凝血因子的活性及ADP诱导的血小板聚集而发挥抗凝作用。     

方格星虫多糖对低剂量中子辐射损伤大鼠的保护作用

摘要：目的 研究方格星虫多糖（SNPS）对低剂量中子辐射损伤大鼠的保护作用。方法 SNPS 3个剂量组70,140和280 mg kg-1。补充何种动物、数量、性别、级别,重量,SD大鼠,50只,雄性,清洁级,180-200 g,每天于照射前经口给予受试药,连续38 d。除正常对照组外,其余各组每天照射22 h,放射源为252Cf中子源,吸收剂量率为0.085 mGy h-1,累积吸收剂量为71.06 mGy。在照射第7、14、21、28、35 d检测外周血细胞计数,在照射38 d检测血清SOD和GSH-PX活力、MDA含量,血清胆固醇和甘油三酯含量,肝脏脂代谢相关基因CYP7A1、FABP1、PPARα mRNA表达变化,计算主要脏器指数。结果 与模型对照组比较,在照射第35 d,SNPS中剂量组外周血血小板显著回升,在照射第38 d,SNPS各剂量组血清GSH-PX活力显著上升,血清MDA含量显著下降,肝脏中胆固醇7- 羟化酶含量显著回升。结论 SNPS对长期低剂量中子辐射损伤大鼠具有升高血小板,提高抗氧化能力,调节胆固醇代谢等保护作用。     

方格星虫多糖对低剂量中子辐射损伤大鼠的保护作用

摘要：目的 研究方格星虫多糖（SNPS）对低剂量中子辐射损伤大鼠的保护作用。方法 SNPS 3个剂量组70,140和280 mg kg-1。补充何种动物、数量、性别、级别,重量,SD大鼠,50只,雄性,清洁级,180-200 g,每天于照射前经口给予受试药,连续38 d。除正常对照组外,其余各组每天照射22 h,放射源为252Cf中子源,吸收剂量率为0.085 mGy h-1,累积吸收剂量为71.06 mGy。在照射第7、14、21、28、35 d检测外周血细胞计数,在照射38 d检测血清SOD和GSH-PX活力、MDA含量,血清胆固醇和甘油三酯含量,肝脏脂代谢相关基因CYP7A1、FABP1、PPARα mRNA表达变化,计算主要脏器指数。结果 与模型对照组比较,在照射第35 d,SNPS中剂量组外周血血小板显著回升,在照射第38 d,SNPS各剂量组血清GSH-PX活力显著上升,血清MDA含量显著下降,肝脏中胆固醇7- 羟化酶含量显著回升。结论 SNPS对长期低剂量中子辐射损伤大鼠具有升高血小板,提高抗氧化能力,调节胆固醇代谢等保护作用。     

海洋星虫提取物的营养分析及免疫调节作用的初步观察

目的测定海洋星虫提取物的蛋白质、氨基酸和微量元素含量 ,并初步观察其对小鼠免疫功能的影响。方法采用盐溶液抽提、超滤、乙醇沉淀等步骤 ,从海洋星虫制备得到海洋星虫提取物 ,分别采用凯氏定氮法、氨基酸自动分析仪和等离子体发射光谱仪测定蛋白质含量、氨基酸组成和微量元素水平。结果海洋星虫提取物的蛋白质含量为 5 5 .3% ,含牛磺酸、赖氨酸、精氨酸等 18种氨基酸和Zn、Cu、Ge、Se等 7种微量元素。动物实验表明 ,海洋星虫提取物能显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数 ,促进脾脏T淋巴细胞转化。结论海洋星虫提取物营养丰富 ,能明显提高机体的免疫功能。     

方格星虫粗提物对5/6肾切除大鼠肾小球病变的影响

目的观察方格星虫粗提物(SNP)对5/6肾切除大鼠肾小球病变的影响。方法 SD大鼠40只,随机分为假手术组和手术组,手术组行5/6肾切除术并于术后2周随机分为模型组、SNP低剂量组、SNP高剂量组。在给药前及给药4、8、12、16 w末观察大鼠24 h尿蛋白(24 hUPQ)及血肌酐(Scr)的动态变化,普通光镜观察肾小球病理变化,免疫组化法检测肾组织中纤维连接蛋白(FN)、α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)、Wilm肿瘤蛋白-1(WT-1)的表达。结果随着时间的延长,各组大鼠24 hUPQ、Scr均逐渐升高,但同一时间点,治疗组与模型组比较,差异无统计学意义;治疗组大鼠肾小球系膜增生程度、FN及-αSMA表达均较模型组下降;治疗组WT-1表达与模型组比较差异不显著。结论方格星虫粗提物可减轻5/6肾切除大鼠肾小球系膜增生程度、其机制可能与下调FN、-αSMA的表达有关。     

扇贝多肽对60Co辐射损伤小鼠的保护作用

采用生物化学方法研讨扇贝多肽(PCF)对小鼠^60Co辐射损伤的保护作用。结果表明，PCF能显著升高^60Co辐射小鼠胸腺系数和脾系数；提高组织匀浆中SOD和GSH—Px活性，降低ROS和MDA含量，同时提高总抗氧化能力，且PCF的作用呈剂量依赖性。提示PCF具有一定的抗辐射作用，这可能与其抗氧化及能提高机体免疫功能有关。     

芩丹颗粒对微波辐射小鼠心脏损伤的防护作用

目的探讨芩丹颗粒对微波辐射小鼠心脏损伤的防护作用。方法 60只小鼠随机分为正常对照组、100 m W·cm-2辐射损伤组、辐射损伤+芩丹颗粒2.5,5.0和10.0 g·kg-1防护组。芩丹颗粒防护组小鼠于辐射前7 d每天ig给药1次。辐射后6 h,取静脉血,用生化法检测血清谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性。取心肌组织,用比色法检测三磷酸腺苷(ATP)含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性,用光镜和电镜观察心肌组织结构的变化,用Western蛋白印迹法检测细胞色素c(Cyt c)和激活型胱天蛋白酶3表达的变化。结果与正常对照组比较,微波辐射组小鼠心肌细胞水肿、线粒体数量减少且形态异常,血清中GOT,CK和LDH活性升高(P<0.01),线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性显著下降(P<0.01),心肌细胞Cyt c和激活型胱天蛋白酶3蛋白表达显著升高(P<0.01)。与辐射损伤组比较,芩丹颗粒5.0和10.0 g·kg-1防护组小鼠心肌细胞体积正常,细胞核和细胞器形态完好,心肌细胞结构损伤程度显著缓解;心肌组织ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性均显著升高(P<0.01);心肌细胞Cyt c和激活型胱天蛋白酶3蛋白表达均显著下降(P<0.01)。结论芩丹颗粒对微波辐射致小鼠心肌细胞损伤具有一定的防护作用,其机制可能与其改善微波所致心肌细胞能量代谢有关。     

方格星虫酶解超滤组分对顺铂所致HK-2人肾小管上皮细胞损伤的保护作用研究

目的 探究方格星虫酶解产物对顺铂诱导的HK-2人肾小管上皮细胞损伤的改善作用。方法 方格星虫酶解后的离心液,逐级通过50K Da和2.5K Da超滤膜后,获得＞50K Da（F-Ⅰ）,2.5～50K Da（F-Ⅱ）,＜2.5K Da（F-Ⅲ）三个超滤组分,分析其营养成分、分子量排布、和氨基酸组成;在顺铂诱导HK-2细胞损伤模型上,评价各超滤组分对顺铂损伤的HK-2细胞活力、细胞凋亡以及细胞内ROS的产生的影响;采用Western Blotting探究其中活性最优F-Ⅰ超滤组分对NF-κB信号通路的影响。结果 营养成分和分子量排布分析发现F-Ⅰ超滤组分中总糖所占的比例最高,以干基计约占48.59%,逐级超滤可以提高超滤组分中多肽的含量,F-Ⅲ组分主要为＜2.5K Da的小分子肽。氨基酸组成分析发现三个超滤组分氨基酸组成齐全,疏水性氨基酸含量高。细胞实验结果表明三个超滤组分均能显著提高顺铂损伤后的HK-2细胞的细胞活力,抑制细胞凋亡和减少细胞内活性氧ROS的累积。其中F-Ⅰ组分缓解顺铂对HK-2细胞损伤的效果最好,能抑制NF-κB信号通路p65和Iκb-α蛋白的磷酸化。结论 方格星虫的三个酶解超滤组分均对顺铂顺伤后的HK-2细胞具有保护作用。相较于其他两个组分,含有较高多糖的F-Ⅰ组分具有更好的改善作用,可能机制与F-Ⅰ组分能更好抑制ROS的积累、细胞凋亡以及NF-κB信号通路有关。     

生白饮对钴60照射小鼠造血系统损伤保护作用

目的：研究生白饮对^60Coγ射线照射小鼠造血系统损伤保护作用。方法：连续动态观察生白饮对小鼠经^60Coγ射线照射后7，14，21d外周血白细胞、骨髓有核细胞数、淋巴细胞转化指数、网织红细胞以及细胞肿瘤因子（TNF）、白细胞介素-6（IL6）活性的影响。结果：照射损伤后小鼠外周血白细胞、网织红细胞、骨髓有核细胞数明显减少，淋巴细胞转化指数下降。TNF、IL-6活性降低。生白饮可促进上述各造血指标的恢复及升高（P〈0．05或P〈0．01）。结论：生白饮对照射损伤小鼠造血系统具有保护作用。     

肉苁蓉总苷对照射损伤小鼠敏感器官超微结构的保护作用

观察肉苁蓉总苷 ( GCs)对小鼠经60 Coγ射线照射后胸腺、脾、睾丸超微结构变化的影响 ;结果表明辐射损伤后小鼠胸腺、脾、睾丸生物膜及细胞器受到不同程度的损伤 ,GCs可促进其恢复 ;推论 GSs对受照小鼠敏感器官超微结构有保护作用 ,其机制可能与抗氧化、促进 DNA、RNA合成有关。     

星虫多糖对亚急性辐射损伤小鼠造血系统的保护作用研究

目的 研究星虫多糖（Sipunculus nudus L. polysaccharide, SNP）对亚急性辐射损伤小鼠造血系统的保护作用。方法 选用雄性BALB/c,采用137Cs γ射线对小鼠进行一次性全身照射（总剂量为4.0 Gy）,建立亚急性辐射损伤模型。照射前连续灌胃给药7天,照射后继续给药14天。用细胞分析仪测定外周血象,流式细胞仪检测骨髓造血干细胞含量与细胞凋亡率。照射后24 h取小鼠股骨进行HE染色观察骨髓病理变化。结果 经137Cs γ射线照射后,与辐照模型组相比,照后第10天,90 mg/kg SNP小鼠外周血象红细胞数量显著提高(P<0.05),SNP三个剂量组血小板数量均显著提高(P<0.05);照后第14天,270 mg/kg SNP组小鼠脾脏指数与30 mg/kg SNP组小鼠睾丸指数显著提高(P<0.05),30 mg/kg SNP组骨髓造血干细胞数量显著提高(P<0.05),SNP各给药组骨髓细胞凋亡率显著下降(P<0.01),骨髓组织中有核细胞数量显著增多。结论 SNP对辐射损伤小鼠的造血系统具有较好的保护效果。