止血镇痛散的制备及其质量标准

目的:制备止血镇痛散并建立其质量控制方法。方法:独一味水提物经聚酰胺柱去除总黄酮,大孔树脂富集得总环烯醚萜苷,以环烯醚萜苷为原料制备独一味止血镇痛散。以8-O-乙酰山栀子苷甲酯为对照品进行薄层色谱定性鉴别;总环烯醚萜苷含量测定采用一阶导数紫外分光光度法;HPLC测定山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯的含量。结果:TLC可较好地鉴别8-O-乙酰山栀子苷甲酯,阴性对照显示无干扰;建立的总环烯醚萜苷含量测定方法,平均加样回收率104.40%,RSD 0.64%;建立的山栀子苷甲酯和8-O-乙酰山栀子苷甲酯的含量测定方法,平均加样回收率分别为94.74%,100.59%,RSD分别为2.27%,1.61%。结论:止血镇痛散的制备工艺可推广于工业化生产中使用;建立的质控方法准确、可靠,可有效评价止血镇痛散的质量。     

工业化提取分离纯化独一味总环烯醚萜苷类成分

目的:应用大孔吸附树脂结合聚酰胺柱色谱法富集分离独一味中总黄酮、总环烯醚萜苷类极性成分,实现工业化生产。方法:用系列色谱设备进行分离富集,一阶导数紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷含量、高效液相色谱法测定山栀苷甲酯,8-O-乙酰山栀苷甲酯,并考察不同洗脱条件下有效成分总环烯醚萜苷的变化。结果:采用70%乙醇溶液为溶媒。大孔吸附树脂柱用"下进上出"的进样方式和"上进下出"的洗脱方式时,得率为20.80%,总环烯醚萜苷、山栀苷甲酯和8-O-乙酰山栀苷甲酯的转移率分别为70.77%,76.36%,68.74%。结论:生产工艺方法及参数可以成功地将实验成果转化为工业化生产。     

独一味环烯醚萜苷胶囊质量标准研究

目的: 制定独一味环烯醚萜苷胶囊的质量标准。 方法: 以薄层色谱法对本品主成分进行定性鉴别,采用一阶导数法测定总环烯醚萜苷含量,高效液相色谱法测定山栀苷甲酯、8-O-乙酰山栀苷甲酯的含量。 结果: 薄层色谱法样品与对照品在相同位置斑点清晰;一阶导数分光光度法测得3批总环烯醚萜苷含量均>50%;山栀苷甲酯、8-O-乙酰山栀苷甲酯与其他组分基线分离且峰形较好,测得3批样品平均含量为73.96,72.43 mg·g^-1。 结论: 该方法可以用于独一味环烯醚萜苷胶囊的质量控制。     

反相制备液相色谱同时分离制备独一味中4种环烯醚萜苷类化合物

目的建立独一味中环烯醚萜苷类化合物山栀苷甲酯、螃蟹甲苷II、番木鳖苷和8-O-乙酰山栀苷甲酯的快速制备色谱方法。方法独一味水提物经聚酰胺色谱柱和大孔吸附树脂柱分离后,进行快速制备液相色谱分离,根据制备色谱图收集流出液,采用HPLC和质谱定性定量分析。结果质谱法确定实验所得4种单体分别为山栀苷甲酯、螃蟹甲苷II、番木鳖苷和8-O-乙酰山栀苷甲酯,RP-HPLC法分析质量分数分别为95.7%、94.8%、96.3%、98.2%。结论该分离方法中各组分分离效果较好,可用于独一味中4种环烯醚萜苷类化合物的分离制备。     

独一味不同提取物中总环烯醚萜苷、总黄酮和总苯乙醇苷的测定

目的: 考察独一味不同提取物中总环烯醚萜苷、总黄酮和总苯乙醇苷的含量。 方法: 独一味水提物经聚酰胺和大孔树脂通过串联及并联方法,分别富集得到水洗脱物、70%乙醇溶液洗脱物Ⅰ（70%乙醇溶液洗脱聚酰胺柱）、70%乙醇溶液洗脱物Ⅱ（70%乙醇溶液洗脱大孔树脂柱）,采用一阶导数紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷的含量;双波长紫外分光光度法、硝酸铝-亚硝酸钠显色分光光光度法测定总黄酮和总苯乙醇苷的含量。 结果: 建立的一阶导数紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷的含量,在252 nm波长处加样回收率为104.40%,RSD分别为0.64%;建立的紫外分光光度法可以测定总黄酮和总苯乙醇苷的含量,总黄酮在268,363 nm波长处平均加样回收率分别为96.23%,104.48%,RSD分别为7.27%,3.61%;总苯乙醇苷在332 nm波长处加样回收率为100.26%,RSD 2.92%。 结论: 一阶导数紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷的含量可行;紫外分光光度法可以测定总黄酮和总苯乙醇苷的含量。     

分光光度法测定藏药独一味及其制剂中总环烯醚萜苷的含量

目的建立藏药独一味及其制剂中总环烯醚萜苷的含量测定方法。方法采用分光光度法,以8-乙酰氧基山栀苷甲酯(8-O-acetylshanzhisidemethylester)为对照品,75%乙醇为反应溶剂,加入50%HCl,80℃水解20min,以对二甲氨基苯甲醛为显色剂,在620nm处测定其含量。结果8-乙酰氧基山栀苷甲酯显色化合物稳定,在5.1～42.0μg/mL范围内有良好的线性关系(r=0.999);平均回收率为102.16%,RSD为3.92%。结论该实验建立了对二甲氨基苯甲醛比色法测定独一味及其制剂中总环烯醚萜苷含量的方法,该方法简便、可靠,可作为独一味及其制剂中总环烯醚萜苷的质量控制方法。     

大孔吸附树脂纯化栀子中总环烯醚萜苷和栀子苷的研究

目的建立栀子中总环烯醚萜苷测定方法,研究HPD 450大孔吸附树脂纯化栀子总环烯醚萜苷、栀子苷的工艺条件。方法采用紫外分光光度法和高效液相色谱法测定目标成分,考察HPD 450大孔吸附树脂对栀子总环烯醚萜苷、栀子苷的吸附和洗脱条件。结果栀子总环烯醚萜苷最大吸收波长为238 nm,与栀子苷一致,栀子苷在9.36~21.84μg/mL与吸光度呈良好线性关系,平均回收率为98.37%;HPD 450大孔吸附树脂可以将提取物中总环烯醚萜苷由45.45%提高到83.72%,栀子苷由24.46%提高到62.28%。结论HPD 450大孔吸附树脂能有效富集并纯化栀子总环烯醚萜苷、栀子苷;紫外分光光度法测定栀子总环烯醚萜苷具有快速、准确的特点。     

RP-HPLC同时测定不同产地独一味药材中4种环烯醚萜苷

目的建立RP-HPLC同时测定不同产地独一味药材中4种环烯醚萜苷单体量的方法。方法采用Sym-metryC18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相:0～11min乙腈-水(11∶89),11～35min乙腈-水(11∶89～15∶85)。体积流量:1.0mL/min,检测波长:235nm。结果山栀苷甲酯在5.0～100μg/mL线性关系良好,加样回收率为103.1%,RSD为2.0%。螃蟹甲苷Ⅱ(phloyosideⅡ)在1.0～50μg/mL线性关系良好,加样回收率为97.2%,RSD为1.3%。番木鳖苷甲酯在1.0～50μg/mL线性关系良好,加样回收率为101.3%,RSD为1.5%。8-O-乙酰山栀苷甲酯在5.0～100μg/mL线性关系良好,加样回收率为102.8%,RSD为1.2%。10批不同产地独一味药材中山栀苷甲酯量为0.3%～1.41%,螃蟹甲苷Ⅱ量为0.0%～0.45%,番木鳖苷甲酯量为0.02%～2.3%,8-O-乙酰山栀子苷甲酯量为1.05%～2.95%。结论实验建立的环烯醚萜苷测定方法准确可靠,适于独一味药材中环烯醚萜苷类量的测定。不同产地独一味药材中环烯醚萜苷量存在较大差异。     

大孔树脂富集纯化藏药独一味总环烯醚萜苷

目的：进行藏药独一味止血活性成分总环烯醚萜苷的富集纯化。方法：以一阶导数分光光度法检测,以总环烯醚萜苷含量为跟踪指标,比较10种不同厂家、不同型号的大孔树脂对独一味水提取物中环烯醚萜苷类成分的吸附与解吸附条件,优选最佳的纯化工艺。结果：富集后总环烯醚萜苷的含量达到67.53％。结论：XDA-1型大孔吸附树脂对独一味水提取物中环烯醚萜苷类成分有较好的吸附能力,50％乙醇溶液解吸附快速有效。树脂重复利用度高。     

栀子总环烯醚萜苷含量的紫外分光光度法测定

目的测定栀子药材乙醇提取物中总环烯醚萜苷的含量。方法采用紫外分光光度法。结果以栀子苷为标准品,栀子总环烯醚萜苷浓度在8.08~24.24μg.ml-1线性关系良好,方法精密度、重复性、加样回收率、稳定性均良好,3批栀子乙醇提取物中总环烯醚萜苷平均含量为56.5%。结论该方法操作简便,结果可靠,重复性好,可作为中药栀子质量控制的方法。     

Isolation and identification of hemostatic ingredients from lamiophlomis rotata (Benth.) kudo

Lamiophlomis rotata (Benth.) Kudo (LR) is a traditional drug used by Chinese minorities such as Tibetans, Mongolians and Na Xi with the beneficial effects of hemostasis and alleviating pain. Flavonoids ingredients (P₁), iridoid glycosides ingredients (P₂) and maximus polarity components ingredients (P₃) were isolated from the aqueous extract of LR (AELR) with polyamide and macroporous adsorptive resins chromatographic columns. The hemostatic activity of these ingredients was estimated by the changes in bleeding time (BT), clotting time (CT) and blood coagulation parameters in mice or rats. RP‐HPLC was used to analyze the chemical composition of P₂. As a result, AELR and P₂ significantly shortened BT, CT and thrombin time (TT), and increased fibrinogen (FIB), but P₁ and P₃ showed no hemostatic effect during the experiment. Moreover, P₂ showed satisfactory hemostatic effect with dose‐effect relationship and low toxicity in mice. 8‐Dehydroxy shanzhiside, phloyoside II, shanzhiside methylester, loganin, and 8‐O‐acetylshanzhiside methylester were detected as the main iridoid glycosides in P₂ by RP‐HPLC. Our results suggest that iridoid glycosides may be the hemostatic activity ingredients of L. rotata and are a potential hemostatic medicine. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

藏药独一味地上部分的化学成分

目的：研究独一味地上部分的化学成分。方法：应用多种色谱技术分离纯化，根据理化性质及波谱分析鉴定化合物的结构。结果：从独一味地上部分的乙醇提取物中分离得到了12个化合物，分别鉴定为木犀草素（1）、木犀草素7-O-β-吡喃葡萄糖苷（2）、芹菜素（3）、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、芹菜素7-O-（6″-反式-对-香豆酰基）-β-D-半乳糖苷（5）、小麦黄素（6）、刺槐素（7）、芫花素（8）、独一味素A（9）、独一味素B（10）、山栀苷甲酯（11）及丁香酸（12）。结论：化合物5-8及12为首次从该植物中分离得到，化合物1和6具有显著抑制小鼠巨噬细胞RAW 264．7释放NO的活性。     

独一味镇痛止血有效部位的富集工艺

目的:对独一味镇痛止血有效部位的富集工艺进行研究。方法:采用二甲氨基苯甲醛法测定总环烯醚萜含量、HPLC测定8-epideoxyloganic acid含量,以正交试验法和单因素试验法筛选提取工艺和大孔吸附树脂分离条件。结果:最佳提取工艺为用10倍量60%乙醇渗漉提取,浸泡36 h,渗漉速度5 mL·min-1.kg-1。纯化工艺为将提取物上聚酰胺柱,水洗脱部分上XDA-7大孔吸附树脂,收集30%醇洗脱部分。结论:XDA-7型树脂对独一味中环烯醚萜苷的富集能力优于其他树脂。洗脱溶剂30%乙醇能较好地洗脱环烯醚萜苷类成分。     

活血止痛方的抗炎及抗血栓形成作用

目的 :观察活血止痛方对小鼠的抗炎作用及对大鼠血栓形成的影响。方法 :用二甲苯作为致炎剂 ,观察活血止痛方对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 ,采用大鼠体外颈总动脉—颈外静脉血流旁路形成血小板血栓法 ,观察活血止痛方的抗血栓形成作用。结果 :活血止痛方能显著抑制耳肿胀 (P<0 .0 1) ,能显著减轻血栓湿重 (P<0 .0 1)。结论 :活血止痛方有明显的抗炎、抗脑血栓形成作用     

消炎止痛膏质量标准新研究

目的：建立消炎止痛膏的新质量标准。方法：采用薄层色谱（TLC）法对方中大黄、黄柏、半夏进行定性鉴别以及对制草乌含乌头碱进行限量测定;用高效液相色谱（HPLC）对制马钱子中的马钱子碱和士的宁进行含量测定。结果：TLC斑点清晰,分离度好;马钱子碱和士的宁进样量都在0.20~2.0μg之间与峰面积积分值呈良好的线性关系（r=1.000）,马钱子碱的平均回收率为97.8%,RSD为0.86%（n=6）;士的宁的平均回收率为96.6%,RSD为1.20%（n=6）。结论：所建立的标准适用于院内制剂消炎止痛膏的质量控制。