低硒并低铬对大鼠心肌细胞电生理的影响

为进一步阐明克山病心肌细胞损害的机理,用细胞内微电极技术分别观察了正常对照、低Ｓｅ、单纯低Ｃｒ、低Ｓｅ低Ｃｒ饲料饲养１４周后大鼠心肌细胞电生理的改变。结果表明：单纯低铬组无变化;单纯低硒组静息电位（ＲＰ）,电位幅度（ＡＰＡ）降低,电位时程（ＡＰＤ５０、ＡＰＤ９０）延长;低硒并低铬组ＲＰＡＰＡ降低,ＡＰＤ５０、ＡＰＤ９０明显延长。提示：缺硒并低铬可明显改变心肌细胞的电生理特性     

维生素C对低硒低铬大鼠心肌细胞电生理的影响

目的 :　阐明克山病心肌细胞损害的电生理机制。方法 :　用细胞内微电极技术分别观察正常对照、单纯低 Se、低 Se高维生素 C、单纯低 Cr、低 Cr高维生素 C、低 Se低 Cr、低 Se低Cr伴高维生素 C饲料饲养 1 4w后大鼠心肌细胞电生理的改变。结果 :　单纯低 Cr组无变化 ;单纯低硒组静息电位 ( RP)、动作电位幅度 ( APA)降低、动作电位时程 ( APD50 、APD90 )延长 ;低 Se低Cr组 RP、APA降低 ,APD50 、APD90 明显延长 ;低 Se高维生素 C组仅 RP降低 ,APA、APD与对照组相比差异无显著性意义。结论 :　低 Se低 Cr可明显改变心肌细胞的电生理特性 ,维生素 C可以对抗低 Se低 Cr所致的这种变化。     

维生素C对低硒高镉饲料饲养大鼠心肌细胞电生理的影响

目的:观察维生素C(VC)对低硒高镉饲料饲养大鼠心肌细胞电生理的影响。方法:用细胞内微电极技术分别观察了:普通饲料组对照、本实验构成饲料组对照、单纯高Cd、高Cd高VC、低Se高Cd、低Se高Cd伴高VC、高Se高Cd、高Se高Cd伴高VC饲料饲养14w后大鼠心肌细胞电生理的改变。结果:高Cd高VC组、高Se高Cd伴高VC组无变化;单纯高Cd组静息电位(RP)、动作电位幅度(APA)降低,动作电位时程(APD50、APD90)延长;低Se并高Cd组RP、APA降低,APD50、APD90明显延长;低Se高Cd高VC组、高Se高Cd组均表现为仅RP降低,APA、APD与对照组相比差异无显著性意义。结论:低硒并高镉饲料可明显改变大鼠心肌细胞的电生理特性,VC可以在一定程度上对抗这种变化。     

硒对培养大鼠心肌细胞抗氧化损伤作用的研究

目的　探讨硒对培养心肌细胞的抗氧化损伤作用。方法　应用不同浓度的过氧化氢 (H2 O2 ) ,分别作用不同时间 ,动态观察其对心肌细胞的损伤作用。同时观察硒对培养心肌细胞的保护作用。结果　H2 O2 作用于培养心肌细胞可造成乳酸脱氢酶 (LDH)从心肌细胞泄漏、细胞周期发生改变、心肌细胞和培养液中脂质过氧化物 (丙二醛 ,MDA)含量增加 ,同时发生 HE-染色可见的形态学改变。培养液中加入一定浓度的硒后 ,培养细胞和介质中 LDH和 MDA水平显著下降 (P<0 .0 1 ) ,噻唑蓝 (MTT)测定培养心肌细胞的存活率显著升高 ,细胞周期和形态学表现与正常细胞基本相同。结论　 H2 O2 作为一种自由基 ,依其浓度和作用时间可造成不同程度的心肌细胞的损伤。硒作为具有抗氧化作用的微量元素 ,能明显抑制自由基对心肌细胞的损伤作用。     

硒代蛋氨酸与亚硒酸钠对心肌细胞动作电位影响的比较

在培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心肌细胞上观察了硒代蛋氨酸与亚硒酸钠对膜电位活动的影响。结果表明，硒代蛋氨酸与亚硒酸钠（１．０，２．０，４．０ｍｇ／Ｌ）均可使心肌细胞动作电位幅值（ＡＰＡ）、超射（ＯＳ）、阈电位（ＴＰ）、最大舒张电位（ＭＤＰ）及最大除极速率（Ｖｍａｘ）显著降低；硒代蛋氨酸使复极化时程（ＡＰＤ１０、ＡＰＤ５０、ＡＰＤ９０）缩短，动作电位发放频率（ＡＰＦ）加快；而亚硒酸钠在４．０ｍｇ／Ｌ硒剂量时使所有的ＡＰＤ均延长，动作电位发放频率减慢，在作用剂量为１．０、２．０ｍｇ／Ｌ硒时，使ＡＰＤ１０延长，而ＡＰＤ５０、ＡＰＤ９０缩短。表明两种硒化合物均具有Ｃａ２＋通道阻滞作用，而亚硒酸钠还具有Ｋ＋通道阻滞作用     

硒对脂质过氧化作用所致培养心肌细胞超微结构损伤的影响

利用氢过氧化枯烯引发培养的乳鼠心肌细胞脂质过氧化损伤，预先向培养液中添加亚硒酸钠，观察硒对其脂质过氧化作用所致心肌细胞超微结构改变的影响。结果表明，适量硒能够明显地减轻其细胞收缩、肌原纤维及生物膜系统的损伤，提示硒通过对抗脂质过氧化作用，保护心肌细胞免于损伤。     

镉对心肌细胞动作电位的影响及硒的保护作用

目的探讨镉（Ｃｄ）对心肌的毒性作用机制及硒的保护效应。方法在培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心肌细胞上观察了镉对膜电位活动的影响及亚硒酸钠和硒代蛋氨酸的保护作用。结果镉使心肌细胞动作电位幅值（ＡＰＡ）、超射（ＯＳ）、阈电位（ＴＰ）、最大舒张电位（ＭＤＰ）及最大除极速率（Ｖｍａｘ）显著降低；复极化时程（ＡＰＤ）明显缩短；动作电位发放频率（ＡＰＦ）明显加快。硒与镉按等摩尔浓度加入（１０μｍｏｌ／Ｌ），亚硒酸钠和硒代蛋氨酸均可减轻镉对心肌细胞动作电位参数ＡＰＡ、ＴＰ、ＭＤＰ、Ｖｍａｘ等的影响，但两种硒化合物对动作电位复极化时程的影响表现不一致，前者延长ＡＰＤ，后者未能改变镉对ＡＰＤ的影响。结论镉能抑制心肌细胞的跨膜电位；亚硒酸钠和硒代蛋氨酸均可不同程度地减轻镉对心肌细胞动作电位的影响。     

维生素C对低硒高镉饲料饲养大鼠肝细胞电生理的影响

硒参与机体的许多生理过程，是人体必需的微量元素，研究表明，缺硒可以导致心脏、肝脏、关节等机体许多部位的严重病患。但近年的研究进一步表明：单纯低硒并不能致上述疾病，机体脏器的损害可能与环境因素特别是食物中其它物质含量的异常也密切相关，其中，高镉低维生素C可能是十分重要的协同因素。本研究以Wistar大鼠为对象，采用低硒高镉及低硒高镉伴高维生素C饲料饲养建立实验动物模型，以细胞内微电极技术观察低硒、高镉及维生素C对大鼠肝细胞电生理的协同影响，为进一步阐明食物中微量元素及维生素C含量异常致肝细胞损害的机理提供实验依据。     

硒对体外心肌细胞过氧化损伤保护和骨架蛋白actin表达的影响

目的探讨硒对H2O2损伤心肌细胞的保护作用以及α-actin和β-actin表达的影响。方法培养乳鼠心肌细胞随机分为对照组,H2O2组,Se 0.05、0.5、1.0和5.0μmol/L组,采用透射电镜观察实验心肌细胞的超微结构,比色法检测心肌细胞培养介质中LDH和MDA含量,Western Blot检测α-actin和β-actin蛋白的表达。结果 Se 0.5μmol/L可减轻心肌细胞超微结构损伤;各加硒组LDH和MDA水平较H2O2组显著降低(P<0.05),较对照组显著升高(P<0.05),其中Se 0.5μmol/L组LDH和MDA含量在各加硒组中最低;Se 0.5μmol/L组α-actin表达水平较H2O2组升高并高于正常对照组;Se 0.5μmol/L组β-actin表达水平较损伤组升高,低于正常对照组。结论 0.5μmol/L硒对H2O2损伤心肌细胞具有较好的保护作用,可维持和保护α-actin和β-actin的表达,参与细胞骨架蛋白重构。     

低硒高镉对大鼠心肌损伤作用的研究

用控制硒、镉含量的饲料喂养生长期ＳＤ大鼠，观察低硒和高镉对大鼠心肌的损伤作用。结果表明：低硒和高镉可引起大鼠心肌的灶状坏死，对心肌和心肌膜系统均有不同程度的损伤作用，心肌的谷胱甘肽过氧化物酶和细胞色素氧化酶的活性下降。提示克山病区粮中存在损伤大鼠心肌的因素，补硒可防止病区粮所致的心肌损伤。     

通脉汤含药血清对缺氧心肌细胞的保护作用

目的　观察通脉汤含药血清对缺氧状态下心肌细胞的保护作用。方法　提取通脉汤含药血清并干预经缺氧处理的心肌细胞 ,测定细胞培养液中的LDH、肌钙蛋白I(CTnI)的含量。结果　缺氧心肌细胞组的LDH( 7 2 2 5± 1 12 8U/L)和肌钙蛋白I( 0 85 1± 0 14 9ng/ml)的水平显著升高 ,而通脉汤含药血清组细胞培养液中的LDH( 4 175± 0 90U/l)、肌钙蛋白浓度 ( 0 5 48± 0 0 92ng/ml)明显低于损伤组 (P <0 0 1)。结论　通脉汤可以保护缺氧心肌细胞。     

骨髓间充质干细胞心肌移植对大鼠心梗后心功能的影响

目的　探讨骨髓间充质干细胞心肌移植对大鼠心梗后心功能及钙泵的影响。方法　取大鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养、增殖和标记 ,同时以液氮冷冻左室游离壁建立心梗模型。 4周后分别将 2× 10 6个细胞悬液或冷D -Hanks液注入实验组和对照组心梗区数个不同部位。另取 5只大鼠作为正常组 ,仅行两次开胸手术。 4周后行心功能测定及取标本 ,RT -PCR检测SERCA2基因mRNA的表达。结果　骨髓间充质干细胞于移植后 1周、2周和 4周后均可存活并具有分化成熟倾向。Buxco系统行有创动态心功能测定 ,发现SLVP、+dp/dt以正常组为最高 ,实验组次之 ,对照组最低。而LVEDP则相反以正常组最低 ,实验组次之 ,对照组为最高。心梗后SERCA2基因mRNA表达水平对照组较正常组明显降低 ( 0 988± 0 0 0 4对 1 82 4± 0 0 0 9,P <0 0 1)。骨髓间充质干细胞心肌移植后 ,虽然SERCA2基因mRNA表达水平实验组也较正常组有所降低 ( 1 5 83± 0 0 12对 1 82 4± 0 0 0 9,P <0 0 1) ,但与对照组相比明显升高 ( 1 5 83± 0 0 12对 0 988± 0 0 0 4,P <0 0 1)。结论　骨髓间充质干细胞心肌移植可促进SER CA2mRNA表达 ,并使大鼠心梗后受损的心功能改善。     

骨髓间充质干细胞心肌移植对大鼠心梗后血管新生和细胞因子分泌的作用

目的　探讨骨髓间充质干细胞心肌移植对大鼠心梗区血管新生和细胞因子VEGF、TGF的影响。方法　取大鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养、增殖和标记 ,同时以液氮冷冻左室游离壁建立心梗模型。 4周后分别将 2× 10 6个细胞悬液或冷D -Hanks液注入心梗区数个不同部位。于移植后 1、2、4周依次获取心梗区标本 ,进行细胞形态学观察 ,毛细血管密度测定和RT -PCR检测细胞因子VEGF、TGF -βmRNA的表达。 结果　骨髓间充质干细胞于移植后 1、2、4周后均可存活并具有分化成熟倾向。移植后第 1、2及 4周心梗区单位面积 ( 0 1mm2 )毛细血管数实验组较对照组均明显增加 (P <0 0 1) ,但毛细血管数有随时间推移而逐步减少的趋势 (P <0 0 1)。VEGFmRNA术后第 1、2及 4周的表达水平实验组与对照组相比均增加 (P <0 0 1) ,且随着时间的推移其表达量两组均呈迅速降低的趋势 (P <0 0 1)。TGF -βmRNA在术后第 1、2及 4周的表达水平实验组与对照组相比均降低 ( P <0 0 1)。结论　骨髓间充质干细胞心梗区移植后可促进大鼠心梗后血管新生 ,并可使VEGF生成增加 ,TGF -β合成减少     

左旋氨氯地平对缺氧心肌细胞钙超负荷的作用

目的观察左旋氨氯地平对缺氧心肌细胞钙离子超负荷的保护性作用。方法体外增养心肌细胞并建立心肌细胞缺氧模型,采用Fura2/am荧光探针在荧光分光光度计下直接测定各组心肌细胞内的游离钙离子浓度,通过RT-PCR方法分析细胞质膜上钙离子ATP酶的表达,并同时用WesternBlot方法测定肌浆网上钙泵的量。结果在左旋氨氯地平干预下缺氧心肌细胞的游离钙离子浓度显著降低(359.06±75.00nmol/L),同时增强了缺氧条件下的细胞质膜钙离子ATP酶的表达及肌浆网上钙泵的含量。结论左旋氨氯地平可以通过提高钙泵的表达来增强心肌细胞在缺氧条件下对钙超负荷的抵抗能力。     

铅对心肌细胞膜脂、膜蛋白运动影响特征的研究

采用荧光偏振及ＥＳＲ（电子自旋共振）技术观察铅对心肌细胞膜脂、膜蛋白运动的影响。与对照组相比,１～１００μｍｏｌ／Ｌ铅可使荧光偏振度Ｐ值及微粘度η值呈增加趋势,但无显著性差异。在同一剂量相同作用时间下,铅对τＣ值有明显影响,在１～５０μｍｏｌ／Ｌ范围内呈剂量反应关系,即随铅剂量增大,τＣ值增大。τＣ增大,膜蛋白运动减慢;τＣ减小,膜蛋白运动加快。提示铅对心肌细胞膜蛋白的影响大于膜脂。     

硒对大鼠肝细胞DNA损伤的研究

为探讨硒的遗传毒性，应用单细胞凝胶电泳研究亚硒酸钠对离体大鼠肝细胞ＤＮＡ损伤的作用。结果表明，８．７５μｍｏｌ／Ｌ，１７．５０μｍｏｌ／Ｌ，３５．００μｍｏｌ／Ｌ的亚硒酸钠可以引起肝细胞ＤＮＡ单链断裂，出现拖尾的彗星细胞。     

大气PM2.5对原代培养大鼠心肌细胞的毒性

目的探讨PM25及其组分对原代培养大鼠心肌细胞的毒性及其剂量-反应关系.方法对出生24 h的SD大鼠的乳鼠分离心肌细胞进行原代培养,以不同浓度(0.1、1.0、10.0、20.0、30.0、100.0、200.0μg/ml)的PM25全颗粒物及其水溶性提取物、有机提取物染毒24h,采用MTT法测定细胞的存活率,并观察染毒对心肌细胞搏动的影响.结果0.1、1.0、10.0μg/ml的全颗粒物、水溶性提取物和有机提取物染毒时,心肌细胞存活率均随染毒浓度升高而上升,在10.0μg/ml时达到最高,随后,随浓度的升高而降低;有机提取物的毒性明显高于水溶性提取物,心肌细胞的搏动频率随染毒浓度的升高而降低.结论以细胞存活率为指标,观察到PM25及其组分对心肌细胞的hormesis效应;PM25及其组分还可抑制心肌细胞的搏动频率并存在剂量-反应关系.     

硒和汞在汞污染区放养家鸭脏器中的分布

通过对松花江肇源江段放养的家鸭脏器中硒和汞的实验研究 ,发现观察组鸭内脏总汞含量由高到低的顺序为肝 >肌肉 >脑 >心 >肾 >肺 ,对照组为肺 >肾 >肝 >心 >脑 ,两组鸭脏器中汞含量除肺外均有显著性差异 ,观察组显著高于对照组 ;观察组硒含量由高到低的排列顺序为心 >肺 >睾丸 >脑 >肌肉 >肝 ,对照组为脑 >肺 >血液 >心 >肝 >肌肉 ,两者的排列顺序不同 ,而且两组鸭脏器硒含量有显著性差异。对鸭肝硒和汞含量做相关性分析 ,相关系数r=- 0 932 ,P <0 0 0 1,呈显著负相关。     

羟乙基淀粉对心肌酶谱的影响

目的　观察手术中输注 6%羟乙基淀粉对心肌酶谱测定的影响。方法　 3 0例择期行全身麻醉胆囊切除术患者 ,麻醉诱导平稳后 1小时内输注 6%羟乙基淀粉 10 0 0ml。分别于输注 6%羟乙基淀粉前、输注后半小时及 2 4小时 ,采静脉血测定心肌酶谱 (CK MB、AST、LDH、HBDH、CTnI)。结果　输注 6%羟乙基淀粉10 0 0ml后半小时及 2 4小时时的心肌酶谱与输注前比较 ,其中LDH于输注后 2 4小时时较输注前稍有升高 (P <0 0 5 ) ,余均无明显变化 (P >0 0 5 )。结论　手术中输注 6%羟乙基淀粉对心肌酶谱测定无明显影响。