苏木乙酸乙酯提取物对大鼠心脏移植慢性排斥模型血清IL-10水平的影响

目的:通过观察苏木乙酸乙酯提取物对大鼠同种异位心脏移植慢性排斥反应血清中IL-10水平的影响,为进一步探讨苏木乙酸乙酯提取物对慢性排斥反应的作用机制奠定工作基础。方法:以Wistar大鼠为供体,以SD大鼠为受体,建立大鼠腹腔异位心脏移植模型。将手术成功后连续灌服21天环孢素A的大鼠,随机分为对照组、苏木组、环孢素A组,对照组按体质量计算等容量橄榄油灌胃;环孢素A组按12 mg/kg/d环孢素A溶于橄榄油给药;苏木组按含生药量1.15g/kg/d溶于橄榄油中给药。灌胃7天后采血,用ELISA法检测血清中IL-10的含量。结果表明:1)与对照组相比,环孢素A组与苏木组血清中IL-10的含量明显增高(P0.01,P0.05)。2)环孢素A组与苏木组相比有显著差异(P0.01)。结论:苏木乙酸乙酯提取物能够升高移植心脏的大鼠血清IL-10的含量,这可能是抗慢性排斥反应的原因之一。     

苏木乙酸乙酯提取物对大鼠心脏移植慢性排斥模型血清TGF-β1的影响

目的:通过观察苏木乙酸乙酯提取物对大鼠同种异位心脏移植慢性排斥反应血清中TGF-β1水平的影响,为进一步探讨苏木乙酸乙酯提取物对慢性排斥反应的作用机制奠定基础。方法:以Wistar大鼠为供体,以SD大鼠为受体,Ono术式建立心脏移植模型。将上述大鼠术后24h给予35mg/kg/d环孢素A(CsA)灌胃,连续21天,以抑制急性排斥反应。21天后选择心脏跳动良好者随机分组。Ⅰ组为对照组,无药物治疗,灌服等体积的橄榄油;Ⅱ组为CsA组,按CsA12mg/kg/d灌服给药;Ⅲ组为苏木乙酸乙酯提取物组,按生药1.15g/kg/d灌服给药。给药7天后采集血液,用ELISA法检测血清中TGF-β1的含量。结果:与对照组相比,CsA组和苏木乙酸乙酯提取物组大鼠血清中TGF-β1的含量明显降低,差异具有统计学意义(P0.01),苏木乙酸乙酯提取物组与CsA组相比,无显著差异(P0.05)。结论:苏木乙酸乙酯提取物能降低心脏移植慢性排斥大鼠血清TGF-β1的含量,这可能是其抗慢性排斥反应作用的机制之一。     

苏木乙酸乙酯提取物对大鼠慢性排斥移植心脏心肌生长因子含量的影响

目的:通过观察苏木提取物对心脏移植模型大鼠心肌病理形态学及生长因子表达的影响,探讨苏木提取物对慢性排斥反应的作用机理,为从中药学中研发出新型的免疫抑制剂奠定工作基础。方法:应用改良Ono术式行大鼠腹腔心脏移植,结合Cs A灌胃建立心脏移植慢性排斥动物模型。选择移植心脏跳动良好的大鼠随机分为3组。苏木组予苏木乙酸乙酯提取物溶液灌胃;环孢素组予Cs A溶液灌胃;模型对照组按体质量计算予等体积橄榄油灌胃,连续灌胃7 d后取下移植心脏。观察移植术后受体的一般情况,移植心脏收缩力情况,移植心脏心肌病理形态学改变,并进行慢性排斥反应诊断分级;采用Real-time-PCR法检测各组大鼠移植心脏心肌生长因子PDGF-A、VEGF-C、FGF-1、FGF-2的基因表达水平。结果:与模型对照组相比,苏木组和环孢素A组PDGF-A的表达水平降低,差异有统计学意义(P0.05);苏木组和环孢素A组移植心脏心肌组织PDGF-A的表达水平相当,差异无统计学意义(P0.05);与模型对照组相比,苏木组和环孢素A组VEGF-C的表达水平降低,差异有统计学意义(P0.05);苏木组和环孢素A组移植心脏心肌组织VEGF-C的表达水平相当,差异无统计学意义(P0.05);与模型对照组相比,苏木组和环孢素A组FGF-1的表达水平降低,差异有统计学意义(P0.05);与苏木组相比,环孢素A组FGF-1的表达水平降低,差异有统计学意义(P0.05)。与模型对照组相比,苏木组和环孢素A组FGF-2的表达水平降低,差异有统计学意义(P0.05);与苏木组相比,环孢素A组FGF-2的表达水平降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:苏木乙酸乙酯提取物能降低大鼠慢性排斥模型移植心肌PDGF-A、VEGF-C的基因表达,作用与Cs A相当。苏木乙酸乙酯提取物能降低大鼠慢性排斥模型移植心肌FGF-1、FGF-2的基因表达,作用不及Cs A。     

苏木乙酸乙酯提取物对心脏移植急性排斥模型大鼠血清IFN-γ的影响

目的:探讨苏木乙酸乙酯提取物对心脏移植急性排斥模型大鼠血清IFN-γ的影响.方法:采用改良的Ono术式建立同种异位心脏移植大鼠模型.术后动物随机分为4组,每组8只大鼠.即:模型空白对照组、环孢素A组、苏木乙酸乙酯提取物组、苏木乙酸乙酯提取物全量加环孢素A半量组.术后第7天行大鼠眼眶下静脉采血,离心,取血清.采用双抗体夹心法(ELISA法)测定外周血清干扰素-γ(IFN-γ)的含量.结果:与模型空白对照组比较,环孢素A组、苏木组、全量苏木加半量环孢素组IFN-γ的浓度明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.01)；苏木组和环孢素A组比较,环孢素A组IFN-γ的浓度降低更为显著,2组比较,差异有统计学意义(P＜0.01)；全量苏木加半量环孢素组和环孢素A组比较,全量苏木加半量环孢素A组IFN-γ的浓度降低的更明显,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:苏木乙酸乙酯提取物能显著降低外周血清中IFN-γ含量,推测是通过这一机制发挥免疫抑制作用.     

苏木有效成分免疫抑制作用的实验研究

目的:探讨苏木提纯物对淋巴细胞转化功能的影响及抗心脏移植急性排斥反应的机制。方法:用两种苏木提纯物给小鼠灌胃8d,取脾后应用MTT法测定T、B淋巴细胞的增殖情况;建立大鼠腹腔同种异位心脏移植模型。供体雄性Wistar大鼠,受体雄性SD大鼠,分别设模型对照组、环孢素A组和苏木乙酸乙酯提取物组。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定移植心脏心肌组织FasL mRNA的表达情况。结果:苏木乙酸乙酯提取物35g/kg组具有较强的抑制淋巴细胞增殖的作用;在抑制心脏移植后FasL mRNA相对量表达水平方面,苏木乙酸乙酯提取物组与对照组相比有显著性差异,与环孢素A组相比无显著性差异。结论:苏木乙酸乙酯提取物有较强的免疫抑制作用,具有良好的开发前景。     

苏木乙酸乙酯提取物对大鼠同种异位心脏移植急性排斥外周血中TNF-α水平的影响

目的:观察在大鼠的同种异位心脏移植急性排斥反应中苏木乙酸乙酯提取物对外周血TNF-α的水平的影响。方法:以Wistar大鼠的心脏为供体,SD大鼠作为心脏移植受者,制造大鼠同种异位心脏移植模型,并将其随机分为环胆素A(CsA)组、模型组、苏木乙酸乙酯加半量CsA组、苏木乙酸乙酯组,应用ELISA法检测外周血TNF-α的水平变化。结果:苏木乙酸乙酯组及苏木乙酸乙酯加半量CsA组均能明显降低大鼠外周血TNF-α的水平。结论:苏木乙酸乙酯提取物具有显著的抑制免疫排斥反应的作用,可能是通过降低TNF-α的分泌而发挥免疫抑制作用。     

苏木乙酸乙酯提取物对大鼠同种异位心脏移植急性排斥反应心肌GrB mRNA表达的影响

目的 观察苏木乙酸乙酯提取物对同种异位心脏移植大鼠移植心肌GrB mRNA表达的影响,探讨苏木免疫活性部位抗排斥反应作用机理。方法 以Wistar大鼠为供体,以SD大鼠为受体,建立大鼠腹腔异位心脏移植模型, 将手术成功鼠随机分为模型组、苏木组、环孢素A（CsA）组,采用RT-PCR法检测GrB mRNA表达。常规方法观察心肌病理形态学。 结果 (1) 病理组织学分级:与模型组（积分31）比较,CsA组（积分14）和苏木组（积分23）均能减轻移植心肌病理损伤（P<0.05,P<0.01）。(2) 移植心肌组织GrB mRNA的表达：与模型组（1.3000±0.1207）比较,CsA组（0.6700±0.0997）和苏木组（0.7070±0.1215）能明显下调GrB mRNA表达（P<0.01）,CsA组与苏木组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 苏木乙酸乙酯提取物能够减轻移植心脏心肌的病理损伤,能够下调大鼠移植心脏心肌GrB的基因表达,这可能是抗急性排斥反应因素之一。     

苏木乙酸乙酯提取物对心脏移植模型大鼠ICAM-1和LFA-1蛋白表达的影响

目的:通过观察苏木乙酸乙酯提取物对同种异位心脏移植急性排斥反应模型大鼠移植心肌ICAM-1和LFA-1蛋白表达的影响,探讨其免疫抑制作用的机理,为苏木的新药研发提供重要的理论和实验依据。方法:以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,制备大鼠同种异位心脏移植模型,造模成功后,用Western Blot法测定ICAM-1和LFA-1蛋白含量变化。结果:模型对照组比较,苏木组、CsA组及苏木加半量CsA组均能降低ICAM-1和LFA-1蛋白的表达,差异有统计学意义;与CsA组比较,苏木组作用效果较弱,差异有统计学意义,而苏木加半量CsA组作用效果相当,无统计学意义。结论:在大鼠心脏移植模型中,苏木乙酸乙酯提取物具有降低同种异位心脏移植模型大鼠心肌ICAM-1和LFA-1蛋白的表达,减轻移植心脏的急性排斥反应。     

苏木乙酸乙酯提取物对慢性柯萨奇病毒性心肌炎小鼠外周血中 TNF-α的影响

目的：观察在苏木乙酸乙酯提取物对慢性柯萨奇病毒性心肌炎小鼠外周血中TNF-α的影响。方法：将慢性柯萨奇病毒性心肌炎模型,随机分为4组,模型组,环孢素A组,苏木乙酸乙酯加半量环孢素A组、苏木乙酸乙酯组,应用ELISA法检测小鼠外周血TNF-α的水平变化。结果：苏木乙酸乙酯组及环孢素A组均能明显降低大鼠外周血TNF-α的水平。结论：苏木乙酸乙酯提取物具有降低慢性柯萨奇病毒性心肌炎小鼠外周血中TNF-α水平,从而发挥抑制慢性病毒性心肌炎免疫损伤,保护心肌细胞作用。     

苏木乙酸乙酯提取物对大鼠外周血细胞因子的影响

目的:通过观察苏木乙酸乙酯提取物对健康大鼠外周血细胞因子IL-1、IL-2、IL-12及IFN-γ含量的影响,探讨其免疫抑制的作用机制。方法:健康Wistar大鼠32只,随机分为空白组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组8只大鼠。高、中、低剂量组分别按照2.3g/kg/d、1.15g/kg/d、0.58g/kg/d剂量给予苏木乙酸乙酯提取物灌胃,空白组给予同体积橄榄油灌胃,连续灌胃7天,眼球取血,采用ELISA法检测大鼠血清IL-1、IL-2、IL-12及IFN-γ含量。结果:苏木乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组与空白组比较,IL-1的表达无明显差异;高、中剂量组IL-2、IFN-γ的表达均降低,与空白组比较有显著性差异(P<0.05)。高、中、低剂量组IL-12的表达均降低,与空白组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:苏木乙酸乙酯提取物具有免疫抑制作用,其作用机理可能与抑制细胞因子IL-2、IL-12、IFN-γ的表达有关。     

强肌健力方对肺脾两虚型COPD大鼠TNF-α IL-10的影响

目的:探讨强肌健力方对肺脾两虚型COPD大鼠TNF-α、IL-10的影响。方法:40只SD大鼠,随机分为正常组、模型组、强高组、强低组,每组各10只,采用"烟熏加气管内滴入脂多糖联合番泻叶灌胃泻下法"复制"肺脾两虚型"COPD动物模型,其中药物组在造模的同时给予强肌健力方高、低剂量治疗,造模60天。实验结束时,比较各组大鼠肺组织病理改变及血清TNF-α、IL-10含量。结果:模型组大鼠TNF-α含量明显升高、IL-10含量明显下降,与正常组比较有显著性差异(P<0.05或0.01);强高组与强低组TNF-α含量均较模型组均有明显下降(P<0.05或0.01);强高组IL-10含量与模型组比较有显著升高(P<0.05),强低组IL-10含量无明显变化。结论:高剂量的强肌健力方可以显著降低TNF-α、升高IL-10含量,提示强肌健力方可纠正TH1/TH2细胞失衡,减轻COPD气道炎症,从而延缓或打断COPD的发展。     

寿胎丸对大鼠卵巢移植术后凋亡基因Bcl-2、Bax的影响

目的：探讨寿胎丸对大鼠卵巢移植术后凋亡基因Bcl-2、Bax的影响。方法：210只Wistar雌性大鼠随机分为7组,即自体移植模型组、自体移植＋寿胎丸组、异体移植模型组、异体移植＋寿胎丸组、异体移植＋CsA组、异体移植＋CsA＋寿胎丸组和正常对照组。各组大鼠于移植术后第7天,第14天,第21天,第28天,第35天分批处死,每次6只。取左侧卵巢,石蜡包埋切片,免疫组化测凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达。结果：移植术后与异体移植模型组相比较,异体移植＋寿胎丸组、异体移植＋CsA组、异体移植＋CsA＋寿胎丸组大鼠的Bcl-2水平均升高（P〈0．05）,Bax水平均降低（P〈0．05）。结论：寿胎丸能升调Bcl．2表达,降调Bax表达,升调Bcl-2／Bax的比值,从而发挥抑制卵巢细胞凋亡、抗卵巢移植急性排斥反应的作用。     

黑睛排斥汤防治大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的机理研究

目的探讨黒睛排斥汤在大鼠高危角膜移植免疫排斥反应中作用的机理。方法角膜缝线法诱导角膜新生血管,建立大鼠高危角膜移植模型,随机分为A组(模型对照),B组(灌服黒睛排斥汤4 g/(kg.d)),C组(灌服黒睛排斥汤4 g/(kg.d)+CsA 10 mg/(kg.d))。行封闭群大鼠SD-Wistar组间同种异体全板层角膜移植,观察植片存活状况;应用流式细胞分析,免疫荧光组织化学等方法对受体局部和全身免疫状态机制进行检测。结果 1.角膜植片存活时间:A组(10.38±1.69)d,B组(13.00±2.03)d,C组(22.50±3.07)d,3组比较差异有统计学意义(P<0.01)。2.外周血淋巴细胞CD4+和CD8+亚群:术后7 d,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+各组之间比较均无明显差别(P>0.05);术后14 d,C组CD4+、CD4+/CD8+与A组比较明显降低(P<0.05);术后21 d,B、C组CD4+、CD4+/CD8+与A组比较明显降低(P<0.05),但各组CD8+比较无明显差异(P>0.05)。3.ConA诱导的脾淋巴细胞的增殖:B组、C组脾T淋巴细胞的增殖被明显抑制,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以C组更为明显。结论黒睛排斥汤对高危角膜移植排斥反应模型大鼠术后免疫排斥反应的抑制作用主要是通过抑制T淋巴细胞的增殖来实现的。     

瑶药猛老虎提取物对大鼠肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原、MMP-1和TGF-β1表达的影响

目的：观察瑶药猛老虎提取物对大鼠肝星状细胞（HSC）Ⅰ、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶（MMP-1）和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法：制备猛老虎乙酸乙酯部位分离物药物血清,分离培养大鼠肝HSC,温育HSC,EIJSA法检测上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量;MTT检测HSC的生长情况;逆转录多聚酶链反应（RT—PCR）法观察MMP-1的表达;免疫组化法观察TGF-β1的表达。结果：猛老虎乙酸乙酯部位各分离物和秋水仙碱药物血清对体外培养的HSC细胞增殖无抑制作用。与空白对照血清组比较,无显著性差异（P〉0．05）。分离物E中和高剂量组的药物血清均能明显促进体外培养HSC细胞MMP-1基因表达水平、抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原的分泌和TGF-β1表达并呈现剂量依赖关系,与空白对照血清组比较,均具有显著性的统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）,效果与秋水仙碱相当。结论：瑶药猛老虎抗肝纤维化作用不是直接抑制HSC的增殖,而是与其促进HSC细胞MMP-1基因表达水平、抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原的分泌和TGF-β1的表达有关。     

川芎治疗偏头痛有效部位筛选研究

目的:研究川芎提取物对硝酸甘油所致偏头痛大鼠行为学症状及血浆、脑组织中的5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)含量的影响,初步筛选川芎治疗偏头痛的有效部位。方法:将川芎乙醇总提取物,采用系统溶剂法依次以氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到各提取部位后,分别灌胃给予实验大鼠。采用硝酸甘油致大鼠偏头痛模型,观察给药后大鼠耳红、挠头和爬笼次数等行为学指标;高效液相色谱-荧光检测法测定各组大鼠血浆及脑组织中的5-HT、DA、NE含量。结果:川芎乙醇提取物、乙酸乙酯提取物能显著抑制偏头痛大鼠耳红消失时间和挠头、爬笼次数;并能不同程度升高偏头痛大鼠血及脑内5-HT、DA、NE含量(P<0.05、0.01),且两者间无显著性差异。结论:乙酸乙酯提取部位是川芎治疗偏头痛的有效部位。     

薯蓣丸对变应性鼻炎大鼠模型IL-4、AQP5的影响

目的探讨薯蓣丸对变应性鼻炎大鼠模型IL-4、AQP5的影响,并探讨二者之间是否具有相关性。方法：将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、高剂量治疗组、中剂量治疗组、低剂量治疗组,每组各10只。对除正常组外的其余组大鼠采用卵清蛋白（OVA）刺激建立变应性鼻炎大鼠模型,正常组、模型组以生理盐水口饲,高、中、低剂量治疗组用薯蓣丸药液灌胃治疗。测定比较各组大鼠血清IL-4水平以及AQP5表达,并分析二者的相关性。结果：薯蓣丸能改善实验动物鼻炎症状,各治疗组IL-4水平降低、AQP5表达增加,与模型组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。IL-4与AQP5表达呈显著负相关（P〈0．05）。结论：薯蓣丸能通过影响IL-4和AQP5缓解变应性鼻炎症状,二者呈显著负相关性。     

56例白癜风患者治疗前后血清IL-2、IL-10和IFN-γ检测结果分析

目的：探讨白癜风患者治疗前后血清IL-2、IL-10和IFN-γ水平的变化情况及其临床意义。方法：应用放免法和酶免法对2012年01月-2013年05月来我所就诊的56例白癜风患者（观察组）进行治疗前后血清IL-2、IL—10和IFN—γ水平检测,并与同期50例健康体检者（对照组）作对比分析。结果：观察组在治疗前血清IL-2水平显著低于健康对照组（P〈0．05）,而IL—10和IFN-γ水平则明显高于对照组（P〈0．05）,经治疗6个月后,与对照组比较仍有显著性差异（P〈0．05）。结论：白癜风患者存在自身免疫调节的异常,检测血清IL-2、IL-10和IFN-γ对疾病的治疗和预后具有重要的临床价值。     

督脉电针早期干预对慢性脑缺血大鼠IL-1β和TNF-α表达的影响

目的:探讨早期运用督脉电针对慢性脑缺血大鼠IL-1β和TNF-α表达的影响。方法:60只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、立即针刺组和针刺治疗组。分次运用双侧颈总动脉永久结扎方法(2VO)制作慢性脑缺血大鼠模型,比较各组大鼠脑组织中IL-1β和TNF-α表达。结果:模型组IL-1β和TNF-α表达明显高于正常组(P<0.05);督脉电针干预明显降低慢性脑缺血大鼠脑组织中IL-1β和TNF-α的含量(P<0.05);立即针刺组IL-1β和TNF-α表达优于针刺治疗组(P<0.05)。结论:督脉电针可以通过影响慢性脑缺血大鼠脑组织中IL-1β和TNF-α的表达以促进受损神经功能恢复,提示督脉电针对慢性脑缺血损伤有保护的作用。与缺血形成后治疗相比,早期督脉电针治疗效果更好。