酸水解地榆总皂苷制备地榆皂苷元的工艺优选

目的优化地榆总皂苷的酸水解工艺,提高水解产物地榆皂苷元的产量。方法采用正交试验设计,考察盐酸浓度、料液比、水解温度、水解时间对地榆总皂苷水解过程的影响。结果影响水解的主次因素依次是盐酸浓度水解时间料液比水解温度,优选的最佳工艺为料液比1∶200,盐酸浓度为4 mol/L,水解时间0.5 h,水解温度92℃。结论采用优化后的水解条件能够得到产量较高的地榆皂苷元,适合工业化生产。     

氢氧化钠水解地榆总皂苷制备地榆皂苷化合物Ⅳ的工艺优选

目的:优化地榆总皂苷的碱水解工艺,提高水解产物地榆皂苷化合物Ⅳ的含量。方法:采用正交试验设计,考察水解时间、氢氧化钠体积分数、料液比、水解温度对地榆总皂苷水解过程的影响。结果:影响水解的主次因素依次是料液比>氢氧化钠体积分数>水解温度>水解时间,优选的最佳工艺为料液比1∶80;氢氧化钠体积分数20%,水解时间3.5 h,水解温度82℃。结论:采用优化后的水解条件能够得到含量较高的地榆皂苷化合物Ⅳ,适合工业化生产。     

地榆总皂苷对小鼠腹水型H22肝癌的抑制作用及机制研究

目的:探讨地榆总皂苷体内抗肿瘤的作用及其机理.方法:通过腹腔接种H22肝癌细胞建立荷瘤小鼠模型,并按体质量随机分为阴性对照组(0.5％ CMC溶液)、阳性对照组(呋喃氟尿嘧啶,120mg/kg)、地榆总皂苷大(4g/kg)、中(2g/kg)、小(1g/kg)剂量组,连续灌胃给药10天后,观察记录60天内动物死亡时间,计算小鼠生存天数及中位生存时间(MST).再通过上述方法建立荷瘤小鼠模型,用地榆总皂苷灌胃给药,连续10天后,抽取小鼠腹水,采用荧光染色法及流式细胞术检测细胞凋亡.结果:各组MST分别为14.51、20.2、19.2、21.0、17.5天,阳性对照及各给药组与阴性对照组MST比值分别为139.3％、132.4％、144.8％、120.7％.荧光显微镜下观察发现阴性对照组细胞核呈蓝色,给药组细胞形态改变,细胞核呈致密浓染,有的细胞核呈碎块状致密浓染,颜色发白.地榆总皂苷大、中、小剂量组细胞凋亡率分别为1.05％、1.14％、0.79％,较阴性对照组明显增高(P＜0.05).各给药组细胞发生不同程度凋亡.结论:地榆总皂苷具有明显的体内抗肿瘤活性,其抗肿瘤活性机理为诱导肿瘤细胞发生凋亡.     

参麦总皂苷抗血管生成作用研究

目的:探讨参麦总皂苷抗血管生成作用,为临床辅助抗肿瘤分子机理提供理论依据。方法:提取参麦总皂苷,采用MTT法及刮痕法分析总皂苷对人脐静脉内皮细胞HUVECs的增殖和迁移抑制作用;通过荧光定量PCR方法考察总皂苷对人肝癌HepG2细胞株VEGF表达影响;最后,以鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)在体模型对总皂苷抗血管生成作用进行评价。结果:MTT及刮痕实验结果表明,参麦总皂苷可剂量依赖性抑制HUVECs细胞增殖和迁移,其中600μg/mL浓度增殖抑制率达63.9%,150μg/mL处理48h,其迁移抑制率可达73.7%;荧光定量PCR结果表明,总皂苷可以抑制HepG2细胞分泌VEGF;此外,鸡胚绒毛尿囊膜模型证实,参麦总皂苷具有抗血管生成作用。结论:参麦总皂苷可以通过抑制内皮细胞增殖、迁移及抑制癌细胞分泌VEGF表达起到抗肿瘤血管生成作用。     

地榆药材中总皂苷及地榆皂苷- I的含量测定

目的 建立地榆药材总皂苷及地榆皂苷-I含量的测定方法,并对不同批次地榆药材中总皂苷和地榆皂苷-I的含量进行测定。方法 采用优化条件的紫外-可见分光光度法建立了地榆药材中总皂苷的含量测定方法,采用HPLC-ELSD法测定地榆药材中地榆皂苷-I的含量。结果 优选出总皂苷含量测定的显色体系为香草醛-冰醋酸-高氯酸,反应条件为15 %香草醛,1.0 mL高氯酸,80 ℃反应15 min,经测定,地榆药材中总皂苷含量为7.25 %~8.41 %;HPLC-ELSD法测得地榆药材中地榆皂苷-I的含量为5.21 %~6.18 %。结论 香草醛-冰醋酸-高氯酸法以及HPLC-ELSD法快速、简便、准确、重现性良好,分别适用于测定地榆药材中总皂苷和地榆皂苷-I的含量。     

地榆总皂苷促造血细胞增殖效应研究

目的 观察地榆总皂苷对3种造血细胞Baf3/Mp1、UT-7和NSF-60的促增殖效应.方法 分别培养依赖血小板生成素(TPO)、红细胞生成素(EPO)和粒细胞集落生长因子(G-CSF)生长的Baf3/Mp1、UT-7和NSF-60细胞,在加或不加细胞因子条件下,用不同质量浓度地榆总皂苷处理细胞72 h后,采用MTT法检测3种细胞的增殖;采用RT-PCR法检测3种细胞因子受体表达水平的变化.结果 地榆总皂苷单独处理细胞72 h,明显促进Baf3/Mp1细胞和NSF-60细胞增殖,但不影响UT-7细胞生长;在TPO和G-CSF存在条件下,地榆总皂苷能分别增强两种细胞因子的促细胞增殖作用.此外,地榆总皂苷能明显增强Baf3/Mp1细胞TPO受体表达,对NSF-60细胞G-CSF受体表达没有影响.结论 地榆总皂苷具有单独或协同细胞因子的促造血细胞增殖作用,其促增殖作用与上调TPO受体的表达有关.     

三步碱沉法制备地榆总皂苷的工艺优选

目的:通过正交试验与三步沉淀法优选地榆总皂苷的提取与纯化工艺条件。方法:采用HPLC-ELSD测定地榆皂苷-Ⅰ的含量,流动相[甲醇-乙腈(1∶1)]-水梯度洗脱,蒸发光散射检测器的漂移温度100℃,气体流速3.0 L·min-1。以地榆皂苷-Ⅰ转移率为指标,通过正交试验优选地榆总皂苷的提取工艺;采用三步碱沉法,以鞣质清除率与地榆皂苷-Ⅰ含量为评价指标,通过单因素试验优选纯化工艺。结果:地榆总皂苷最佳工艺条件为加8倍量70%乙醇回流提取2次,每次1.5 h,提取液加10%氢氧化钠溶液调p H 12~14,静置12 h,离心去沉淀,上清液用10%氢氧化钠溶液调p H 12~13,静置24 h,离心,沉淀于70℃减压干燥至干,用30倍量无水乙醇回流30 min,减压回收乙醇至有固形物析出,固形物减压干燥12 h。地榆总皂苷纯度91.32%。结论:优选的地榆总皂苷提取纯化工艺路线简单、稳定,制备的地榆总皂苷得率、纯度高,适合工业化生产。     

应用Box-Behnken设计优化地榆皂苷的闪式提取工艺研究

目的采用Box-Behnken设计进行工艺优化,研究地榆皂苷的闪式提取工艺。方法采用闪式提取法,以溶媒用量、乙醇体积分数、提取时间3个因素为主要影响因素,以总皂苷转移率、地榆皂苷I转移率、总评归一值(OD)为评价指标进行Box-Behnken设计试验,考察最佳工艺。结果最佳工艺为溶媒用量9倍、乙醇体积分数75%、提取时间2 min,对最佳工艺进行验证,结果实测平均值为总皂苷转移率82.20%、地榆皂苷I转移率88.73%,RSD分别为1.59%、2.72%,与模型预测值非常接近,说明该模型比较可靠。结论本方法科学、合理、可行,为进一步地榆制剂研究奠定基础。     

地榆总皂苷对鸡胚血管新生的影响

目的:研究地榆总皂苷对鸡胚血管新生的抑制作用。方法:采用平皿法,观察地榆总皂苷对鸡胚卵黄囊膜(YSM)和绒毛尿囊膜(CAM)血管的作用。结果:给药48h后,空白对照组对鸡胚卵黄囊血管网未见有明显抑制作用,地榆总皂苷高、中剂量组显著抑制鸡胚卵黄囊血管网的发育,使血管走形发生改变,抑制率分别为90%、80%,与空白对照组比均有显著性差异(P<0.01);空白对照组CAM新生微血管数目为(56.7±8.6)条,地榆总皂苷高、中剂量组新生微血管数目分别为(13.5±3.7)、(21.7±5.3)条,血管生成受到了明显的抑制,抑制率分别为76.2%、61.7%,与空白对照组比均有显著性差异(P<0.01)。结论:地榆总皂苷能显著抑制鸡胚血管的新生,具有一定的抗血管生成活性,且其作用效果呈剂量依赖性。     

海星总皂苷抗肿瘤作用的实验研究

目的：对从南海海星Craspidastet hesperus Muller et troschel中分离提取的总苷进行抗肿瘤活性研究。方法：采用体外肿瘤细胞培养和体内抗肿瘤实验方法。测定海星总皂苷的体外和体内抗肿瘤作用。结果：海星总皂苷对体外培养的小鼠移植性肿瘤肉瘤S180、肝癌H22细胞有直接的细胞毒作用;能明显的抑制小鼠生肉瘤S180的生长,延长H22腹水小鼠的生存时间。结论：海星总皂苷具有明显的抗肿瘤活性,可望用于恶性肿瘤的治疗。     

竹节参总皂苷对高血脂模型小鼠的影响作用

目的:研究竹节参总皂苷降血脂的药理活性。方法:腹腔注射75%蛋黄生理盐水溶液0.02mL.g-1建立小鼠高血脂动物模型。随机分为空白对照组、高脂模型组、2个阳性对照组(包括血脂康组及辛伐他汀组)和2个试验组(Z1高剂量组及Z1低剂量组)。空白对照组给予生理盐水,高脂模型组给予蛋黄乳溶液和生理盐水,阳性对照组和试验组以CMC-Na混悬,配成混悬药液样品。测定给药后动物血浆中TG、TC、LDL-C、HDL-C的mmol.L-1浓度。结果:阳性对照组和试验组各项指标与模型组比较,差异均有显著性。结论:竹节参总皂苷具有一定的降血脂的作用,并呈现量效关系。     

人参果皂苷对犬实验性心肌梗死的保护作用

 目的研究人参果皂苷(Ginseng fruit saponins,GFS)对犬实验性心肌梗死的保护作用。方法犬结扎左冠状动脉前降支6 h造成急性心肌梗死模型,同时应用GFS进行治疗,标测24个点心外膜心电图,求出心肌缺血程度(△Σ-ST)及缺血范围(△N-ST),计算心肌梗死面积(MIS),测定血清磷酸肌酸激酶(CPK)、天门冬氨酸氨基转换酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及脂质过氧化物(LPO)和游离脂肪酸(FFA)含量。结果GFS静脉滴注2.5～10 mg·kg^-1,能明显降低实验性心肌梗死犬的△Σ-ST及△N-ST,缩小MIS,降低血清CPK,LDH及AST活性,亦能明显降低血清LPO、FFA含量,提高SOD及GSH-Px活性。结论GFS对犬实验性心肌梗死具有明显的保护作用,可能与其改善心肌代谢,提高内源性抗氧化酶活性,减轻氧自由基的损伤有关。     

麦冬总皂苷对实验性高血糖小鼠的降糖作用

目的：研究麦冬总皂苷对实验性糖尿病小鼠血糖的影响。方法：麦冬总皂苷（100,200,400 mg/kg）灌胃,测定正常小鼠及由四氧嘧啶、肾上腺素、葡萄糖所致高血糖小鼠血糖水平。结果：麦冬总皂苷对四氧嘧啶、肾上腺素及葡萄糖引起的小鼠高血糖均有抑制作用。结论：麦冬总皂苷对实验性高血糖小鼠有明显的降糖作用。     

黄芪皂甙提高心脏保存效果的实验研究

目的：在的Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ心脏保存液（ｍＥＣ液）中添加黄芪皂甙（ＡＳ），观察黄芪皂甙对心脏保存的作用。方法：将Ｗｉｓｔａｒ大鼠分成ｍＥＣ组和ＡＳ组。分别用ｍＥＣ液和含ＡＳ的ｍＥＣ液冷保存离体大鼠心脏６ｈ后，用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ离体鼠心模型再灌注３０ｍｉｎ，研究保存后的心脏功能及抗氧自由基损伤作用。结果：ＡＳ组与ｍＥＣ组比较，保存后心脏的心功能和冠脉流量明显好于ｍＥＣ组（Ｐ〈０．０５），     

三七花总皂苷降压作用研究

目的观察三七花总皂苷对自发性高血压大鼠(SHR)血压、心率的影响作用时间特点。方法以SHR为研究对象,ACL-NIBP鼠尾无创血压测量分析系统,记录30分钟、60分钟、90分钟、120分钟、180分钟、240分钟分别监测大鼠尾动脉收缩压、舒张压、心率。结果三七花总皂苷30分钟左右出现降压效果,90～180分钟达高峰,240分钟血压开始出现回升,对心率无影响。结论三七花总皂苷具有降低血压作用。     

反相高效液相色谱法测定地榆中金丝桃苷的含量

目的 建立地榆中金丝桃苷的高效液相色谱含量测定方法.方法 采用RP-HPLC测定,C18柱,流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(46:54),用三乙胺调pH至3.0,流速1.0 ml·min-1,检测波长370 nm;供试品溶液的制备采用甲醇超声提取.结果 测定了不同产地不同批次的地榆药材,金丝桃苷质量分数在0.052%-0.291%.结论 该方法灵敏快速,准确可靠,可用于地榆的质量控制.     

基于网络药理学技术的中药地榆活性成分及药理作用研究

目的 基于多个数据库软件,根据网络药理学方法探讨地榆主要成分的药理活性,并分析和预测其潜在的作用机制。方法 首先在TCMSP数据库中检索并收集中药地榆的主要成分,然后利用基因、蛋白等分析工具分析所获得成分的相关作用靶点以及信号通路。再应用DAVID在线软件,将地榆成分所对应的靶点进行富集和通路注释,并采用Cytoscape软件构建地榆的成分-靶点-信号通路网络互作图,根据互作图对地榆的传统活性进行深入分析。结果 数据库检索到地榆的成分中有20个主要活性成分,在治疗癌症、炎症、内分泌代谢疾病、神经变性疾病、免疫疾病等方面具有较强的作用。这些成分共作用于230个靶点,并涉及主要富集通路118条。结论 本研究发现地榆在抗肿瘤抗氧化等传统药理作用研究中体现出了中药多成分、多靶点、多途径的作用特点,该结果可为后续对地榆的药理药效进行全面认识和深入研究提供参考和指导。     

HPLC测定地榆配方颗粒中没食子酸的含量

目的:建立高效液相色谱法测定地榆配方颗粒中没食子酸的定量分析方法,为制定其质量标准及开发利用提供科学依据。方法:色谱柱:Diamonsil C18(2)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.05%磷酸(5∶95),检测波长272 nm,柱温20℃。结果:在上述色谱条件下,没食子酸进样量在0.009 72～0.097 2 mg·kg-1与其峰面积成良好的线性关系,回归方程Y=34 347.2X+10.887(r=0.999 9);平均加样回收率为99.83%,RSD 2.3%(n=6)。结论:该测定方法简便易行,结果准确,重复性好,可用于地榆配方颗粒中没食子酸的含量测定,并为其提供了有一定参考价值的实验数据。     

一枝黄花及其总黄酮总皂苷利尿作用的实验研究

目的：探讨一枝黄花煎剂及其总黄酮、总皂苷的利尿作用。方法：采用家兔输尿管法研究一枝黄花煎剂、总黄酮及总皂苷的利尿作用,并用原子吸收分光光度计测定家兔尿中Na^＋、K^＋浓度,比较用药前后尿量与离子的变化。结果：一枝黄花煎剂和总皂可以显著提高家兔排尿量（P〈0．01）,产生较强的利尿作用,作用维持时间在2h以上;一枝黄花总黄酮可以明显提高家兔排尿量（P〈0.05）,产生明显利尿作用,作用时间在2h以内。一枝黄花煎剂、总黄酮、总皂苷均可使单位容积尿液中的尿Na^＋、尿K^＋排出量减少（P〈0．05）,表现为排水大于排钠排钾。结论：一枝黄花具有较强的利尿作用,一枝黄花总黄酮和总皂苷是一枝黄花发挥利尿作用的有效成分,且两成分之间在利尿作用方面可能有协同作用。一枝黄花及其总黄酮、总皂苷均可作为保钾利尿药使用。