实验性溶血性贫血对大白鼠脾脏影响的组织学与组织化学的研究(一)

用 APH 造或大白鼠体内急性溶血性贫血,观察腺脏的组织学变化及核酸等组织化学变化。注射 APH 后,动物除很快出现明显的贫血外,脾脏还有明显增大,颜色由绛红变为棕黑。上述变化的程度与注射次数相平行。APH 溶血时,脾脏的组织学改变表现为:脾红髓淤血,脾窦扩大,脾索结构紊乱,其中的淋巴细胞减少,中性粒细胞和巨噬细胞增多;脾小体逐渐缩小,结构不完整;T.B 淋巴细胞比例倒置。注射APH 三天后,脾红髓内的 RNA 含量明显增加,第9天达高峰,第13天有所降低,但仍高于正常。脾脏是体内最大的淋巴器官,许多因素都可引起脾脏的形态学改变,这方面曾有过不少报导。贫血是临床上常见的病症,溶血性贫血患者明显的体征之一是脾肿大。本教研室在探讨“血虚”动物模型的实验研究中观察到用乙酰苯肼造成溶血性贫血的大白鼠也有明显的脾肿大。由此提出一个问题:溶血性贫血时脾脏肿大的机制是什么?其组织学和组织化学变化的特点是什么?对于上述问题的研究,过去已有一些报导,但有关溶血性贫血条件下脾脏组织化学的研究尚少报导。本实验对乙酰苯肼造成急性溶血性贫血的大白鼠脾脏进行了组织学和组织化学的观察,并进一步分析其中细胞成分的形态结构及几种化学物质的改变过程,从而为脾脏的研究工作积累一些实验形态学资料。     

巨噬细胞在激活过程中形态和功能的改变

实验用石腊油,糖元及淀粉溶液给小鼠腹腔注射,经过16小时,腹腔巨噬细胞(Macrophae-Mφ)的数目开始增多,体积变大。细胞内乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶及酸性醋酸萘酚酯酶的活性显著增强;三磷酸腺苷酶、琥珀酸脱氢酶及氨基肽酶的活性稍增强。巨噬细菌吞噬鸡红细胞的能力增强。至注后72小时,上述改变更加明显。表明糖元、淀粉、石腊油可以激活小鼠腹腔巨噬细胞。     

大剂量醋酸可的松对大白鼠脾脏作用的组织学及组织化学研究

一、实验共用成年雄性大白鼠49只,体重为140-210克。其中9只不加任T可处理作为对照。其余40只分别经臀部肌肉注射可的松或氢化可的松25毫克/每日一次。注射分一次、三次、六次以及注六次后恢复4,5和9日后杀死取材。二、随注射次数的增加和实验时间的延长大鼠脾脏逐渐萎缩。到注六次或注六次后恢复4和5日时可缩小到正常的1/3以上。其内部结构也相应地引起了十分明显地变化。红白髓中淋巴细胞迅速减少,到注六次恢复4和5日时脾小体几乎完全消失,红白髓难于辨认。此时整个脾脏几乎被红髓占据。注射六次后恢复9日时,虽有些恢复,但仍未达正常水平。三、实验动物脾脏淋巴细胞中RNA合量减少,尤其大中淋巴细胞较为明显。固缩和破碎的淋巴细胞核普遍存在,尤其脾小体处为多,有些已被亘噬细胞吞噬。而中性粒细胞的数量增加,井多量的堆积于脾小体周围。旦噬细胞及其吞噬的含铁血黄素显著增多。 蛋白质、蛋白质结合一SH和DNA含量未见变化。四、磷酸酶的活性变化,以ALP和ACP较为显著。ALP在注射初期升高,以注射三次者为最明显,随后酶活性一值下降。而ACP活性在实验时期一直上升。前者以中性粒细胞为代表,后者以网状细胞为代表。三磷酸腺普酸酶在注射初期上升,之后则逐渐恢复正常。5一核试酸酶、非特异性磷酸酶和醋酶的活性虽有变化,但不明显。     

猪苓多糖和氢化考的松对小鼠腹腔巨噬细胞的作用——细胞化学研究

小鼠注射猪苓多糖和氢化考的松7天后,取其腹腔巨噬细胞,进行细胞化学的定性及定位;并用 MPV-2型显微分光光度计进行定量研究。发现应用氢化考的松后,细胞内的 AcPase、ATPase 和 ANAE 活性下降,多糖含量减少。注射猪苓多糖以后,ATPase、AcPase 和 ANAE 活性增强,多糖含量显著增多。猪苓多糖和氢化考的松同时注射,酶活性及多糖含量与对照组无明显区别。     

自体脾移植的血管供应

脾脏有一个独特的脉管系统,能使有免疫活性的细胞暴露血液循环中。脾脏的清除功能主要是排列在髓索和边缘窦中的巨噬细胞的吞噬作用。当活性不强的细胞通过红髓时而被清除。当脾脏切除或失去功能时,这种独特、有效的抗原捕捉功能便消失。自体脾组织移植后血供及其功能恢复如何呢? 本文作者对自体脾组织移植的血供进行了观察。自体脾移植术后,将大鼠麻醉,开胸经胸主动     

实验性糖尿病大鼠巨噬细胞内酶活性及吞噬功能的研究

目的 研究实验性糖尿病大鼠巨噬细胞内酶活性及其吞噬功能。方法 用四氧嘧啶腹腔注射复制ＳＤ大鼠糖尿病动物模型,测定大鼠肺泡及腹腔巨噬细胞内酸性磷酸酶,精氨酸酶,乳酸脱氢酶及异柠檬酸脱氢酶的活性并测定腹腔及肺泡巨噬细胞对中性红的吞噬能力。结果糖尿病大鼠肺泡及腹腔巨噬细胞内４种酶性均高于对照组,其对中性红的吞噬能力也大于对照组。结论 糖尿病时巨噬细胞处于激活状态,此激活的巨噬细胞可能参与糖尿病并发症之     

实验性家兔骨折愈合过程中甲状旁腺的组织学和组织化学的变化

本实验应用成年雄性家兔95只,其中18只作为对照,其余的动物以外科手术造成桡骨中段缺损,分别在不同时间杀死,取出甲状旁腺进行常规组织学和组织化学观察。骨折后第三天家兔甲状旁腺细胞体积增大,空泡增多,蛋白质茚三酮-雪夫反应和α-酰胺羧基反应增强。第七天后上述变化更加显著;核糖核酸含量明显增高;糖原显著减少;酸性磷酸酶,非特异性酯酶,琥珀酸脱氢酶和毛细血管内皮的碱性磷酸酶的活性也相应增高。骨折后17天酯酶和琥珀酸脱氢酶恢复正常,21天糖原和碱性磷酸酶也开始恢复,而其它反应到35天尚未恢复到正常水平。文中讨论了以上各种变化和甲状旁腺的机能的意义,以及它们和骨折愈合各期局部变化的关系。     

细脚拟青霉对大鼠肺泡巨噬细胞的激活作用

用细脚拟青霉水提取物给正常及环磷酰胺所致免疫抑制大鼠灌胃２１ｄ，灌洗并培养肺泡巨噬细胞，用生化方法测定巨噬细胞内乳酸脱氢酶和精氨酸酶的活性，并进一步观察巨噬细胞摄取中性红的能力。结果表明：细脚拟青霉水提取物可显著提高正常及环磷酰胺所致免疫抑制大鼠肺泡巨噬细胞内乳酸脱氢酶和精氨酸酶的活性。并增强肺泡巨噬细胞摄取中性红的能力。提示：细脚拟青霉对肺泡巨噬细胞具有激活作用。     

醋酸氢化可的松对大白鼠肝脏作用的组织学及组织化学研究

1.本实验用成年雄雌性大白鼠20只,体重为100—200克。其中六只动物作为对照。其余动物经臀部肌肉注射氢化可的松2.5毫克/100克体重,每日一次,分为注射三次、六次和注射六次后生活9日三组。大部分动物(16只雄性动物)经绝食24小时后杀死取材,分别进行组织学及组织化学观察。2.注射氢化可的松后动物体重下降,肝重略有增加,肝重/体重百分比也随之升高。3.实验动物肝细胞中,嗜伊红性颗粒、核糖核酸以及蛋白质均显著的减少。与此相反,肝糖原合量急剧增加。与其相伴,磷酸化酶的活性也趋于增强。非特异性酯酶的活性明显的降低。4.碱性磷酸酶的变化不一致。酸性磷酸酶、三磷酸腺苷酸酶的活性以及脱氧核糖核酸的含量均无变化。脂类含量及琥珀酸脱氢酶的活性也无改变。     

大鼠脾脏的组织发生

应用光镜、扫描电镜和透射电镜对大鼠脾脏的组织发生进行了形态学观察。脾原基发生在妊娠第16天,继则血管出现,血窦形成,脾脏造血开始。妊娠第19天,网状细胞围绕着发生中的小动脉形成动脉周围鞘。随之淋巴细胞聚集于小动脉周围。出生后,各种血细胞造血相继终止,红、白髓不断发育成熟,生后第5天观察到淋巴树突细胞。边缘带、边缘窦和脾小结相继出现。生后第25天观察到原始生发中心。第40天后,脾脏各部结构基本发育完善。     

榄香烯复合瘤苗HSP70与HSP70BCG对巨噬细胞功能影响的比较

目的 :比较Hca F榄香烯复合瘤苗HSP70 (HSP70 HTCV)和卡介苗HSP70 (HSP70 BCG)对小鼠腹腔或脾脏巨噬细胞功能的影响 ,分析HSP70 HTCV诱导抗瘤免疫作用的机制。方法 :给正常BALB C小鼠腹腔注射HSP70 HTCV 或HSP70 BCG ,共 3次 ,并用多聚甲醛固定的Hca F细胞体内冲击。收集腹腔和脾脏的巨噬细胞 ,并用HSP70 HTCV或HSP70 BCG 体外再致敏 ,用MTT法测细胞毒活性、细胞的增殖和分泌TNF的能力 ,用中性红吞噬试验测巨噬细胞的吞噬能力。结果 :用HSP70 HTCV 免疫小鼠的腹腔巨噬细胞对Hca F的细胞毒活性强于用HSP70 BCG 免疫小鼠的腹腔巨噬细胞 (4 2 7%VS 31 0 % ,P <0 0 5 ) ;用HPS70 HTCV 免疫小鼠的脾脏巨噬细胞分泌TNF的能力高于用HSP70 BCG免疫小鼠的脾脏巨噬细胞 ,细胞培养上清对L92 9的细胞毒活性分别为 5 7 4 %和 35 9% (P <0 0 5 ) ,脾脏巨噬细胞吞噬中性红的能力的变化两组之间无明显差别 ;免疫巨噬细胞的上述功能均高于未经免疫的对照小鼠的巨噬细胞 (P <0 0 1) ,而三组巨噬细胞的增殖改变无明显差别 (P >0 0 5 )。结论 :HSP70 HTCV 或HSP70 BCG 免疫都能增强巨噬细胞功能 ,但HSP70 HTCV免疫诱导的巨噬细胞对肿瘤细胞有更强的杀伤活性     

当归多糖对衰老模型大鼠脾脏结构与功能的影响

目的 探讨当归多糖（ASP）对衰老模型大鼠脾脏结构与功能影响及其机制。 方法 SD大鼠随机分为正常对照组,ASP对照组,衰老模型组,ASP衰老模型组,每组10只。衰老模型组皮下注射D-半乳糖（120mg/kg）qd×42d;ASP衰老模型组注射D-半乳糖的剂量与时间同衰老模型组,第15天起腹腔注射ASP (100 mg/kg) qd×28d;正常对照组皮下注射等量生理盐水qd×42d;ASP对照组注射等量生理盐水qd×14d,第15天起腹腔注射ASP（同ASP衰老模型组)。药物注射完成后第2天,取脾脏测定脾指数,石蜡切片观察脾脏显微形态学;衰老β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色观察脾细胞百分率,CCK8测定脾细胞对刀豆蛋白A刺激的增殖能力;流式细胞术检测脾细胞周期与活性氧簇（ROS）含量; ELISA检测脾细胞分泌TNF-α、GM-CSF能力与丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶(SOD)含量;Western blotting 检测衰老相关蛋白P53、P21、RB蛋白表达。 结果 与正常对照组比较,D-半乳糖致衰老模型组大鼠脾指数,脾脏白髓面积比例,脾细胞对刀豆蛋白A刺激的增殖能力,S期比例及TNF-α、GM-CSF的分泌能力,SOD活性明显降低;脾细胞的SA-β-Gal阳性率,G₁期与G₂/M期细胞比例,ROS、MDA含量,P53、P21、RB蛋白表达显著增高。与衰老模型组比较,ASP使D-半乳糖致衰老模型大鼠脾指数,脾脏白髓面积比例,脾细胞对刀豆蛋白A刺激的增殖能力,S期比例与TNF-α、GM-CSF的分泌能力,SOD活性明显提高;脾细胞SA-β-Gal阳性率,G₁期及G₂/M期细胞比例,ROS、MDA含量,P53、P21、RB蛋白表达有显著抑制作用。
结论 D-半乳糖复制的衰老模型大鼠脾脏结构与功能损伤明显,当归多糖对其致衰损伤有明确的保护作用。     

家兔实验性胃溃疡期间甲状腺的组织学和组织化学变化(Ⅱ.滤泡旁细胞)

用成年雄性家兔49只,分为正常组、溃疡组和盐水组。正常组是未经处理的正常家兔;溃疡组为在无菌条件下,打开动物腹腔,用少量冰醋酸注入胃粘膜下层,造成实验性胃溃疡;盐水组模拟手术,用生理盐水注入胃粘膜下层。手术后1～28天,分批取甲状腺,进行组织学和组织化学的观察。实验结果表明,各组甲状腺滤泡旁细胞没有明显的组织学变化。正常家兔甲状腺滤泡旁细胞的乙酰胆碱酯酶、非特异性酯酶和酸性磷酸酶反应很强,乙酰胆碱酯酶有一定的特异性;硫胺素焦磷酸酶反应很弱;琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶反应弱阳性。盐水组的甲状腺滤泡旁细胞在手术后1～7天,某些组织化学产生一定的变化;在手术后14～28天恢复正常。溃疡组的甲状腺滤泡旁细胞在手术后1～3天,各组织化学反应与盐水组相似;手术后7～28天,许多组织化学反应均在一定程度上比盐水组的反应增强。本文讨论了以上组织化学变化的意义,提示在实验性胃溃疡期间,甲状腺滤泡旁细胞可能参与了调节活动。     

山药多糖促进小鼠巨噬细胞向M1型极化

目的考察山药多糖对小鼠巨噬细胞极化的影响。方法在体外实验中,将RAW264.7细胞与山药多糖共孵育24 h,采用MTT法检测细胞活性;利用Griess试剂盒检测NO分泌水平;采用CBA法检测细胞因子分泌水平;采用流式细胞术检测细胞表面MHC-Ⅱ类分子表达水平。在动物实验中,将Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、山药多糖低剂量组(50 mg/kg)和高剂量组(200 mg/kg),每天灌胃给药1次连续15 d;第11~15天除正常组外,其余小鼠腹腔注射氢化可的松。末次给药第2天取脾和胸腺称质量,计算免疫器官指数;利用流式细胞术检测腹腔巨噬细胞MHC-Ⅱ类分子表达水平。结果山药多糖剂量低于500μg/ml时对RAW264.7细胞活性无显著影响,但可以促进细胞分泌NO和细胞因子IL-6、TNF-α、MCP-1,提高细胞表达MHC-Ⅱ类分子的水平。动物实验结果显示山药多糖可以恢复免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞MHC-Ⅱ类分子表达水平。结论研究表明山药多糖可以促进巨噬细胞向M1型极化。     

约氏疟原虫感染小鼠的巨噬细胞表面吞噬相关分子的研究

为探讨致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL)感染抵抗型DBA/2小鼠的脾巨噬细胞发挥吞噬功能的作用机制,本试验利用Giemsa薄血膜染色,光学显微镜计数红细胞感染率,观察巨噬细胞的吞噬功能;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清中抗P.y.17XL特异性IgG抗体水平;采用流式细胞技术(FACS)动态检测脾巨噬细胞表面膜分子CD36、CD64表达水平。结果表明,DBA/2小鼠红细胞感染率于感染后第7天高达31.87%,约第15天自愈;感染小鼠脾巨噬细胞吞噬能力于感染后第5天开始增强,至第10天吞噬率高达95%,随后维持于高水平;巨噬细胞表面分子CD36于感染后第3天开始升高,至第10天达到峰值;CD64表达水平于感染后第5天开始升高,随后持续维持于高水平;小鼠血清中抗P.y.17XL特异性IgG抗体水平在感染后第10天开始出现有意义的升高。结果显示,在P.y.17XL感染过程中,巨噬细胞通过表面分子CD36和CD64分别介导的非调理性和调理性吞噬方式杀伤疟原虫,提示巨噬细胞是DBA/2小鼠发挥抗疟保护性免疫的重要效应细胞。     

红色奴卡放线菌细胞壁骨架制剂对小鼠腹腔渗出细胞及细胞内环核苷酸含量影响

本实验表明，红色奴卡放线菌细胞壁骨架（Nr-CWS)制剂小鼠腹腔内注射，使腹腔渗出细胞（PEC）明显增加。第1天以多形核粒细胞增加为主很快恢复，4天以后巨噬细胞和淋巴细胞增加显著，吞噬细胞吞噬功能也明显增强，在巨噬细胞吞噬功能增强的同时，PEC中cGMP含量亦显著增加，两者呈平行关系，PEC中cAMP含量在注射Nr-CWS制剂后第2天即显著增加，第6天达高峰，然后逐渐下降至正常水平。     

槲皮素对小鼠动情周期及免疫功能的调节作用

目的:研究槲皮素对小鼠动情周期的影响及其免疫效应,并探讨其作用机制。方法:对小鼠连续7天灌胃给予浓度为2.5 mg/ml的槲皮素药液0.5 ml/(天.只),通过阴道脱落细胞学检查法判断未经产雌鼠所处的动情周期,并利用MTT法检测脾淋巴细胞转化率、α-醋酸萘酯酶法检测T淋巴细胞数量、碳廓清实验检测吞噬细胞活性、定量溶血分光光度法检测IgM抗体生成量。结果:槲皮素显著延长了小鼠的动情周期,并可以明显增加淋巴细胞转化率和T淋巴细胞数目、增强小鼠巨噬细胞的吞噬活性和IgM抗体的生成。结论:槲皮素对小鼠子宫内膜的周期性变化造成了影响,对小鼠机体起到了免疫增强作用。     

分娩后小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能

本文证明分娩后4天小鼠腹腔巨噬细胞和注射葡聚糖后的小鼠腹腔巨噬细胞,以及正常未妊娠小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞和酵母菌的功力明显不同。其中。分娩后4天和注射葡聚糖腹腔巨噬细胞,其吞噬率和吞噬指数都明显高于对照组。该结果表明分娩后小鼠体内单核——吞噬细胞系统活性增强,吞噬活性增高。     

高压、高压氧对小鼠大脑酶活性的影响——组织化学研究

本文研究高压和高压氧对小鼠大脑碱性磷酸酶等6种酶的活性影响。30只小鼠随机分为空白对照组、高压组和高压氧组。高压组动物置于加压舱内,高压氧组动物置于同一加压舱中的小套舱内,分别给予5ATA的空气和纯氧,停留37分钟。高压处理结束,按组织化学要求取材、固定、切片和酶活性反应。实验结果表明:高压氧可致动物小痉挛;高压环境对动物机体无明显刺激影响;高压氧使碱性磷酸酶(AKP)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)、乳酸脱氢酶(LDH)、乙酰胆碱酯酶(AChE)活性增强,高压环境使上述4种酶活性略有增强,和空白对照组比差别不明显。高压和高压氧使单胺氧化酶(MAO)和过氧化物酶活性略有降低。本文对高压氧环境导致机体行为变化和6种酶活性改变的意义作了讨论。     

豚鼠胃肠壁内神经丛的能量代谢的酶和基本物质的组织化学观察

本文研究了正常成年豚鼠胃肠壁内神经丛神经元(简称肠神经元)的镁激活的三磷酸腺苷酶(Mg~(++)-ATPase)、钙激活的三磷酸腺芏酶(Ca~(++)-ATPase)、细胞色素氧化酶(CCO)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6 PDH)和葡萄糖-6-磷酸酶(G 6Pase),并对糖类、蛋白质、脂类和核酸做了观察。除光镜的半定量观察外,并用显微光度计对两种ATPase做了定量测量。光镜的半定量结果和显微光度计测得的数据经计算机做了统计学处理。本文的结果表明,肠神经元具有上述各种酶活性,提示神经元与这些酶有关的代谢活跃。但粘膜下丛与肠肌丛酶活性差异显著,前者SDH活性较强,后者LDH、G6 PDH和两种ATPase活性较强。据此推测,两神经丛神经元的主要糖代谢方式、能量代谢以及机能活跃程度有明显的差别。此外,胃肠各段肠肌丛酶活性强度不一,十二指肠和近端结肠各种酶活性最强,盲肠最弱。本文的结果表明,肠神经元的代谢和功能确有相当的差别,但酶活性的差异同神经元类型的关系如何,有待继续研究。