以pAAV为载体的RANi沉默E2F3对前列腺癌LNCAP细胞系的影响

  目的  探讨以pAAV为载体的RANi沉默E2F3对前列腺癌LNCAP细胞系的影响及其作用机制。  方法  用pAAV-siE2F3穿梭质粒转染LNCAP细胞, 流式细胞计数检测转染后细胞凋亡, 细胞周期变化; Westernblot检测转染后E2F3蛋白与Bcl-2蛋白表达的变化, 分析E2F3蛋白与Bcl-2蛋白变化相关性。  结果  与对照组相比, pAAV-siE2F3穿梭质粒有效的沉默了E2F3蛋白表达(P < 0.01), pAAV-siE2F3穿梭质粒组细胞凋亡明显增加(P < 0.01), G₁期细胞明显增加(P < 0.01), S期明显减少(P < 0.01), pAAV-siE2F3穿梭质粒组与对照组相比, Bcl-2蛋白表达明显减少(P < 0.01)。  结论  本实验初步明确了E2F3在前列腺癌细胞周期调控细胞凋亡方面起的作用, E2F3可能通过影响Bcl-2表达调控细胞凋亡; 为进一步阐明E2F3基因与前列腺癌的关系, 及以E2F3为靶点的前列腺癌基因治疗提供理论基础。      

E2F转录因子与肿瘤基因治疗

E2F转录因子与细胞增殖、凋亡及癌变密切相关.各种与E2F转录因子相关的肿瘤基因治疗已在动物实验中取得良好效果.早期基因1A区的2保守区(E1A-CR2)缺失和携带E2F1启动子的增殖型腺病毒载体,可选择性在多种肿瘤细胞中增殖,其增殖能力甚至超过了野生腺病毒,是非常有潜力的肿瘤基因治疗手段.现对E2F转录因子在细胞周期调控、凋亡、肿瘤发生及相关肿瘤基因治疗等方面的研究作一综述.     

E2F8在恶性肿瘤中的作用及机制研究进展

E2F8是较晚发现的E2F转录子家族成员。它参与调控细胞周期、细胞增殖、分化、细胞凋亡以及DNA损伤修复。有研究提示，E2F8参与恶性肿瘤的发生发展，在多种恶性肿瘤中表达水平升高，并且其转录水平与肿瘤病人的不良预后密切相关。因此，E2F8有望成为恶性肿瘤的诊断标志物或治疗新靶点。这篇综述总结了近几年有关E2F8在恶性肿瘤中的作用及其机制研究的新进展，以期为恶性肿瘤的临床诊断和治疗提供参考依据。     

E2F基因与肿瘤放射敏感性研究进展

目的 肿瘤放射敏感性是影响肿瘤放射治疗效果的重要原因.在众多影响放射敏感性的因素中,细胞周期、细胞凋亡和DNA损伤修复发挥重要作用.E2F基因家族通过编码E2Fs转录因子家族,调控细胞周期、细胞凋亡等生命活动.本研究旨在总结E2F基因与肿瘤细胞放射敏感性的关系的研究进展.方法 应用PubMed、CNKI等数据库,以“E2F,放疗敏感性,辐射敏感性”等为关键词,检索1990-12-2017-05的中英文文献,共检索到英文文献1 560篇,中文文献634篇.纳入标准:(1)E2F的结构其对细胞周期,细胞凋亡,DNA损伤调控的相关研究;(2)肿瘤细胞辐射敏感性影响因素的临床、基础研究;(3)E2F基因与肿瘤放射敏感性关系的基础研究.排除标准:(1)讨论与辐射敏感性因素关系不紧密的研究;(2)探究不与E2F基因相互作用的基因和细胞因子的研究.符合分析的文献126篇,72篇纳入分析.结果 E2F基因通过PRb/E2F通路调控G1/S期转变,进而调控细胞周期进程.细胞DNA损伤后,E2F1通过p53依赖型和非p53依赖型方式诱导细胞凋亡,成为肿瘤放射治疗的潜在靶点.结论 探究E2F基因与肿瘤放射敏感性的关系将可能成为未来提高肿瘤放射敏感性的重要思路.     

E2F转录因子与肿瘤基因治疗

E2F转录因子与细胞增殖、凋亡及癌变密切相关。各种与E2F转录因子相关的肿瘤基因治疗已在动物实验中取得良好效果。早期基因1A区的2保守区(E1A-CR2)缺失和携带E2F1启动子的增殖型腺病毒载体，可选择性在多种肿瘤细胞中增殖，其增殖能力甚至超过了野生腺病毒，是非常有潜力的肿瘤基因治疗手段。现对E2F转录因子在细胞周期调控、凋亡、肿瘤发生及相关肿瘤基因治疗等方面的研究作一综述。     

PI3K/Akt信号转导通路在恶性肿瘤中的研究进展

信号转导通路的异常改变是肿瘤细胞的重要生物学特性,其中PI3K/Akt信号转导通路在维持细胞恶性生物学特性中起重要作用。细胞在一系列内外因素的作用下,通过启动PI3K/Akt信号转导通路,诱导细胞的增殖、分化,避免细胞发生凋亡。近年来研究表明,PI3K/Akt信号转导通路在肿瘤细胞恶性增殖、血管新生和转移以及对放化疗的拮抗中起着重要作用。本文就PI3K/Akt信号转导通路的结构特点、调节过程及其对放化疗的影响作一综述。     

转录因子E2F3对浸润性膀胱癌细胞因子的调控反应

目的 E2F3在浸润性膀胱癌的发生、发展中起着重要作用,但是其具体调控分子机制尚不明确,本研究旨在探讨E2F3对浸润性膀胱癌细胞调控的分子机制.方法 采用RNAi技术使E2F3在浸润性膀胱癌细胞系中低表达,通过蛋白质印迹法、PCR进行检测及后续实验,通过CHIP实验等观察E2F3在HT1376和TCCSUP细胞系中与信号转导及转录激活因子3(STAT3)和Etsl之间及其相关侵袭细胞因子的调节关系.结果 E2F3、STAT3和Etsl基因在高表达E2F3细胞系(HT1376和TCCSUP)中成功被沉默,CHIP测序显示,E2F3与Etsl和STAT3基因启动子结合增多只出现在过表达膀胱癌细胞系中;免疫组化和蛋白质印迹法检测结果显示,E2F3过表达细胞癌中,Etsl和STAT3基因过表达,二者呈正相关,r=0.421,P=0.023;E2F3高表达同时相关细胞因子也增加(IL-1、IL-8、TNF-α和VEGFA等),Etsl和STAT3被沉默后,上述细胞因子也相对降低,CHIP实验显示,与低表达E2F3膀胱癌相比,在高表达E2F3膀胱癌中,Etsl和STAT3启动子活性增强.结论 E2F3过表达在人膀胱癌细胞系中通过Etsl和STAT3调节免疫相关基因的表达,E2F3的过表达促进Etsl和STAT3的表达.     

E2F1对 TFDP3 表达的调控及其对前列腺癌PC3细胞凋亡的影响

目的：构建含TFDP3基因启动子和荧光素酶报告基因的重组载体pGL3-TFDP3-promoter,观察E2F1对TFDP3转录及表达的调控作用以及TFDP3对E2F1诱导肿瘤细胞凋亡的影响。方法：以人前列腺癌PC3细胞系基因组DNA为模板,PCR扩增TFDP3启动子序列并克隆入荧光素酶报告基因载体,与E2F1表达载体pCMV-E2F1-HA瞬时单独或共同转染PC3细胞,测定荧光素酶活性以观察E2F1对TFDP3启动子的调控作用,Western blotting检测pCMV-E2F1-HA转染对PC3细胞内TFDP3表达的影响,流式细胞术检测TFDP3与E2F1相互作用对前列腺癌细胞凋亡的影响。结果：成功构建TFDP3基因启动子重组质粒pGL3-TFDP3-promoter,与E2F1表达载体pCMV-E2F1-HA共转染PC3细胞后,TFDP3启动子诱导的荧光素酶活性较单独转染pGL3-TFDP3-promoter显著升高[（1.14±0.06）vs（0.61±0.05）, P<0.05]。转染pCMV-E2F1-HA的PC3细胞的TFDP3蛋白表达是未转染细胞的2.7倍[（0.24±0.03）vs（0.09±0.02）, P<0.05]。pCMV-E2F1-HA转染后PC3细胞凋亡率较未转染组显著上升[（7.10±0.003）% vs（2.66±0.001)%,P<0.05],而pCMV-E2F1-HA与pcDNA3.1-TFDP3共转染后细胞凋亡率较pCMV-E2F1-HA组显著下降[（4.92±0.002）% vs（7.10±0.003）%,P<0.05]。结论：E2F1可增强TFDP3启动子的活性,增加TFDP3蛋白的表达,其可能通过此机制抑制E2F1诱导的前列腺癌细胞凋亡。     

E2F因子与表皮细胞的增殖和凋亡

近 10年来 ,有关细胞周期和细胞增殖的研究有了惊人的发展 ,而有关 2个肿瘤抑制因子pRB和p5 3的研究尤其受到关注。目前普遍认为 ,这 2个因子是与其他一系列肿瘤相关基因和蛋白共同作用 ,通过多种通道发挥肿瘤抑制活性的。E2F因子作为 1个重要的细胞周期调控因子 ,既促进细胞增殖又参与了对细胞凋亡的调控 ,其与 pRB、p5 3的密切关系已日益受到重视。1　E2F转录因子概述1.1　E2F因子的结构和分类E2F蛋白因子 (E2factor)最初是在腺病毒的E2启动子中被发现的 ,因其具有激活此类启动子的作用 ,因而得名[1] 。E2F因子最简单的活性形式是 …     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

Assessment of the degree of carcinogenicity of small doses of nitrites

Chronic experiments on CBA and C57B1 mice and acute experiments on CBA mice established: (a) carcinogenic effect of sodium nitrite given continuously with drinking water (0.1; 1.0 and 10.0 maximum allowable concentration) in combination with morpholine fed with bread, and (b) endogenous synthesis of nitrosomorpholine as a result of simultaneous intragastric administration of same doses of sodium nitrite and morpholine. Also, nitrosomorpholine and N-nitrosodimethylamine synthesis was observed in vitro following addition of low-dose sodium nitrite, morpholine and amidopyrine to human gastric juice. Carcinogenic hazard associated with low-dose nitrite consumption in humans is discussed.     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

中晚期贲门癌148例的外科治疗

目的　总结贲门癌手术治疗影响生存率的因素 ,提供今后工作参考。方法　对 14 8例经手术治疗的贲门癌患者进行术后并发症、绝对生存率的X2 检验。结果　本组切除率为 94.5 9% ,近半胃切除占 72 .14 % ,1、3、5年生存率分别为 67.9%、45 %和 2 4.3 %。病期、外侵程度和淋巴结转移等因素对 5年生存率有显著影响 (P <0 .0 1)。术后并发症以吻合口瘘及肺癌并发症为多见 ,其发生率为 3 .6% ,手术死亡率 1.4%。结论　提高生存率的关键在于早期诊断 ,根治手术和术后积极综合治疗。     

胆囊癌29例分析

目的探索胆囊癌的防治方法。方法分析29例胆囊癌病人临床资料、治疗方法及结果。结果术前诊断明确者21例，剖腹探查发现已属晚期，9例为Ⅳ期行根治术，12例为Ⅴ期未行根治术，均于术后1年内死亡。术前怀疑胆囊癌者5例，剖腹探查冰冻切片证实为Ⅴ期及Ⅳ期者各1例，Ⅴ期未行根治术，Ⅳ期行根治术，均于术后1年内死亡；Ⅲ期者3例，行胆囊癌根治术分别于术后10月、13月、17月死亡。2例术中冰冻切片发现的Ⅱ期胆囊癌，行胆囊癌根治术，分别于术后23月、26月死亡。1例意外胆囊癌属Ⅰ期胆囊癌，术后5年半死亡。结论要减少胆囊癌危害，重在及时治疗胆囊结石。