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相似文献
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1.
目的:阐述As2O3对慢性粒细胞白血病(CML)原代细胞BCR-ABL及信号转导的影响。方法:采用免疫沉淀、蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)活性测定和Western印迹、实时定量PCR等方法。结果:1.0μmol/L和2.0μmol/L As2O3作用48h,CML患者骨髓单个核细胞BCR/ABL蛋白含量下调,0.5μmol/L时无明显改变。在0.5μmol/L As2O3作用下STAT1蛋白下调,1.5μmol/L和2.0μmol/L时下调更明显。P27蛋白无变化。As2O3作用60h,可使CML患者骨髓单个核细胞BCR-ABL蛋白PTK活性轻度下降。As2O3对bcr-abl融合基因的mRNA表达无明显影响。结论:As2O3下调BCR-ABL蛋白STAT1蛋白水平,减弱BCR-ABL信号的下传。As2O3下调PTK活性。  相似文献   

2.
急性髓系白血病82例患者VEGF与MMP-2、MMP-9的相关性研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
为了探讨急性髓系白血病(AML)患者中血管内皮生长因子(VEGF)与基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的相互关系及二者在AML中的意义,采用半定量RT—PCR技术检测AML患者与正常人骨髓单个核细胞(MNC)MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA、VEOF mRNA的表达,用明胶酶谱的方法测定原代MNC和HL-60细胞分泌的MMP-2、MMP-9的活性。应用ELISA方法检测AML患者血清中VEGF蛋白的水平,分析VEGF和MMP-2、MMP-9 mRNA之间的关系。结果显示:AML患者MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA与VEGF mRNA的表达和VEGF蛋白水平呈正相关,缓解期患者和正常对照无相关性;VEGF阳性组发生髓外浸润率明显高于阴性组;VEOF上调HL-60细胞中bcl-2的表达:结论:AML患者中MMP-2,MMP-9的表达和VEGF具有正相关性,VEGF可以上调部分AML患者中MMP-2,MMP-9的表达,VEOF可能与MMP-2,MMP-9共同参与了白血病髓外浸润的发生。  相似文献   

3.
为了探讨急性白血病(AL)患者骨髓细胞中有丝分裂早期检查点Chfr基因的表达及其意义,对46例初诊未治疗的AL患者骨髓单个核细胞,用RT—PCR和免疫组织化学的方法检测Chfr基因mRNA及蛋白的表达,并与正常人骨髓单个核细胞进行对照。结果表明:免疫组织化学和RT—PCR分析显示。28例急性髓细胞白血病(AML)中的15例,18例急性淋巴细胞白血病(ALL)中的13例骨髓单个核细胞Chfr基因mRNA和蛋白的表达与正常对照相比显著下降,同时Chfr基因表达异常病例染色体检查存在核型异常。结论:急性白血病骨髓细胞有丝分裂检查点Chfr基因表达受损,可能在白血病发病中具有重要作用。  相似文献   

4.
为了研究三氧化二砷(As2O3)诱导人类骨髓增生异常综合征难治性贫血伴原始细胞过多型(MDS—RAEB)细胞株MUTZ-1细胞凋亡的端粒酶调控机制,采用端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附试验(TRAP—ELISA)检测端粒酶活性;RT—PCR法检测端粒酶逆转录酶(hTERT)、TRF1(TTAGGG repeat binding factor 1)、TRF2(TTAGGG repeat binding factor 2)、bcl-2、bax等基因mRNA水平的表达;磷脂酰丝氨酸(PS)转位等方法检测细胞凋亡,结果表明:1—8μmol/L As2O3诱导MUTZ-1细胞凋亡呈时间、浓度依赖关系。在该浓度范围内,As2O3可下调细胞端粒酶活性。且端粒酶活性下调与凋亡细胞阳性率呈明显负相关(r=一0.938,P=0.018)。MUTZ-1细胞经As,01作用后,hTERT基因mRNA表达下调,并与端粒酶活性变化呈正相关(r=0.783,P=0.022),但As2O3对TRF1及TRF2基因mRNA表达没有明显影响.MUTZ-1细胞端粒酶活性受抑制同时,伴有bcl-2 mRNA表达下调及bcl-2/bax比值下降结论:As2O3可能通过抑制细胞端粒酶活性及hTERT表达,诱导MUTZ-1细胞凋亡。As2O3抑制MUTZ-1细胞端粒酶活性可能是诱导该凋亡机制之一。  相似文献   

5.
本研究旨在探讨白血病患者骨髓单个核细胞中结缔组织生长因子(CTGF)、富含半胱氨酸蛋白61(CYR61)、血管内皮生长因子-c(VEGF—C)和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)mRNA及蛋白的表达水平以及它们在白血病发生、发展、浸润转移中的作用和临床意义。初发白血病100例患者,26例完全缓解后急性白血病患者,30例对照者纳入本研究。收集骨髓单个核细胞,应用realtimePCR和Westernblot分别检测白血病患者及对照者CTGF、CYR61、VEGF-C、VEGFR-2mRNA及蛋白的表达水平。结果表明,急性白血病患者骨髓中上述4种因子mRNA、蛋白水平明显高于对照组(P〈0.05)。急性白血病缓解后只有CTGFmRNA表达与对照组比较有差异(P〈0.05),且CTGFmRNA表达在急性白血病不同骨髓增生中有统计学意义(P〈0.05)。CTGF蛋白表达在白血病不同染色体核型组有差异(P〈0.05),CYR61和VEGF—C蛋白表达在急性白血病不同程度骨髓增生组中比较差异有统计学意义(P〈0.05)。CML组CTGF、CYR61、VEGF—CmRNA和蛋白表达高于对照组(P〈0.05),CLL组CTGF和CYR61蛋白表达水平高于对照组。在性别、髓外浸润等因素分组比较中,上述4种因子mRNA和蛋白表达水平比较均无差异有统计学意义(P〉0.05)。在相关性分析中,白血病患者上述4种因子mRNA表达水平与骨髓原始细胞计数呈正相关(P〈0.05),CTGF、CYR61、VEGF—C蛋白表达水平与其呈正相关(P〈0.05)。除了VEGFR-2与骨髓原始细胞计数无相关性外,这些因子的mRNA及蛋白表达水平与骨髓原始细胞计数呈正相关。结论:CYR61、CTGF、VEGF-C和VEGFR-2mRNA和蛋白表达在急慢性白血病中都有作用。在急性白血病(AML/ALL)中上述4种因子高表达,在CML中除了VEGFR-2外其他因子也高表达,多数因子的表达与骨髓原始细胞计数呈正相关。联合阻断这些相关的血管性因子可能对白血病靶向治疗有重要作用。  相似文献   

6.
目的探讨三氧化二砷(As2O3)对K562细胞的血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)表达水平和基质金属蛋白酶2、9(MMP-2、9)活性的影响。方法用MTT法测定As2O3对K562细胞的毒性,酶联免疫吸附试验测定细胞上清中VEGF含量,流式细胞术检测细胞的VEGFR表达率,明胶酶谱法半定量测定细胞上清中MMP-2、9的活性。结果①Mar法检测K562细胞的,IC50为(2.12±0.11)μmol/L,0.4~6.4μmol/LAs2O3可显著抑制K562细胞的增殖(P<0.05)。②0.05μmol/L As2O3对VEGF无明显影响(P>0.05);0.4和3.2μmol/LAs2O3可明显下调VEGF表达(P<0.05);As2O3对VEGFR的表达无明显影响(P>0.05)。③MMP-2、9经0.05μmol/L As2O3处理72h、0.4和3.2μmol/L As2O3处理24、48和72h均可显著抑制K562细胞MMP-2、9的活性(P<0.05),这种抑制作用随As2O3浓度增加和作用时间延长而逐渐增强。结论As2O3可下调K562细胞VEGF的表达和抑制MMP-2、9的活性。  相似文献   

7.
本研究探讨急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者骨髓细胞中基质金属蛋白酶-2和-9(MMP-2,MMP-9)的表达及临床意义。采用半定量RT-PCR方法检测初治、复发B-ALL患者和正常对照骨髓中单个核细胞MMP-2,MMP-9mRNA的表达。采用明胶酶谱检测B-ALL患者和正常对照骨髓单个核细胞孵育上清中MMP-2,MMP-9的酶活性。结果表明,初治、复发组B—ALL患者中MMP-2表达率明显高于正常对照组(P〈0.05);MMP-9表达率明显低于正常对照组(P〈0.05)。髓外浸润组患者MMP-2和MMP-9表达率均明显高于无髓外浸润组(P〈0.05),而MMP-2/MMP-9(+)组髓外浸润发生率明显高于MMP-2/MMP-9(-)组。高危组B—ALL患者MMP-9表达率明显高于标危组,而两组间MMP-2表达率无显著性差异(P〉0.05)。结论:B-ALL患者白血病细胞可以产生MMP-2,MMP-9,可能参与了B-ALL的髓外浸润,MMP-9表达可能提示预后不良。  相似文献   

8.
本研究观察小发夹RNA对白血病细胞血管内皮生长N子受体flt-1基因表达的抑制作用并探讨其对白血病细胞侵袭能力的影响及作用机制。采用脂质体介导的方法将构建的人flt-1基N特异性shRNA真核表达载体转染入K562细胞,用(3418抗性筛选获得阳性克隆;抽提基因组DNA,用PCR方法验证shRNA基因对K562细胞的转染;以RT—PCR和免疫印迹反应检测flt-1mRNA和蛋白表达量的变化;用Boyden小室体外侵袭实验检测白血病细胞的侵袭能力;RT~PCR方法检测白血病细胞MMP-2和MMP-9的表达。结果表明,flt-1基因特异性shRNA真核表达载体转染入白血病细胞株K562,G418筛选2周获得阳性克隆;PCR检测证实shRNA基因整合入白血病细胞基因DNA;携有shRNA的flt-1基因能明显下调白血病细胞内flt-1基因mRNA表达水平;设计的2种不同flt-1shRNA序列能不同程度干扰flt—1基因和蛋白在细胞中的表达,两纽阳性细胞中flt-1基因表达抑制率分别为46.1%和65.4%;flt—1 shRNA转染白血病细胞系K562细胞后,MMP-2和MMP-9mRNA表达水平均较转染前明显下降;阳性细胞穿透人工重组基底膜的能力(4.3±1.2)%较对照组(12.7±1.9)%及(9.6±1.7)%明显降低(P〈0.01)。结论:VEGF受体flt-1特异性shRNA的真核表达载体能够高效转染入白血病细胞株K562,有效抑制flt-1基因的表达,并使白血病细胞体外侵袭能力减弱,MMP-2和MMP-9mRNA表达水平下降。这提示VEGF可能通过与其受体结合调控MMP-2和MMP-9的方式,参与白血病细胞的转移。  相似文献   

9.
本研究检测了组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)基因在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者骨髓单个核细胞中的表达水平及其甲基化状态,探讨其与AML发生、发展及危险度分层的关系.分离33例初治、19例完全缓解、12例复发/难治AML患者及15例单纯缺铁性贫血患者(对照组)骨髓单个核细胞,采用实时定量PCR (RT-PCR)检测TFPI-2 mRNA在其中的表达水平,采用甲基化特异性PCR (MSP)检测启动子CpG岛甲基化状态.结果表明,初治组、完全缓解组及复发/难治组TFPI-2 mRNA表达水平均低于对照组(P<0.05),复发/难治组TFPI-2 mRNA表达水平明显低于初治组(P =0.006),与完全缓解组相比,初治组TFPI-2 mRNA表达水平也显著降低(P=0.030);64例AML患者TFPI-2基因启动子甲基化频率为64.63% (42/64),其中初治组、完全缓解组和复发/难治组患者中TFPI-2基因启动子甲基化频率分别为66.67%(22/33)、52.63% (10/19)和83.33% (10/12) (P> 0.05);甲基化AML患者与非甲基化AML患者骨髓单个核细胞中TFPI-2 mRNA的相对表达量分别为0.165(0.005-2.099)和0.597(0.011-2.787) (P <0.05),在对照组骨髓单个核细胞中未检测到TFPI-2基因启动子的甲基化;初治组经2个疗程化疗后,完全缓解组(CR)骨髓单个核细胞TFPI-2 mRNA表达量显著高于未完全缓解组(PR+ NR) (P=0.031).结论:在AML中TFPI-2基因表达下调或沉默与启动子甲基化有关,TFPI-2基因表达水平及启动子甲基化状态可以作为AML分层及病情进展的指标.  相似文献   

10.
本研究探讨As2O3对肿瘤细胞中COX-2、MMP-2和MMP-9表达的影响。以体外培养SGC7901和K562细胞为对象,加不同浓度As2O3干预40和72小时。采用Western blot法和荧光定量RT—PCR法分别测定COX-2、MMP.2和MMP-9的表达和SGC7901细胞内的COX-2和MMP-2 mRNA的水平。结果显示:As2O3干预后SGC7901和K562细胞内的COX-2、MMP-2和MMP-9的表达水平呈时间和剂量依赖性减低;MMP-2 mRNA和COX-2 mRNA减低。结论:三氧化二砷可抑制肿瘤细胞COX-2、MMP-2和MMP-9表达,这一机制可能参与砷剂抑制肿瘤血管生成的过程。  相似文献   

11.
We report the results of density functional theory calculations on the atomic and electronic structure of solids formed by assembling A2B2PN (A = Ge and Sn, B = Cl, Br, and I) inorganic double helices. The calculations have been performed using a generalized gradient approximation for the exchange–correlation functional and including van der Waals interactions. Our results show that the double helices crystallize in a monoclinic lattice with van der Waals type weak interactions between the double helices. In all cases except Ge2Cl2PN, the solids are stable with a binding energy between the double helices ranging from 0.06 eV per atom to 0.09 eV per atom and inter-double helices separation of more than 3.33 Å. All the solids are semiconducting. Further calculations have been done by using meta-GGA with a modified Becke–Johnson functional to obtain better band gaps, which are found to lie in the range of 0.91 eV to 1.49 eV. In the case of Ge2Br2PN the solid is a direct band gap semiconductor although the isolated double helix has an indirect band gap and it is suggested to be interesting for photovoltaic, and other optoelectronic applications. The charge transfer between the atoms has been studied using Bader charge analysis and the DDEC6 method in the CHARGEMOL program, which suggests charge transfer from the outer helix to the inner helix.

We report the results of density functional theory calculations on the atomic and electronic structure of solids formed by assembling A2B2PN (A = Ge and Sn, B = Cl, Br, and I) inorganic double helices.  相似文献   

12.
目的 探讨有丝分裂原激酶MEKK2对IL-2生成的影响。方法 用MEKK2和JNK激酶活性测定、荧光素酶报告基因检测、逆转录-聚合酶链反应及Western blot等方法,检测在PHA/抗CD28抗体刺激Jurkat细胞后MEKK2对IL-2转录和翻译的影响结果经PHA/抗CD28抗体刺激后,亲本Jurkat细胞AP1和IL-2启动子荧光素酶报告基因活性分别增加4倍和5倍。而MEKK2功能域灭活的Jurkat细胞AP1和IL-2启动子荧光素酶报告基因活性仅各增加1倍。经PHA/抗CD28抗体刺激后,亲本Jurkat细胞IL-2 mRNA的转录和IL-2蛋白的表达明显增加,而MEKK2功能域灭活的Jurkat细胞IL-2 mRNA的转录和IL-2蛋白的表达无明显增加。结论 MEKK2在IL-2的生成过程中起重要的调节作用,MEKK2可以作为药物作用的靶点,从而筛选有效药物抑制免疫反应,提高移植物抗宿主病和自身免疫性疾病治疗的疗效。  相似文献   

13.
Previous in vivo studies indicate that 2-hydroxyestradiol (2OHE) attenuates cardiovascular and renal diseases. In vitro studies suggest that the biological effects of 2OHE are mediated by 2-methoxyestradiol (2MEOE) after methylation of 2OHE by catechol-O-methyltransferase (COMT). This study tested the hypothesis that in vivo 2OHE is a prodrug of 2MEOE. We administered to male rats i.v. boluses of either 2OHE or 2MEOE and measured plasma levels of 2OHE and 2MEOE by gas chromatography-mass spectrometry at various time points after drug administration. After administration of 2OHE, plasma levels of 2OHE declined extremely rapidly [t(1/2(1)) = 0.94 min and t(1/2(2)) = 10.2 min] becoming undetectable after 45 min. Concomitant with the disappearance of 2OHE, 2MEOE occurred and then declined [t(1/2(1)) = 7.9 min and t(1/2(2)) = 24.9 min]. The peak concentration and total exposure (area under the curve) for 2OHE were much lower than for 2MEOE. 2OHE had a much higher plasma clearance (CL) and volume of distribution (V(d)) compared with 2MEOE (2OHE: CL = 1215 ml min(-1) kg(-1) and V(d) = 17,875 ml/kg; 2MEOE: CL = 50 ml min(-1) kg(-1) and V(d) = 1760 ml/kg). After administration of 2MEOE, plasma levels of 2MEOE declined [t(1/2(1)) = 2.5 min and t(1/2(2)) = 20.2 min] with a plasma CL of 50 ml min(-1) kg(-1) and a V(d) of 1500 ml/kg. We could not detect 2OHE in plasma from rats receiving 2MEOE. We conclude that the conversion of 2OHE to 2MEOE is so efficient that in terms of 2MEOE exposure, administration of 2OHE is bioequivalent to administration of 2MEOE itself.  相似文献   

14.
目的 研究环氧合酶(COX)-2、基质金属蛋白酶(MMP)-2及其抑制因子(TIMP-2)在乳腺癌组织中的蛋白表达及其相互关系.方法 建立组织芯片平台,应用免疫组织化学S-P法检测127例乳腺癌组织COX-2、MMP-2和TIMP-2蛋白的表达情况.结果 乳腺癌COX-2、MMP-2和TIMP-2阳性率分别为81.1%(103/127)、96.9%(123/127)和60.6%(77/127);COX-2的表达与乳腺癌腋淋巴结转移和TNM分期均呈正相关(P<0.01,P<0.05),与孕激素受体表达呈负相关(P<0.05);MMP-2蛋白表达与COX-2表达呈显著正相关(r=0.290,P<0.01).结论 乳腺癌COX-2表达状况与肿瘤侵袭转移有密切关系,COX-2可能通过调控MMP-2表达来促进肿瘤侵袭转移.  相似文献   

15.
目的 研究高血压病人定时定量运动前后氧及二氧化碳分压的变化,以指导病人正常的运动。方法 选取 30例高血压病人,按 I、Ⅱ、Ⅲ期高血压分类,分别测定其运动前、后氧及二氧化碳分压,另选取 30例无高血压病和心、脑、肾等疾病者为对照组。结果 高血压患者动脉氧分压运动后较运动前均有不同程度的升高, I、Ⅱ期高血压病患者动脉氧分压较Ⅲ期运动后比运动前有明显提高。结论 适当的运动可能有助于 I、Ⅱ期高血压病人降压治疗。  相似文献   

16.
目的探讨对老年 2型糖尿病患者行空气净化前后动脉血氧分压 (PaO2 )和二氧化碳分压 (PaCO2 )的变化。方法 5 5例老年 2型糖尿病患者分为观察组 ( 2 9例 )和对照组 ( 2 6例 )。观察组患者所处疗养室每日 2 4h进行空气净化。分别于净化前、净化后第 2、3、4周抽取动脉血检测PaO2 、PaCO2 、pH值和氧饱和度。 结果空气净化 4周后 ,观察组PaO2 、PaCO2 、氧饱和度有明显改善 (P <0 .0 1) ,pH值无显著性变化。结论空气净化能改善老年 2型糖尿病患者的PaO2 、PaCO2 。  相似文献   

17.
目的:根据临床实验室室内质量控制和室间质量评价的累积数据评价22项生化检测项目的测量不确定度。方法收集检验科2013年1~6月22项生化检测项目的室内质量控制数据和2012~2014年间常规化学室内质控和室间质评的数据,依据 Nordtest准则,分别计算与精密度和偏倚相关的不确定度分量,然后评估合成标准不确定度和扩展不确定度。结果利用室内质控与室间质评数据可以逐步计算出22项生化检测项目的不确定度范围为4.24~24.88,其中 ALP的扩展不确定度最大,达到24.88;Na+的扩展不确定度最小,仅为4.24。各类指标的扩展不确定度范围如下:电解质(4.27~18.16,Na+最低,Mg最高);酶类(8.12~24.88,GGT最低,ALP最高);小分子物质(4.88~12.44,GLU最低,Cr最高);蛋白与脂类(4.78~13.1,TC最低,TG最高)。结论使用累积的室内质控与室间质评数据评定生化定量检测项目的不确定度简便可行,可用于定期评估检验结果准确性。  相似文献   

18.
Group-10 transition metal dichalcogenide (TMD) materials have recently attracted considerable attention in optoelectronics applications. However, so far their quantum dot (QD) counterparts with photoluminescence (PL) nature still remain to be revealed. In this study, 2 typical types of group-10 TMD material (PdS2 and PdSe2) QDs are fabricated via liquid exfoliation using N-methyl-2-pyrrolidone (NMP) solvent. The absorption and PL spectra of these QD solutions are studied, exhibiting excitation wavelength-dependent behaviors and large Stokes shifts. Furthermore, the quantum yield and decay lifetime are also investigated and analyzed. The obtained results suggest promising optoelectronic applications with group-10 TMD QDs in the future.

PdS2 and PdSe2 QDs are fabricated via liquid exfoliation using NMP solvent. The PL behaviors of these QD solutions are studied. The obtained results suggest promising optoelectronic applications with group-10 TMD QDs in the future.  相似文献   

19.
South Carolina's Greenville Hospital System (GHS) minimizes caregivers' exposure to blood and body fluid through a risk-reduction program that hinges on feedback from data analysis and frontline staff.  相似文献   

20.
Dysfunction of the nigrostriatal system is the major cause of Parkinson's disease (PD). This brain region is therefore an important target for gene delivery aiming at disease modeling and gene therapy. Recombinant adeno-associated viral (rAAV) vectors have been developed as efficient vehicles for gene transfer into the central nervous system. Recently, several serotypes have been described, with varying tropism for brain transduction. In light of the further development of a viral vector-mediated rat model for PD, we performed a comprehensive comparison of the transduction and tropism for dopaminergic neurons (DNs) in the adult Wistar rat substantia nigra (SN) of seven rAAV vector serotypes (rAAV 2/1, 2/2, 2/5, 2/6.2, 2/7, 2/8 and 2/9). All vectors were normalized by titer and volume, and stereotactically injected into the SN. Gene expression was assessed non-invasively and quantitatively in vivo by bioluminescence imaging at 2 and 5 weeks after injection, and was found to be stable over time. Immunohistochemistry at 6 weeks following injection revealed the most widespread enhanced green fluorescence protein expression and the highest number of positive nigral cells using rAAV 2/7, 2/9 and 2/1. The area transduced by rAAV 2/8 was smaller, but nevertheless almost equal numbers of nigral cells were targeted. Detailed confocal analysis revealed that serotype 2/7, 2/9, 2/1 and 2/8 transduced at least 70% of the DNs. In conclusion, these results show that various rAAV serotypes efficiently transduce nigral DNs, but significant differences in transgene expression pattern and level were observed.  相似文献   

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