胎盘滋养层细胞侵袭行为与MMP-2 和MMP-9的研究进展

胎盘适度侵入子宫壁是妊娠顺利进行的基础,该侵袭行为受到多维度调控网络影响,涉及诸多因素,侵袭过度或不足均与各类病理性妊娠互为因果,其中基质金属蛋白 (matrix metalloproteinase, MMP) -2和MMP-9与胎盘滋养层细胞的侵袭力密切相关,近年来在病理性妊娠研究中逐渐受到重视。本文以Pubmed、Web of Science、中国知网等为检索数据库,通过查阅分析归纳文献,系统总结胎盘滋养层细胞侵袭行为与MMP-2和MMP-9之间的关系及其主要影响因素。为进一步了解精确调控胎盘滋养层增殖和侵袭行为的基因及其影响、探索各种病理性妊娠情况下胎盘侵袭行为的异常提供研究思路;为从致病机制层面更深入探讨此类疾病的防治新方法提供方向。     

C型凝集素样受体CLEC-2在人滋养细胞系HTR-8/SVneo的表达与调控

目的研究C型凝集素样受体CLEC-2在人早孕期母胎界面滋养细胞的表达及调控。方法应用免疫细胞化学法和Western blot法检测人滋养细胞系HTR-8/SVneo中CLEC-2的表达;并观察不同浓度人绒毛膜促性腺激素（hCG）、孕激素及雌激素对其表达CLEC-2的影响。结果 HTR-8/SVneo显著表达CLEC-2。与对照组相比,2.5和5.0kU/LhCG处理组CLEC-2的表达上调;相反,经0～10-7mol/L浓度雌激素处理后,HTR-8/SVneo中CLEC-2的表达呈剂量依赖性降低;孕激素不影响CLEC-2的表达。结论 HTR-8/SVneo表达CLEC-2受hCG升调节、雌激素降调节;CLEC-2可能参与调节人早孕期滋养细胞的生物学行为,进而参与正常妊娠的维持。     

腺苷对人Müller细胞MMP-2和MMP-9mRNA表达的影响

目的 探讨腺苷受体在人Müller细胞中的表达情况以及腺苷(adenosine,ADO)对人Müller细胞中基质金属蛋白酶-2 (matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9 (matrix metalloproteinases-9,MMP-9) mRNA表达的影响.方法 ...     

慢性肝病与原发性肝癌中EGFR、MMP2、MMP9表达及比较

目的研究慢性肝病(CHD)与原发性肝癌(PHC)中表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达并进行比较.方法采用免疫组化(SP)法研究47例CHD与PHC组织中EGFR、MMP2、MMP9的表达.结果EGFR阳性定位于肝实质细胞浆中,MMP2、MMP9阳性定位于肝实质细胞和间质细胞浆中.EGFR在肝癌中的表达率(73.08%)显著高于CHD中(28.57%)(P<0.01).MMP2、MMP9在肝癌中阳性表达率完全一致(80.77%).MMP9在PHC中表达率(80.77%)显著高于CHD中(52.38%)(P<0.05).在CHD中MMP2、MMP9表达与EGFR有差异(P<0.01～0.05).结论EGFR高表达与PHC发生有关.MMP2、MMP9在PHC及CHD中作用机制可能不同.在前者能增加癌细胞浸润与转移的能力,在后者可能减少或抑制肝硬化的形成与发展.     

转染CTGF基因对乳腺癌细胞MMP－2及TIMP－2表达的影响

目的: 通过研究结缔组织生长因子（CTGF）基因对人乳腺癌MCF-7细胞株基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）表达的影响,深入探讨CTGF在乳腺癌侵袭和转移中的作用机制。方法: 采用脂质体介导法,将CTGF基因瞬时转染体外培养的人MCF-7细胞,并用免疫荧光、RT-PCR和蛋白质印迹法检测其转染成功与否;再采用蛋白质印迹法检测转基因MCF-7 MMP-2及TIMP-2表达改变。结果: 与对照组相比,转染CTGF基因的MCF-7,其CTGF mRNA和蛋白表达均显著增高,MMP-2蛋白表达水平显著增高,而TIMP-2蛋白表达水平显著降低。 结论: CTGF可能通过增加乳腺癌细胞MMP-2表达及抑制TIMP-2的生成而起到促进乳腺癌侵袭和转移的作用。     

HPV 感染及 MMP－2、MMP－7、MMP－9的表达与子宫颈癌相关性分析

目的：探讨子宫颈癌组织中的人乳头瘤病毒（ human papilloma virus , HPV ）感染及MMP－2、MMP－7、MMP－9的表达与临床病理资料的相关性。方法选取76例子宫颈癌组织,采用组织芯片技术、免疫组织化学技术和统计学方法,对检测HPV、MMP－2、MMP－7、MMP－9的各个指标间进行比较分析。结果 HPV感染与高分化子宫颈鳞癌有关（ P＜0．01）;与有无淋巴结转移和术前有无化疗有关（ P＜0．01）。 MMP－7和MMP－9在子宫颈癌组织中的表达与有无HPV感染有明显的相关性（ P＜0．001）,而MMP－2的表达与有无HPV感染无相关性（ P＞0．05）。结论在子宫颈癌组织中HPV感染,MMP－7和MMP－9的表达,与淋巴结转移有关。子宫颈癌术前经过一段时间的化疗后再进行手术,可预防肿瘤的复发。     

MMP 2/TIMP 2在妊娠输卵管黏膜中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制物-2(TIMP-2)与输卵管妊娠的关系.方法 选择输卵管妊娠组25例、正常输卵管组27例及正常宫内早孕组28例,采用免疫组织化学染色技术及半定量病理图像分析系统检测输卵管妊娠黏膜组织、正常输卵管黏膜组织及正常宫内早孕组子宫蜕膜组织中MMP-2及TIMP-2的表达.结果 MMP-2和TIMP-2阳性表达均在正常宫内早孕组最高,在输卵管妊娠组中较高,在正常输卵管组中最低,三组两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 MMP-2/TIMP-2参与了输卵管妊娠过程,且与输卵管妊娠缺乏蜕膜化反应有关.     

罗格列酮对肝星状细胞MMP 2、TIMP 1mRNA表达的影响

目的探讨罗格列酮对体外培养肝星状细胞MMP 2及TIMP 1基因表达的影响。方法采用HSC T6肝星状细胞系,经不同浓度的罗格列酮干预,采用RT PCRA法检测各组MMP 2及TIMP 1基因的表达情况。结果在10、20?μmol/L罗格列酮组,TIMP 1的表达较空白对照组明显降低(P＜0.05),而MMP 2的表达与空白对照组相比差异无统计学意义。结论罗格列酮的抗肝纤维化作用与抑制HSC表达TIMP 1有关。     

瘦素对HTR8-SVneo细胞增殖的影响及调控机制

目的研究瘦素(Leptin)对HTR8-SVneo滋养细胞系增殖的影响及对DNA结合和分化抑制剂(ID)分子表达水平的影响,探讨Leptin对HTR8-SVneo细胞增殖作用的调节机制。方法体外培养HTR8-SVneo滋养细胞,MTT法检测Leptin不同质量浓度(0、10、50、100、250、500 ng/mL)刺激后细胞增殖情况。HTR8-SVneo细胞培养体系中加入Leptin(0、100、500 ng/mL),RT-PCR检测瘦素受体(Leptin R)各亚型表达,实时定量PCR检测ID分子表达,Western Blot检测ID2表达。SiRNA干扰ID2分子后,分为Leptin(0 ng/mL)、Leptin(100 ng/mL)、Leptin(500 ng/mL)、Leptin(0 ng/mL)+ID2-siRNA、Leptin(100 ng/mL)+ID2-siRNA、Leptin(500 ng/mL)+ID2-siRNA,MTT检测Leptin对HTR8-SVneo滋养细胞增殖的影响。结果与Leptin(0 ng/mL)比较,高质量浓度Leptin(100、250、500 ng/mL)促进HTR8-SVneo细胞增殖(P<0.05);HTR8-SVneo细胞表达除HuB219.2外的全部受体亚型;Leptin以剂量依赖方式促进HTR8-SVneo细胞ID2分子及OB-RL表达(P<0.05);ID2-siRNA抑制ID2表达并逆转Leptin对滋养细胞增殖的促进作用。结论 Leptin可能通过Leptin R-ID2途径促进HTR8-SVneo细胞增殖,为阐明滋养细胞增殖调控机制提供了新的基础数据。     

IL-2对人滋养层细胞的增殖活性和HCG分泌的影响

目的 :探讨白细胞介素 2 (IL 2 )对体外培养的正常孕早期滋养层细胞的增殖活性和绒毛膜促性腺激素(HCG)分泌的调节作用。　方法 :选取培养至第 4代生长良好的滋养层细胞 ,加入不同浓度的IL 2继续培养 4 8h后 ,用四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色法测定细胞的增殖活性 ,用放射免疫法测定HCG浓度。　结果 :①与对照组相比较 ,IL 2在低浓度 (10 0U/ml、4 0 0U/ml)时促进滋养层细胞的增殖活性和HCG分泌 (P <0 .0 5 ) ;在高浓度 (16 0 0U/ml、6 4 0 0U/ml、2 5 6 0 0U/ml)时抑制滋养层细胞的增殖活性 (P <0 .0 5 ) ,而对HCG分泌无影响。②IL 2与滋养层细胞增殖性之间呈负相关 ,与HCG分泌水平之间无相关性 ;滋养层细胞的增殖活性与HCG分泌水平之间呈正相关。　结论 :①不同浓度的IL 2对滋养层细胞的增殖活性产生不同的作用 ,具有明显的量效关系 ,为病理性妊娠发病机制的研究提供了新的依据 ,也为临床抗早孕、异位妊娠的治疗提供新的思路。②IL 2可能不直接对滋养层细胞HCG的合成与释放产生调节作用。     

hCG对小鼠间充质细胞(K9)转醛醇酶活性的调节

目的:研究小鼠间充质细胞(K9)中人绒毛膜促性腺激素(hCG)对转醛醇酶(TAL)活性的调节. 方法:K9细胞培养,加hCG, cAMP孵化,测定TAL活性、Western blot检测TAL蛋白表达、Northern blot检测TAL mRNA表达、2D-Western blot测定TAL蛋白迁移表达. 结果:① hCG促使TAL mRNA表达升高. 2,4,8和16 h TAL mRNA表达密度的扫描结果依次为:hCG组(32.7±2.3),(62.2±3.5),(27.5 ±2.9)和(18.1±1.1),对照组(32.3±2.7),(25.2 ± 1.9),(31.4±3.3)和(22.5 ±2.6),其中4 h组间差异显著( P<0.01),8及16 h表达显著下降;②hCG对TAL蛋白表达无显著差异;③hCG和cAMP促使TAL活性升高,hCG组2,4,8,16和20 h的TAL活性依次为(417±33),(438±47),(508±24),(576±18)和(593±29) nkat/g,均高于同期对照组(288±18),(302±20),(334±24),(393±14)和(399±10 ) nkat/g,组间差异显著(P<0.05);④2D-Western blot:hCG导致TAL第二亚型出现新的蛋白迁移点b6,并向酸性端迁移. 结论:hCG促使小鼠K9细胞TAL的转录及活性升高,但hCG对TAL活性调节与转录水平无关,提示TAL活性调节发生在翻译后修饰,可能是通过第二信使cAMP促进了TAL磷酸化过程.     

滋养细胞肿瘤患者血清可溶性白细胞介素-2受体测定

应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定了５１例滋养细胞肿瘤患者及２８名正常非孕妇女血清可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ２Ｒ）和人绒毛膜促性腺激素β亚单位（ＨＣＧβ）水平，并将ＳＩＬ２Ｒ与ＨＣＧβ进行直线相关分析。结果：肿瘤患者血清ＳＩＬ２Ｒ与正常对照组比较差异不显著（Ｐ＞００５），而ＨＣＧβ则明显高于正常对照组（Ｐ＜００１）；相关分析ｒ＝０１７３５，Ｐ＞００５。结论：该患者血清ＳＩＬ２Ｒ的低水平可能是高水平的ＨＣＧβ所致     

卵巢癌3AO细胞株hCG受体特性的研究

目的建立酶受体分析法 (enzymereceptorassay ,ERA) ,并研究卵巢癌 3AO细胞hCG受体的结合特性。方法采用ERA ,通过竞争结合实验、受体结合的特异性实验、饱和结合实验测定 3AO细胞膜上hCG受体的特异性、饱和性 ,计算其最大结合容量 (Bmax)和亲和力 (Kd)。结果ERA测得 3AO细胞LH/hCG受体的Bmax为 14 2 .4ng/mg蛋白 ,亲和力Kd值为 16 .14 2ng/ml,未标记配体hCG抑制hCG受体对HRP—hCG特异结合的IC50 为 3.5 84 μg/ml。 结论hCG可能通过靶细胞膜上的特异性受体影响着卵巢癌的发生发展。     

商陆对器官培养的早孕绒毛hCG分泌的影响

目的 :探讨中药商陆对早孕绒毛人绒毛膜促性腺激素 (h CG)分泌的影响。方法 :用γ—免疫计数器测定早孕绒毛培养液中 h CG含量的变化。结果 :实验组培养液中 h CG的含量为 (19.7± 2 .9)μg/L ,对照组培养液中 h CG的含量为 (2 2 .2± 1.8)μg/L ,两组差异非常显著 (P <0 .0 1)。结论 :中药商陆对早孕绒毛 h CG的分泌具有明显的抑制作用     

明胶酶A及其特异性组织抑制剂在胎膜早破中的作用

目的:通过检测自发性胎膜早破患者和正常分娩产妇及择期剖宫产产妇胎膜组织中明胶酶A(MMP 2)及其特异性组织抑制剂(TIMP 2) mRNA和蛋白质的表达,探讨明胶酶A及其特异性组织抑制剂在正常分娩前后和病理状态胎膜中的表达及其作用。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和SP法对8例自发性胎膜早破患者、8例正常分娩产妇以及8例择期剖宫产产妇的胎膜组织中 MMP 2 和 TIMP 2 mRNA和蛋白的表达及定位进行检测。用光镜观察胎膜组织形态学特征的改变。结果: MMP 2 蛋白和mRNA在胎膜早破组表达明显高于正常分娩组和剖宫产组,两者比较,差异有显著性(P<0.05),而在正常分娩组的表达与剖宫产组比较差异无显著性 (P>0.05)。TIMP 2蛋白和mRNA在剖宫产组表达最高,正常分娩组次之,胎膜早破组最低,两两比较差异有显著性(P<0.05)。MMP 2在羊膜细胞内表达,在羊膜细胞的间叶细胞个别表达,强表达于绒毛膜的光滑的滋养细胞;TIMP 2表达于羊膜上皮细胞、网状细胞、绒毛膜滋养层。胎膜早破组的胎膜结构发生了明显改变。结论:胎膜早破组的胎膜中MMP 2的表达明显增高,而 TIMP 2 的表达明显降低,MMP 2 和 TIMP 2 的表达失调将导致胎膜基质的降解增加并最终导致胎膜的破裂。     

米非司酮对体外培养大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的影响

目的 :研究米非司酮对大鼠睾丸间质细胞 (Leydigcells)睾酮的基础分泌及促性腺激素刺激的睾酮分泌的影响。方法 :将雄性大鼠处死 ,取睾丸间质细胞加药进行体外培养 ,用放射免疫分析方法测定睾酮含量。结果 :10 μmol·L-1米非司酮对睾酮基础分泌和促性腺激素刺激的睾酮分泌的抑制率分别为 65 18% (P <0 0 0 1)、 72 78% (P <0 0 5 )。结论 :本研究表明米非司酮能直接影响睾丸甾体激素的合成     

“补肾健脾方”对早孕先兆流产患者内分泌的影响

目的：观察补肾健脾方治疗早孕先兆流产的疗效,探讨其临床内分泌作用机制。方法：75例早孕先兆流产患者作为病例组,分为3组,中药治疗组30例运用补肾健脾方治疗;中西医结合治疗组30例运用补肾健脾方、黄体酮和绒毛膜促性腺激素（HCG）治疗;西药治疗组15例运用黄体酮和HCG治疗;疗程2周,观察疗效。15例正常早孕妇女作为对照组。运用化学发光法检测病例组治疗前、后和对照组的孕酮（P）、B。HCG水平。结果：中药治疗组、中西医结合治疗组有效率均为90．0％,西药治疗组有效率为66．7％（P〈0．05）;中药治疗组、中西医结合治疗组、西药治疗组治疗前血清P、p—HCG水平明显低于对照组（P〈0．05）,治疗后各组均较治疗前明显升高（P〈0．05）,中药治疗组、西药治疗组血清P水平仍明显低于对照组（P〈0．05）,西药治疗组B—HCG水平仍明显低于对照组（P〈0．05）。结论：补肾健脾方治疗早孕先兆流产疗效显著,其机制与促进早孕期胎盘分泌HCG并使其分泌稳步上升,提高孕激素水平,改善黄体功能有关。     

绒毛膜促性腺激素(HCG)及表皮生长因子受体(EGFR)在人早孕滋养层细胞的表达

目的对早孕绒毛膜滋养层细胞中EGFR、HCG的表达作定位、定性研究.方法取停经45～55天健康妇女人工流产的绒毛组织,固定,石蜡包埋,切片,用ABC法进行抗HCG及抗EGFR免疫组织化学染色,光镜观察.结果合体滋养层细胞HCG强阳性反应,细胞滋养层细胞HCG阴性,部分中间型滋养层细胞HCG阴性或弱阳性;合体滋养层和中间型滋养层细胞胞质和核膜EGFR中度阳性,细胞滋养层细胞膜、核膜EGFR中度阳性、胞质弱阳性,各层滋养层细胞核EGFR弱阳性.结论为进一步研究EGF/EGFR调控滋养层细胞合成分泌HCG奠定了基础.