NADPH氧化酶2在AngⅡ促进高血压炎症因子IL-1β分泌中的意义

目的探讨NADPH氧化酶2（NOX2）在AngⅡ促进高血压炎症因子IL-1β分泌过程中的意义。方法分离雄性自发性高血压大鼠（SHR）外周血单个核细胞并进行培养,将细胞随机分为：空白对照组（A组）,AngⅡ组（B组）,AngⅡ＋NOX2抑制剂二苯基碘（DPI）组（C组）。分别检测单个核细胞NOX2蛋白、IL-1βmRNA及蛋白的表达。结果与A组比较,B组NOX2蛋白、IL-1βmRNA及蛋白的表达升高（P〈0.01或P〈0.05）;与B组比较,C组NOX2蛋白、IL-1β蛋白的表达降低（P〈0.01）,而IL-1βmRNA的表达无明显变化（P〉0.05）。结论 AngⅡ能通过上调单个核细胞NOX2的表达促进IL-1β蛋白的分泌。     

丹参酮ⅡA对大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的：探讨丹参酮ⅡA对大鼠肾间质纤维化的作用及机制。方法：30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丹参酮ⅡA组。结扎大鼠单侧输尿管建立肾间质纤维化动物模型。丹参酮ⅡA经腹腔注射，剂量为1．5mg／（kg·d）。术后第10天取梗阻侧肾组织作HE、Masson染色，观察肾间质病理改变。免疫组化法检测肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及Ⅰ型胶原的蛋白表达与定位。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测三者的mRNA水平。结果：模型组术后第10天梗阻侧出现明显的肾间质纤维化，肾组织TGF-β1、α—SMA和Ⅰ型胶原的蛋白及mRNA表达显著增加（P〈0．01）。丹参酮ⅡA组肾间质纤维化程度减轻，肾组织TGF-β1、α—sMA及Ⅰ型胶原表达下调（P〈0．05）。结论：丹参酮ⅡA对大鼠肾间质纤维化有明显的抑制作用，其机制可能与下调TGF-β1表达，抑制成纤维细胞增殖和表型转化，减少胶原沉积有关。     

强直性脊柱炎患者外周血Th17细胞比率及其相关细胞因子的表达

目的研究强直性脊柱炎（AS）不同疾病状态外周血Th17细胞比率及其相关细胞因子表达情况,探讨其与AS炎症活动的关系。方法41例AS患者按Bath强直性脊柱炎活动性分为活动组（n=22）和稳定组（n=19）,14例健康人作为对照。采用流式细胞术检测外周血11h17细胞比率,EMSA法检测血浆中的IL-17、IL-1β、IL-6、IL-23及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）蛋白水平。结果活动组外周血Th17细胞比率明显高于稳定组及对照组（P〈0．05或〈0．01）。活动组血浆中IL-17平均浓度以及IL-1β、IL-6、IL-23、TNF-α等表达水平均明显高于稳定组及对照组（P均〈0．01）;IL-17、IL-1β、IL-6、IL-23、TNF-α之间呈显著相关（P〈0．05或〈0．01）。结论Th17及相关细胞因子可能与AS炎症高度活动相关。     

强直性脊柱炎患者血浆IL-1β水平变化

目的观察强直性脊柱炎（AS）患者血浆IL-1β水平变化。方法采用ELISA法检测36例AS患者血浆中的IL-1β。结果强直性脊柱炎附着点指数（MASES）〉0者血浆IL-1β为（2．98±1．74）pg/ml,MASES=0者为（1．22±0．73）pg／mJ,两者比较,P〈0．05。MASES与血浆IL-1β水平呈正相关,r=0．448,P〈0．05。结论AS患者血浆IL-1β水平升高,IL—-1β与AS的发生发展有关。     

丹参酮ⅡA对急性胰腺炎相关性肺损伤的干预作用

[目的]研究丹参酮ⅡA对急性胰腺炎相关性肺损伤（APALI）的干预作用,并探讨其作用机制。[方法]SD大鼠随机分为3组：假手术（对照）组、APALI组及丹参酮ⅡA干预组,应用5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射建立大鼠APALI动物模型,观察各组肺组织中肺脏湿干重比、髓过氧化物酶（MPO）的活性、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）水平、细胞间黏附分子（CAM）的表达,同时比较各组肺组织损伤积分。[结果]与假手术对照组比较,APALI组肺组织肺脏湿干重比,MPO活性,TNF-αI、L-1β水平,ICAM的表达及肺组织病理损伤积分均显著增高（均P〈0.05）;丹参酮ⅡA干预组与APALI组相比,肺组织肺脏湿干重比,MPO活性,TNF-αI、L-1β水平,ICAM的表达及肺组织病理损伤积分均显著降低（均P〈0.05）;[结论]丹参酮ⅡA可以下调炎性因子的表达而减轻APALI的炎症反应。     

不同置换量连续性血液净化治疗对多器官功能障碍综合征患者细胞因子的影响

目的探讨不同置换量连续性血液净化（CBP）治疗对多器官功能障碍综合征（MODS）患者细胞因子的影响。方法将18例接受CBP治疗的MODS患者随机分为以下3组：A组6例,置换液量每小时〈35ml／kg;B组6例,置换液量每小时45ml／kg;C组6例,置换液量每小时〉60ml／kg。在治疗前,治疗后24、48、72小时观察急性生理学与慢性健康状况Ⅱ（APEACHEⅡ）评分变化,并测定血浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-10（IL-10）的水平。结果治疗48小时后,B组和C组APEACHE Ⅱ评分明显下降（P〈0．05）;治疗24小时后,B组和C组TNF-α、IL-1β水平下降（P〈0．05或P〈0．01）,与A组比较,差异有显著性（P〈0．05或P〈0．01）,各组IL-10水平与治疗前比较无显著性差异。结论每小时45ml／kg以上置换量CBP可清除多种细胞因子,改善临床状况。     

丹参酮ⅡA对肥厚心肌细胞核因子-κb的影响

目的　探讨丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )诱导的心肌细胞肥大的影响。　 方法　利用体外细胞培养技术 ,用AngⅡ刺激新生大鼠心肌细胞肥大 ,通过免疫组织化学方法观察丹参酮ⅡA对肥大心肌细胞核因子 (NF κB)表达的影响。　 结果　与正常细胞相比 ,AngⅡ组细胞直径明显增加 ,细胞核NF κB呈强表达。加入丹参酮ⅡA干预后 ,心肌细胞直径明显减小 ,NF κB表达减弱 (P <0 0 1)。　 结论　丹参酮ⅡA具有保护心肌 ,防止心肌肥厚作用 ,其抑制心肌细胞肥厚的机制可能与抑制NF κB表达有关     

IL-1β诱导肝星状细胞IL-1Ⅰ型受体及AP-1表达的研究

目的探讨白细胞介素1β（IL-1β）对大鼠肝星状细胞（HSC）IL-1Ⅰ型受体（IL-1RⅠ）及激活蛋白-1（AP-1）表达的诱导作用。方法应用流式细胞技术检测IL-1RⅠ蛋白表达;应用凝胶电泳移动抑制法测定AP-1的活性。结果IL-1β刺激HSC 2min后即见IL-1RⅠ表达增强,10min时达到高峰（P〈0．01）,随后有所降低,60min时仍保持较高的活化状态（P〈0．01）,120min后则基本接近初始水平;IL—1β作用HSC1、2和4h后,AP-1活性均较对照组明显增高（P〈0．01）。结论IL-1β以时间依赖方式诱导HSCIL-1RI及AP-1的表达。     

丹参和丹酚酸B对脐动脉平滑肌细胞迁移能力的影响

目的比较丹参及其提取物丹酚酸B对血管平滑肌细胞(VSMC)迁移能力的影响。方法培养脐动脉VSMC,采用15mg/ml丹参及80和160μg/ml丹酚酸B作为趋化物,15%含血清的培养基作为阳性对照趋化物,通过改良boyden chamber观察VSMC的迁移情况;采用实时定量RT-PCR观察迁移相关因子血小板衍化生长因子(PDGF)-BBmRNA表达。结果丹参及两种剂量丹酚酸B对VSMC迁移都存在抑制作用,其中以160μg/ml丹酚酸B抑制作用最强;高剂量丹酚酸B组抑制平滑肌迁移的作用强于丹参组和丹酚酸B低剂量组,提示应用合适剂量的丹酚酸B可以达到更好的平滑肌细胞迁移抑制作用;丹参和160μg/ml丹酚酸B对PDGF-BBmRNA表达存在抑制作用,与阳性对照组相比差异显著(P0.01),二者之间没有显著性差异(P0.05)。结论丹参和其单体丹酚酸B均可通过抑制PDGF表达,抑制VSMC迁移。     

丹参酮ⅡA治疗急性脑梗死的有效性和安全性评价

目的 观察丹参酮ⅡA治疗急性脑梗死的有效性和安全性。方法 60例急性脑梗死病人随机分为对照组和治疗组。对照组给予急性脑梗死常规方法治疗，治疗组在常规治疗基础上加用丹参酮ⅡA治疗。两组病例于治疗前、治疗后2周分别进行巴氏指数（BI）和神经功能缺损量表（CSS）评定，并测定超氧化物歧化酶（SOD）的活性及丙二醛（愀）的含量，观察丹参酮ⅡA治疗期间的不良反应。结果 两组治疗2周后CSS和BI评分均有所改善，但治疗组改善明显优于对照组（P〈0．01），两组治疗2周后血清SOD活性均升高。MDA含量均降低（P〈0．05），但治疗组明显优于对照组（P〈0．01），丹参酮ⅡA治疗期间无明显副反应发生。结论 丹参酮ⅡA治疗急性脑梗死疗效确切，安全可靠。     

严重急性呼吸综合征病毒N蛋白致人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)的炎症反应

目的研究SARS冠状病毒N蛋白致人Ⅱ型肺泡上皮细胞（A549）的炎症反应。方法采用噻唑蓝（MTT）法检测第24、48、72和96小时SARS冠状病毒N蛋白对人Ⅱ型肺泡上皮细胞（A549）生长活性的影响。采用ELISA检测SARS冠状病毒N蛋白作用后A549细胞培养上清液中IL-6、IL-10、转化生长因子-β1（TGF-β1）的浓度变化。用RNA提取试剂盒提取总RNA，RT-PCR半定量法检测A549细胞IL-6、IL-10、TGF-β1 mRNA及基质金属蛋白酶（MMP）-9 mRNA的表达。结果不同浓度N蛋白对A549细胞生长均有抑制作用（表现在作用48h后），其中以20μg／mL浓度抑制性最强，其72h、96h的A值分别为0．672±0．027、0．799±0．092，与同一时间点空白对照组A值0．737±0．024、0．968±0．007相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。加入N蛋白后，4、6和12hA549细胞培养上清液中IL-6、IL-10、TGF-β1浓度上升，其中IL-6的6h和12h浓度分别为（119．35±5．60）ng／L和（116．29±10．49）ng／L，II，10的4、6和12h浓度分别为（56．75±6．28）、（64．99±7．45）和（61．28±3．56）ng／L，TGF-β1 4、6和12h的浓度分别为（159．47±5．38）、（178．83±9．13）和（173．40±14．71）ng／L，与同一时间点对照组相比，差异有统计学意义。加入N蛋白后，A549细胞IL-6、IL-10、TGF-β1 mRNA的表达迅速上升，2h即有明显升高，6h进一步升高；MMP-9 mRNA的表达在2h时无明显上升，6h时有明显升高。结论Ⅱ型肺泡上皮细胞是SARS冠状病毒的重要靶细胞，同时也是效应细胞；SARS冠状病毒结构蛋白导致A549细胞各种炎性介质的分泌增加，表现在炎性因子的浓度提高和相应的mRNA表达水平增加，可能是机体异常免疫反应的发病机制。     

幽门螺杆菌相关性十二指肠球溃疡与胃癌中NF—KB、VEGF、Bcl-2、IL-1β的表达及意义

目的探讨Hpylori相关性十二指肠溃疡与胃癌病例中NF—KB、Bcl-2、VEGF、IL-1β表达的差异及相互关系，进一步了解Hpylori致胃癌与十二指肠溃疡的发病机制。方法选取胃镜检查的胃黏膜活检标本，十二指肠溃疡患者33例，胃癌患者63例，通过免疫组化sP法测定NF—KB、Bcl-2、VEGF、IL-1β在H．pylori感染与非感染的胃癌及十二指肠溃疡患者胃黏膜中的表达情况。结果十二指肠溃疡组和胃癌组中，H．pylori感染者NF—KB、VEGF与IL-1β的表达水平高于npylori阴性者（P〈0．Ol或0．05），Bcl-2的表达无显著差异（P〉0．05）；H．pylori感染病例中，NF—KB、Bcl-2、VEGF在胃癌组的表达水平高于十二指肠溃疡组（P〈0．01或0．05），IL-1β的表达无显著差异（P〉0．05）；胃癌组与球溃疡组中，NF—KB的表达水平与VEGF均呈正相关（P〈0．05）；胃癌组巾，NF—KB和VEGF的表达水平与Bcl-2呈正相关（P〈0．05），与IL-1β表达水平无明显相关性（P〉0．05）；球溃疡组中，NF—KB和VEGF的表达水平与IL-1β表达水平呈正相关（P〈0．05），与Bcl-2表达水平无明显相关性（P〉0．05）．结论幽门螺杆菌感染可上调宿主胃黏膜上皮NF—KB、VEGF及IL-1β的表达，三者表达水平具有协同性，其中NF—KB、VEGF表达的差异与十二指肠溃疡与胃癌两种不同的疾病转归相关，     

丹参酮ⅡA抗心肌纤维化作用机制实验研究

目的：研究丹参酮ⅡA（TSN）对大鼠心脏成纤维细胞（CF）内转化生长因子β1（TGFβ1）信号转导的影响，探讨TSN抗心肌纤维化的作用机制。方法：采用胰酶消化法和差速贴壁法获取新生SD大鼠CF，应用5ng／ml TG即1刺激及不同浓度（10^-6、10^-5、10^-4mol／L）TSN预处理。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测纤维连接蛋白（FN）mRNA表达，western blot检测FN和Smads蛋白表达。结果：TGF^-在一定范围内以时间依赖方式诱导FN及Smads表达，刺激终末FNmRNA和蛋白表达量分别增加1．3倍和1．8倍（P〈0．01，P〈0．01），磷酸化Smad2／3（p-Smad2／3）蛋白表达量增加3．9倍（P〈0．01）。TSN预处理可下调FN和p-Smad2／3表达，而且效应呈剂量依赖性。10～mol／L TSN预处理对FN和p-Smad2／3表达几无影响（P〉O．05，P〉0．05）；1015和1014mol／LTSN预处理后，FNmRNA表达量分别下降32．7％、42．9％（P〈0．05，P〈0．01），FN蛋白表达量分别下降45．8％、57．1％（P〈0．01，P〈0．01），p-Smad2／3蛋白表达量分别下降40．5％、55．4％（P〈0．05，P〈0．01）。结论：TSN抗心肌纤维化作用可能与其抑制TGFβ1诱导的Smad2／3磷酸化，阻断CF内TGFβ1／Smads信号通路有关。     

胃癌患者血清和组织IL-1β水平变化及临床意义

目的研究IL-1β与胃癌发生的相关性，探讨IL-1β在胃癌发生中的作用，为胃癌的防治提供新的思路。方法收集70例胃癌、45例癌旁和70例胃炎手术切除组织和胃镜下活检标本，采用免疫组化SABC法测定组织IL-1β蛋白表达水平；以双抗体夹心ELISA法测定胃癌、胃炎患者血清中IL-1β含量，并进行比较。结果胃癌患者血清IL-1β水平显著高于胃炎病人（P〈0．05），且与临床分期有关，进展期胃癌高于早期胃癌（P〈0．05）。IL-1β蛋白在胃癌、癌旁和胃炎中的表达率分别为65．95％、44．44％和22．50％；胃癌组IL-1β表达高于癌旁、胃炎组。低、未分化癌组织IL-1β的表达高于高、中分化癌组织（P〈0．05）；进展期胃癌高于早期胃癌（P〈0．05）。结论胃癌患者血清、胃粘膜组织中IL-1β表达高于胃炎组，提示胃粘膜IL-1β表达与胃癌的发生有一定的关系。     

过表达白血病相关蛋白16基因对前列腺癌ALVA41和DU145细胞增殖的影响

目的探讨过表达白血病相关蛋白16（LRP16）基因对人前列腺癌ALVA41和DU145细胞增殖的影响及其发生机制。方法2004—04～2005—10于解放军总医院用下列方法检测：（1）构建LRP16真核表达载体（peDNA3．1-LRP16）并与对照空载体（pcDNA3．1）分别转染ALYA41和DU145细胞，将G418筛选获得的表达外源LRP16基因以及空载体的4组细胞（A16、A3．1、D16、D3．1）继续传代培养。（2）用四氮唑蓝染色（MTT）法测定并比较各组细胞的生长曲线。（3）提取两种细胞的总RNA，通过RT—PCR方法测定雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）和雄激素受体（AR）在两种细胞中的表达。结果（1）LRP16过表达促进DU145细胞的生长，D16组在24、48、72、96和120h的细胞生长倍数分别是对照组（D3．1）的1．03倍（P〉0．05）、1．10倍（P〈0．05）、1．13倍（P〈0.01）、1．63倍（P〈0．01）和1．55倍（P〈0．01）。（2）LRP16过表达对ALVA41细胞的生长无影响，A16组在24、48、72、96和120h的细胞生长倍数分别是对照组（A3．1）的0．998、1．040、0．944、1．018和1．036倍（P值均〉0．05）。（3）ERα和ERβ在ALVA41、DU145两种细胞中均有表达。AR在ALVA41细胞中有表达，而在DU145细胞中无表达。结论过表达LRP16基因促进前列腺癌DU145细胞生长，但是其机制可能不是直接通过AR发挥作用。     

布地奈德对支气管哮喘大鼠血中性粒细胞中转化生长因子β1及Smad2／3表达的影响

目的观察转化生长因子β1（transforrning growth factor beta-1,TGF-β1）及Smad2／3在支气管哮喘（简称哮喘）大鼠血中性粒细胞（polymorphonuclear leucocyte,PMN）中的表达及布地奈德对其的影响,探讨PMN通过TGF-β1／Smad信号通路参与哮喘气道炎症的可能作用机制。方法采用大鼠哮喘模型,随机分成哮喘组（A组）、正常对照组（C组）和布地奈德治疗组（B组）,对血PMN进行分离纯化,免疫细胞化学法检测血PMN中TGF-β1和Smad2／3的表达水平。结果与C组（0．131±0．015OD值）相比,PMN TGF-β1的表达水平在A组（0．228±0．016OD值）和B组（0．164±0．01701）值）差异均具有统计学意义（P值均〈0．01）;B组与A组相比,TGF-β1的表达水平差异也具有统计学意义（P〈0．01）。与C组（0．081±0．011OD值）相比,PMN Smad2的表达水平在A组（0．142±0．021OD值）和B组（0．110±0．010OD值）差异均具有统计学意义（P值均〈0．01）;B组与A组相比,PMNSmad2／3的表达水平也具有显著统计学意义（P〈0．01）。两者的表达呈显著正相关（r=0．776,P〈0．01）。结论PMN能合成TGF—β1和Smad2／3,且哮喘时其合成水平增加,其合成功能可以被布地奈德所抑制。PMN可能通过TGF-β1／Smad信号转导途径参与哮喘的气道炎症讨程。     

雷公藤甲素抑制外周血单个核细胞分泌IL-1β及其基因多态性的关系

目的 探讨雷公藤甲素抑制外周血单个核细胞（PBMC）分泌白细胞介素-1β（IL-1β）及其基因多态性的关系。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）法，对31名健康志愿者IL-1β基因启动子区-511位点C—T多态性进行基因型检测，同时进行PBMC培养，用脂多糖（LPS）刺激培养细胞，并予以雷公藤甲素处理PBMC，收集培养上清液，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测上清液IL-1β的含量。结果 携带IL-1β-511T/T纯合子基因型PBMC经LPS刺激后，IL-1β的分泌量明显较非T/T纯合子为高（P〈0．05）；雷公藤甲素能显著抑制LPS诱导的C／C和C／T基因型PBMC分泌IL-1β（P〈0．05），但对T/T基因型的抑制作有不明显（P〉0．05）。结论IL-1β基因-511C-T多态性与IL-1β的分泌量相关，雷公藤甲素对不同基因型的IL-1β抑制作用有差异，这可能是导致雷公藤药理作用出现个体差异的原因之一。     

低氧下丹参酮ⅡA对人胃癌SGC-7901细胞HIF-1α与c-Myc表达的影响

目的观察低氧下丹参酮ⅡA（Tan ⅡA）对人胃癌SGC-7901细胞低氧诱导因子let（HIF-1α）与c—Myc表达的影响和二者的相关性。方法用氯化钴创建低氧模型,设常氧对照组、低氧对照组和低氧加不同浓度Tan Ⅱ A组。分别取0．5、2．0、10．0mg／L Tan ⅡA干预低氧胃癌细胞48h后,免疫细胞化学二步法检测HIF-1α和c—Myc蛋白表达的变化。结果Tan ⅡA呈剂量依赖性地抑制HIF—1α和c—Myc蛋白表达,且二者呈高度正相关（r=0．901,P〈0．05）。结论低氧条件下,Tan ⅡA可同时抑制人胃癌SGC-7901细胞HIF-1α和c—Myc蛋白的表达,提示Tan ⅡA可能对抑制肿瘤的无氧糖酵解和VEGF表达具有重要作用。     

丹参酮ⅡA对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的研究丹参酮ⅡA（TanⅡA）对体外培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化能力的影响。方法扩增传代至第3代的SD大鼠BMSCs向成骨诱导分化培养,分为实验组和对照组,采用MTT比色法检测细胞的增殖能力;采用RT—PCR方法检测成骨相关细胞因子mRNA的表达;通过钙结节染色对比观察细胞形态情况。结果实验组各浓度TanⅡA较对照组BMSCs增殖速度提高（P〈0．05）,细胞增殖速率随TanⅡA浓度的增高而加快（P〈0．05）;实验组各浓度TanⅡA成骨相关细胞因子mRNA的表达较对照组提高（P〈0．05）;钙结节染色观察TanⅡA各浓度组均阳性显色,对照组显色不明显。结论TanⅡA能够提高体外培养的BMSCs增殖速率,对BMSCs向成骨细胞分化有明确的诱导作用,缩短骨细胞的成熟时间。     

酪蛋白对高碘小鼠甲状腺细胞凋亡的影响

目的观察酪蛋白（CA）对高碘小鼠甲状腺细胞凋亡的影响。方法将昆明种小鼠随机分为4组：对照（NI）组、高碘（HI）组、高碘＋CA1（HI＋CA1）组、高碘＋CA2（HI＋CA2）组，喂养12个月，ELISA法检测血清白细胞介素1β（IL—1β），RT-PCR法检测甲状腺组织Fas、FasLmRNA表达水平，TUNEL法检测甲状腺细胞凋亡。结果与NI组比较，HI组小鼠血清IL-1β水平和甲状腺组织FasmRNA表达均明显增高（P〈0．05或〈0．01），且甲状腺滤泡上皮凋亡细胞数也明显增多（P〈0．01），而高碘小鼠随着CA摄入量增高，上述改变程度明显降低。结论高碘可通过提高机体IL-1β水平，诱发凋亡调控基因Fas／FasL系统表达改变，促进大鼠甲状腺细胞凋亡。而CA摄入可以部分拮抗高碘引起的上述改变，对滤泡上皮细胞具有一定的保护作用。