丝胶对2型糖尿病大鼠睾丸c-fos表达的影响

目的 观察2型糖尿病(T2DM)大鼠睾丸原癌基因c-fos表达的变化及丝胶的保护作用.方法 30只雄性SD大鼠随机分成正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组.链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM大鼠模型,以血糖≥16.7 mmol/L作为成模标准.待模型成功建立后,模型组大鼠不做任何处理;丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃(2.4 g·kg-1·d-1)35 d.ELISA方法检测大鼠血清睾酮水平,SP免疫组化法和RT-PCR法分别检测睾丸c-fos蛋白和mRNA的表达.结果 T2DM模型大鼠血清睾酮水平、睾丸c-fos蛋白和mRNA的表达均明显低于正常对照组大鼠(P＜0.01);丝胶治疗组大鼠血清睾酮水平、睾丸c -fos蛋白和mRNA的表达明显高于模型大鼠(P＜0.01,P＜0.05).结论 丝胶可通过上调睾丸c-fos的表达,促进精原细胞向精母细胞转化,发挥对T2DM生殖功能损伤的保护作用.     

丝胶预处理对2型糖尿病大鼠睾丸生殖细胞的保护作用

目的 研究丝胶预处理对2型糖尿病大鼠睾丸生殖细胞的保护作用.方法 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶预处理组,每组12只.链脲佐菌素(STZ)连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型;丝胶预处理组大鼠于注射STZ前给予丝胶(2.4 g·kg-1·d-1)灌胃35 d.采用ELISA法检测大鼠血清睾酮水平;分别采用免疫组化染色和RT-PCR法检测睾丸增殖细胞核抗原(PCNA)、c-fos蛋白和mRNA的表达.结果 糖尿病模型组大鼠血清睾酮水平、睾丸PCNA和c-fos的表达均明显低于正常对照组大鼠(P＜0.01).丝胶预处理组大鼠血清睾酮水平、睾丸PCNA和c-fos的表达明显高于模型大鼠(P＜0.01,P＜0.05).结论 丝胶预处理可通过上调睾丸PCNA和c-fos的表达,提高生精细胞的增殖能力,促进精子发生及睾酮分泌,从而防止糖尿病模型大鼠生殖功能的下降,对糖尿病生殖功能障碍具有预防保护作用.     

丝胶预处理对糖尿病大鼠睾丸生长激素和生长激素受体表达的作用

目的探讨丝胶预处理对糖尿病大鼠睾丸生长激素(GH)和生长激素受体(GHR)表达的作用。方法 30只雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组、糖尿病模型组和丝胶预处理组,每组均为10只。链脲佐菌素(STZ)连续腹腔注射建立糖尿病动物模型,待模型成功建立后,模型组大鼠不再作任何处理;丝胶预处理组大鼠于注射STZ前给予丝胶(2.4 g·kg-1·d-1)灌胃35 d。采用ELISA法检测大鼠血清睾酮和GH水平;分别采用Western印迹和RT-PCR法检测睾丸GH、GHR蛋白和mRNA的表达。结果丝胶预处理可明显抑制糖尿病大鼠血清睾酮水平降低、GH水平升高,睾丸GH表达升高、GHR表达降低(P<0.01,P<0.05)。结论丝胶预处理可通过下调睾丸GH水平、上调睾丸GHR的表达改善糖尿病大鼠的生精功能,发挥对糖尿病生殖功能障碍的预防保护作用。     

丝胶对糖尿病大鼠海马生长激素及其受体表达的调节作用

目的探讨丝胶对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠海马生长激素(GH)和生长激素受体(GHR)表达的调控作用。方法将36只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、T2DM模型组和丝胶用药组,每组12只。腹腔注射链脲佐菌素制备T2DM大鼠模型;在成功制备模型后,对模型大鼠灌胃给予丝胶(2.4 g·kg~(-1)·d~(-1))35 d。分别检测各组大鼠的血糖和血清GH水平(ELISA法),检测大鼠海马GH、GHR蛋白(蛋白印迹法)和mRNA(逆转录PCR法)的表达情况。结果与空白对照组大鼠比较,T2DM模型组大鼠的血糖、血清GH水平、海马GH的表达明显升高,海马GHR的表达明显降低(P<0.05);与糖尿病模型组相比,丝胶组大鼠的血糖、血清GH水平,GH在海马的表达显著降低,GHR在海马的表达显著升高(P<0.05)。结论丝胶可能通过调节糖尿病时海马GH和GHR的表达,进而改善海马GH-GHR/IGF-1轴的功能。     

丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞胰岛素蛋白表达的作用

目的观察丝胶对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛β细胞胰岛素蛋白表达的影响。方法 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组,每组12只大鼠。链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM大鼠模型并给予丝胶(2.4 g/kg)灌胃。SP免疫组织化学染色法观察大鼠胰岛细胞胰岛素蛋白的表达情况。结果胰岛素蛋白免疫阳性产物位于胰岛β细胞胞质,呈棕黄色颗粒状。糖尿病模型组大鼠胰岛β细胞胰岛素蛋白的表达水平为(0.392±0.017),明显低于正常对照组大鼠(0.729±0.017)(P<0.01);丝胶治疗组大鼠胰岛β细胞胰岛素蛋白的表达水平为(0.619±0.039),明显高于糖尿病模型组大鼠(P<0.01)。结论丝胶可通过上调胰岛素蛋白的表达保护糖尿病时胰岛β细胞损伤。     

结缔组织生长因子在糖尿病大鼠肾脏损伤中的作用及丝胶的干预效果

目的观察2型糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子(CTGF)的变化及丝胶的干预作用。方法健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组(n=12)。链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,丝胶治疗组大鼠按照2.4 g·kg-1·d-1的剂量灌胃给予丝胶、阳性对照组大鼠按照55.33 mg·kg-1·d-1的剂量灌胃给予二甲双胍。ELISA法检测各组大鼠血清纤维连接蛋白的含量;Western印迹和RT-PCR法检测各组大鼠肾脏CTGF蛋白和mRNA的表达。结果丝胶治疗组较模型组,血清纤维连接蛋白的含量、肾脏CTGF蛋白和mRNA的表达明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论丝胶可通过下调糖尿病大鼠肾脏CTGF的表达,恢复肾脏细胞外基质代谢的平衡,从而发挥对糖尿病肾脏损伤的保护作用。     

丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏肝细胞核因子-4α表达的影响

目的研究丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏肝细胞核因子(HNF)-4α表达的影响。方法雄性SD大鼠48只随机分为:正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和丝胶预防组,每组12只大鼠。链脲佐菌素连续腹腔注射制作2型糖尿病大鼠模型,待模型成功建立后,模型组大鼠不做任何处理,丝胶治疗组大鼠给予2.4 g·kg-1·d-1的丝胶连续灌胃35 d;丝胶预防组大鼠在链脲佐菌素连续腹腔注射前,给予丝胶(2.4 g·kg-1·d-1)灌胃,时间与丝胶治疗组相同。分别采用Western印迹法和RT-PCR法检测大鼠肝脏HNF-4α蛋白和mRNA的表达。结果与正常对照组大鼠比较,糖尿病模型组大鼠肝脏HNF-4α蛋白和mRNA的表达明显升高(P<0.01);与糖尿病模型组大鼠比较,丝胶治疗组、丝胶预防组大鼠肝脏HNF-4α蛋白和mRNA的表达明显降低(P<0.01)。结论丝胶改善糖代谢的作用可能与其调节肝脏HNF-4α的表达有关。     

丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的保护作用

目的观察丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的保护作用。方法雄性SD大鼠36随机分为3组:正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组。链脲佐菌素(STZ,25 mg/kg,连续3 d)腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型;待模型成功建立后,丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃(2.4 g.kg-1.d-1)35 d。免疫组织化学染色观察胰岛β细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果与正常对照组大鼠相比,模型组大鼠胰岛β细胞Bax蛋白的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达明显降低(P<0.01);与模型大鼠相比,丝胶治疗组大鼠胰岛β细胞Bax蛋白的表达明显降低(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达明显升高(P<0.01)。结论丝胶可通过上调胰岛β细胞Bcl-2蛋白的表达、下调胰岛β细胞Bax蛋白的表达,抑制2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡,对糖尿病时胰岛细胞损伤具有一定的保护作用。     

丝胶对糖尿病大鼠肾脏血小板衍生生长因子表达的调控作用

目的观察丝胶对2型糖尿病大鼠肾脏血小板衍生生长因子(PDGF)表达的调控作用。方法健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组(n=12)。链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,丝胶治疗组大鼠按照2.4 g·kg~(-1)·d~(-1)的剂量灌胃给予丝胶、阳性对照组大鼠按照55.33 mg·kg~(-1)·d~(-1)的剂量灌胃给予二甲双胍。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清Ⅰ型胶原的含量;Western印迹和RT-PCR法检测各组大鼠肾脏PDGF蛋白和mRNA的表达。结果丝胶治疗组较糖尿病模型组血清Ⅰ型胶原的含量、肾脏PDGF蛋白和mRNA的表达明显降低(P0.01,P0.05)。结论丝胶可通过下调糖尿病大鼠肾脏PDGF的表达,恢复肾脏细胞外基质代谢的平衡,从而发挥对糖尿病肾脏损伤的保护作用。     

2型糖尿病大鼠肝脏肿瘤坏死因子-α表达变化及丝胶的保护作用

目的研究2型糖尿病大鼠肝脏肿瘤坏死因子(TNF)-α表达的变化及丝胶的保护作用。方法雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、丝胶治疗组及阳性对照组,每组12只。链脲佐菌素连续腹腔注射法制备2型糖尿病大鼠模型,成功后模型组大鼠不做处理,丝胶治疗组大鼠给予2.4 g·kg-1·d-1剂量的丝胶灌胃35 d,阳性对照组大鼠给予55.33 mg·kg-1·d-1剂量的二甲双胍灌胃35 d。采用SP免疫组化法、蛋白免疫印迹法和RT-PCR法检测各组大鼠肝脏TNF-α的表达情况。结果与正常对照组大鼠相比,TNF-α蛋白和mRNA在糖尿病模型组大鼠肝脏中均呈高表达(P0.01);与模型组大鼠相比,TNF-α蛋白和mRNA在丝胶治疗组、阳性对照组大鼠肝脏中均呈低表达(P0.01)。结论丝胶可能通过下调肝脏TNF-α的表达改善胰岛素抵抗。     

脂联素与2型糖尿病乳腺癌发生的相关性及其机制研究

目的:探讨脂联素与2型糖尿病（T2DM）患者乳腺癌发生的相关性及其可能机制。方法:选取2016年1至6月于安徽医科大学第一附属医院甲状腺与乳腺外科住院的乳腺癌患者50例作为研究对象。按照是否合并T2DM将纳入患者分为合并T2DM的乳腺癌组（20例）以及单纯乳腺癌组（30例）。检测空腹血糖和胰岛素、血脂、总脂联素、高分子...     

贝前列腺素钠对2型糖尿病大鼠肾功能及氧化应激水平的影响

目的 观察贝前列腺素钠(BPS)对2型糖尿病大鼠肾功能及氧化应激水平的影响. 方法 将30只SD大鼠随机分为正常对照组(NC组),2型糖尿病组(T2DM组),BPS治疗组(BPS组),T2DM组和BPS组大鼠给予高脂饮食合并小剂量链脲佐菌素( STZ)腹腔注射,建模成功后,BPS组给予0.6 mg/(kg.d)灌胃,其余饲养条件3组相同,最终纳入实验各组6只.给药8周后检测各组大鼠体质量、血糖、24 h尿量、肾质量体质量比(KW/BW)、24h尿蛋白(24 h Ualb),血肌酐(Cr),尿素氮(BUN)以及各组大鼠氧化应激水平及炎症因子指标,包括总超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、髓过氧化物酶(MPO)、超敏C反应蛋白(hs-CRP). 结果 给药8周后,T2DM组血糖、尿量、KW/BW、24 h Ualb、Cr、BUN、MIDA、IL-6、TNF-α、MPO、hs-CRP水平均较NC组显著升高;体质量、SOD、GSH水平较NC组显著降低(P＜0.01).BPS组较T2DM组血糖、尿量、KW/BW、24 h Ualb、Cr、IL-6、M DA、TNF-α、MPO、hs-CRP水平显著降低(P＜0.05或0.01),体质量、SOD、GSH水平显著升高(P＜0.05). 结论 BPS可通过降低氧化应激水平,减少炎症因子的生成,显著减少糖尿病肾病大鼠尿蛋白排泄量,改善其肾功能,对T2DM大鼠肾脏具有保护作用.     

吡格列酮对2型糖尿病大鼠骨骼肌脂联素受体1表达的影响

目的观察吡格列酮对2型糖尿病大鼠血清脂联素以及骨骼肌脂联素受体1(AdipoR1)表达的影响,探讨吡格列酮对2型糖尿病胰岛素抵抗的改善作用及机制。方法 40只8周龄健康雌性SD大鼠,随机分为正常对照组(n=10)、糖尿病组(n=15)及吡格列酮组(n=15)。用高糖高脂饲料加小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,成模后吡格列酮组给予10 mg/(kg.d)吡格列酮灌胃,正常对照组和糖尿病组给予同体积生理盐水灌胃,共12周。3个月后股静脉取血,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清脂联素水平,留取大鼠骨骼肌,光、电镜观察骨骼肌结构,免疫组织化学染色法测定骨骼肌AdipoR1蛋白的表达。结果与正常对照组(1.73±0.32 mg/L)比较,糖尿病组血清脂联素(1.01±0.27 mg/L)水平显著降低,而吡格列酮组(1.34±0.43 mg/L)较糖尿病组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。骨骼肌AdipoR1免疫组织化学染色正常对照组着色深且广泛,糖尿病组较正常对照组染色浅,吡格列酮组较糖尿病组染色深,但较正常对照组浅。光镜及电镜结果显示大鼠骨骼肌结构未见明显异常。结论 2型糖尿病大鼠血清脂联素水平及骨骼肌AdipoR1表达降低并导致糖脂代谢紊乱及胰岛素抵抗。吡格列酮可上调血清脂联素及骨骼肌AdipoR1的表达,从而调节糖脂代谢,改善胰岛素抵抗。     

氯沙坦对Nestin在糖尿病大鼠肾组织中表达的影响

目的研究中间丝蛋白Nestin在糖尿病大鼠肾组织中的表达以及血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂(AT1Ra)氯沙坦的影响。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分出正常对照组(N组)10只,余20只腹腔注射STZ制备糖尿病大鼠模型。模型制备成功后,再随机分为糖尿病组(DM组)10只和氯沙坦治疗组(DL组)10只。DL组大鼠每日给予氯沙坦20 mg/kg灌胃。干预8 w后,生化方法检测各组大鼠血糖、血尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白。电镜观察足细胞超微结构变化;免疫组织化学、流式细胞术、Wertern印迹检测肾组织中Nestin蛋白的表达。结果 DM组大鼠Nestin蛋白表达明显高于N组;氯沙坦治疗后,Nestin表达明显降低。相关性分析显示,Nestin蛋白表达水平与24 h尿蛋白量密切相关(P<0.01)。结论Nestin表达升高可能参与了糖尿病大鼠蛋白尿的发生,氯沙坦对肾脏的保护作用可能部分的是通过降低Nestin的表达而实现的。     

脂联素及脂联素受体1的表达与糖尿病心肌病的关系

目的通过观察2型糖尿病(T2DM)大鼠脂联素(APN)及心肌脂联素受体1的表达情况,探讨其在T2DM心肌病发病过程中的作用。方法建立T2DM大鼠动物模型。采用双抗体夹心酶联免疫法检测血清及心肌APN水平,并采用免疫组化的方法测定心肌脂联素受体1(Adipo R1)的蛋白表达。结果与对照组比较,T2DM组血清和心肌APN水平下降,心肌Adipo R1蛋白的表达水平降低,差异均有统计学意义(P0.05)。相关性分析显示,T2DM组大鼠血清APN与血清胰岛素、稳态模型胰岛素抵抗指数呈负相关(r=-0.613,P0.05;r=-0.637,P0.05),心肌Adipo R1蛋白表达量与心肌APN呈正相关(r=0.89,P0.05),与HOMA稳态模型(HOMA-IR)及空腹胰岛素水平(FINS)呈负相关(r=-0.697,P0.05;r=-0.593,P0.05)。结论糖尿病心肌病大鼠血清及心肌APN水平下降,心肌Adipo R1蛋白表达下降,胰岛素抵抗可能在糖尿病心肌病的发病过程中起到作用。     

糖尿病周围神经病变患者血清脑源性神经营养因子与高迁移率族蛋白B1水平相关性的研究

目的 探讨糖尿病周围神经病变（DPN）患者血清脑源性神经营养因子（BDNF）与高迁移率族蛋白B1（HMGB1）水平的相关性. 方法 将T2DM患者60例分为T2DM组和DPN组,每组各30例,另选取健康体检者30名作为对照（NC）组.ELISA检测血清BDNF及HMGB1含量,RT-PCR法检测其mRNA在外周血单个核细胞中的相对表达水平,分析DPN患者中BDNF与HMGB1相关性. 结果 DPN组和T2DM组血清BDNF含量及rnRNA表达水平均低于NC组（P＜0.05）,而HMGB1含量及mRNA表达水平高于NC组（P＜0.05）.DPN组血清BDNF含量及mRNA表达水平低于T2DM组,血清HMGB1含量及mRNA表达水平高于T2DM组（P＜0.05）.DPN组血清BDNF与HMGB1水平负相关（r=-0.425,P＜0.05）. 结论 DPN患者血清BDNF与HMGB1相关,二者可能共同参与了DPN的发病.     

二甲双胍调节糖尿病大鼠心房小电导钙激活钾通道亚型蛋白表达的信号通路

目的探讨蛋白激酶A(PKA)/钙调蛋白Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路在二甲双胍(Met)调节2型糖尿病(T2DM)大鼠心房小电导钙激活钾通道亚型KCa2.2和KCa2.3蛋白表达中的作用。方法健康雄性Wistar大鼠40只,随机选8只喂普通饲料为对照组(Con组),另32只喂高脂高糖饲料联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素构建T2DM大鼠模型后,再随机分为DM组、Met组、H-89组(腹腔注射PKA抑制剂H-89)和KN-93组(腹腔注射CaMKⅡ抑制剂KN-93),每组8只。用ELISA检测大鼠心房组织PKA活性,qRT-PCR检测CaMKⅡmRNA表达,Western blot和免疫组织化学检测KCa2.2、KCa2.3和磷酸化CaMKⅡ(p-CaMKⅡ)蛋白表达。结果 Con组、DM组、Met组和H-89组PKA活性分别为0.74±0.04、0.50±0.05、0.69±0.03和0.48±0.03。与DM组比较,Met组PKA活性明显提升(P<0.01);与Met组比较,H-89组显著抑制PKA活性(P<0.01)。Con组、DM组及Met组CaMKⅡmRNA分别为1.00±0.07、0.61±0.03和0.92±0.09。与Con组比较,DM组CaMKⅡmRNA表达明显降低(P<0.01);与DM组比较,Met组CaMKⅡmRNA表达明显增加(P<0.01)。与Con组比较,DM组心房组织p-CaMKⅡ和KCa2.2蛋白表达均明显降低,KCa2.3蛋白表达明显升高(P<0.01)。与DM组比较,Met组明显提升p-CaMKⅡ和KCa2.2蛋白表达,明显抑制KCa2.3蛋白表达(P<0.01)。与Met组比较,KN-93组和H-89组分别显著抑制p-CaMKⅡ蛋白表达和PKA活性,均显著下调KCa2.2蛋白表达,上调KCa2.3蛋白表达(P<0.01)。免疫组织化学染色显示,与Met组比较,KN-93组和H-89组均显著下调KCa2.2蛋白表达,上调KCa2.3蛋白表达(P<0.05,P<0.01),与Western blot检测结果一致。结论 Met通过激活PKA/CaMKⅡ信号通路部分修复T2DM大鼠心房KCa2.2蛋白下调和KCa2.3蛋白上调。     

糖基化终末产物对大鼠肾皮质基质金属蛋白酶2活性和表达的影响

的　研究糖基化终末产物 (AGEs)对肾皮质基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )活性及其mRNA表达的影响。方法　用链脲佐菌素制备大鼠糖尿病模型。大鼠血清蛋白与 0 .5mol/L葡萄糖孵育制备AGEs,分静脉注射AGEs(AGEs组 )、静脉注射大鼠正常血清 (阴性对照组 )和未注射大鼠 (对照组 ) 3组进行观察。ELISA测定肾皮质和血清AGEs含量 ,RT PCR检测MMP 2、金属蛋白酶组织抑制物 2 (TIMP 2 )mRNA表达水平 ,酶谱法测定MMP 2活性。结果　糖尿病大鼠肾皮质AGEs含量明显升高 ,MMP 2mRNA表达下降 ,TIMP 2mRNA表达上调 (均P <0 .0 1)。AGEs处理组大鼠肾皮质AGEs含量明显升高 (P <0 .0 1) ,MMP 2活性也明显下降 (均P <0 .0 5)。结论　AGEs通过降低大鼠肾皮质MMP 2的活性及其mRNA表达及增加TIMP 2mRNA表达 ,由此减少肾小球细胞外基质 (ECM )降解 ,可能是导致糖尿病肾病ECM积聚的原因之一