ELISA在出入境人员梅毒检测中的应用分析

目的分析ELISA在出入境人员梅毒检测中的应用价值。方法对出入境人员1847份标本采用TRUST和ELISA同步盲法进行检测,TRUST或ELISA阳性者进行TPPA检测;对TRUST阴性,ELISA阳性受检者进行跟踪复检和流行病学调查。结果1847份标本中,TRUST检测28份阳性,ELISA检测57份阳性,TPPA复检ELISA检测57份阳性者均为阳性。对31份TRUST阴性,ELISA和TPPA阳性标本受检者1～2月后进行TRUST复查。全部仍为阴性。结论ELISA与TPPA检测结果具有很好的一致性,对出入境口岸梅毒监测具有很好的应用价值;推荐采用ELISA做初筛试验,阳性结果以TRUsT试验复核的出入境人员梅毒血清学检测程程序。     

重组Sj31-b的表达及其免疫诊断价值的研究

目的 探讨日本血吸虫重组31KD蛋白片（rSJ31-b)的免疫诊断价值。方法 表达并纯化rSj31-b，用免疫印迹方法（EITB）检测纯化的rSj-b的免疫活性，以rSj31-b-ELISA分别检测慢性日本血吸虫病人及正常人的血清。结果 纯化的重组Sj31-b具有较好的免疫活性；用其rSj31-b－ELISA检测52份慢性日本血吸虫病人血清及83份正常人血清，敏感性和特异性与常规应用的天然抗原SEA（可溶性虫卵抗原）差异无显性。检测治疗12个月后的慢性日本血吸虫病人血清，阴转率85.0%，明显优于SEA－ELISA。结论 rSj31-b具有较好的敏感性和特异性，且有一定的疗效考核价值，可替代SEA用于慢性日本血吸虫病人的诊断。     

聚合酶链反应在检测慢性HBsAg携带者血清HBV-DNA传染性研究中的应用

聚合酶链反应是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法 ,操作简便 ,具有高度特异性和敏感性的生物学新技术。我们将其用于检测慢性HBsAg携带者血清HBV DNA ,研究其传染性和酶联免疫吸附技术(ELISA)检测血清HBsAg作对比。实验结果证明 ,聚合酶链反应直接检测血清HBV DNA比ELISA检测血清HBsAg更加敏感特异。在被检测的 1 2 31份血清标本中 ,用ELISA检出 91 9份慢性HBsAg携带者 ,血清HBsAg呈阳性结果。聚合酶链反应检测血清HBV DNA亦阳性 ,两者结果一致。而ELISA检测HBsAg阴性的 31 2份血清中 ,用聚合酶链反应检测又有 2 70份 (86 .5 %)可检测出HBV DNA ,总检出率 96 .6 %。此组研究证实血清HBsAg阴性标本仍有HBV DNA存在 ,具有传染性。琼脂糖凝胶电泳法比较简便 ,结果易观察。     

梅毒螺旋体血清学几种检测方法的比较

目的探讨几种血清梅毒螺旋体检测方法的应用价值。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA),胶体金快速检测试验(SYP)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)分别检测一定时间段内的735份标本,其中31例为确诊感染病例。结果对735份标本进行SYP初筛后,21份显示弱阳性;对21份弱阳性标本行TPPA法检测,3份滴度低于1∶80,余均显示阴性;ELISA法检测结果与TPPA法相同。31份阳性标本用TRUST法复核,临床无症状者的20份标本多呈弱阳性,有明显临床症状者的标本均呈强阳性。结论临床可用SYP法做为初筛试验,ELISA和TPPA法做为确认诊断试验。     

酶联免疫吸附测定法检测乙型肝炎表面抗原

以双抗体夹心型酶联免疫吸附测定法(ELISA)、对流电泳(CEP)和反向被动血凝法(RPHA),检测271例肝炎病人血清标本中的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。HBsAg 的阳性率 CEP 为18.5%(50侧)、RPHA 为29%(79例)、ELISA 为31%(84例),ELISA 和 RPHA 两法的符合率是97.4%。检测纯化 HBsAg 时,ELISA 的检出下限<50ng/ml,较 CEP 高200倍,为 RPHA 的2.5倍。ELISA 检测 HBsAg的平均回收为95.92±12%,多孔复测和多次复测的变异系数分别为6.6%和6.5%;假阳性率为28%,但血清中的类风湿因子并不影响检测结果。表明 ELISA 检测 HBsAg 是敏感、特异的方法,重复性也好。     

ELISA和ECLIA检测乙型肝炎病毒血清标志物的检测结果分析

目的分析比较ELISA和ECLIA检测乙型肝炎病毒血清标志物的临床意义。方法选取2010年11月-2011年10月在我院检查的74例乙肝病毒感染患者为研究对象,同时选择31例健康的体检者为对照组,分别采用ELISA以及ELISA两种检测方法检测乙肝五项,比较分析两种检测方法的检测结果。结果 105例血清分别应用ELISA法与ECLIA法测定的抗-HBc、抗-HBe、HBeAg、抗-HBs、HBsAg的符合率分别是96.11%、81.05%、95.61%、95.61%、94.77%。经过相关性分析以后得出,HBV-M五项的检测结果都具有中等相关性（P〈0.001,0.4000.05,抗-HBe、HBeAg有统计学上的差异,P〈0.05。结论 ELISA及ECLIA检测HBV-M所有5项值均有很好的相符性,ECLIA有更宽的检测范围及更高的自动化程度,检测e系统的敏感性比ELISA更高,检测能定量以及对乙肝病毒潜伏期感染、抗病毒的疗效、疫苗接种的效果以及乙肝病毒低水平的评估都有着积极的临床意义。     

RPR滴度在梅毒检测中的应用

目的探究血浆反应素环状卡片试验(RPR)在梅毒抗体临床检测中的应用价值。方法本组研究将以我院检验科于2015年1月1日至2016年12月31日期间进行梅毒检测的389例疑似梅毒患者作为研究样本;所有患者的血清样本分别进行梅毒螺旋体ELISA试验(ELISA)与RPR检测,并以TPPA检测结果作为金标准,对两种检测方法的结果进行对比分析。结果 (1)RPR检测共检测出阳性标本180例,阳性率46.27%(180/389);ELISA检测共检测出阳性标本369,阳性率94.86%(369/389),ELISA的阳性检出率明显高于RPR,具有统计学意义,P0.05;(2)所有标本经TPPA检测后,阳性369例,阳性率为94.86%,RPR检测阳性180例,阳性率为46.27%,灵敏度为54.09%,准确率为84.87%;ELISA的灵敏度为31.88%,准确率为66.88%;RPR均明显高于ELISA,具有统计学意义。结论 RPR检测对梅毒螺旋体的准确性较好,通常可以作为梅毒初筛手段以及梅毒治疗效果监测手段,进一步确诊需要结合TPPA检测以提高准确度。     

胶体金免疫层析法和酶联免疫吸附法检测β-HCG的对比观察

目的通过采用胶体金免疫层析法（GICA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）两种方法检测β-HCG,并对其结果进行对比。方法在相同条件下使用上述两种方法对本院80例门诊患者血清标本进行检测。结果酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测出阳性53例,阴性27例;胶体金免疫层析法（GICA）检测出阳性49例,阴性31例,其中有6份阳性标本没有检测出来。与ELISA法对比,GICA的敏感度为92．5％,特异性为100％。结论胶体金免疫层析法和酶联免疫吸附法各有优点,临床中应根据实验室情况选择使用。     

PCR检测结核性胸水31例分析

31例结核性胸水经PCR、ELISA、培养、涂片法检测,阳性者分别为21例、20例、4例、3例;17例非结核性胸水经上述4种方法检测,PCR法阳性1例,ELISA法阳性5例,培养和涂片法均为阴性。x~2检验,PCR法与培养和涂片法分别比较,均有显著性差异(P<0.01),ELISA法与PCR法虽无显著性差异,但假阳性为5/17。提示:PCR法不愧为病原菌诊断新技术。该检测技术具有敏感、特异、快速等优点,是检测结核性胸水的优选方法。     

截短型肿瘤抗原BAP31 DNA疫苗的构建及免疫效果分析

目的：通过LAMP分子的靶向作用,增强截短型BAP31肿瘤抗原（BAP31）的MHC-Ⅱ提呈,激活更多的特异性CD^4＋T细胞,最终辅助增加CTL细胞的杀伤活性及特异性抗体产生。方法：构建重组质粒P-△AP31和P-L-△AP31,同时构建重组质粒P-△AP31／EGFP和P-L△AP31／EGFP。质粒P-△AP31／EGFP和P-L△AP31／EGFP瞬时转染Hela细胞,荧光显微镜观察目的蛋白的表达;将重组质粒P-△AP31和P-L-△AP31免疫C57BL／6小鼠,间接ELISA检测免疫小鼠血清中特异性抗体效价;ELISPOT检测免疫脾淋巴细胞分泌细胞因子IFN-γ和IL-4的频率;乳酸脱氢酶释放法检测免疫小鼠特异性CTL反应。结果：经酶切鉴定及序列测定,成功构建截短型肿瘤抗原BAP31的DNA疫苗重组载体;用带EGFP报告基因的重组质粒转染Hela细胞,荧光显微镜观察可见特异性的绿色荧光;ELISA检测免疫小鼠血清,带LAMP组BAP31特异性抗体效价明显高于不带LAMP组（P〈0.01）,且两者均高于空质粒及正常对照组;ELISPOT检测分泌IFN-γ,IL-4的T细胞频率,带LAMP组明显增高（P〈0.01）;杀伤试验表明,特异性CTL活性带LAMP组较不带LAMP组显著提高,且均高于对照组（P〈0.01）。结论：构建的P-△AP31和P-L-△AP31基因疫苗不仅在小鼠体内均可诱导特异性体液和细胞免疫应答,而且P-L-△AP31基因疫苗的免疫效果显著优于P-△AP31,为进一步研制肿瘤治疗性基因疫苗奠定了基础。     

日本血吸虫多价分子疫苗的制备及其抗原性的研究

目的:为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。方法:通过制备型SDS-PAGE和电渗方法从日本血吸虫成虫分离纯化出28KD、31/32KD及97KD蛋白。经BCA法检测蛋白含量,SDS-PAGE检测蛋白纯度和分子量,Western-blot及ELISA检测其抗原活性。结果:日本血吸虫成虫28KD、31/32KD及97KD三种纯化蛋白经SDS-PAGE检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符;其蛋白含量分别为0.35mg/ml、0.4mg/ml和0.3mg/ml;West-ern-blot均为单一反应区带;ELISA反应滴度分别为1:640、1:1280和1:320。结论:由制备型SDS-PAGE和电渗析方法制备的日本血吸虫成虫28KD、31/32KD及97KD蛋白多价分子疫苗,具有纯度高、制备快、回收率高等优点,而且不影响所纯化的抗原活性。     

初始海洛因依赖者血清中细胞因子IFN-γ、IL-4、TGF-β1、IL-9和IL-17水平

目的:检测不同亚类T淋巴细胞产生的主要细胞因子IFN-γ、IL-4、TGF-β1、IL-9及IL-17在初始海洛因依赖者血清中的水平,认识海洛因对机体免疫功能的影响.方法:将31例海洛因依赖者(2年内)设为海洛因依赖组,31例正常体检者作为对照组,用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组血清IFN-γ、IL-...     

沧州市无偿献血员乙型肝炎病毒表面抗原检测结果分析

目的了解无偿献血员HBsAg感染状况。方法用酶联免疫吸附实验(ELISA)进行检测。结果 31 568名献血员血清中HBsAg阳性率4.65%(1 468/31 568),其中计划无偿献血者HBsAg阳性率为4.85%(510/10 512),志愿无偿献血者HBsAg阳性率为9.3%(838/8 978),个体献血者HBsAg阳性率为1.0%(120/12 078)。结论严格献血员HBsAg的检测管理工作,确保血液质量,保证输血安全     

快速酶联免疫吸附法检测血清脂阿拉伯甘露糖-IgG对肺结核的诊断意义

评价快速酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清阿拉伯甘露糖-IgG(LAM－IgG)对进展期及稳定期肺结核的诊断价值。方法：应用快速ELISA法检测93例进展期肺结核、30例稳定期肺结核、31例其它肺疾病病人及21例健康对照者血清中LAM－IgG水平。结果：进展期肺结核LAM－IgG阳性率70．97％,稳定期肺结核阳性率66．67％,其它肺疾病组阳性2倒,占6．45％,健康对照组均为阴性。结论：快速ELISA法测定血清LAM－IgG对肺结核的诊断有一定意义。     

血清抗-HAV IgM、抗-HBcIgM及HBVM的检测在收治甲型肝炎流行期间病例的临床意义

1988年春上海甲型肝炎(下称甲肝)流行,我院某一收治点从1月23日至5月31日共收治9～61岁的肝炎958例,每例常规采用ELISA技术检测血清抗-HAV IgM、抗-HBc IgM与HBVM,并对31例高胆红素血症(Sb>10mg/dl)进行不定期抗-HAV     

低水平HBsAg检测的初步探讨

目的 对低水平HBsAg检测的初步探讨。方法 将ELISA法检测HBsAg阴性标本106例分为两组，Anti-HBe阳性、Anti—HBc阳性56例作为第一组，Anti—HBs阳性、Anti—HBe阳性与Anti—HBc阳性50例作为第二组，用微粒子捕捉酶免法(MEIA，Mieroparticle enzyllle immunoassay)检测HBsAg。结果第一组阳性18例，占31％，第二组阳性5例，占10％。结论 ELISA法检测出的HBsAg阴性者中，仍可能有部分低水平HBV存在于体内或低水平的复制。     

2种方法检测乙型肝炎表面抗原的比较

目的:比较金标法(GICA)与酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的结果。方法:对5 632份血清标本同时采用GICA和ELISA检测HBsAg,以ELISA为标准,对GICA的灵敏度、特异性进行评价。结果:5 632份血清中以ELISA为标准,HBsAg阳性507例,阳性率为9.00%;GICA有34份假阴性,31份假阳性,灵敏度为93.84%,特异性为99.34%。34例假阴性中HBsAg均为弱阳性OD/CO值在1.50～4.76。2种方法测定的HBsAg结果差异无统计学意义(P0.05),且具有高度一致性(Kappa=0.929 4,P0.01)。结论:GICA适用于单份检测,无需任何仪器,且快速简便,但灵敏度、特异性稍差,特别是针对HBsAg弱阳性有漏诊可能;ELISA虽然步骤多,时间长,但灵敏度高,特异性强,适合批量检测。实验室应根据实际需要结合工作情况选用。     

人巨细胞病毒US31蛋白特异性抗体的制备及鉴定

目的：探讨人巨细胞病毒（HCMV）US31蛋白及其多克隆抗体的制备及鉴定方法。方法：HCMV US31基因经原核密码子优化后进行全基因合成,克隆至pET21a（+）原核表达载体,构建pET21a（+）/HCMV US31重组质粒,测序鉴定;将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导目的蛋白表达,Ni-NTA亲和层析法纯化US31蛋白,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ELISA、Western blot及免疫荧光方法检测抗体效价和特异性。结果：在大肠杆菌中诱导出高表达的HCMV US31融合蛋白,经Ni-NTA亲和纯化后获得高纯度的目的蛋白;免疫新西兰兔诱导产生特异性的IgG抗体,效价为1:49 600;经ELISA、Western blot以及免疫荧光均证实制备的特异性抗体可识别细胞中表达的US31蛋白。结论：成功制备了HCMV US31蛋白及特异性抗体,为进一步研究US31蛋白的生物学功能奠定了基础。     

ELISA与NAT检测在血液HBV筛查中的关系研究

目的分析ELISA检测与病毒核酸扩增（NAT）检测血液HBV的符合率,探讨这2种方法在血液HBV筛查中的关系。方法选取59483份献血者血液标本,先用国产和进口2种不同的ELISA试剂检测HBsAg,将ELISA检测双试剂阳性、单试剂阳性、阴性的标本进行NAT检测HBVDNA,检测模式为6人份混样检测,混样NAT检测结果阳性的标本再进行单人份拆分NAT检测。观察ELISA与NAT检测血液HBV结果的符合率。结果59483例血液标本中ELISA检测双试剂阳性NAT检测阳性的标本25例,ELISA检测单试剂阳性NAT检测阳性的标本30例,ELISA检测阴性NAT检测阳性120例,ELISA检测双试剂阳性NAT检测阴性的标本6例,ELISA检测单试剂阳性NAT检测阴性的标本38例,ELISA检测阴性NAT检测阴性的标本59264例。ELISA检测双试剂阳性、单试剂阳性与NAT阳性的符合率分别是80.6%和44.1%,总符合率为55.5%。结论在献血者血液HBV筛查中,ELISA检测与NAT检测技术各具优势,互为补充,两者联检对降低HBV输血传播的发生,保障血液安全具有重要作用。     

羊布鲁菌BCSP31蛋白表达纯化及其单克隆抗体的制备

目的：表达并纯化羊布鲁菌BCSP31蛋白,制备其单克隆抗体（mAb）．方法：采用GST亲和层析纯化的方法纯化BCSP31蛋白．用纯化的BCSP31蛋白免疫小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤Sp2／0细胞融合,ELISA间接法筛选阳性克隆,3次克隆化后建立杂交瘤细胞系．采用小鼠腹腔接种杂交瘤细胞制备腹水,正辛酸-硫酸铵法纯化mAb．采用Western Blot和ELISA等方法鉴定mAb特性．结果：GST—BCSP31融合蛋白在25℃诱导时为可溶性表达,经亲和层析纯化,获得BCSP31纯化蛋白0．5g／L;Western Blot检测结果显示所获蛋白可与兔抗布鲁菌阳性血清特异性反应．获得2株mAb,分别命名为1F1,1E5．结论：BCSP31蛋白的纯化及其mAb的制备为布鲁菌病的诊断与防治奠定了一定的物质基础．