环孢素致离体肾小管上皮细胞损伤时的氨基酸代谢及甘,丙氨酸的保…

目的 研究环孢素Ａ（ＣｓＡ）的肾毒性机制。方法 制备了体外ＣｓＡ致肾小管上皮细胞（ＴＥＣ）损伤模型，对ＴＥＣ内氨基酸组成、含量、ＡＴＰ水平及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放率等指标进行了一系列检测。结果 （１）经ＣｓＡ处理，ＴＥＣ内氨基酸水平没有明显豪华；（２）体外投入甘、丙氨酸对ＣｓＡ所致的损伤可起保护作用，其作用与投入时机及剂量有关，而与Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶的抑制无直接联系。结论 ＣｓＡ肾中毒的     

环孢素A对鼠肾小管上皮细胞的毒性作用

目的 研究环孢素A(CsA)对鼠肾小管上皮细胞的毒性作用及病理学机制。方法 利用体外培养实验法，将鼠肾小管上皮(NRK-52E)细胞，在体积分数95％O2／5％CO2、37℃的条件下培养24h后，用不同浓度的CsA处理48h。对细胞损伤的形态学、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量及细胞的脱落死亡进行观察和检测；细胞凋亡采用TUNEL染色法检测。结果 用CsA处理48h后。NRK-52E细胞出现了空泡化、脱落以至大片死亡；培养基中LDH含量明显增高。同时，经CsA处理的部分NRK-52E细胞核出现了明显断片化，TUNEL染色阳性，发生了细胞的凋亡。CsA对NRK-52E细胞的这种毒性作用与使用剂量和时间呈正相关。结论 CsA对鼠肾小管上皮细胞的毒性作用较强。细胞凋亡可能是CsA致肾小管细胞毒性的重要病理学机制之一。     

钙超载与氧自由基：镉致离体肾小管上皮细胞损伤中的作用及联系

钙超载与氧自由基机制是细胞发生损伤的两大重要分子学机制。本文以离体肾小管上皮细胞为研究对象，重金属隔为损伤因素，着重探讨了镉致肾小管损伤中钙超载及氧自由基双重损伤机制的各自作用及联系，此外，尚观察了中药三七皂甙对上述机制的可能影响。结果发现，当镉与肾小管上皮细胞共同孵育后，［Ｃａ＾＋＋］ｉ及脂质过氧化代谢产物明显升高，氧自由基清除酶活力下降，提示钙超载机制及氧自由基机制共同参与了镉致肾小管上皮细胞     

姜黄素保护大鼠肾小管上皮细胞对抗氧化应激引起的损伤作用

目的 探讨姜黄素对氧化应激诱导大鼠近端肾小管上皮细胞 (NRK-52E) 损伤作用的影响。 方法 用不同浓度的H2O2处理NRK-52E细胞,建立氧化应激损伤NRK-52E的实验模型。应用Hoechst 33258染色法观察凋亡细胞的形态学改变;PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western印迹法检测Bcl-2蛋白的表达。 结果 H2O2在100~500 μmol/L浓度范围内处理NRK-52E细胞24 h,呈浓度依赖性地增加细胞的凋亡率;500 μmol/L H2O2能显著抑制NRK-52E细胞Bcl-2的表达（P < 0.05）。20 μmol/L和40 μmol/L姜黄素能显著阻断H2O2对NRK-52E细胞的致凋亡作用[（32.9±8.1）%、（22.23±9.3）%比（72.7±10.5）%,均P < 0.05],并能显著拮抗H2O2对Bcl-2蛋白表达的下调作用（P < 0.05）。40 μmol/L姜黄素本身也能上调Bcl-2蛋白的表达（P < 0.05）。 结论 姜黄素能保护NRK-52E细胞对抗氧化应激引起的细胞凋亡,此肾小管上皮细胞保护作用可能与其抑制H2O2对Bcl-2蛋白表达的下调作用有关。     

N-乙酰半胱氨酸对碘海醇诱导肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对碘海醇引起人肾小管上皮细胞（HK-2）损伤的保护作用及机制。 方法 将体外培养的HK-2细胞分为4组：对照组、碘海醇组、NAC组、NAC预处理＋碘海醇共作用组。用细胞增殖/毒性检测法（CCK-8）测定细胞存活率;核染色、AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;二氯二氢荧光素双醋酸盐（DCFH-DA）荧光结合流式细胞法检测细胞内活性氧（ROS）的产生;免疫荧光（IF）、Western印迹法检测相关信号转导途径。 结果 碘海醇呈剂量和时间依赖性诱导HK-2细胞凋亡,降低细胞存活率。碘海醇使细胞内ROS升高至对照组的1.3倍。NAC（5、10、15 mmol/L）预处理与碘海醇共作用后, HK-2细胞存活率分别增至104%、118%、130%,与碘海醇组（63%）差异有统计学意义（P < 0.05）;凋亡率分别降为13.51%、13.46%、12.23%,与碘海醇组（24.41%）差异亦有统计学意义（P < 0.05）;活性氧分别降为对照组的1.05、0.93、0.86倍,与碘海醇组（对照组的1.3倍）差异亦有统计学意义（P < 0.05）。碘海醇作用于HK-2细胞,引起p53磷酸化,上调Bax,下调Bcl-2的表达,促进线粒体内细胞色素C（CytC）释放到胞质,进而引起半胱天冬氨酸蛋白酶（caspase）-3活化,导致细胞凋亡。NAC降低细胞内ROS浓度,下调Bax表达,上调Bcl-2表达,减少caspase-3活化,从而减轻细胞损伤。 结论 碘海醇增加细胞内ROS生成,引起p53磷酸化,进而影响Bcl-2家族蛋白表达,促进CytC从线粒体释放和激活caspase-3信号通路,导致细胞凋亡。NAC通过清除氧自由基,降低细胞内ROS浓度,进而减轻碘海醇诱导的氧化应激所致细胞损伤及凋亡。     

柠檬酸对纳米细菌致人肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的:体外观察柠檬酸对纳米细菌(NB)致人肾小管上皮细胞损伤的影响,并探讨其可能机制。方法:取对数生长期人肾小管上皮细胞并随机分为五组:对照组、损伤组、干预组A、干预组B及干预组C。检测各组细胞中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和一氧化氮(NO)水平,实时荧光定量PCR检测ICAM-1mRNA相对表达量,Western blot检测ICAM-1、NF-κB p65、p-IκBα蛋白的表达。结果:与对照组比较,损伤组MDA含量、NO水平显著增加,SOD活性显著下降,柠檬酸干预后,MDA含量、NO水平降低,SOD活性升高,而且上述改变随柠檬酸浓度增加而明显,差异有统计学意义(P0.05)。RT-PCR法检测结果显示对照组、损伤组、干预组A、干预组B和干预组C ICAM-1mRNA相对表达量分别为1、36.56±2.65、17.36±1.51、6.76±0.95和2.77±0.46;Western blot法检测结果显示各组细胞ICAM-1蛋白相对表达量分别为0.35±0.05、0.93±0.03、0.86±0.04、0.81±0.04和0.70±0.03;NF-κB p65蛋白相对表达量分别为0.41±0.03、0.99±0.02、0.91±0.03、0.82±0.03和0.55±0.05;p-IκBα蛋白表达量分别为0.21±0.04、0.61±0.05、0.52±0.03、0.44±0.03和0.32±0.02。结论:NB作用于体外培养的人肾小管上皮细胞后可通过激活NF-κB通路来刺激细胞表达ICAM-1,而柠檬酸可显著抑制此过程,且具有剂量依赖性。     

顺铂肾小管损害中线粒体改变及氨基酸的保护作用

我们观察了顺铂引起的肾小管细胞线粒体改变及８种Ｌ－氨基酸合剂对肾脏功能的保护作用，并探讨其作用机制。 一、方法 实验选用雄性ＳＤ鼠，体重２５０～３５０ｇ。体内实验共３ｈ。一侧股静脉中插入双通道静脉输液器，用于注射顺铂及０．９％氯化钠或氨基酸合剂。切开腹中线进腹腔，于肾血管平面下插动脉导管进腹主动脉，记录平均动脉压，实验中维持在１００～１２０ ｍｍＨｇ。每３０ｍｉｎ收集尿一次用于测尿流率和尿肌酐，实验完成时从门静脉抽血２ｍｌ测血肌酐；结扎肠系膜上动脉及肾血管上腹主动脉，经动脉导管用４℃灌注液冲洗一侧…     

离体肾小管低氧,氧复苏损伤中的脂类介质和磷脂酶A2

从体外制备肾小管上皮细胞低氧、氧复苏模型入手，着重分析了低氧、氧复苏损伤过程中磷酯酶（ＰＬ）Ａ＿２的活性变化，ＰＬＡ＿２活性变化与细胞内钙稳态、脂质过氧化产物（ＬＰＯ）及ＰＧｓ、ＴｘＡ等脂类介质之间的关系，以探究低氧、氧复苏致肾小管上皮细胞损伤的本质。结果发现，在低氧及低氧、氧复苏时，ＰＬＡ＿２活性逐渐升高，尤其在氧复苏过程中，ＰＬＡ２活性升高明显；与此同时，［Ｃａ］ｉ自始至终处于高水平状态，两者呈明显相关关系（ｒ＝０．６８，Ｐ＜０．０１）。人为调节细胞外钙离子浓度也发现，Ｃａ浓度可明显影响ＰＬＡ＿２活性。ＰＬＡ＿２的激活呈明显Ｃａ依赖性。推测在低氧、氧复苏性损伤中，ＰＬＡ＿２的激活极有可能是由于低氧、氧复苏造成的细胞内钙离子浓度增高所致。ＰＬＡ＿２的损伤作用可能与由其引起的脂质过氧化及脂类介质的产生与释放有关。ＣｙＡ可明显阻断ＰＬＡ＿２的激活以及过氧化脂质、脂类介质的大量产生和堆积，缓解低氧、氧复苏所造成的细胞损伤。     

环孢素A诱导人肾小管上皮临近细胞的上皮-间质细胞转化（EMT）

肾小管间质纤维化是限制环孢素A临床应用的一个相对常见并发症。环孢素A可以通过EMT直接影响肾小管上皮细胞。EMT在胚胎发育和肿瘤形成过程中发挥着重要作用，同时对器官纤维化形成中的器官重建起一定的作用。为探讨环孢素A是否能够诱导肾小管上皮细胞EMT，研究者观察不同浓度的环孢素A对人肾小管上皮细胞的作用。结果发现，环孢素A可以诱导上皮细胞形态学显著变化包括细胞形态变化、细胞骨架蛋白压力纤维形成、粘附蛋白β-连环蛋白的离域作用以及Ⅳ型胶原和纤维粘连蛋白表达水平的提高。另外，环孢素A诱导EMT和TGF-β1蛋白水平密切相关，在抗TGF-β1抗体存在的情况下，EMT被明显抑制。     

丹参对马兜铃酸致肾小管上皮细胞损害的保护作用研究

目的:探讨丹参对马兜铃酸(aristolochic acid,AA)所致肾小管上皮细胞损害的保护作用.方法:以95%DMEM培养液加5%小牛血清培养肾小管上皮细胞株(NRK-52E),加入不同浓度的丹参和马兜铃酸,采用MTT法来观察肾小管上皮细胞存活以及生长的状况;用碘化丙啶(PI)染色方法确认细胞凋亡的发生.结果:马兜铃酸浓度超过10 mg/ml时肾小管上皮细胞的活力显著抑制(P＜0.05).以丹参3.0、15、30、60 mg/ml处理后的肾小管上皮细胞再加入AA(10 mg/ml浓度),则肾小管上皮细胞的活力明显增加,且随着丹参浓度的增加其作用愈趋明显(P＜0.01),丹参明显抑制AA所造成肾小管上皮细胞的凋亡(P＜0.01).结论:丹参(3.0、15、30、60 mg/ml)通过减少马兜铃酸致肾小管上皮细胞的凋亡,可明显保护肾小管上皮细胞,且其作用随着丹参浓度的增加而加强.     

钙离子拮抗剂及精氨酸对离体肾小管上皮细胞造影剂损伤的保护作用

随着影像学设备特别是CT及介入放射学的普遍应用,使用造影剂后导致或加重肾功能损害受到人们的关注.目前对造影剂引起肾中毒的机制尚不十分清楚.本研究中,我们探讨造影剂肾病(CAN)的发生机制,同时初步探讨钙通道拮抗剂及精氨酸(L-arginine,L-Arg)对离体肾小管上皮细胞造影剂损伤的保护作用机制.     

促红细胞生成素对马兜铃酸致肾小管上皮细胞损伤保护作用的初步观察

目的：探讨促红细胞生成素（EPO）对马兜铃酸（AA）刺激后肾小管上皮细胞再生的影响。方法：以5、10、20雠倒AA刺激LLC—PK1细胞株，同时培养体系中加入不同浓度的EPO（5、10、20U/ml），另设对照组。各组细胞培养24h后．TUNEL法原位检测细胞凋亡情况，免疫组化检测细胞PCNA的表达。结果：TUNEL结果表明，经AA5μg／ml刺激后．核染色阳性的细胞百分比与对照组比较无明显差异，而AA10μg／ml、20μg／ml刺激后，核染色阳性的细胞百分比与对照组比较明显增加（P〈0.05）；经EPO干预后，EPO 10U/ml和EPO 20U/ml可明显降低AA10μg／ml组阳性细胞的百分比（P〈0．05）。免疫组化显示：经AA5μg／ml刺激后，细胞核PCNA阳性表达增加，而经AA10μg／ml、20μg／ml刺激后，细胞核PCNA阳性表达逐渐减弱；加入不同剂量的EPO后，AA10μg／ml组PCNA阳性细胞均增多（P〈0.05）。结论：EPO可抑制AA诱导的肾小管上皮细胞凋亡、并促进细胞的再生，这可能是EPO对马兜铃酸致肾小管上皮细胞损伤的保护机制之一，其作用机制有待进一步深入研究。     

黄芪甲苷对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的:旨在探究黄芪甲苷(ASI)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞损伤的抑制作用,并阐明其机制。方法:体外培养人肾小管上皮细胞,进行分组:正常对照组:低糖(葡萄糖浓度5.5mmol/L)环境下培养;高糖组:高糖(葡萄糖浓度25mmol/L)环境下培养;ASI各组:分别在高糖培养基内加入不同浓度ASI(包括25、50、100、200μg/ml),在处理后0、1、12、24、48、96h观察,采用TUNEL法和caspase3检测各组细胞凋亡情况,采用ELISA法检测TGF-β1和HGF蛋白含量,采用Western blot检测磷酸化p-38、磷酸化ERK和磷酸化JNK浓度。此外,另在同样高糖培养基内加入p38抑制剂SB202190,1、12、24h观察细胞凋亡情况。最后,取同样高糖环境培养细胞,依次加入HGF50、100、200μg/ml,24h后检测细胞内磷酸化p38蛋白水平。结果:ASI(25～200μg/ml)可抑制高糖诱导的人肾小管上皮细胞凋亡,其抑制作用呈现剂量依赖性与时间依赖性。ASI同样可抑制高糖诱导的TGF-β1蛋白表达和p38MAPK信号通路活性。此外ASI可提高肾小管上皮细胞内HGF浓度;HGF可对p38MAPK信号通路产生抑制作用。结论:ASI抑制高糖诱导的人肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与ASI促进HGF分泌,阻断p38MAPK信号通路,进而抑制细胞凋亡以及TGF-β1的表达有关。ASI可能有助于糖尿病肾病的治疗。     

甘草酸对马兜铃酸致肾小管上皮细胞损害保护作用的初步研究

目的:探讨甘草酸(glycyrrhizin,GL)对马兜铃酸(aristolorchic acid,AA)肾损害的保护作用,观察GL是否可以减轻AA对培养的肾小管上皮细胞的损害.方法:5?S RPMI-1640培养肾小管上皮细胞(LLC-PK1),采用结晶紫染色法观察细胞增殖;荧光染色观察活细胞数目;酶动力学检测LDH活性,比色法检测NAG水平;透射电镜观察细胞超微结构.结果:(1)AA 40、80、160 μg/ml可明显抑制细胞增殖,结晶紫OD值显著减少,与无AA对照组比较(P<0.01).(2)GL在5、10、25 μg/ml时结晶紫OD值与无GL对照组比较(P>0.05);GL在50 μg/ml时P<0.05,100 μg/ml、200 μg/ml时P<0.01,提示大剂量GL可改善AA抑制细胞增殖的作用.(3)在AA 40 μg/ml作用下;随着时间延长,无GL组的细胞存活数目逐渐减少,而GL(100 μg/ml、200 μg/ml)作用组,活细胞数目明显增多,显示高浓度GL对细胞损伤有一定的保护作用.(4)GL在5、10、25 μg/ml时,LDH释放率、NAG酶水平与无GL对照组比较(P>0.05),GL在50 μg/ml时P<0.05,GL在100 μg/ml、200 μg/ml时LDH释放率、NAG酶明显减少,与无GL组比较(P<0.01).提示大剂量GL可减轻AA的细胞毒作用.(5)细胞超微结构观察:AA 40 μg/ml作用24 h后,细胞超微结构发生显著改变,以核变异最突出,出现核分叶、巨核、染色质浓染、核边集、核缺失、核膜卷曲增厚,线粒体肿胀等严重细胞损伤改变.GL 100 μg/ml、200 μg/ml组上述改变均较轻微.结论:GL可明显改善AA对肾小管上皮细胞增殖的抑制作用;改善细胞超微结构.     

丹参注射液对造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的：研究丹参注射液对造影剂碘海醇诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用并对其作用机制进行探讨。方法：体外培养的人肾小管上皮细胞（HK-2细胞）,分为正常对照组、甘露醇对照组（与碘海醇渗透压相当）、造影剂对照组（碘海醇100mg/ml）、丹参防治组（碘海醇100mg/ml＋丹参注射液15mg/ml）。比色法测定细胞培养上清液LDH水平,MTT法测定细胞增殖活力,DCFH-DA荧光探针测定细胞内活性氧（ROS）,硫代巴比妥酸法测定细胞内MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,RT-PCR测定细胞内血红素加氧酶-1（HO-1）mRNA表达,Westernblot检测细胞内HO-1蛋白表达。结果：碘海醇100mg/ml可明显抑制HK-2细胞增殖、引起培养液中LDH水平上升、促使细胞内ROS和MDA含量增高而细胞内SOD活性下降,同时碘海醇可诱导HO-1mRNA和蛋白表达上调。加入丹参可明显降低培养液中LDH水平,促进细胞增殖,同时抑制细胞内ROS的产生,降低细胞内MDA含量,保护细胞内SOD活性,并使HO-1mRNA和蛋白表达进一步增强。结论：丹参对造影剂碘海醇所致肾小管上皮细胞具有明显的保护作用,其作用机制与其抗氧化能力及诱导HO-1表达有关。     

全反式维甲酸对大鼠肾小管上皮细胞缺氧性损伤保护作用的体外研究

目的 探讨全反式维甲酸(atRA)对大鼠肾小管上皮细胞缺氧性损伤的保护作用及其相关机制.方法 对大鼠肾小管上皮细胞进行体外培养,根据研究需要分四组,分别为对照组、CoCl2刺激组、atRA刺激组以及CoCl2与atRA共同刺激组,做如检测:用凝胶电泳迟滞分析(EMSA)测定各组别细胞NFκB活性,用qRT - PCR和Western blo分别检测各组别细胞NFκB亚单位p65,Scpep1、VEGF mRNA与蛋白表达水平,用免疫共沉淀检测NFκB亚单位p65与Scpep1相互作用.结果 CoCl2刺激组中VEGF mRNA与蛋白水平的表达明显高于对照组(P＜0.01).atRA刺激组中VEGF的mRNA与蛋白水平表达明显低于对照组(P ＜0.05).CoCl2刺激组中p65 mRNA与蛋白水平的表达明显高于对照(P＜0.01).atRA刺激组中VEGF 的mRNA与蛋白水平表达明显低于对照组(P＜0.05).共同刺激组中p65的表达受到抑制,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).CoCl2刺激组中NFκB的DNA结合力明显高于正常组(P＜0.01).而atRA刺激组中NFκB的DNA结合力受到显著抑制,与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).在共同刺激组,NFκB的活性同样受到抑制,与对照组比,差异有统计学意义(P＜0.05).atRA刺激组中Scpep1mRNA与蛋白水平的表达水平显著高于对照组(P＜0.01).与对照组比较,CoCl2刺激组中Scpep1的mRNA与蛋白水平表达无明显变化,差异无统计学意义(P＞0.05).免疫沉淀结果显示,p65与Scpep1存在相互关联.结论 atRA通过Scpep1对NFκB复合物形成及其活性产生抑制效应,从而减弱VEGF的表达,对缺氧性损伤的肾小管上皮细胞发挥保护作用.     

氯离子通道阻断剂对氧化剂诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的研究氯离子（Cl-）通道阻断剂在氧化剂诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用。方法以H2O2诱导肾小管上皮细胞株（LLC-PK1）损伤，观察Cl-通道阻断剂对受损细胞LDH释放量、ATP含量和DNA降解程度的影响。结果Cl-通道阻断剂可使受损细胞的LDH释放量下降、ATP含量回升和DNA降解程度减轻。结论Cl-通道参与了氧化剂对细胞损伤的病理过程，Cl-通道阻断剂对肾小管上皮细胞具有保护作用。     

骨髓间充质干细胞干预对缺血再灌注致小鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)干预对缺血再灌注(I/R)诱导的急性肾损伤小鼠肾小管上皮细胞(RTECs)自身修复的影响.方法 Percoll密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化出C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞(mMSCs),5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记.雄性C57BL/6小鼠45只,分为正常对照组(15只)、I/R组(15只、夹闭双侧肾蒂30 min开放)、I/R+Brdu-mMSCs组(15只、夹闭双侧肾蒂30 min开放的同时尾静脉注射BrdU标记的mMSCs).留取动脉血及肾组织,检测血尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)水平,制作肾组织切片行苏木素-伊红(HE)染色,荧光组织化学观察mMSCs在受体小鼠肾组织的分布,免疫组织化学观察RTECs增强细胞核抗原(PCNA)的表达,TUNEL法检测RTECs凋亡,Western blot检测建模后第2天肾小管组织中Caspase-3、bcl-2蛋白的表达.结果 BrdU标记mMSCs的阳性率可达(98.71±0.32)%.I/R+BrdU-mMSCs组小鼠的BUN及Scr水平较I/R组为低,肾小管损伤病理明显减轻,且小鼠的肾脏中可检测到BrdU+细胞的分布.mMSCs干预后,RTECs细胞核PCNA阳性表达明显增多(P＜0.05或P＜0.01),而细胞凋亡的水平却较I/R组明显减少(P＜0.05或P＜0.01).Western blot进一步显示:I/R+BrdU-mMSCs组小鼠的肾组织中Caspase-3蛋白水平明显下降[(1.16±0.33)比(1.64±0.27),P＜0.01],而bcl-2水平却明显增高[(0.94±0.27)比(0.68 ±0.15),P＜0.01].结论 小鼠发生I/R诱导的急性肾损伤后可诱导移植的MSCs向损伤肾组织归巢,锚定在肾脏的MSCs可促进损伤RTECs的再生,抑制其凋亡,从而有助于RTECs的自身修复,延缓肾损害进展.

Abstract：

Objective To observe the effects of mesenchymal stem cells (MSCs) on self-repair of renal tubular epithelial cells ( RTECs) in mice under ischemia/reperfusion ( IR). Methods MSCs in C57BL/6 mice were successfully isolated by Percoll density gradient centrifugation and adherence cultivation, then marked with BrdU. Forty-five healthy male C57BL/6 mice were assigned to control group (n =15 ) , I/R group (n = 15 , clamping bilateral renal pedicles and then reopening after 30 min) , I/R + BrdU-MSCs group (n = 15 , clamping bilateral renal pedicles and then reopening after 30 min, meanwhile, BrdU-marked MSCs were injected through caudal vein into the body of model mice). One, 2,3,7 and 14 days later, the mice were killed (n = 3/each group) , and blood and kidneys were obtained. Serum creatinine (Scr) and urea nitrogen (BUN) were determined, and mice kidneys were stained with Hematoxylin and Eosin ( HE) to observe their pathological changes. The distribution of MSCs in mice was observed by using fluorescence histochemistry. The expression of proliferating cell nuclear antigen ( PCNA) in RTECs was assessed by using immunohistological staining. The apoptosis of RTECs was detected by using TUNEL. The protein levels of Caspase-3 and bcl-2 in renal tubules on the day 2 after establishing the model were detected by using Western blotting. Results The positive BrdU marking ratio was (98. 71 ±0. 32) % in MSCs.As compared with I/R group, the levels of BUN and Scr in I/R + BrdU-MSCs group were significantly reduced, and pathological changes in renal tubules were alleviated significantly. BrdU-marked MSCs desposited in the kidneys of I/R + BrdU-MSCs group. The positive PCNA expression of RTECs was increased significantly after intervention of BrdU-MSCs (P ＜0. 05 or P ＜0. 01) , while the apoptosis relieved significantly. Western blotting analysis revealed: as compared with I/R group, the level of Caspase-3 in I/R + BrdU-MSCs group was decreased notably [(1.16±0.33) vs (1.64±0.27), P＜0.01], while the level of bcl-2 increased significantly [(0.94±0.27) vs (0.68±0.15), P＜0.01). Conclusion Acute renal injury by I/R can induce MSCs homing to injured kidney and anchoring here. The anchored MSCs can contribute to RTECs' self-repair of mice under ischemia/reperfusion, inhibit their apoptosis, which is helpful to the RTECs' self-repair and can delay the progression of renal injury.     

川芎嗪对肾小管功能损伤的保护作用

笔者采用川芎嗪治疗各种原因导致的肾小管功能损害,报道如下。 病例资料：选择2007年8月至12月在我科治疗的肾小管功能损害患者60例,将其随机分为两组,川芎嗪组30例,其中男18例、女12例,年龄（47．60±14．34）岁,