无血缘关系供者外周血干细胞移植和骨髓移植治疗白血病的比较

目的比较无血缘关系供者外周血干细胞移植和骨髓移植在造血重建、T 细胞重建、感染、移植物抗宿主病(GVHD)及疗效等的差异。方法 53例白血病患者中,21例接受无血缘关系供者外周血干细胞移植(PBSCT 组),32例接受无血缘关系供者骨髓移植(BMT 组)。统计分析二者移植后白细胞和血小板重建时间、T 细胞重建、感染率、GVHD、白血病复发、无病生存(DFS)情况。结果PBSCT 组和 BMT 组移植后白细胞重建时间分别为(12.43±3.67)天和(16.16±2.99)天(P<0.01),血小板重建时间分别为(14.67±6.19)天和(21.23±8.25)天(P<0.01)。PBSCT 组和 BMT 组移植后1,3,6,9及12个月的 T 细胞重建差异无统计学意义。PBSCT 组和 BMT 组移植后早期感染率分别为42.86%和53.13%(P>0.05)。PBSCT 组与 BMT 组急性 GVHD 的发生率分别为61.90% 和71.885(P>0.05);在可统计的患者中,慢性 GVHD 的发生率在 PBSCT 组和 BMT 组分别为47.06%和43.48%(P>0.05)。PBSCT 组与 BMT 组移植后分别有4例和2例复发,二者复发率差异无统计学意义(P>0.05);PBSCT 组与 BMT 组移植后2年 DFS 率分别为(50.14±12.00)% 和(59.81±8.99)%,二者差异也无统计学意义(P>0.05)。结论无血缘关系供者 PBSCT 后的造血重建比BMT,但二者移植后 T 细胞重建、感染发生率、GVHD 及 DFS 的差异均无统计学意义。     

异基因骨髓移植治疗Bruton病

目的 探讨异基因骨髓移植（allo-BMT)治疗X连锁无丙种球蛋白血症（Bruton病）的疗效。方法 采用HLA配型相合的同胞allo-BMT治疗Bruton病2例。其中例1进行了2次ABO血型相合，HLA相合的allo-BMT。结果 2例患者分别于allo-BMT后第20天和第13天骨髓恢复造血，免疫球蛋白在3个月内逐渐恢复正常；患者的体液免疫重建。生活质量得到明显提高，2例现在仍无病存活13年和2年。2例患者均未出现严重的移植物抗宿主病。结论 造血干细胞移植可用于Bruton病的治疗。     

小鼠骨髓程序移植的实验研究

目的：探讨进一步提高骨髓移植效果的新方法。方法：以昆明种小鼠急性放射病为模型，进行了骨髓程序移植后小鼠活存率及造血重建、急性移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）的观察。结果：骨髓程序移植可使小鼠移植细胞数降至１０５数量级，活存率达３０％；骨髓程序移植４×１０６个细胞时，于照射后１７天小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞计数显著回升，ＣＦＵＥ、ＣＦＵＧＭ、ＣＦＵＳ、ＣＦＵＦ已达正常，ＧＶＨＤ较一次移植１×１０７骨髓细胞组轻，活存率达６０％，显著高于一次骨髓移植组（３０％）。结论：骨髓程序移植可能充分利用了每次腾出的“龛位”，增加干细胞植入，却减少了移植细胞数，减轻了ＧＶＨＤ，提高了移植效果，是一种较好的移植新方法     

供鼠的活化自然杀伤细胞对小鼠异基因骨髓移植的影响

目的　研究供鼠的活化自然杀伤细胞（ Ｎ Ｋ 细胞） 对小鼠异基因骨髓移植的影响。方法　将荷瘤鼠照射后,于输注骨髓细胞（ 含 Ｔ细胞） 之前４ 小时或之后７２ 小时,注射供鼠的活化 Ｎ Ｋ 细胞,观察荷瘤鼠 Ｃ Ｆ Ｕ Ｓ、 Ｃ Ｆ Ｕ Ｇ Ｍ、生存期、体重、病理组织学和双肺瘤结节等指标。结果　输注供鼠的活化 Ｎ Ｋ细胞能显著促进荷瘤鼠 Ｃ Ｆ Ｕ Ｓ和 Ｃ Ｆ Ｕ Ｇ Ｍ 增殖。输注骨髓细胞前４ 小时输注供鼠的活化 Ｎ Ｋ 细胞能显著提高荷瘤鼠生存率,减轻移植物抗宿主病（ Ｇ Ｖ Ｈ Ｄ） 的病理损伤程度,并使肺瘤结节数量减少;而输注骨髓细胞后７２ 小时输注供鼠的活化 Ｎ Ｋ 细胞能显著加重 Ｇ Ｖ Ｈ Ｄ 病理损伤程度。结论　①在小鼠异基因骨髓移植的初始阶段,输注供鼠的活化 Ｎ Ｋ 细胞能促进造血重建,预防 Ｇ Ｖ Ｈ Ｄ 并同时增强移植物抗肿瘤（ Ｇ Ｖ Ｔ） 效应;输注骨髓细胞之后,输注供鼠的活化 Ｎ Ｋ 细胞则起到加重 Ｇ Ｖ Ｈ Ｄ 的不良作用;② Ｇ Ｖ Ｔ和 Ｇ Ｖ Ｈ Ｄ 是能够被分开的。     

混合骨髓移植——协调GVHD与GVL的移植新策略

移植物抗宿主病(GVHD)与移植物抗白血病(GVL)本质上都是异基因淋巴细胞针对受者MHC的以细胞免疫反应为主的排斥反应。由于存在不依赖GVHD的GVL,以及正常组织对损伤的代偿修复能力,如果把GVHD控制在一定程度之内,就可以保留GVL作用。在异基因移植物中加入同基因成分进行混合移植,为协调GVHD与GVL提示了一种新的移植策略。异基因淋巴细胞是GVL所必需的效应细胞,同基因淋巴细胞可以通过对后者的抑制减轻GVHD的同时保留GVL。GVHD与GVL的平衡可以通过改变同基因与异基因淋巴细胞的比例而实现。临床混合骨髓移植已取得初步成效。     

Prognostic assessment of the acute complications of bone marrow transplantation requiring intensive therapy

Patients with bone marrow transplant may present with acute, life-threatening complications which frequently (40% of our cases) require intensive care unit treatment and result in an increased mortality (76% in this series). In an attempt to reach a more objective prognostic assessment, we have analyzed those factors related to the worst outcome in the 25 patients with bone marrow transplant admitted into our intensive care unit. Respiratory failure was the most frequent complication (72%), with an 83% mortality. Graft-versus-host disease and neutropenia led to a greater number of infectious complications with a poor outcome. Failure of more than three organ systems, septic shock and mechanical ventilation were statistically associated with mortality (p<0.05), and all patients who required mechanical ventilation for more than seven days or needed intensive therapy for more than 10 days died. The presence of septic shock, multisystem failure and severe neutropenia on admission should be considered as initial indicators of a poor prognosis. More than 7 days of mechanical ventilation and an intensive care unit stay of more than 10 days could be critical points in the reassessment of the intensity and prolongation of treatment.     

Biological aspects and clinical results of autologous bone marrow transplantation for acute myeloid leukemia

Summary Autologous bone marrow transplantation is a therapeutic approach that permits the administration of high-dose chemo-radiotherapy followed by the infusion of the patient's own marrow, previously collected during remission and cryopreserved. In recent years, autologous bone marrow transplantation has been increasingly used as a treatment for acute leukemias. The mechanisms underlying leukemic relapse represent the most exciting and controversial aspects of autologous bone marrow transplantation. At least three factors may be responsible for leukemic relapse in patients receiving autologous bone marrow transplantation: (1) minimal residual disease; (2) leukemic cells reinfused with the graft; (3) the lack of a graft-versus-leukemia effect. In this paper, the techniques for pharmacological marrow decontamination and the clinical results obtained with autologous bone marrow transplantation will be reviewed.     

非亲缘异基因骨髓移植术后重症肠道急性移植物抗宿主病的临床分析

目的分析非亲缘异基因骨髓移植术后并发重度肠炎临床和病理特征及治疗情况：方法3例慢性粒细胞白血病慢性期及1例骨髓增生异常综合症患者接受非亲缘异基因骨髓移植术．预处理方案为马利兰／环磷酰胺,以霉酚酸酯(MMF)和环孢霉素(CsA)加短程氨甲蝶呤(MTX)预防急性移植物抗宿主病(aGVHD)。结果4例患者分别于移植后的后22、56、55、47d并发重度肠炎．肠镜和病理活检示肠黏膜充血水肿或上皮层坏死脱落,肠腔正常结构消失,直、结肠多发性溃疡,见较多淋巴细胞和浆细胞浸润,未见巨细胞病毒(CMV)包涵体和巨细胞,诊断为肠道aGVHD。予以糖皮质激素为主的治疗,其中1例予FK506、抗CD3单克隆抗体治疗。3例出现血CMV抗原血症．给予更昔洛韦／磷甲酸钠治疗。1例治疗无效死亡,3例得到有效控制。结论非亲缘异基因骨髓移植后并发aGVHD所致肠炎,诊断有赖于肠镜和病理活检并为正确治疗提供依据。     

非清除性异基因骨髓移植治疗小鼠白血病的实验研究

目的　研究非清除性异基因骨髓移植 (BMT)及其加供者淋巴细胞输注 (DLI)治疗小鼠白血病是否在保留移植物抗白血病效应 (GVL)的同时 ,又能减轻移植物抗宿主病 (GVHD)及移植相关并发症。方法　采用L6 15淋巴细胞白血病小鼠模型 ,非清除性预处理后移植BALB c小鼠骨髓细胞和脾细胞。分 4组 :清除性BMT对照组 (A组 )、非清除性预处理组 (B组 )、非清除性BMT组 (C组 )、非清除性BMT +DLI组 (D组 )。通过受鼠生存期、外周血白细胞和L6 15细胞计数、死亡鼠尸解观察GVL效应 ;通过体重改变、弓背、翘毛、腹泻等表现和肝脏、小肠、皮肤病理学检查观察GVHD ;通过染色体检查和PCR检测嵌合状态。结果　A、B、C、D组生存时间分别为 (2 0 .3± 13.4 )d、(15 .9± 1.1)d、(2 1.6± 1.7)d和 (37.8± 2 .0 )d ,C组和A组生存时间无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,C组生存时间长于B组 (P <0 .0 1) ,D组长于C组 (P <0 .0 1) ;A组有 6 0 %出现GVHD表现及病理学改变 ,而C组和D组均无典型GVHD表现和病理学改变 ;A组有 4 0 %在 2周内死于移植相关并发症 ,C组和D组均无移植相关死亡发生 ;A组一直保持异基因嵌合 ,C组渐被排斥。结论　非清除性BMT有一定的GVL效应 ,加DLI能增强GVL效应 ;非清除性BMT能减轻GVHD及移植相关并发症。     

复制缺陷性慢病毒介导的双自杀基因在小鼠异基因骨髓移植中的应用

目的　探讨复制缺陷性慢病毒介导的胞嘧啶脱氨酶 (cytosinedeaminase,CD)和胸苷激酶(thymidinekinase ,TK)双自杀基因在异基因骨髓移植 (allo BMT)时控制移植物抗宿主病 (GVHD)的可行性及其有效性。方法　将携带双自杀基因的复制缺陷性慢病毒通过脂质体转染入T细胞中。将经6 0　Coγ射线照射后的荷瘤小鼠分组进行骨髓移植 ,观察骨髓移植后荷瘤鼠CFU S、CFU GM、Y染色体整合、T细胞中CD TK基因整合、生存率和生存期、体重及病理组织学等指标。结果　复制缺陷性慢病毒载体可将双自杀基因高效稳定转染入T细胞。在allo BMT中 ,除空白对照组外 ,各组小鼠的CFU S的数目和CFU GM产率差异无显著性 ,且均有Y染色体整合。使用前体药物治疗的小鼠未发生明显的GVHD ,其生存率和生存期明显高于其它各组 ;双自杀基因的效果优于单自杀基因。结论　复制缺陷性慢病毒介导的双自杀基因系统可在不影响移植物存活的情况下有效控制GVHD的发生 ,显著提高allo BMT的成功率。     

激活骨髓自体移植治疗白血病

为降低自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）后的复发。采用重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）激活骨髓（ＡＢＭ）自体移植治疗白血病１１例。１０例预处理用ＭＡＣＣ（马法兰、阿糖胞苷、环磷酰胺和环已亚硝脲）方案、１例用全身照射＋环磷酰胺方案；移植后当天开始用ｒＩＬ－２（２～４）×１０￣５Ｕ／ｄ×（１５～３０天），０～＋５天开始用Ｇ－ＣＳＦ３００μｇ／Ｌ×（５～１５天）。结果：所有患者造血都得到重建，时间缩短；移植前５例未缓解患者移植后均获完全缓解（ＣＲ），２例在移植后１０个月与１３２天复发，其它９例持续ＣＲ至１９９６年３月，ＣＲ期为５６天～３０个月。２例出现皮肤移植物抗宿主病样表现；移植中感染发生率为３６．４％。结论：ＡＢＭ自体移植治疗白血病有效，并可能诱导移植物抗白血病效应，降低ＡＢＭＴ的复发率，联合应用Ｇ－ＣＳＦ和ＩＬ－２能加速移植后造血重建。     

骨髓间充质干细胞对异基因骨髓移植后aGVHD和GVL的影响

为了观察骨髓间充质干细胞(BMMSC)对异基因骨髓移植(allo-BMT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)和移植物抗白血病(GVL)效应的影响，以急性淋巴细胞白血病(ALL)小鼠为动物模型，对其进行allo-BMT的同时，静脉输注体外培养的供鼠BMMSC，同时设立单纯allo—BMT对照组。记录受鼠存活时间；观察受鼠发生aGVHD一般反应及病理学变化；用流式细胞术检测受鼠CD4^ 、CD8^ T细胞亚群的差异；采用性染色体检查检测嵌合状况。结果显示：BMMSC推迟aGVHD发生的时间；降低CD4^ T细胞的同时增加CD8^ T细胞的数量；明显延长受鼠allo—BMIT后的生存时间。结论：BMMSC与allo-BMT联合进行具有一定的GVL效应；BMMSC能抑制allo—BMT后aGVHD的发生，但同时具有一定的GVL效应。     

异种骨髓移植移植物抗宿主反应的实验动物模型

为了观察大鼠和小鼠间异种骨髓移植中移植物抗宿主病 (GVHD)的现象 ,建立动物模型。受体BALB/c小鼠接受 8.5Gy全身照射后 ,一组 (n =10 )输入SD大鼠骨髓细胞 4× 10 7,另一组 (n =10 )输入SD大鼠骨髓细胞 4× 10 7及脾细胞 2× 10 7,观察 6 0天 ,记录受鼠发生GVHD情况。结果表明 :单纯骨髓细胞输入组 8只鼠存活超过 6 0天 ,另 2只鼠分别于 18天和 31天死亡 ,肝、小肠病理切片未见明显GVHD。而骨髓细胞及脾细胞输入组均于14天内死亡 ,肝、小肠病理切片证实有GVHD。结论 :大、小鼠间异种全骨髓细胞移植未见明显GVHD ,建立GVHD模型需要加入脾细胞     

异基因造血干细胞移植后发生巨细胞病毒感染的临床分析

本研究总结巨细胞病毒(CMV)感染的发生及治疗。对北京军区总医院血液科2010年1月至2012年1月140例异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者的临床资料进行了回顾性分析。结果表明,140例allo-HSCT中48例患者发生移植后CMV感染,发生率为34.3%,首次检出CMV-DNA阳性中位时间为移植后45(33-68)d,CMV定量范围为1.25×103-5.5×106,其中2例为CMV相关性间质性肺炎,5例为CMV相关性出血性膀胱炎。发生移植物抗宿主病(GVHD)患者共65例,其中合并CMV感染32例,占49.2%。应用更昔洛韦、膦甲酸钠抗CMV治疗45(33-68)d后CMV-DNA转阴,有效率为100%。共有12例患者治疗过程中出现一过性的白细胞和血小板减少。结论:allo-HSCT后较易发生CMV感染,发生GVHD的患者CMV感染发生率也较高,更昔洛韦、膦甲酸钠对allo-HSCT后CMV感染的治疗效果可靠,且不良反应少。     

细胞因子基因表达在急性移植物抗宿主病中的意义

移植物抗宿主病(GVHD)是异基因骨髓移植后主要的并发症,是影响骨髓移植成功及病人预后的重要因素之一。细胞因子过度表达,是GVHD发生的主要病理生理学基础。本实验采用斑点杂交和细胞原位杂交方法研究了急性GVHD时患者外周血淋巴细胞中6种细胞因子基因表达的情况,发现急性GVHD时,各种细胞因子表达均有不同程度的升高。提示细胞因子在急性GVHD发病过程中具有重要意义,通过细胞因子的表达调控以预防和治疗GVHD,可能是一个颇具前景的方向。     

HLA基因位点全相合和1～2个位点不合无血缘关系异基因骨髓移植的临床疗效比较

目的　比较HLA基因位点全相合与HLA 1～ 2个基因位点不合无血缘关系供者异基因骨髓移植 (URD BMT)的临床疗效。方法　病例包括急性白血病 2 2例 ,慢性髓系白血病慢性期 32例 ,骨髓增生异常综合征 (MDS) 6例。其中HLA基因位点全相合URD BMT 39例 ,1～ 2个位点不合URD BMT 2 1例。预处理方案均为Bu Cy2方案 ,急性移植物抗宿主病 (aGVHD)预防方案均为霉酚酸酯(MMF)、环孢菌素A(CsA)加甲氨蝶呤 (MTX)联合方案。结果　HLA基因位点全相合组造血重建 38例 ,中位随访时间 11(2 .5～ 5 2 .0 )个月 ,3年无病生存率 (79.2± 7.1) % ,HLA 1～ 2个位点不合组造血重建18例 ,中位随访时间 9(2～ 4 6 )个月 ,3年无病生存率 (45 .8± 15 .5 ) % (P <0 .0 5 )。Ⅱ～Ⅳ度aGVHD发生情况 :HLA基因位点全相合组 10例 (2 6 .3% ) ,HLA 1～ 2个基因位点不合组 6例 (33.3% ) (P >0 0 5 )。结论　URD BMT是治疗白血病和MDS的有效方法 ,HLA基因学配型技术可提高URD BMT的疗效。     

化学修饰物甲氧基聚乙二醇对异基因骨髓移植影响的研究

为了探讨经甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰的骨髓移植物对异基因移植并发症———移植物抗宿主病(GVHD)的影响,将BALB/cH2d小鼠经60Coγ线8.0Gy照射后随机分3组。A组经尾静脉注射RPMI1640,B组注射615H2k小鼠的骨髓及脾细胞混合悬液,C组注射等量的mPEG修饰后的骨髓及脾细胞混悬液。通过小鼠外观的观察、存活率和存活时间的测定及组织病理检查研究GVHD程度,通过染色体检查研究植入情况。研究结果表明:B组出现脱毛等表现较C组早,程度重,重症病例多(P≤0.05)。B组死亡小鼠30天存活率20%,平均存活时间为12.1±2.4天,C组为50%,平均存活时间为16.1±2.9天(P≤0.05);B组出现Ⅲ度GVHD比例为59%,C组为20%(P=0.050),B组和C组的异基因骨髓成功植入。结论:mPEG修饰的骨髓移植物可减轻GVHD程度,有望延长生存时间,提高生存率。     

霉酚酸酯对小鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病的预防作用

目的：探讨新型免疫抑制剂霉酚酸酯（MMF）对小鼠异基因骨髓移植（allo-BMT)后急性移植物抗宿主病（aGVHD)的预防作用。方法：用主要组织相容性抗原（MHC）完全不合的纯种近交系小鼠[供鼠：雌性C57BL／6J（H－2^b)鼠；受鼠：雄性BALB／c(H-2^d)鼠]建立allo-BMT/aGVHD动物模型，随机分6组，给予MMF、环孢菌素A（CsA) 甲氨喋呤（MTX）或联合不同剂量MMF作为aGVHD预防方案。观察其aGVHD的预防作用。结果：移植小鼠出现典型的aGVHD症状，未用aGVHD预防方案的移植小鼠（第6组）死亡高峰在移植后第5－第7天，死亡率达100％。用不同aGVHD预防方案的1－5组小鼠aGVHD症状明显减轻，平均生存时间（MST）较第6组显著延长（分别延长3．4，8．4，9．0，6．1，8．8d（P＜0．05）。不同aGVHD预防方案的移植小鼠之间，移植后外周血常规变化差异无显著性。经用各预防方案后，移植小鼠cGVHD病理表现减轻，且MMF、CsA、MTX三药联合组的病理分级轻于MMF单药组或CsA MTX标准方案组。结论：MMF单药及与CsA MTX联合均能有效预防小鼠allo-BMT后的aGVHD，减轻其症状和病理损害程度，显著延长平均生存时间。小剂量MMF（≤30mg/kg）与CsA TMX的联用效果优于大剂量MMF（60mg/kg）与CsA MTX的联用效果。适当剂量的MMF（10－60mg/kg）对骨髓植入和造血恢复没有显著影响。