光学及荧光显微镜在细胞凋亡检测中的应用

为观察细胞培养中细胞凋亡的形态及数量,取4℃环境下不同时间培养的小鼠胸腺细胞,用光镜或吖啶橙(AO),溴化乙锭(EB)染色后荧光镜观察。光镜下可见凋亡小体,荧光镜下早期凋亡细胞发绿色或暗绿色荧光,伴有核结构的变化,而晚期凋亡细胞发橙红色荧光并有凋亡小体的形成。结果表明:光镜下需出现典型核形态变化时凋亡才能确认,AO和EB双重荧光染色后荧光镜检在细胞凋亡检测中既可定性,又可定量。     

兔椎间盘髓核细胞体外培养自然退变的观察

目的 观察体外培养的兔髓核细胞不同代数之间细胞形态、NOS活性、NO含量、细胞总蛋白含量的变化;制作兔髓核细胞体外培养的退变模型.方法 酶消化及自然传代法分离培养体外兔椎间盘髓核细胞,HE染色光镜观察髓核细胞形态;利用分光光度法检测P1、P3代细胞培养液中NOS活性和NO含量,考马斯亮蓝法检测细胞总蛋白含量.结果 ①成功建立了兔椎间盘髓核细胞的体外培养模型;②随着传代次数的增加,细胞内一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性和NO分泌增加,但细胞总蛋白含量却降低,差别具有统计学意义.结论 通过体外培养兔髓核细胞并进行自然传代,随着传代次数的增加,髓核细胞呈现自然退变现象,为髓核细胞退变机理的研究提供了细胞学基础.     

内皮－单个核细胞体外粘附的实验研究

采用体外细胞培养法，建立了内皮－单个核细胞联合培养模型，观察了该模型中单个核细胞形态和数量的变化。所见３种形态的单个核细胞，分别称为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型细胞。对３型细胞进行了形态的描述和定量的观察，认为培养内皮细胞对单核细胞向巨噬细胞分化有诱导作用。该方法简便、安全、可靠，是研究内皮一单个核细胞粘附的理想模型。     

内皮—单个核细胞体外粘附的实验研究

采用体外细胞培养法，建立了内皮－单个核细胞联合培养模型，观察了模型中单个核细胞形态和数量的变化。所见３种形态的单个核细胞，分别称为Ｉ型，Ⅱ型和Ⅲ型细胞。对３型细胞进行了形态的描述和定量的观察，认为 内皮细胞对单核细胞向巨噬细胞分化有诱导作用，该方法简便，安全、可靠，是研究内皮一单个核细胞粘附的理想模型。     

鼻咽涂片中巨大裸核细胞的性质和形成的探讨

26例光镜电镜对照观察,证明鼻咽涂片中的巨大裸核癌细胞具有恶性肿瘤和鼻咽癌胞核的超微结构特点。DNA Feulgen 反应阳性,显示其为胞核成分,并非粘液或异物。透射电镜可见组织表面巨核癌细胞胞浆脱失,并有向巨大裸核癌细胞逐步过渡的形态改变,说明巨大裸核癌细胞系由巨核癌细胞胞浆脱失而来。     

光学及荧光显微镜在细胞凋亡检测中的应用

为观察细胞培养中细胞凋亡的形态及数量，取４℃环境下不同时间培养的小鼠胸腺细胞，用光镜或吖啶橙（ＡＯ），溴化乙淀（ＥＢ）染色后荧光镜观察，光镜下可见凋亡小体，荧光镜下早期凋亡细胞发绿色或暗绿色荧光，伴有核结构的变化，而晚期凋亡细胞发橙红色荧光并有凋亡小体的形成。结果表明：光镜下需出现典型形态变化时凋亡才能确认，ＡＯ和ＥＢ双重荧光染色后荧光镜检在细胞凋亡检测中即可定性，又可定量。     

左归补髓生血方对再生障碍性贫血小鼠骨髓有核细胞凋亡的影响

目的 观察左归补髓生血方治疗小鼠再生障碍性贫血的疗效及其对骨髓中有核细胞凋亡的影响。方法 将40只SPF级ICR小鼠随机分正常组、模型组、西药组、中药组。采用二甲磺酸丁酯和环磷酰胺交替给药12 d的方法复制再生障碍性小鼠模型。观察外周血细胞计数以及骨髓组织形态学变化,采用TUNEL法检测各组小鼠骨髓中有核细胞凋亡。结果 与正常组比较,模型组小鼠外周血白细胞、红细胞、血小板计数和血红蛋白浓度明显减低（P＜0.05）,骨髓有核细胞凋亡率明显升高（P＜0.05）;光镜下可见小鼠骨髓增生极度减少,红系、粒系、巨核细胞系均明显减少。与模型组比较,中药组以及西药组外周血红细胞、白细胞、血小板计数和血红蛋白浓度明显升高（P＜0.05）,骨髓有核细胞凋亡率明显降低（P＜0.05）;光镜下可见骨髓中造血组织比例增多。结论 左归补髓生血方可以有效升高再生障碍性贫血小鼠外周血细胞计数,抑制骨髓中有核细胞的凋亡。     

G-CSF和维甲酸对HL-60细胞超微结构的影响

本研究将重组人粒系集落刺激因子(rhG-CSF)和维甲酸(RA)作用于HL-60细胞后,观察HL-60细胞的超微结构改变,并作光镜检查加以对照,结果显示,rhG-CSF处理的细胞,电镜下细胞核形态,核内染色质,细胞质内核糖核蛋白颗粒及线粒体等细胞器与对照细胞比较均未显示有分化迹象。但rhG-CSF和RA联合作用较RA单独使用能显著提高HL-60细胞的分化比例。电镜观察结果与光镜检查表现相似,由此提示rhG-CSF具有诱导白血病细胞分化的潜能。     

尸体标本腹腔神经节的细胞形态学观察

目的了解教学用尸体腹腔神经节微细结构保存情况。方法取18例成人尸体腹腔神经节作石蜡切片,HE、尼氏和Masson染色,光镜观察。结果绝大部分切片组织结构、细胞形态、胞核清楚,神经元尼氏体明显,胶原纤维清楚。结论局部解剖学用的尸体腹腔神经节结构保存较好,可作细胞形态的研究。     

尖锐湿疣挖空细胞的原位杂交与电镜观察

目的：探讨尖锐湿疣挖空细胞的性质和形态变化，为病理诊断提供信息。方法：采用东山区人民医院尖锐湿疣活检50例。每例分别取材作透射电镜、原位杂交组化和HE染色光镜观察，将电镜所见的结果与原位杂交组化所得信息进行对比分析。结果：发现所有挖空细胞核内均有HPV-DNA存在，电镜下核内均含有多少不等染色质间颗粒，其中3例含有病毒颗粒。核皱缩，染色质边集，深染，核仁消失。在HE切片上，挖空细胞单个、灶状或成片分布，核呈星形或毛虫样的形态特征。结论：挖空细胞具有HPV感染引起表皮细胞凋亡形态特征，据此特征即可确定尖锐湿疣的病理诊断。     

急性白血病化疗前后细胞形态计量学分析

目的 :探讨急性白血病 (AL)化疗前后细胞形态学参数及临床意义。方法 :用细胞形态计量学方法 ,利用普通光镜手工测试急性白血病化疗前后白血病细胞长轴 (CL)、短轴 (CS)、核长轴 (NL)、短轴 (NS) ,换算出细胞平均轴(CM)、细胞面积 (CA)、核平均轴 (NM)、核面积 (NA)及核面积与细胞面积之比 (NA/CA)共 9个参数 ,并结合临床疗效与预后进行分析。结果 :急性髓性白血病 (AML)化疗后细胞形态参数值均增大 ,AML、M3 、M4 、M5型化疗后增大更明显。急性淋巴白血病 (ALL)化疗前后细胞形态参数值无差异 (P >0 .0 5 )。结论 :化学治疗能改变AML的形态参数且有预后意义 ;而不能改变本组ALL的形态计量值     

成人正常和突出椎间盘髓核细胞的形态及生长动力学比较

目的:比较成人正常和突出椎间盘髓核细胞体外培养的形态及生长动力学差异.方法:从成人正常和突出髓核组织分离培养髓核细胞,分别取传1、3、5代细胞作为研究对象,光镜和电镜下观察细胞形态,并对细胞生长速率、MTT摄取、最大生长密度、分裂指数、克隆形成率等生长动力学指标进行比较研究.结果:体外培养的突出髓核细胞与正常髓核细胞相比,形态学上可见突出髓核细胞排列较紊乱,极性消失,胞质内粗面内质网轻度扩张.在接种相同的细胞密度和相同的培养条件下,成人正常和突出髓核细胞的生长速率差异在传1代时为T＝52.5(P>0.05),传3、5代分别为T＝72.0(P<0.01)、T＝67.5(P<0.05);二者的最大生长密度、MTT摄取、分裂指数、克隆形成率在传1代时分别为7.28±0.23和7.41±0.17、0.186±0.015和0.173±0.008、(25.36±2.14)‰和(23.13±2.55)‰、(52.4±2.8)%和(47.7±2.6)%,差异均无显著性(P>0.05),传3代时分别为6.96±0.19和5.48±0.22、0.154±0.018和0.110±0.009、(22.52±2.16)‰和(16.68±2.35)‰、(48.7±3.3)%和(40.7±2.5)%,传5代时分别为2.42±0.13和0.98±0.14、0.085±0.006和0.050±0.007、(15.61±1.96)‰和(9.34±2.12)‰、(40.2±2.3)%和(28.34±2.9)%,传3、5代时差异均有统计学意义(P<0.05).结论:成人正常和突出椎间盘的髓核细胞在体外培养状态下,突出组细胞在细胞形态学上与正常对照组存在一定差异,在生长动力学方面,突出组细胞的持续增殖能力明显低于正常髓核细胞组,更容易出现老化现象.     

白藜芦醇对大鼠退变腰椎间盘髓核组织形态学的影响

目的观察白藜芦醇对大鼠退变腰椎间盘髓核组织影响的病理改变及超微结构变化。方法将大鼠36只随机分为正常对照组、椎间盘退变组和白藜芦醇药物干预组各12只,应用HE染色光镜观察各组腰椎间盘髓核组织的病理改变,在电镜下对其进行超微结构的观察。结果光镜下可见正常对照组较多的脊索细胞和类软骨细胞增殖活跃,椎间盘退变组髓核的细胞减少,白藜芦醇药物干预组髓核细胞减少较椎间盘退变组程度轻;电镜下正常对照组的椎间盘髓核组织超微结构的病理改变不显著,而椎间盘退变组表现为髓核细胞减少,出现不同程度的退变、坏死,白藜芦醇药物干预组中退变程度明显减轻。结论通过光镜、电镜下观察白藜芦醇对大鼠退变腰椎间盘髓核组织有延缓或抑制作用,可为白藜芦醇预防和治疗椎间盘退变提供相关的实验依据。     

原发性肝细胞癌胞核及核内包涵体的超微结构

用透射电镜观察了55例原发性肝细胞癌胞核及核内包涵体的超微结构改变。电镜下,核/质比例明显增加,核的形态极不规则,畸形,核膜表面凸凹不平。在大部分肝癌病例的胞核内可见到各种形态的假包涵体和其他小体。核内异染色质常集聚在核内膜下,染色质间颗粒增多,部分病例染色质周颗粒增多。这些改变和肝癌细胞蛋白质合成有密切关系。越是分化差的肝癌,胞核的改变越明显。因此,根据肝癌胞核的改变情况,可以判断肝癌的分化程度。     

兔、鼠膈腹膜间皮的扫描电镜观察

本文以扫描电镜为主,配合光镜,对兔、鼠膈腹膜间皮细胞进行了研究。证明间皮含大、小两种细胞,此两种细胞的形态不同,小细胞间存在与吸收功能有关的孔、裂。     

高脂食物喂饲大鼠后的下丘脑核团神经元形态变化

将12只大鼠分为实验组和对照组，每组6只动物，实验组用高脂食物喂饲对照组用基础食物喂饲，4个月后，取下丘脑，用体视学方法分析了下丘脑视前内侧核和腹内侧核神经元的形态变化参数。结果发现这两个核团的神经元数目实验组比对照组明显减少，而细胞体系味道大，光镜下检查主动脉管壁，发现实验组均有局部增厚，弹性膜及平滑肌排列疏松；电镜发现内皮下有胶原纤维和平滑细胞增生。血清总胆固醇实验组也明显高于对照组。本并对用高脂食物喂饲大鼠后，下丘脑血管调控中枢神经元出现形态变化的可能机理进行了初步分析。     

用光镜直接从培养细胞中检测细胞凋亡的研究

目的：观察细胞培养中凋亡细胞的形态。方法：取４℃环境下不同时间培养的小鼠胸腺细胞，与台盼蓝混合制成悬液片，用光镜观察。结果：可见凋亡细胞核形态改变及凋亡小体。结论：光镜下依据典型凋亡细胞形态变化可确认凋亡。     

42例急性白血病骨髓细胞形态学检查体会

骨髓检查是诊断白血病的主要方法 ,绝大部分病例可据骨髓变化而肯定诊断。急性白血病骨髓中原始细胞及幼稚细胞不仅有数量的增加 ,更主要的是有质量的异常。其中细胞形态异常成熟障碍是其突出特点。1　形态异常1.1　细胞大小不均及形态异常 :白血病细胞大小上有明显改变 ,多数原始或幼稚细胞体积增大 ,核大、浆少 ,核浆比值大。有部分病例的细胞体积小于正常 ,但细胞核仍相对较大。有的出现明显大小不均现象。1.2　胞核异常 :胞核形态不规则 ,常扭曲、折叠、分叶、凹陷、核染色质比较粗糙 ,分布不均。1.3　核仁异常 :核仁可大而且多 ,且显著…     

宫颈小细胞神经内分泌癌4例临床病理分析

目的:探讨宫颈小细胞神经内分泌癌(SCCC)的临床病理特征、免疫组织化学特点及鉴别诊断要点。方法:运用光镜、免疫组织化学法对4例SCCC进行观察,并回顾性分析其临床表现、镜下组织结构、细胞形态及免疫组织化学特点,总结其诊断及鉴别诊断要点。结果:光镜下肿瘤细胞呈片巢状浸润宫颈,瘤细胞体积小,近圆形,胞浆极少,核深染,病理性核分裂多见,可伴坏死。结论:SCCC是一种少见的高度恶性肿瘤,其特征性的小而一致的细胞形态及免疫组织化学特点有助于明确诊断。     

10例经单克隆抗体标记证实为外周T细胞淋巴瘤的病理形态分析

本文分析10例经单克隆抗体标记证实为外周T细胞淋巴瘤的病理形态,每例均用ABC法作Leu_1、Leu_2、Leu_3、Leu_4、OKT_3、oKT_6,HLA-DR(Ⅰ_s)、B_1、Kappa(k)、Lainbda(λ)免疫标记测定,证实为辅助T细胞来源,E花结测定见大中淋巴样细胞中有45～65％形成花结,5例ANAE点状阳性,2例ACP阳性。光镜下Peri TL的细胞形态可归结为六类。作者根据其相互之间的过渡形态推测了外周T淋巴细胞的转化过程,并结合肿瘤细胞的生长方式建议Peri TL再增加以下四个亚型:(1)透明圆核细胞性,(2)多形细胞性,即透明扭核细胞性,(3)混合T细胞性,(4)单纯圆细胞性。