164株念珠菌培养与药敏分析

目的了解女性外阴阴道的感染情况,研究临床分离的真菌种类及其对药物的敏感性。方法对1184例标本进行回顾性分析,其中164例阳性标本的菌株用API真菌鉴定板条(API 20C AUX)鉴定,用Rosco纸片法对制霉菌素、益康唑、伊曲康唑、酮康唑、咪康唑、两性霉素、克霉唑、氟康唑、氟胞嘧啶进行药物敏感性试验。结果 164例共有8个种,以白色念珠菌为主,占67.1%。各种念珠菌对9种抗真菌药物均有不同程度的耐药。结论白色念珠菌仍然是妇产科真菌感染主要菌种。氟胞嘧啶与两性霉素是治疗妇产科深部真菌病的首选药物。各种念珠菌对临床上常用抗真菌药物的敏感性具有明显不同,对于合理使用抗生素,减少真菌感染,特别是耐药菌株感染的发生有着重要的意义。     

128株酵母菌的鉴定及其药敏试验分析

目的了解临床分离的酵母菌种类及其对药物的敏感性。方法采用科玛嘉真菌鉴定显色培养基、API 20C鉴定条对2005年6月至2006年12月分离到的128株酵母菌进行菌株鉴定,并对其采用ROSCO纸片扩散法进行氟康唑、两性霉素B、伊曲康唑、5-氟胞嘧啶4种抗真菌药物的体外药敏试验。结果酵母菌占总分离率的5．21％。128株酵母菌以白酵母菌感染率最高,为78株,占60．94％,其他依次为热带酵母菌18株（14．06％）,光滑酵母菌15株（11．72％）,克柔酵母菌6株（4．69％）,近平滑酵母菌4株（3．13％）,季也蒙酵母菌3株（2．34％）,其他少见酵母菌4株（3．13％）。药敏结果显示,两性霉素B对除葡萄牙酵母菌外的其他菌株敏感率较高;氟康唑和伊曲康唑对除克柔酵母菌和光滑酵母菌外的其他菌株敏感率较高,但分别存在10株（7．81％）和9株（7．03％）依赖剂量敏感的菌株;5-氟胞嘧啶对除克柔酵母菌外的1株光滑酵母菌表现为依赖剂量敏感,其余100．0％敏感。克柔酵母菌对氟康唑全部耐药,对伊曲康唑只有33．3％敏感,50．0％依赖剂量敏感,16．7％耐药。光滑酵母菌对氟康唑和伊曲康唑的敏感率分别为33．3％和66．7％。结论患者深部真菌感染中仍以白酵母菌为主,克柔酵母菌比例有所上升;菌种不同对各种抗菌药物的敏感性不同;临床细菌室应提高真菌的鉴定技术水平和加强药物的耐药性监测工作;临床医生应依据药敏试验结果选择有针对性的药物进行治疗。     

荚膜组织胞浆菌的药敏试验

组织胞浆菌病是由荚膜组织胞浆菌感染引起的一种较罕见的疾病 ,多发生于获得性免疫缺陷、长期应用激素、抗生素或免疫抑制剂的患者。为了指导临床用药 ,我们用抗真菌药对该菌进行药敏试验 ,结果介绍如下。1　材料和方法1 1　实验菌株　本室自组织胞浆菌病患者骨髓新分离出的组织胞浆菌 ,培养成酵母相和菌丝相。1 2　ATBFungus药敏试剂盒　由法国BioM啨ｒｅｂｕｒｙ公司生产 ,含有 5 氟胞嘧啶、两性霉素B、制霉菌素、咪康唑、益康唑、酮康唑 6种抗真菌药物的药敏板 ,ATBF培养基和ATBF缓冲剂。1 3　自制药敏血平板　梅里埃血琼脂基…     

281株临床分离念珠菌的药敏结果分析

目的 对临床送检标本分离鉴定出的念珠菌进行细菌构成及药敏结果分析,促进临床合理使用抗真菌药物.方法 对2009年1月至2010年12月临床送检标本进行 5种常用抗真菌药(5-氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B)的体外敏感性检测及耐药分析.结果 281株念珠菌中白色念珠菌184株,占65.5%,其次是光滑念珠菌50株(17.8%),热带念珠菌19株(6.8%).结论 该院患者念珠菌感染以白色念珠菌为主,药敏结果显示两性霉素B、5-氟胞嘧啶、伏立康唑、氟康唑、伊曲康唑敏感性高,对送检标本及时进行真菌培养和药敏试验,可及时、合理地使用抗真菌药物,减少多重耐药和深部真菌感染的发生.     

118株酵母样真菌药敏结果分析

目的分析酵母样真菌对目前常用的5种抗真菌药物的敏感性,为临床合理选用抗真菌药物提供依据。方法对云南省第一人民医院2009年1～6月分离的118株酵母样真菌的药敏试验结果进行回顾性分析。结果酵母样真菌感染以白色念珠菌为主,酵母样真菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B敏感率较高,在98%以上,对唑类药物敏感性稍低,为70%～80%。结论酵母样真菌感染以白色念珠菌、热带念珠菌和光滑念珠菌较为常见,而且耐药菌株的检出率呈上升趋势,临床上应慎用抗菌药物,减少耐药菌株的产生。     

酵母菌药敏试验常量与微量液体稀释法的比较

目的：采用常量和微量稀释法检测酵母样菌对四种抗真菌药物的最低抑菌浓度（MIC）,并将两种方法的MIC结果进行统计分析。方法：参照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的“酵母菌液体稀释法抗真菌药敏试验参考方法”,测定临床分离的20株酵母样菌,结果：两性霉素－B的两种方法对所有菌标的MIC值大多数落在两个稀释度范围内,但两种方法比较,多数MIC值≥两个稀释度。氟胞嘧啶对白色念珠菌、新型隐球菌和光滑球拟酵母菌两种方法中的MIC有90％得到相同的结果,两性霉素－B对有菌株、酮康唑对新型隐球菌两种方法有显著性差异（P＜0．05）。微量法中新型隐球菌在48h可以判定结果常量法要72h才能判定结果,结论：通过两种方法的比较及统计分析表明,微量法与常量法有较好的相关性,微量法操作简便,节省试剂和药物,适合临床实验室应用。     

角膜溃疡致病性真菌的检测及体外药敏试验

角膜真菌性疾病是目前临床较常见、治疗困难、致盲率高的眼部感染性疾病 ,尚无理想的广谱抗真菌药物 ,目前国内外报道的治疗真菌性角膜溃疡多采用氟康唑或与其他抗真菌药物联合用药[1] 。我们对 13例确诊为真菌性角膜溃疡的患者分泌物进行了体外药敏试验 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　病例选择　选择我院 2 0 0 0年 7月至 2 0 0 1年 7月眼科角膜溃疡就诊的病人 ,从溃疡部位刮取分泌物 2份 ,1份做刮片镜检 ,另 1份做培养。共 13例 ,其中男性 9例 ,女性 4例。根据临床分型[2 ] 分为重型 3例 ,中型 5例 ,轻型 5例。1 2　培养基　采用…     

多重耐药铜绿假单胞菌体外联合药敏试验

目的 通过体外联合药敏试验了解治疗耐亚胺培南铜绿假单胞菌感染的最佳联合用药。 方法 耐亚胺培南铜绿假单胞菌30株,以琼脂稀释法测定环丙沙星（CIP）、阿米卡星（AMK）、头孢噻肟（CTX）、左氧氟沙星（LVX）的最低抑菌浓度（MIC）,以棋盘肉汤稀释法对CIP与CTX和AMK与CTX进行联合药敏实验。 结果 棋盘肉汤稀释法,CTX与AMK和CIP的协同率分别为80％和43.3％,有效点率分别为73.3％和30％。 结论 对多重耐药铜绿假单胞菌的感染,可使用AMK和CTX进行联合治疗。     

产孢丝状真菌NCCLS药敏试验方法的应用

美国国家临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)于 1997年推出了关于酵母菌的液体培养基稀释 (多量法与微量法 )抗真菌药敏试验方案Ｍ2 7 Ａ ,建立了被众多实验室认同的重复性好、准确性较高的标准化体外药敏试验方法。但由于丝状真菌本身的诸多特点如产孢条件难以控制、接种量难以精确量化、孵育时间长等 ,使其试验方法标准化具有一定难度。近年来ＮＣＣＬＳ分会成员以Ｍ2 7 Ａ的微量法为基础进行了多中心广泛深入研究[1 ,2 ] ,于 1998年提出了《产孢丝状真菌的液基稀释抗真菌药敏试验参考方案》(Ｍ38 Ｐ)。该方案在提出了一些建设性意见的…     

如何正确理解抗真菌药物体外敏感试验结果对临床用药的指导价值

随着临床侵袭性真菌感染患者的增加,真菌疾病的诊断和治疗倍受关注,临床亟须实验室在真菌鉴定和药敏方面提供帮助.本文将围绕临床和实验室共同关心的几个问题展开阐述,包括抗真菌药物体外药敏的发展历史和方法学进展,酵母菌和丝状真菌体外药敏的判读,折点解释以及对于临床的指导意义.本文同时紧密结合临床常用的几种抗真菌药物,以期从操作层面帮助实验室提高真菌药敏的工作水平,帮助临床更好地理解各种抗真菌药物的体外药敏结果.     

氟康唑和伏立康唑对酵母菌抗菌活性的研究

目的 :研究氟康唑和伏立康唑对 2 14株酵母菌的体外抗菌活性。方法 :酵母菌收集自 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 1年 12月住院患者提供的标本。采用酵母菌纸片扩散法敏感试验 ,Mueller Hinton琼脂中补充 2 %葡萄糖和 0 .5mg/L美蓝 ,其他类似于美国国家临床实验室标准委员会 (NCCLS)M2 A6细菌药敏试验法。采用BIOMIC仪自动读取平皿抑菌环直径、解释和记录试验结果及核对质控数据。结果 :白念珠菌最常见 ,占 5 4 .7% ,其次为热带念珠菌占 18.7% ,光滑念珠菌占 12 .1% ,近平滑念珠菌占 4 .7% ,克柔念珠菌占 3.7%和新型隐球菌占 3.7%。白念珠菌、热带念珠菌和近平滑念珠菌对氟康唑的敏感率为 92 .5 %～10 0 .0 % ,MIC90 均在敏感范围内 (<3～ 8mg/L) ,伏立康唑对白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌的MIC90 为 0 .0 6 4～ 1.5mg/L。结论 :氟康唑对白念珠菌、热带念珠菌和近平滑念珠菌有较好的抗菌活性 ,伏立康唑比氟康唑对白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌有更高的抗菌活性 ,有较低的MIC值     

抗真菌药物对丝状真菌的体外抗菌活性研究

目的 了解两性霉素B(AMB)、伊曲康唑(ICZ)、伏立康唑(VRC)和卡泊芬净(CBF)对72株丝状真菌的体外抗菌活性,指导临床合理应用抗真菌药物.方法 MIC检测采用美国临床和实验室标准协会(CLSI)制订的用于产丝孢状真菌的体外药敏方案(M38-P)和(M38-A).AMB、VRC、ICZ在单独用药时分别取100%、100%、≥80%的生长抑制为MIC值,CBF在单独用药时取明确改变真菌菌丝形态的最低浓度作为最小有效浓度.分数抑菌浓度(FIC)评价体外联合效果,FIC=MIC<,联合>/MICA单独+MIC联合/MICB单独.结果 AMB、ICZ、CBF、VRC对72株丝状真菌的MIC90分别为8、4、2、8 μg/ml,AMB+ICZ、AMB+VRC、ICZ+VRC联合用药MIC的范围分别为0.125～16.97、0.245 2～1.25、0.062 5～8.25μg/ml.AMB+VRC对丝状真菌产生协同作用为20.0%～88.9%,优于AMB+ICZ的10.0%～62.5%和ICZ+VRC的20.0%～44.4%(P=0.007<0.05).结论 72株丝状真菌对4种常用抗真菌药物的体外抗菌活性有差异,AMB+VRC优于AMB+ICZ与ICZ+VRC,同样可作为直症感染治疗的联合用药.     

正确应用药敏标准 提供准确药敏结果

本文从做药敏试验的原则和考虑因素、无需做药敏试验的情况、选择最适药敏方法、复核罕见耐药表型结果、连续监测治疗中重复分离株的耐药性发展、检测耐药机制对药敏报告及治疗的影响等方面解读美国临床和实验室标准协会最新药敏标准文件,并综合了欧洲抗菌药物敏感性试验委员会的相关药敏规则,帮助广大临床微生物室正确应用药敏标准,向临床提供准确及时的药敏结果.     

微量MIC检测判断结核分枝杆菌药敏的方法学研究

目的 建立用微量MIC值判断结核分枝杆菌药物敏感性的方法 ,并进行初步临床应用评价.方法 采用液体培养基MIC测定技术,在96孔U型板中进行检测,以60株已知药敏结果 的本院菌株库保存菌株作为试验菌株, 根据Bactec MGIT结果采用ROC曲线分析建立微量MIC药敏判断界值,最后用80株连续时间段内收集的结核分枝杆菌临床分离株对微量MIC药敏判断界值进行验证和修正.结果 微量MIC药敏法的最佳接种菌量为10~(-3)mg/ml数量级,7～10 d即可报告结果 ,链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇、氧氟沙星、阿米卡星和卷曲霉素的最佳判断界值分别为2、0.25、1、2、1、4和4 μg/ml,其敏感度分别为93.5%、97.7%、93.5%、84.4%、95.8%、91.7%和88.9%, 特异度分别为95.6%、94.6%、100.0%、93.8%、92.9%、95.6%和91.5%.其准确性分别达95.0%、96.3%、97.5%、90.0%、93.8%、95.0%和91.3%. 结论 微量MIC药敏检测方法 具有快速、准确、低成本和操作简单的优点,具有良好的推广应用前景,适合在我国各级结核病专业收治机构使用.     

中性红染色在抗真菌药物敏感试验中的应用

目的为了进一步验证中性红染色方法在抗真菌药物敏感试验中的应用。方法分别测定特比萘芬和伊曲康唑对２２株临床常见皮肤癣菌（红色毛癣菌、须癣毛癣菌、石膏小孢子菌、犬小孢子菌）的最低抑菌浓度（ＭＩＣ）和最低杀菌浓度（ＭＦＣ）值。其中ＭＦＣ值的测定用中性红染色方法与常规培养方法分别进行对比。结果特比萘芬对皮肤癣菌ＭＩＣ值与ＭＦＣ值相同，为０．００１～０．００８μｇ／ｍｌ。结论特比萘芬有抑菌和杀菌的双重作用。中性红染色方法具有方便、快捷的特点，对于判断真菌的活性以及评价抗真菌药物的ＭＦＣ较常规方法更为优越，值得进一步推广应用。     

规范抗菌药药敏试验合理向临床报告检测结果

本文介绍美国临床和实验室标准协会(CLSI)抗菌药药敏试验的规范操作及向临床报告注意事项.共分9部分:(1)常规工作中药敏试验应注意要点;(2)葡萄球菌;(3)肠球菌;(4)肺炎链球菌;(5)肺炎链球菌以外的其他链球菌;(6)不常见的临床分离株及苛养菌;(7)肠杆菌科菌;(8)非肠杆菌科菌菌群;(9)流感嗜血杆菌.笔者还介绍了CLSI M100-S19,2009的文件中的部分新的内容.     

抗菌药物敏感性试验快速检测新技术

抗菌药物敏感性试验(AST)是一种体外定性或定量测定抗菌药物抑制或杀灭细菌能力的实验。随着耐药病原体的增多和耐药机制的变异,传统药敏试验逐渐无法满足临床快速诊治的需求,因此基于待测病原体表型、基因型及其他耐药机制的药敏快检技术正在不断发展。本文论述了AST快速检测技术的发展现状及存在的问题,所有新技术对临床诊治指南的指导意义均应进行多方面评估和规范化。     

显微镜观察药物敏感度检测技术在二线抗结核药耐药性检测中应用

目的 探讨MODS同时快速检测4种二线抗结核药耐药性的效果.方法 用24孔细胞培养板建立显微镜观察药物敏感性技术,进行二线抗结核药物耐药性检测,并对最佳检测条件进行探讨.将该技术用于上海市肺科医院2007-2008年住院肺结核患者痰标本分离60株结核分枝杆菌对丙硫异烟胺、阿米卡星、卷曲霉素、左氧氟沙星耐药性检测,并与传统罗氏药敏结果进行比较,对2种方法检测结果不符的菌株进行MIC测定.结果 MODS检测丙硫异烟胺、阿米卡星、卷曲霉素、左氧氟沙星药敏结果与罗氏药敏结果符合率分别为96.7%(58/60)、98.3%(59/60)、91.7%(55/60)、96.7%(58/60).以传统罗氏药敏结果为判断金标准,MODS检测敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值及准确性丙硫异烟胺分别为100%、87.5%、87.5%、100%、96.7%,阿米卡星分别为100%、90.0%、90.0%、100%、98.3%,卷曲霉素分别为76.9%、95.7%、83.3%、93.8%、91.7%,左氧氟沙星分别为100%、96.0%、83.3%、100%、96.7%.结论 MODS检测丙硫异烟胺、阿米卡星、卷曲霉素、左氧氟沙星耐药性具有快速、操作简便、价廉等优点,与传统罗氏药敏结果有较高的符合率,可作为MTB耐药性的快速检测方法之一.     

ATB FUNGUS 3与CLSI M27-A2微量液基稀释法测定酵母菌药物敏感性的一致性比较

为92.4%、93.0%和93.6%.对于有判读折点的念珠菌,2种方法测定FLC、ITC、VRC、5-FC的一致性分别为81.7%、59.2%、90.9%和96.5%.结论 ATB FUNGUS 3方案操作简便,读取结果更加快速,除了FLC和ITC对于有判读折点的念珠菌的抑菌活性外,ATB FUNGUS 3与CLSI M27-A2方案具有良好的一致性.