利妥昔单抗对弥漫大B细胞淋巴瘤患者Th17细胞及相关细胞因子影响的体外实验

目的 探讨利妥昔单抗对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者Th17细胞及相关细胞因子体外的影响及其意义.方法 DLBCL初治患者(DLBCL组)20例和健康对照者(健康对照组)20名,每个对象分别采集4份外周血标本,分离外周血单个核细胞(PBMC),按照培养条件的不同分成4个亚组:空白组(A亚组)、加入利妥昔单抗组(B亚组)、加入利妥昔单抗和血清组(C亚组)和极化组(D亚组)[加白细胞介素6(IL-6)和转化生长因子(TGF-β)].培养后分别采用流式细胞术检测各亚组外周血PBMC中Th17细胞比例,酶联免疫吸附法(ELISA)检测上述培养液中白细胞介素17(IL-17)的表达水平.结果 健康对照组中,D亚组的Th17细胞比例和IL-17水平分别为(17.12±4.90)％、(45.735±10.012)pg/ml,均高于A、B、C亚组(P＜0.05),A、B、C亚组之间比较差异均无统计学意义(P＞0.05).DLBCL组A亚组的Th17细胞比例及IL-17水平为(0.69±0.24)％、(6.012±1.312)pg/ml,均低于健康对照组A亚组的(2.43±0.61)％、(8.217± 1.681)pg/ml(P＜ 0.05);在与利妥昔单抗一起体外培养后,DLBCL组中B、C和D亚组的Th17细胞比例分别为(2.34±0.48)％、(2.31±0.53)％和(16.92±4.81)％,IL-17水平分别为(7.944±1.538) pg/ml、(7.957±1.533) pg/ml和(44.417±9.881) pg/ml,均高于A亚组,且D亚组明显高于B、C亚组(P＜0.05).B、C亚组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 体外实验证实,DLBCL患者外周血PBMC中Th17细胞比例低于健康人,利妥昔单抗作用于DLBCL患者外周血PBMC后可升高Th17细胞比例.     

非小细胞肺癌患者外周血Th17细胞比例和血清IL-17水平的检测及其临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血Th17细胞比例和自细胞介素-17(IL-17)水平的变化及其与患者临床病理的关系.方法 收集60例原发未治疗的NSCLC患者(NSCLC组)和20例健康志愿者(对照组),采用流式细胞术(FCM)检测Th17细胞比例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-17水平.结果 NSCLC组Th17细胞占CD+3 T细胞比例高于对照组[(1.23±0.41)％比(1.05±0.28)％,t=1.679,P=0.097],鳞状细胞癌患者外周血Th17细胞比例明显高于腺癌患者[(1.31±0.39)％比(1.09±0.41)％,t=2.093,P=0.041].NSCLC组IL-17水平明显高于健康对照组[(21.11±7.87) pg/ml比(17.64±5.07)pg/ml,t=2.280,P=0.027],鳞状细胞癌患者血清IL-17表达水平明显高于腺癌患者[(23.11±8.73) pg/ml比(18.54±6.38)pg/ml,t=2.203,P=0.032].Th17细胞比例、IL-17的表达水平随临床分期的进展呈下降趋势[F=3.151,P=0.032;F=4.132,P=0.010].结论 NSCLC患者外周血中Th17细胞比例和IL-17的表达与肿瘤病理分型、TNM分期相关,可能在NSCLC的病程中发挥重要作用.     

肝细胞癌患者外周血Th17细胞水平的变化及其与肿瘤进展的关系

目的 研究Th17细胞在肝细胞癌(HCC)外周血中的表达,探讨Th17与HCC进展的关系.方法 采用流式细胞术检测61例HCC患者和38例正常对照者外周血中Th17细胞的水平,应用实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR),从mRNA水平检测白细胞介素(IL-17)、IL-23p19和维甲酸相关孤儿受体(RORc)的表达情况,分析HCC患者外周血Th17水平变化与其各项临床指标间的关系.结果 61例HCC患者的Th17细胞水平为4.67%±0.79%,正常对照组为3.25%±0.68%,两组间差异有统计学意义(P＜0.0001).HCC患者外周血单个核细胞(PBMC)中IL-17、IL-23p19和RORc的mRNA表达水平分别为正常对照组的23.9、8.5和23.2倍,差异有统计学意义(P＜0.05).HCC患者外周血中Th17水平增高与患者的性别、年龄、术前甲胎蛋白浓度等无关(P＞0.05),而与肿瘤大小、门脉癌栓、远处转移、TNM分期等有相关性(P＜0.05).Th17细胞水平随TNM分期的增加而升高,Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期患者外周血中Th17细胞水平分别为4.05%±0.82%、4.32%±0.67%、4.94%±0.70%和5.22%±0.87%,Ⅰ～Ⅱ期患者的Th17细胞水平明显低于Ⅲ～Ⅳ期(P=0.0008).结论 HCC患者外周血中Th17细胞水平升高,Th17细胞水平增高与肿瘤大小、门脉癌栓、远处转移、TNM分期有明显关系;PBMC中IL-17、IL-23p19和RORc的mRNA表达水平也明显升高.Th17细胞可能通过分泌效应细胞因子,直接或间接参与了HCC细胞的增殖、侵袭和远处转移.     

肺癌脑转移患者Th17细胞和IL-17水平变化的研究

背景与目的 Th17细胞是一种重要的辅助性T细胞,其主要分泌IL-17等细胞因子,在感染免疫、自身免疫性疾病和肿瘤免疫中均有重要意义。本研究旨在探讨Th17细胞和IL-17在肺癌脑转移患者外周血中的表达及IL-17在肺癌脑转移患者脑脊液中的表达和意义。方法流式细胞术检测22例肺癌脑转移患者和20名正常对照外周血Th17(CD3+CD4+IL-23R+)细胞的百分率,ELISA方法检测22例肺癌脑转移患者和20名正常对照血浆IL-17水平,ELISA方法检测19例肺癌脑转移患者和16例无脑转移肺癌患者脑脊液IL-17水平。结果肺癌脑转移患者外周血Th17细胞百分率(4.65%±0.72%)明显高于正常对照(2.71%±0.54%,P=0.04);其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者和小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者没有差异。肺癌脑转移患者血浆IL-17水平明显高于正常对照(117.4±16.43 pg/mL和72.55±8.19 pg/mL,P=0.02);其中NSCLC患者和SCLC患者没有差异。肺癌脑转移患者脑脊液IL-17水平明显高于无脑转移的肺癌患者(73.21±7.52 pg/mL和50.25±8.04 pg/mL,P=0.04)。结论肺癌脑转移患者外周血Th17细胞数量增多,血浆IL-17和脑脊液IL-17水平升高,Th17细胞和IL-17可能参与了肺癌脑转移的发生和发展。     

食管鳞癌患者外周血中Th17细胞的检测及其临床意义

目的:检测食管鳞癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞的比例及外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中RORγt和IL-17的表达水平,探讨Th17、RORγt及IL-17在食管鳞癌中的临床意义。方法:收集山东大学齐鲁医院2009年8月至2010年6月40例食管鳞癌患者PBMC标本,其中男24例、女16例,年龄34～78(61±8.76)岁。采集40例健康志愿者PBMC为对照。流式细胞术检测Th17细胞在外周血淋巴细胞中的比例;PT-PCR检测PBMC中RORγt和IL-17mRNA的表达水平。结果:食管鳞癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞的比例较健康对照者明显升高[(2.40±0.55)%vs(0.84±0.41)%,P<0.01];PBMC中RORγt、IL-17mRNA表达水平均明显高于健康对照组[(0.669±0.184)vs(0.451±0.151),(0.625±0.179)vs(0.438±0.150),P<0.01],且两者呈明显正相关(r=0.551,P<0.01)。食管鳞癌患者转移组与未转移组相比,Th17细胞比例、RORγt和IL-17mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论:食管鳞癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞的比例及PBMC中RORγt和IL-17mRNA表达水平明显升高,Th17细胞可能通过RORγt和IL-17参与食管癌的发生。     

沙利度胺对弥漫大B细胞淋巴瘤疗效及Th17细胞和相关细胞因子表达的影响

目的 探讨沙利度胺对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者外周血中Th17细胞、白细胞介素17(IL-17)、巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α)表达及3年生存率的影响.方法 选择2009年1月至2013年1月河北工程大学附属医院60例DLBCL患者,采用信封法随机分为联合组(30例,采用沙利度胺联合CHOP方案)和化疗组(30例,单用CHOP方案),比较两组临床疗效、不良反应、治疗前后外周血中Th17细胞、IL-17、MIP3α表达量以及3年生存率.结果 联合组和化疗组总有效率分别为73.3％(22/30)、46.7％(14/30),3年生存率分别为87.4％、40.7％,差异均有统计学意义(均P<0.05).治疗前后联合组外周血Th17细胞百分率及IL-17表达水平分别为(0.52±0.14)％和(1.61±0.53)％、(5.61±0.75)pg/ml和(8.87±1.84)pg/ml,差异均有统计学意义(均P<0.05),而化疗组治疗前后Th17细胞及IL-17表达水平分别为(0.75±0.05)％和(0.74±0.07)％、(5.69±0.29)pg/ml和(5.26±0.24)pg/ml,差异均无统计学意义(均P>0.05).治疗前后联合组患者外周血清中IL-17、MIP3αmRNA表达水平分别为8.51±0.23和13.96±0.89、27.4±1.5和83.0±8.5,差异均有统计学意义(均P<0.05),而化疗组治疗前后分别为8.85±0.32和9.45±0.55、23.7±1.8和38.7±5.5,差异均无统计学意义(均P>0.05).联合组与化疗组患者不良反应差异无统计学意义(P>0.05).结论 沙利度胺可能通过干预Th17细胞及相关细胞因子治疗DLBCL,延长DLBCL患者生存期.     

急性白血病患者外周血Treg细胞与Th17细胞的相关性

目的:检测急性白血病患者外周血中Treg细胞与Th17细胞的比例以及相关细胞因子如IL-17、IL-6、TGF-β的变化,分析其相关性。方法:选取兰州大学第二医院血液科急性白血病初诊患者15例,另取15名健康志愿者为对照。流式细胞术检测外周血中CD3+CD4+TIL-17+辅助性T细胞(Th17细胞)、CD4+TCD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)占CD4+T细胞的比例,ELISA法检测血清中细胞因子IL-17、TGF-β、IL-6的水平。结果:急性白血病患者外周血中Th17细胞占CD4+T细胞的(1.39±0.24)%,高于对照组的(0.26±0.11)%(P<0.05);急性白血病患者外周血Treg细胞占CD4+T细胞的(11.58±2.17)%,高于对照组的(2.47±0.72)%(P<0.05);且Treg细胞与Th17细胞呈正相关(γ=0.37)。急性白血病患者血清中TGF-β、IL-6、IL-17的水平分别为(26.06±2.43)、(14.66±2.47)、(18.63±2.38)pg/ml,高于对照组的(13.41±1.92)、(1.44±0.29)、(10.34±1.71)pg/ml(均P<0.05)。结论:急性白血病患者外周血中Treg、Th17细胞比例升高,且两者呈正相关;急性白血病患者血清中TGF-β、IL-6、IL-17水平升高,可能影响Treg与Th17细胞的平衡。     

胸腺瘤合并重症肌无力患者Th17细胞检测及其临床意义

  目的  研究胸腺瘤合并重症肌无力患者Th17细胞检测及其临床意义。  方法  选取2015年10月至2017年10月天津医科大学总医院收治的78例胸腺瘤患者及15例正常对照患者,流式细胞术检测患者术前Th17细胞比例,检测外周血IL-17、IL-21及AchRAb水平,分析Th17及相应细胞因子的相关性,预测胸腺瘤合并重症肌无力的独立危险因素。  结果  MG组Th17为（10.33±1.28）%,Con组为（7.33±0.58）%、Tm组为（7.67±2.18）%,后两组与MG组相比,差异具有统计学意义（P < 0.001）;MG组患者IL-17为（18.05±7.23）pg/mL、IL-21为（180.67±16.17）pg/mL、AchR-Ab为（37.29±7.48）pmol/L,Con组IL-17为（7.45±3.46）pg/mL、IL-21为（84.33±5.13）pg/ mL、AchR-Ab为（15.23±3.32）pmol/L,Tm组IL-17为（8.22±1.67）pg/mL、IL-21为（93.00±7.21）pg/mL、AchR-Ab为（16.87±4.89）pmol/ L,后两组与MG组相比,上述指标差异均具有统计学意义（P < 0.001）;MG组患者Th17含量与IL-17（r=0.830,P < 0.001）、IL-21（r=0.734,P < 0.001）、AchR-Ab（r=0.809,P < 0.001）呈正相关;IL-17、IL-21与AchR-Ab是预测胸腺瘤合并MG的独立危险因素（P < 0.001）。  结论  Th17细胞参与了胸腺瘤合并MG的疾病发生发展过程,其通过分泌IL-21促进自身细胞增殖,并通过分泌IL-17对MG进行调控。      

利妥昔单抗治疗前后弥漫大B细胞淋巴瘤患者Th17细胞及相关细胞因子的变化

 【摘要】　  目的　了解弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者接受利妥昔单抗治疗前后Th17细胞及相关细胞因子的变化及其意义。方法　初治患者31例,化疗后患者60例（RCHOP组29例、CHOP组31例）,以20名体检健康者为健康对照组。采用流式细胞术检测各组外周血中Th17细胞比例,酶联免疫吸附法检测外周血相关细胞因子白细胞介素17（IL-17）、IL-21、IL-23、转化生长因子β （TGF-β）的表达水平。结果　初治组和CHOP-完全缓解（CR）组Th17细胞比例、IL-17、IL-21、IL-23水平分别为（0.67±0.21）%、（5.929±1.342）pg／ml、（130.632±17.945）pg／ml、（51.681±9.808）pg／ml和（1.07±0.37）%、（6.526±0.538）pg／ml、（132.119±7.700）pg／ml、（50.245±7.668）pg／ml,均低于对照组的（2.53±0.63）%、（8.435±2.031）pg／ml、（149.265±12.316）pg／ml、（55.303±7.778）pg／ml（P＜0.05）;初治组TGF-β水平为（370.615±98.444）pg／ml,显著高于对照组的（311.895±73.365）pg／ml（P＜0.05）。RCHOP-CR组Th17细胞比例、IL-17、IL-21、IL-23水平分别为（2.38±0.59）%、（7.724±0.780）pg／ml、（148.412±7.355）pg／ml、（55.668±7.532）pg／ml,均高于初治组和CHOP-CR组（P＜0.05）;RCHOP-CR组TGF-β水平为（283.904±59.223）pg／ml,低于CHOP-CR组的（341.481±95.597）pg／ml（P＜0.05）。结论　Th17细胞可能与DLBCL的发生发展呈负相关,IL-23水平降低和TGF-β水平升高可能抑制Th17细胞的分化;利妥昔单抗可提高DLBCL患者Th17细胞比例,且与化疗效果有关。     

白细胞介素17调节弥漫大B细胞淋巴瘤小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ的表达及其与肿瘤进展关系的研究

目的 通过体外培养的Th17细胞过继免疫治疗弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)小鼠,分析白细胞介素17(IL-17)水平与主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)表达的相关性及其与肿瘤发生发展的关系.方法 免疫磁珠法分离纯化BALB/c小鼠脾来源的CD4+CD62L+T细胞,加入抗CD3抗体、抗CD28抗体、转化生长因子β(TGF-β)、IL-6体外培养Th17细胞,人生发中心B细胞样(GCB)DLBCL细胞株SUDHL-4传代培养后接种到严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠,建立DLBCL小鼠模型.将荷瘤小鼠分为Th17细胞实验组(30只)和对照组(20只),实验组荷瘤小鼠接种Th17细胞,对照组注射0.9％NaCl溶液.分别于预实验得到的小鼠肿瘤中位发病时间和小鼠中位生存时间处死半数小鼠.酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠肿瘤组织IL-17表达,免疫组织化学法检测MHCⅡ的表达.结果 DLBCL小鼠肿瘤中位发病时间为8d,中位生存期为28d.Th17细胞接种后IL-17表达水平[(11.93±0.56)pg/ml]较对照组[(9.82±0.26)pg/ml]升高(P＜ 0.000 1),随着肿瘤病程进展,IL-17表达水平降低[(9.53±0.18)pg/ml](P＜ 0.000 1);Th17细胞接种后MHCⅡ阳性细胞比例[(69.13±0.36)％]较对照组[(42.59±0.12)％]升高(P＜ 0.000 1),随着肿瘤病程进展,MHCⅡ阳性细胞比例降低[(54.63±0.45)％](P＜ 0.000 1).IL-17与MHCⅡ之间存在正相关性(r=0.89,P=0.000).结论 IL-17可上调DLBCL小鼠肿瘤组织MHCⅡ表达,且随着肿瘤病程进展,MHCⅡ表达下降.MHCⅡ表达水平可作为DLBCL疾病状态的判断指标,而其正向调控因子IL-17表达水平的上调会影响DLBCL的疾病进程,联合检测IL-17和MHCⅡ表达水平对判断DLBCL疾病状态及进程可能更有参考价值.     

Th17细胞过继免疫治疗对荷弥漫大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的 探讨Th17细胞过继免疫治疗对荷弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)小鼠肿瘤生长的影响.方法 采用Mini MACS免疫磁珠分离纯化BALB/c小鼠脾来源的CD4+ CD62L+初始T细胞,采用"转化生长因子(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、干扰素γ抗体(anti-IFN-γ)、白细胞介素4抗体(anti-IL-4)、白细胞介素23(IL-23)"因子组合体外诱导小鼠Th17细胞分化,采用ELISA法测定Th17细胞产生IL-17水平;采用DLBCL细胞株SUDHL-4接种SCID小鼠建立DLBCL荷瘤小鼠模型;选择0、8、18d(3组,5只小鼠/每组)对荷瘤小鼠进行Th17细胞过继免疫治疗,计算肿瘤体积,观察荷瘤小鼠生存期.结果 小鼠在接种SUDHL-4细胞8d左右均形成瘤结节,成瘤率为100％.与对照组小鼠相比,3个过继免疫治疗组小鼠肿瘤体积均明显缩小(P＜0.05),荷瘤小鼠生存期均显著延长(P＜0.05).结论 Th17细胞过继免疫治疗对DLBCL荷瘤小鼠具有抗肿瘤作用.     

Th17细胞与肿瘤

Th17细胞是一类CD4^＋效应T细胞。研究发现Thl7细胞及其相关细胞因子存在于许多肿瘤中,并在炎症相关性肿瘤中发挥重要作用,但对Th17细胞在肿瘤微环境中的分化表达、免疫调控机制及功能效应仍不明确。     

CD4+ and CD8+ T cells have opposing roles in breast cancer progression and outcome

The Cancer Immunoediting concept has provided critical insights suggesting dual functions of immune system during the cancer initiation and development. However, the dynamics and roles of CD4⁺ and CD8⁺ T cells in the pathogenesis of breast cancer remain unclear. Here we utilized two murine breast cancer models (4T1 and E0771) and demonstrated that both CD4⁺ and CD8⁺ T cells were increased and involved in immune responses, but with distinct dynamic trends in breast cancer development. In addition to cell number increases, CD4⁺ T cells changed their dominant subsets from Th1 in the early stages to Treg and Th17 cells in the late stages of the cancer progression. We also analyzed CD4⁺ and CD8⁺ T cell infiltration in primary breast cancer tissues from cancer patients. We observed that CD8⁺ T cells are the key effector cell population mediating effective anti-tumor immunity resulting in better clinical outcomes. In contrast, intra-tumoral CD4⁺ T cells have negative prognostic effects on breast cancer patient outcomes. These studies indicate that CD4⁺ and CD8⁺ T cells have opposing roles in breast cancer progression and outcomes, which provides new insights relevant for the development of effective cancer immunotherapeutic approaches.     

辅助性T细胞17和调节性T细胞的免疫功能及其对非小细胞肺癌免疫调节作用的研究进展

在不同细胞因子以及不同浓度的细胞因子作用下原始CD4+ T细胞可分化为不同的Th亚群。辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg细胞)是近年的研究热点,两者通过分泌不同的效应细胞因子发挥不同的免疫调节作用,即相互区别又相互联系,其中具体调控机制复杂,均在非小细胞肺癌(NSCLC)的发生中发挥重要作用。文章就Th17和Treg细胞的分化、发育、免疫学作用及对NSCLC的免疫调节作用的研究进展进行综述。     

Th17细胞与肿瘤

Th17细胞是一类CD4+效应T细胞.研究发现Th17细胞及其相关细胞因子存在于许多肿瘤中,并在炎症相关性肿瘤中发挥重要作用,但对Th17细胞在肿瘤微环境中的分化表达、免疫调控机制及功能效应仍不明确.     

Th17 cells and interleukin‐17 increase with poor prognosis in patients with acute myeloid leukemia

Although Th17 cells play crucial roles in the pathogenesis of many autoimmune and inflammatory disorders, their roles in malignancies are currently under debate. The role and mechanism of Th17 cells in patients with acute myeloid leukemia (AML) remain poorly understood. Here we demonstrated that the frequency of Th17 cells was significantly increased in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and bone marrow mononuclear cells from AML patients compared with healthy donors. Plasma levels of interleukin (IL)‐17, IL‐22, IL‐23, IL‐1β, IL‐6, and transforming growth factor (TGF)‐β1 were significantly increased in blood and bone marrow in AML patients compared with healthy donors. The in vitro experiments demonstrated that IL‐1β, IL‐6, IL‐23, but not TGF‐β1 promoted the generation and differentiation of Th17 cells from naive CD4⁺ T cells in humans. IL‐17A, a signature cytokine secreted by Th17 cells, induced the proliferation of IL‐17 receptor (IL‐17R)‐positive AML cells via IL‐17R, in which activation of PI3K/Akt and Jak/Stat3 signaling pathway may play important roles. In addition, combination of IL‐17A and IL‐22 significantly reduced the generation of Th1 cells and the production of interferon (IFN)‐γ from healthy donor or AML patient peripheral blood mononuclear cells. Patients with high Th17 cell frequency had poor prognosis, whereas patients with high Th1 cell frequency had prolonged survival. Combined analysis of Th1 and Th17 cell frequencies improved the ability to predict patient outcomes. In conclusion, Th17 cells play a crucial role in the pathogenesis of AML and may be an important therapeutic target and prognostic predictor.