EBV—DNA检测在儿童EB病毒感染中的临床意义

目的探讨荧光定量PCR检测EB病毒（EBV）对诊断和治疗EBV感染的临床意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应病毒核酸扩增方法,对儿科2010—06～2012—06以发热为主诉的患儿205例,检测外周血EB病毒DNA栽量,结合常规外周血及异型淋巴细胞检查,对照首发临床表现,分析荧光定量PCR检测发热患儿感染EBV的临床价值。结果205例发热患儿中,外周血EBV—DNA阳性42例,阳性率20．5％。荧光定量PCR检测EB病毒能早期反映EBV感染。结论荧先定量PCR检测EBv—DNA有助于早期诊断EBV感染,能减少诊疗的盲目性,对临床有一定指导意义。     

血液系统恶性肿瘤患者巨细胞病毒和EB病毒定量检测的临床价值

目的评价实时荧光定量聚合酶链反应对血液系统恶性肿瘤患者巨细胞病毒(CMV)感染和EB病毒(EBV)感染的早期诊断价值。方法应用实时荧光定量PCR检测334例血液系统恶性肿瘤患者血液中CMV DNA和EBV DNA载量。结果 334例患者中EBV检测阳性率为13.2%,CMV检测阳性率为19.2%,DNA拷贝数介于(102~107)copy/mL之间。治疗有效者EBV DNA和CMV DNA载量迅速下降,2~3周后转阴。结论实时荧光定量PCR动态监测血液系统恶性肿瘤患者CMVDNA和EBV DNA水平对于CMV感染和EBV感染的早期诊断和疗效判断具有重要意义。     

EB病毒感染实验室诊断方法探讨

目的 探讨EB病毒(EBV)感染的实验室诊断方法.方法 设计针对EBV基因组的引物和荧光标记探针,利用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测70例外周血标本.其中17例是确诊EBV感染及传染性单核细胞增多症患儿,27例是临床高度怀疑EBV感染患儿,26例是临床非EBV感染的患儿,并与检测EBV抗体VCA-IgM的酶联免疫吸附试验(ELISA)进行比较.结果 确诊组、疑似组和对照组患儿FQ-PCR检测EBV的阳性率分别为100.00%、81.48%和0.00%.与此对应VCA-IgM的阳性率分别为100.00%、25.93%和0.00%.确诊组EBV DNA的平均拷贝数为1.15×105/ml,疑似组为4.38×104/ml,均明显高于对照组(P＜0.05).结论 与VCA-IgM检测方法相比,FQ-PCR检测到EBV感染的阳性率更高,EBV DNA的定量检测可帮助诊断儿科活动性EBV感染,尤其是可疑患儿的临床诊断.     

EB病毒感染实验室诊断方法探讨

目的探讨EB病毒(EBV)感染的实验室诊断方法。方法设计针对EBV基因组的引物和荧光标记探针,利用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测70例外周血标本。其中17例是确诊EBV感染及传染性单核细胞增多症患儿,27例是临床高度怀疑EBV感染患儿,26例是临床非EBV感染的患儿,并与检测EBV抗体VCA-IgM的酶联免疫吸附试验(ELISA)进行比较。结果确诊组、疑似组和对照组患儿FQ-PCR检测EBV的阳性率分别为100.00%、81.48%和0.00%。与此对应VCA-IgM的阳性率分别为100.00%、25.93%和0.00%。确诊组EBV DNA的平均拷贝数为1.15×105/m l,疑似组为4.38×104/m l,均明显高于对照组(P<0.05)。结论与VCA-IgM检测方法相比,FQ-PCR检测到EBV感染的阳性率更高,EBV DNA的定量检测可帮助诊断儿科活动性EBV感染,尤其是可疑患儿的临床诊断。     

血液肿瘤患者血浆EB病毒和巨细胞病毒定量检测的临床价值

目的采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定血液肿瘤患者血浆中EB病毒(EBV)和巨细胞病毒(CMV)DNA水平,探讨血浆EBV DNA和CMV DNA定量测定的临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测280例血液肿瘤患者血液中EBV DNA和CMV DNA载量。结果 280例血液患者中EBV DNA检测阳性率为17.1%,CMV检测阳性率为18.9%,动态监测病毒DNA拷贝数为10~2~10~7 copy/mL。接受外周造血干细胞移植的患者126例,其中EBV检测阳性率为28.6%,CMV检测阳性率为40.5%。血液肿瘤患者进行抗病毒治疗后,均在7~14d后转阴。结论实时荧光定量PCR动态检测血液肿瘤患者EBV DNA和CMV DNA水平对于EBV和CMV感染患者的疗效判断具有重要临床意义。     

179例血液病患者EBV和HCMV核酸检测阳性率与患者年龄的关系

目的了解再生障碍性贫血、急性淋巴细胞白血病及髓系白血病患者EB病毒(EBV)和人巨细胞病毒(HCMV)核酸检测阳性率与其年龄的关系。方法收集中国人民解放军海军总医院2012年1月至2013年12月骨髓穿刺后临床确诊为再生障碍性贫血、急性淋巴细胞白血病及髓系白血病患者为研究对象,采用达安基因核酸检测试剂盒对EBV和HCMV核酸进行检测,分析EBV和HCMV感染阳性率与患者年龄的关系。结果 EBV和HCMV在3种血液病中核酸检测阳性率不同,HCMV核酸检测阳性检出率(15.8%)低于EBV(43.7%)。再生障碍性贫血和髓系白血病患者中,不同年龄患者EBV核酸检测阳性率比较差异有统计学意义(P0.01)。结论对于儿童再生障碍性贫血病和髓系白血病患者应更加重视EBV和HCMV核酸的监测。     

荧光定量PCR在检测儿童EB病毒感染中的应用

目的探讨荧光定量PCR方法检测Epstein-Barr Virus DNA(EBV-DNA)在儿童临床EB病毒感染诊断中的价值。方法对376例表现为不明原因发热、咽炎、肝脾肿大等患儿采用实时荧光定量PCR方法检测血浆EBV-DNA。结果检测出174例患儿血浆EBV-DNA阳性,阳性率46%,其中男性100例,女性74例,年龄≤1岁36例,1岁～8岁108例,>8岁30例。结论荧光定量PCR方法检测对儿童EB病毒(EBV)感染的检测具有早期、快速等优点。     

实时荧光定量PCR在EB病毒DNA检测中的应用

目的探讨实时荧光定量PCR技术在检测患者外周血单个核细胞(PBMC)中EB病毒(EBV)DNA定量的临床应用,比较实时荧光定量PCR在检测血浆和PBMC中EBV DNA含量的差别,并研究EBV阳性患者的病种分布特点。方法应用罗氏Light Cycler荧光定量PCR仪检测375例患者PBMC中EBV DNA含量,所有阳性患者均用血浆进行复查,比较其差别,并回顾性分析患者临床特点。结果检测PBMC中EB阳性标本35例,阳性率为9.3%。阳性患者中鼻炎13例,鼻咽癌4例,鼻息肉4例,肺炎7例,急性淋巴细胞性白血病1例,传染性单核细胞增多症6例。取阳性标本检测其血浆游离EB DNA,33例阳性,其拷贝数低于相应标本中PBMC中的拷贝数。结论实时荧光定量PCR技术检测PBMC和血浆中EB DNA准确,快速,在确诊EBV感染相关性疾病中具有重要的作用,且检测PBMC中EB DNA可能更优于检测血浆中EB DNA。     

咽拭子和外周血EB病毒核酸检测结果分析

目的：用荧光定量PCR法分别检测咽拭子和外周血标本EB病毒核酸,将结果进行统计对比,探讨其结果是否一致。方法采用实时荧光PCR法同时检测疑似感染患者和正常人的外周血和咽拭子EB病毒DNA拷贝数,将结果进行对比。结果疑似感染患者咽拭子EB病毒阳性率49.4%远高于正常人咽拭子13.3%阳性率,差异有统计学意义(P<0.05);疑似感染患者外周血EB病毒阳性率19.1%高于正常人外周血阳性率7.2%,差异有统计学意义(P<0.05);同一个患者同时取咽拭子检测EB病毒阳性率51.6%高于外周血阳性率18.3%,差异有统计学意义(P<0.05),且同一患者的咽拭子检测病毒载量(1.0×102～3.17×107)也高于外周血检测病毒载量(4.5×102～2.84×105),差异有统计学意义(P<0.05)。结论用荧光定量PCR法检测咽拭子标本阳性率较外周血阳性率更高,更能及时准确的监测EB病毒在体内的实际复制情况,且标本采集方便,值得在临床推广应用。     

血清淀粉样蛋白A在972例EB病毒感染儿童中的临床意义

目的 探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)对EB病毒(EBV)感染儿童诊断的临床意义。方法 选取2019年1月到12月在泰安市中心医院确诊的972例EBV感染的儿童作为实验组,并同时选择200例随机抽取的健康体检儿童作为对照组,在EBV感染儿童入院后抽取空腹的静脉血,分别检测全血SAA、CRP和EBV-DNA。分析SAA、CRP在EBV感染儿童及健康对照组中的含量变化,以及EBV感染儿童中病毒载量与SAA浓度的变化趋势。结果 EBV感染儿童组的SAA及CRP水平显著高于健康对照组(Z=-16.01、-11.18),差异有统计学意义(P<0.05);EBV感染儿童组的SAA的阳性率(71.7%)明显高于CRP的阳性率(39.8%)(χ²=200.4),差异有统计学意义(P<0.05);EBV低载量组儿童的SAA浓度高于高载量组(Z=-2.46),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 在EBV感染诊断中SAA的敏感性要优于CRP,SAA的检测可以作为诊断儿童感染EBV的一个重要的指标。     

儿童呼吸道EB病毒感染IgM抗体与病毒DNA的相关性分析

目的 研究不同年龄段儿童呼吸道感染EB病毒(EBV)IgM抗体与病毒DNA的相关性.方法采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测1 062例患儿的血清标本中的EBV-IgM,同时用荧光探针PCR法检测患儿咽拭子标本中的EBV-DNA,对不同年龄段结果利用软件SPSS11.5进行χ2检验分析.结果 1 062例患儿EBV-DNA阳性率为46.61%,EBV-IgM阳性率6.78%,二者比较差异有统计学意义(P＜0.01);EBV-DNA各年龄段分组检测中,阳性率分别为21.05%、40.91%、65.71%、50.00%,≤1岁的低龄患儿阳性率最低(21.05%),与其他组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 不同年龄段的儿童由于免疫系统发育处于不同阶段,对EB病毒的免疫应答可能存在差异.     

Predictive value of quantitative PCR-based viral burden analysis for eight human herpesviruses in pediatric solid organ transplant patients

Human herpesviruses can cause significant morbidity and mortality in pediatric solid organ transplant recipients. It was hypothesized that viral burden quantification by polymerase chain reaction using an internal calibration standard could aid in distinguishing between viral disease and latency. Here we report the results of a 2-year prospective study of 27 pediatric solid organ (liver, kidney, or heart) transplant recipients in which multiple samples were analyzed for levels of all eight human herpesviruses by internal calibration standard-polymerase chain reaction. Herpes simplex viruses 1 and 2, varicella-zoster virus, and Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus were not detected in any of these samples. Human herpesvirus types 6 and 7 were detected in half of the patients, but were present at low levels, similar to those found in reference populations. Epstein-Barr virus (EBV) and cytomegalovirus (CMV) were detected in 89% and 56% of the patients, respectively. Viral burden analysis suggested distinct patient populations for CMV, with a natural cutoff of 10,000 viral targets/ml blood strongly associated with disease. In some cases, a dramatic increase in CMV levels preceded clinical evidence of disease by several weeks. EBV viral burden was relatively high in the only patient presenting with an EBV syndrome. However, two other patients without evidence of EBV disease had single samples with high EBV burden. Rapid reduction in both EBV and CMV burden occurred with antiviral treatment. These data suggest that viral burden analysis using internal calibration standard-polymerase chain reaction for CMV, and possibly other herpesviruses, is an effective method for monitoring pediatric transplant patients for significant herpesvirus infection and response to therapy.     

淋巴瘤患者EBV感染状态的调查

本研究调查北京大学第一医院2008年1月至2012年4月淋巴瘤患者的EBV感染状态。选取2008年1月-2012年4月于我院行外周血EBV DNA检测或病理EBER检测的淋巴瘤患者,收集此人群的性别、年龄、病理类型、外周血EBV DNA、病理EBER结果等信息,研究不同类型淋巴瘤的EBV阳性率,和EBV阳性组与EBV阴性组的特征差异,应用Kaplan-Meier生存分析法和Cox生存分析法分析EBV阳性对总生存率的影响。结果表明,169例淋巴瘤患者中,结外NK/T细胞淋巴瘤、血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤患者病理EBER阳性率最高（分别为84.8%、72.7%、40.0%）,弥漫大B细胞性淋巴瘤病理EBER阳性率较低（16.7%）,老年EBV（＋）弥漫大B细胞淋巴瘤外周血EBV阳性率为50%,10例霍奇金淋巴瘤中有1例患者进行病理EBER检测,结果为阳性,外周血EBV阳性率为10%,EBV阳性患者中的T细胞淋巴瘤比例明显增多（P=0.000）,B症状发生率也明显升高（P=0.005）,所有EBER阳性病例中外周血EBV阳性与阴性患者OS差异有显著统计学意义,多因素回归分析表明外周血EBV阳性是淋巴瘤患者预后不良的独立危险因素（P=0.027）。结论：EBV与结外NK/T细胞淋巴瘤、血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤等密切相关。外周血EBV阳性是淋巴瘤患者预后不良的独立危险因素。     

系统性红斑狼疮患者EB病毒和人疱疹病毒6型感染的探讨

目的探讨EB病毒(EBV)和人疱疹病毒6型(HHV 6)感染在系统性红斑狼疮(SLE)中的作用。方法采用巢式聚合酶链反应(PCR)检测SLE患者和正常对照者外周血中HHV 6 DNA;应用逆转录PCR(RT-PCR)和Southern杂交技术,检测EBV阳性标本增殖期基因BZLF1、BARF1和BcLF1的表达。结果SLE患者组EBV阳性率高于对照组(P=0),但HHV 6阳性率与对照组差异无显著性(P=0.735 4),SLE患者EBV与HHV 6检出率有明显相关性(P=0.015 9)。32例EBV DNA阳性者中有2例检出BARF1 mRNA,均为活动期,且HHV 6DNA阳性。16例BcLF1 mRNA阳性者中有14例HHV 6 DNA阳性,相关性好。均未检测到BZLF1的表达。结论SLE患者EBV阳性率和BcLF1 mRNA的表达均与HHV 6有明显相关性,SLE患者中可能存在EBV和HHV 6的相互激活作用。     

小儿慢性咳嗽检测肺炎支原体抗体的临床意义

目的:探讨小儿慢性咳嗽与肺炎支原体(MP)感染的关系.方法:采用金标免疫斑点法,对96例慢性咳嗽患儿(咳嗽组)及50例健康儿童(健康组)进行血清肺炎支原体抗体(MP-IgM)检测.结果:咳嗽组MP-IgM阳性50例,阳性率52.0%,以3～6岁组阳性率最高(74.2%).健康组阳性4例,阳性率8%,两组阳性率差异有显著性意义(P＜0.01).结论:MP感染与小儿慢性咳嗽关系密切,在对慢性咳嗽患儿寻找病因时,应常规进行MP-IgM检测,为临床治疗提供依据.     

河北省儿童医院住院患儿EB病毒感染流行病学特征

目的了解河北省儿童医院住院患儿EB病毒(EBV)感染的流行病学特征,为儿童EBV感染的诊断和预防提供科学依据。方法收集2017年1—12月河北省儿童医院0~14岁EBV感染住院患儿的全血样本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其EBV衣壳抗原(VCA)IgG及IgM抗体,抗早期抗原(EA)IgG抗体和抗核抗原1(NA1)IgG抗体,以检测结果为研究样本的抗体谱。根据4种EBV抗体的检测结果分为现症感染(抗VCA-IgM抗体阳性,抗NA1-IgG抗体阴性、抗VCA-IgG抗体、抗EA-IgG抗体阳性或阴性)、亚急性感染(抗VCA-IgG抗体阳性,抗VCA-IgM抗体、抗NA1-IgG抗体、抗EA-IgG抗体阳性或阴性)、既往感染(抗NA1-IgG抗体阳性,抗VCA-IgG抗体阳性或阴性,其他抗体均为阴性)和未感染(4种抗体均阴性)。按照患儿年龄、检出月份和性别分析各组的阳性率。结果共纳入符合要求的样本4 451例,其中3 257例(73.17%)抗体谱提示EBV感染,包括现症感染380例(8.54%)、亚急性感染616例(13.84%)、既往感染2 261例(50.80%)。不同年龄组原发阳性检出率差异有统计学意义(P<0.05),其中学龄前(>3岁)组的阳性检出率最高(P<0.05);不同检出月份组阳性检出率差异有统计学意义(P<0.05),7月份阳性检出率高于其他月份(P<0.05);男性患儿与女性患儿EBV感染率差异无统计学意义(P>0.05)。380例现症感染患儿的疾病谱以血液系统疾病[传染性单核细胞增多症、急性粒细胞缺乏症、血小板减少性紫癜、EBV相关嗜血细胞综合征]为主,其中传染性单核细胞增多症为临床常见疾病;其次是呼吸系统疾病(急性支气管炎、疱疹性咽峡炎、急性扁桃体炎);其他疾病谱包括神经系统疾病及血流感染、肾病综合征、川崎病。结论河北省儿童医院住院患儿EBV阳性检出率有年龄和检出月份差异,现症感染以血液系统疾病患儿为主,医院应根据流学病学特征制定相应预防措施。     

Sensitivity of the Enzygnost anti-EBV/IgG for the determination of the Epstein-Barr virus immune status in pediatric patients

The Enzygnost Anti-EBV/IgG shows good performance for populations not defined by age. Samples from 349 pediatric outpatients were screened with the assay and with immunofluorescence assay (IFA) as the gold standard. The Enzygnost assay showed a sensitivity of 85%. Ten and one-tenth percent of EBV seropositive samples were classified as intermediate, and 4.9% were falsely determined as seronegative when compared to the standard IgG anti-virus capsid antigen (VCA) IFA. Our data suggest a limited sensitivity of the assay with samples from pediatric patients.     

EB病毒VCA-IgA抗体及病毒DNA载量在系统性红斑狼疮患者中的表达

目的 检测EB病毒VCA-IgA抗体及病毒DNA载量在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中的表达，探讨EB病毒与SLE的相关性。方法 分别采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法和实时定量PCR方法检测EB病毒VCA-IgA抗体和EB病毒DNA载量。同时分析EB病毒VCA-IgA抗体与SLE患者的实验室指标抗Sm抗体、抗dsDNA抗体、补体C3和C4的相关性。结果 248例SLE患者中，49例为EBV-VCA-IgA抗体阳性，167例健康对照者中12例阳性，SLE患者阳性率明显高于对照组(19.8% vs 7.2%; P < 0.001)；SLE患者EB病毒载量也明显高于对照组。EB病毒VCA-IgA抗体阳性与抗Sm抗体、抗dsDNA抗体、补体C3和C4不相关。结论EB病毒感染与SLE相关，EB病毒VCA-IgA抗体阳性者有较高的DNA载量，SLE的发病危险性亦高，EB病毒重新活化与SLE活动有关。     

Clinical reliability of IgG, IgA, and IgM antibodies in detecting Epstein-Barr virus at different stages of infection with a commercial nonrecombinant polyantigenic ELISA

We studied the diagnostic reliability of a modification of the Enzygnost EBV test (Behringwerke, Germany) for the detection of IgG, IgA, and IgM antibodies (Abs) in the diagnosis of Epstein-Barr virus (EBV) disease. One hundred and twenty-three serum samples were studied: 14 asymptomatic subjects without EBV infection, 48 patients with primary infection, 46 subjects with past EBV infection (11 patients with other acute infections), 8 patients without EBV infection but with other viral infection, and 7 patients with probable acute clonal stimulation of B lymphocytes caused by different microorganisms. Enzygnost EBV is based on an ELISA test with a pool of viral antigens. In our series the reliability of IgM for the diagnosis of recent primary EBV infection was: sensitivity 100%, specificity 95%, positive predictive value 90.5%, and negative predictive value 100%. The IgG detection with Enzygnost was: sensitivity 98%, specificity 100%, positive predictive value 100%, and negative predictive value 91.7%. Only two subjects had positive IgA. The Enzygnost test is an efficient method for the diagnosis of EBV infection although a few IgM false positives can occur.     

EB病毒、P53及Ki67在鼻息肉组织中的表达及意义

目的：探讨EB病毒（EBV）、P53及Ki67在鼻息肉组织中的表达及其与鼻息肉发病的相关性。方法：利用免疫组化方法检测30例鼻息肉患者术后的鼻息肉组织中EBV毒、P53及Ki67的表达情况。另检测10例鼻中隔偏曲患者正常鼻粘膜组织的EBV、P53及Ki67表达。结果：正常鼻粘膜中EBV毒、P53及Ki67表达的阳性率分别为10%、0%与0%;鼻息肉组织中的EBV阳性率为46.7%,P53的阳性率为33.3%,Ki67（Ⅱ~Ⅳ）为40%。结论：EB病毒的感染及Ki67、P53的阳性表达与鼻息肉的发病密切相关。