WHV/myc转基因小鼠肝癌发生过程中的基因异常

目的探测ＷＨＶ／ｍｙｃ转基因小鼠肝癌发生过程中有关基因在肝脏中的异常表达。方法用原位杂交方法检测ＷＨＶ／ｍｙｃ转基因小鼠肝肿瘤形成的不同阶段,ｃ－ｍｙｃ转染基因、胰岛素样生长因子Ⅱ（ＩＧＦ－Ⅱ）基因ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｆｏｓ和ｃ－Ｈ－ｒａｓ等基因的表达。结果ｃ－ｍｙｃ转染基因和ＩＧＦ－Ⅱ基因在转基因小鼠出生后早期的肝脏中异常表达,随后表达水平即降低至不能测出。上述两基因的表达在肝肿瘤形成期重新出现。ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｆｏｓ和ｃ－Ｈ－ｒａｓ基因在转基因小鼠肝癌发生前肝脏中的表达强度明显高于正常小鼠。结论ｃ－ｍｙｏｔ染基因和ＩＧＦ－Ⅱ基因在小鼠出生后早期和肿瘤形成期的异常表达对肝肿瘤的发生和瘤细胞转化表型的维持可能具有重要意义;在ｃ－ｍｙｃ转染基因表达的“沉默”期,一些癌基因在肝脏中的异常表达对日后肝脏肿瘤的形成可能也具有一定作用。     

肝癌组织中p62^c—myc表达及其意义

应用免疫组织化学（ＡＢＣ法）技术对４８例原发性肝癌患者的肝癌及癌旁石蜡包埋组织中ｐ６２＾ｃ－ｍｙｃ进行检测，结果显示ｐ６２＾ｃ－ｍｙｃ的阳性率在肝癌中为８３．３％（４０／４８），在癌旁组织为８９．６％（４３／４８），说明ｃ－ｍｙｃ基因的激活与肝癌癌变过程有密切关系。同时对ｐ６２＾ｃ－ｍｙｃ表达的意义进行了讨论。     

肝癌组织中p62~（c－myc）表达及其意义

应用免疫组织化学（ＡＢＣ法）技术对４８例原发性肝癌患者的肝癌及癌旁石蜡包埋组织中ｐ６２~（ｃ－ｍｙｃ）进行检测，结果显示ｐ６２~（ｃ－ｍｙｃ）的阳性率在肝癌中为８３．３％（４０／４８），在癌旁组织为８９．６％（４３／４８），说明ｃ－ｍｙｃ基因的激活与肝癌癌变过程有密切关系。同时对ｐ６２~（ｃ－ｍｙｃ）表达的意义进行了讨论。     

老年男性肝癌存在c－myc和p53基因过量表达

本实验应用免疫组织化学（ＡＢＣ法）对８例石蜡包埋老年男性肝癌和癌旁组织的ｐ６２ｃ－ｍｙｃ和ｐ５３蛋白进行了检测。结果显示，癌和癌旁组织的ｐ６２ｃ－ｍｙｃ弱阳性者６例，仅癌组织或癌旁组织阳性者各１例；癌及其癌旁组织均ｐ５３阴性者２例。说明ｃ－ｍｙｃ和ｐ５３基因的过量表达参与了老年人肝癌的发生发展过程。     

肝癌h—met,c—mycP^16蛋白表达与细胞增殖状态的研究

目的和方法：用免疫组化法检测了３０例肝癌的ｈ－ｍｅｔ，ｃ－ｍｙｃ，Ｐ１６和ＣＤＫ４蛋白的表达，旨在了解肝癌细胞的增殖调控与多基因表达异常的关系。结果：结果显示，ｈ－ｍｅｔ，ｃ－ｍｙｃ，Ｐ１６和ＣＤＫ４蛋白在肝癌的表达率分别为５３３％，７２４％，２６７％和６０％。它们之间的表达率有显差异（Ｐ＜００１）。Ｐ１６表达率与ＣＤＫ４的表达间有负向关系；ｈ－ｍｅｔ表达率与ＣＤＫ４之间显正向关系；而ｃ－ｍｙｃ基因在肝癌组织的表达与ＣＤＫ４之间相互独立无明显关系。结论：结果提示Ｐ１６基因表达低下是促进肝癌细胞恶性增长的原因之一     

反义c-mycRNA的表达对大鼠血管平滑肌细胞c-mycmRNA和c-Myc蛋白水平的影响

为探讨反义ｃ－ｍｙｃ逆转录病毒载体是否影响血管平滑肌细胞表达ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ｃ－Ｍｙｃ蛋白水平，用基因重组方法，将第二外显子及其两侧部分内含子共１．５３ｋｂ序列的ｃ－ｍｙｃ基因片段反向连接于ＰＬＸＳＮ的５’长末端重复序列下游，通过Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将反义ｃ－ｍｙｃ逆转录病毒导入ＰＡ３１７包装细胞系，并经Ｇ４１８筛选获得抗性克隆。反义ｃ－ｍｙｔ逆转录病毒上清液转染的平滑肌细胞经ＤＮＡ印迹杂交和ＥＮＡ印迹杂交及蛋白印迹杂交证实其是否整合于平滑肌细胞基因组中，有无反义ｃ－ｍｙｃＲＮＡ表达及表达的反义ｃ－ｍｙｃＲＮＡ对平滑肌细胞ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ｃ－Ｍｙｃ蛋白表达的影响。结果发现，反义ｃ－ｍｙｃ逆转录病毒载体能整合于平滑肌细胞基因组中，ＲＮＡ印迹杂交和蛋白印迹杂交发现反义ｃ－ｍｙｃＲＮＡ显著抑制了平滑肌细胞ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ｃ－Ｍｙｃ蛋白的表达，而正义ｃ－ｍｙｃＲＮＡ对其无影响。此实验结果说明反义ｃ－ｍｙｃＲＮＡ是以序列特异性方式抑制ｃ－ｍｙｃ基因表达的有效工具，这为ｃ－ｍｙｃ基因过度表达的疾病的基因治疗提供了一种新的途径。     

C—myc癌基因在膀胱癌中的扩增与表达

应用核酸杂交和免疫组化技术，检测了５０例膀胱癌患者的癌组织标本及６例正常膀胱组织的Ｃ－ｍｙｃ基因扩增和表达，其中１２例膀胱癌组织显示Ｃ－ｍｙｃ扩增，扩增率为２４％；２２例Ｃ－ｍｙｃ蛋白产物表达阳性，阳性率为４４％。正常膀胱组织中Ｃ－ｍｙｃ基因无扩增现象及其蛋白产物表达。提示Ｃ－ｍｙｃ基因扩增及其蛋白表达与膀胱癌的组织学类型及预后有关。     

原位杂交检测肝癌组织c—myc和HBx基因的表达

应用光敏生物素标记基因探针原位杂交技术（ＤＮＡ－ｍＲＮＡ）检测２３例新鲜肝癌和癌旁组织中的ｃ－ｍｙｃ和ＨＢｘ基因表达状况。结果发现，１１例肝癌和癌旁组织ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ＨＢｘｍＲＮＡ均为阳性，６例均为阴性，５例仅ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ阳性１例仅ＨＢｘｍＲＮＡ阳性，Ｘ＾２检验显示肝癌组织ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ＨＢｘｍＲＮＡ地明显相关关系（Ｐ〉０．０５），提示ＨＢｘｍＲＮＡ不能直接激活ｃ－ｍｙｃ交响曲在     

原位杂交检测肝癌组织c－myc和HBx基因的表达

应用光敏生物素标记基因探针原位杂交技术（ＤＮＡ－ｍＲＮＡ）检测２３例新鲜肝癌和癌旁组织中的ｃ－ｍｙｃ和ＨＢｘ基因表达状况。结果发现，１１例肝癌和癌旁组织的ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ＨＢｘｍＲＮＡ均为阳性，６例均为阴性，５例仅ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ阳性，１例仅ＨＢｘｍＲＮＡ阳性。ｘ~２检验显示肝癌组织ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ＨＢｘｍＲＮＡ无明显相关关系（Ｐ＞０．０５），提示ＨＢｘｍＲＮＡ不能直接激话ｃ－ｍｙｃ癌基因。     

肺癌组织中几种相关基因的研究

目的研究几种基因的异常在肺癌过程中所起的作用。方法采用免疫组化、ＤＮＡ／ＰＣＲ直接测序及ＲＴ－ＰＣＲ方法对５９例原发性肺癌组织ｐ５３、ｍｙｃ基因和ｍｄｒｌ基因进行检测。结果在肺癌组织中ｐ５３基因突变或过表达占６５％（３７／５７），ｍｙｃ基因过表达占５９％（２７／４６），ｍｄｒｌ基因过表达占３１％（１５／４８）。其特点是：ｐ５３基因异常与肿瘤大小、淋巴结转移、病期和复发无相关性，而ｍｙｃ基因的过表达与之呈正相关，ｍｄｒｌ基因过表达在腺癌中占有较高比例，它与淋巴结转移及病期无相关性。ｐ５３和ｍｙｃ二者均异常者占６３％（１９／３０），其复发率为７６％，ｍｄｒｌ和ｍｙｃ均异常者为６２％，其复发率为８３％。结论ｐ５３、ｍｄｒｌ与ｍｙｃ基因的异常在肺癌中可能具有协同作用，影响肺癌预后的主要因素是ｍｙｃ基因高表达     

核蛋白类基因在人肝细胞癌中的变化及其意义

在人肝细胞癌及其癌旁组织中至少发现七种基因的重排、扩增、点突变或过量表达等，其中ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｅｔｓ－２和ｐ５３基因属于核蛋白类，它们的产物大多具有与ＤＮＡ结合的能力，对肝细胞恶性转化及维持起着重要作用，抑癌基因ｐ５３在人肝癌中的异常变化是目前研究的重点。对核蛋白类基因的研究有利于进一步明确人肝细胞癌的发生机制，并且对人肝细胞癌的诊断及治疗均有重要意义。     

C—myc基因与心肌重构

Ｃ－ｍｙｃ基因是１９８２年Ｎｅｅｌ等［１］最早在禽类骨髓细胞瘤病毒２９中发现的一种癌基因。心肌重构是心脏功能不全的生物学基础，研究发现，原癌基因ｃ－ｍｙｃ等是细胞增殖调控的早期反应基因，与基因介导的心肌肥厚的病理发生有密切关系，同时它还具有诱导细胞凋...     

苯乙酸诱导分化胶质瘤细胞过程中基因表达变化

观察诱导分化剂苯乙酸对胶质细胞Ｃ６的增殖分化过程中基基因Ｃ－ｍｙｃ,抑癌基因Ｐ１６的蛋白水平变化。方法＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测细胞增殖率;免疫组织化ＳＰ法检测Ｃ－ｍｙｃ、Ｐ１６基因蛋白水平的表达。结果应用苯乙酸后,细胞ＣＰＭ值降低;Ｃ－ｍｙｃ基因胞浆阳性表达下降,Ｐ１６基因胞浆阳性表达升高。     

老年细胞原癌基因c-fos、c-myc基因可诱导性减退与特异转录因子的关系

目的观察人胚肺二倍体成纤维细胞的老年细胞中原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ表达的变化及其与特异转录因子的关系。方法使用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交法检测ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ基因表达情况，使用Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交法检测特异转录因子。结果表皮生长因子（ＥＧＦ）对老年细胞中ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ转录的可诱导性下降，使与ｃ－ｆｏｓ基因片段特异结合的蛋白质Ｐ９１和与ｃ－ｍｙｃ基因片段特异结合的蛋白质Ｐ８０明显降低。结论老年细胞中ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ基因转录对ＥＧＦ可诱导性下降，可能与其结合的转录因子活性改变有关。     

老年细胞原癌基因c—fos,c—myc基因可诱导性减退与特异转录因…

目的 观察人胚肺二倍体成纤维细胞的老年细胞中原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ表达的变化及其与特异转录因子的关系。 方法 使用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交法检测ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ基因表达情况，使用Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交法检测特异转录因子。 结果 表皮生长因子（ＥＧＦ）对老年细胞中ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ转录的可诱导性下降，使与ｃ－ｆｏｓ基因片段特异结合的蛋白质Ｐ９１和与ｃ－ｍｙｃ基因片段特异结     

DNA甲基化与肝癌研究进展

ＤＮＡ甲基化是转录水平的ＤＮＡ的修饰方式之一,其在调节基因表达及维持细胞正常分化中起着重要作用。正常情况下细胞内约７５％的胞嘧啶一鸟嘌呤碱基对中的胞嘧啶（Ｃ）处于甲基化状志,它是维持细胞稳定性的重要因素,其水平下降或模式改变可导致基因结构和功能的异常,是细胞癌变中重要的一步。大量实验表明,在肿瘤的发生发展中存在ＤＮＡ甲基化水平和模式的紊乱。研究发现,化学致癌剂诱发的大鼠肝结节增生和肝癌中可发现ｃ－ｍｙｃ、ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因的ＤＮＡ甲基化模式改变,而相应癌基因表达增加［１］。我国为肝癌（ＨＣＣ）…     

反义c-mycRNA的表达对大鼠血管平滑肌细胞c-mycmRNA和c-Myc蛋白水平的影响

为探讨反义ｃ－ｍｙｃ逆转录病毒载体是否影响血管平滑肌细胞表达ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ和ｃ－Ｍｙｃ蛋白水平，用基因重组方法，将第二外显子及其两则部分内含子共１．５３ｋｂ序列的ｃ－ｍｙｃ基因片段反向连接于Ｐ＾ＬＸＳＮ的５′长末端重复序列下游，通过Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将反义ｃ－ｍｙｃ逆转录病毒导入ＰＡ３１７包装细胞系，并经Ｇ４１８筛选获得抗性克隆。反义－ｃ－ｍｙｃ逆转录病毒上清液转染的平滑肌细胞经ＤＮＡ印迹     

丹参酮Ⅱa磺酸钠抑制巨噬细胞源性生长因子刺激平滑肌细胞c-myc基因表达

本实验采用原位杂交技术，探讨丹参酮Ⅱａ磺酸钠对血管平滑肌细胞增殖相关基因ｃ－ｍｙｃ表达的影响。观察到巨噬细胞源性生长因子可明显促进平滑肌细胞ｃ－ｍｙｃ高表达；丹参酮Ⅱａ磺酸钠能阻止巨噬细胞源笥长因子刺激平滑肌细胞的作用，使ｃ－ｍｙｃ表达水平下降，提示丹参酮Ⅱａ磺酸钠可能在动脉粥样硬化疾病中阻止平滑肌细胞增殖起重要作用。     

丹参酮Ⅱa磺酸钠抑制巨噬细胞源性生长因子刺激平滑肌细胞c-myc基因表达

本实验采用原位杂交技术，探讨丹参酮Ⅱａ磺酸钠对血管平滑肌细胞增殖相关基因ｃ－ｍｙｃ表达的影响。观察到巨噬细胞源性生长因子可明显促进平滑肌细胞ｃ－ｍｙｃ高表达；丹参酮Ⅱａ磺酸钠能阻止巨噬细胞源性生长因子刺激平滑肌细胞的作用，使ｃ－ｍｙｃ表达水平下降，提示丹参酮Ⅱａ磺酸钠可能在动脉粥样硬化疾病中阻止平滑肌细胞增殖起重要作用。     

胰岛素对血管平滑肌细胞增殖及原癌基因c-fos和c-myc表达的影响

用３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入实验及细胞计数法等观察了胰岛素对体外培养的人血管平滑肌细胞ＤＮＡ合成、细胞增殖及原癌基因：ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ表达的影响。结果发现，在培养基中加入不同浓度的胰岛素后，血管平滑肌细胞增殖，细胞ＤＮＡ合成增加，原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ表达增加，上述三者均具有胰岛素剂量依赖性，呈现量－效关系．实验结果表明，高胰岛素血症可能通过促进平滑肌细胞增殖和原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ表达和来加速动脉粥样硬化的发生与发展的。