血小板源生长因子对动脉平滑肌细胞增殖,Ⅰ、Ⅲ型前胶原信使核糖核酸的表达及胶原蛋白合成的调节作用

目的：研究血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）对培养的人主动脉平滑肌细胞增殖、胶原蛋白合成、分泌及Ⅰ、Ⅲ型前胶原信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）表达和转移生长因子βｍＲＮＡ表达的调节作用。方法：氚胸腺嘧啶脱氧核苷（３ＨＴｄＲ），氚脯氨酸参入及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析。３ＨＴｄＲ，氚脯氨酸参入的比较采用ｔ检验。结果：ＰＤＧＦ能促进人主动脉平滑肌细胞脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）合成和胶原蛋白合成、分泌；ＰＤＧＦ能上调Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和转移生长因子βｍＲＮＡ表达。结论：血小板源生长因子能通过上调Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和转移生长因子βｍＲＮＡ表达促进平滑肌细胞胶原蛋白的合成、分泌。     

纤维粘连蛋白和层粘连蛋白对原代培养血管平滑肌细胞胶原基因表达的影响

为了研究纤维粘连蛋白（Ｆｎ）和层粘连蛋白（Ｌｎ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胶原基因表达的影响。我们应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交的方式观察不同剂量的Ｆｎ和Ｌｎ处理的ＶＳＭＣｓⅠ、Ⅲ型前胶原［Ｐｒｏα１（Ⅰ）、Ｐｒｏα１（Ⅲ）］基因ｍＲＮＡ的改变。发现Ｆｎ能明显地促使Ｐｒｏα１（Ⅰ）基因的转录，Ｆｎ的这种作用与剂量呈正比，α１（Ⅲ）基因的５．８ｋｂｍＲＮＡ在Ｆｎ４．０μｇ组比对照组增加明显，４．８ｋｂｍＲＮＡ和５．４ｋｂｍＲＮＡ在Ｆｎ４００μｇ组较Ｆｎ４０μｇ组增加，三种剂量下５．８ｋｂｍＲＮＡ量变化不大。Ｌｎ也能使ＶＳＭＣｓ的α１（Ⅰ）基因ｍＲＮＡ量增加，但与剂量无关，对α１（Ⅲ）基因ｍＲＮＡ量的改变在Ｌｎ２．４μｇ组与２４μｇ组差异无明显性，但比对照组增加，在Ｌｎ２４０μｇ组则４．８ｋｂｍＲＮＡ量增加，５．８ｋｂｍＲＮＡ量变化不明显。结果提示：Ｆｎ和Ｌｎ都能影响ＶＳＭＣｓＰｒｏα１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）基因的表达，它们的作用机制可能有联系，但不完全相同。     

硒对大鼠肝细胞和储脂细胞过氧化脂质及细胞外基质的影响

目的 观察微量元素硒（Ｓｅ）对大鼠肝细胞、储脂（Ｉｔｏ）细胞过氧化脂质和细胞外基质（ＥＣＭ）产生的影响。方法 采用原位灌注方法分离大鼠肝细胞和Ｉｔｏ细胞。结果 培养肝细胞、Ｉｔｏ细胞有一定 基础丙二醛（ＭＤＡ）产生和ＥＣＭ分泌。Ｓｅ可提高肝细胞、Ｉｔｏ细胞谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性,抑制基础＝ＥＧＥＹＲＮＰＶＳＧＣＸ （＾３Ｈ－Ｐｒｏ）掺篱、３型前胶原（ＰＣⅢ）分泌及Ｉｔｏ细胞透明质酸     

风湿性心脏病瓣膜胶原及转化生长因子β1改变的初步研究

为了解风湿性心脏病（风心病）病变二尖瓣和主动脉瓣组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）基因表达的改变。用斑点杂交法测定９例风心病人和３例尸检中除外心血管病与胶原系统疾病者的二尖瓣和主动脉瓣中Ⅰ型胶原α１链［α１（Ⅰ）］ｍＲＮＡ、Ⅲ型胶原α１链［α１（Ⅲ）］ｍＲＮＡ、ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的含量。结果显示：以对照组值为１．００，风心病人二尖瓣α１（Ⅰ）ｍＲＮＡ为２．３１±０．４８（Ｐ＜０．０１），α１（Ⅲ）ｍＲＮＡ为１．５９±０．１７（Ｐ＜０．０１），ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ为１．５７±０．２１（Ｐ＜０．０１）；主动脉瓣的结果分别为２．１０±０．４９（Ｐ＜０．０１），１．６６±０．２７（Ｐ＜０．０１），１．５２±０．１８（Ｐ＜０．０１）。结论：提示风心病病变瓣膜成纤维细胞胶原基因表达增强，使胶原合成增加，导致瓣膜纤维化。ＴＧＦ－β１基因表达增强的意义尚需进一步研究。     

DDPH对实验性腹主动脉狭窄高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及癌基因表达的影响

观察１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对实验性腹主动脉狭窄高血压大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及对原癌基因及抑癌基因的影响。方法氚－胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入，电镜，原位杂交及Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交。结果ＤＤＰＨ在降低血压同时，能减少血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的线粒体，粗面内质网及３Ｈ－ＴｄＲ掺入量（Ｐ＜０．０１），并能逆转ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｓｉｓ原癌基因ｍＲＮＡ表达增强（Ｐ＜０．０５～０．０１），Ｐ５３抑癌基因ｍＲＮＡ表达减弱（Ｐ＜０．０５）。结论ＤＤＰＨ能抑制实验性高血压大鼠的ＶＳＭＣ增殖，与癌基因调控的分子生物学机制有关。     

纤维粘连蛋白和层粘连蛋白对原代培养血管平滑肌细胞胶原基…

为了研究纤维粘连蛋白（Ｆｎ）和层粘连蛋白（Ｌｎ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胶原基因表达的影响。我们应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交的方式观察不同剂量的Ｆｎ和Ｌｎ处理的ＶＳＭＣｓＩ、Ⅲ型前胶原［Ｐｒｏα１（Ｉ）、Ｐｒｏα１（Ⅲ）］基因ｍＲＮＡ的改变。发现Ｆｎ能明显地促使Ｐｒｏα１（Ｉ）基因的转录，Ｆｎ的这种作用与剂量呈正比，α１（Ⅲ）基因的５．８ｋｂ ｍＲＮＡ在Ｆｎ４．０μｇ组比对照组增加明显，４．８ｋｂ     

转化生长因子β_1对纤维母细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶mRNA表达的影响

目的纤维母细胞是重要的胶原合成细胞，观察转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）对纤维母细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶ｍＲＮＡ表达的影响，以了解ＴＧＦ－β１在肝纤维化中的作用机制。方法首先对含有Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶ｃＤＮＡ片段的质粒进行扩增、提纯及酶切，然后用自由引物延伸法进行地戈辛标记，并对探针进行检测；其次对纤维母细胞进行培养，加用ＴＧＦ－β１孵育后收集细胞并提取细胞总ＲＮＡ，最后将ＲＮＡ点样于尼龙膜上，并与上述探针进行斑点杂交。结果杂交结果显示ＴＧＦ－β能明显促进纤维母细胞Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ的表达（Ｐ＜０．０５），也能促进其Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达（Ｐ＝０．０９）；而对其胶原酶ｍＲＮＡ的表达则起抑制作用（Ｐ＜０．０５）。结论ＴＧＦ－β可以从细胞及分子水平发挥其抗纤维化作用。     

右心室肥大时心肌间质胶原改建及其前胶原基因的表达

目的了解法乐四联症肥大右室心肌间质Ⅰ、Ⅲ型胶原的改建及与前胶原基因ｍＲＮＡ表达的关系,为防治心肌间质胶原改建提供新的依据和途径。方法用生化方法定量分析了２２例法乐四联症患者和８例非心血管及胶原系统疾病尸检者的右室心肌间质中的胶原含量和Ⅰ、Ⅲ型胶原比值,以及用斑点杂交法测定法乐四联症患者右室心肌间质Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因ｍＲＮＡ的表达。结果法乐四联症组心肌间质胶原含量为（１４８５±２４８）μｇ／ｍｇ总蛋白,较对照组（７５５±１８９）μｇ／ｍｇ总蛋白明显增多（Ｐ＜００５）;其Ⅰ／Ⅲ型胶原比值为５１０±１８４,较对照组２２７±０５８显著增高（Ｐ＜００５）;法乐四联症组右室心肌间质胶原含量与Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因表达强度的相关系数分别为０８０（Ｐ＜０００１）、－０２７７（Ｐ＞０１０）。右室心肌间质胶原Ⅰ／Ⅲ型比值与Ⅰ／Ⅲ型前胶原基因表达强度比值呈正相关,ｒ＝０４７（Ｐ＜００５）。结论提示法乐四联症肥大右室心肌间质存在以胶原含量增多和Ⅰ／Ⅲ型比值增高为特点的胶原改建,且主要与Ⅰ型前胶原基因ｍＲＮＡ转录水平上调有关。     

川芎嗪,丹参治疗大鼠肺纤维化对Ⅰ,Ⅲ型前胶原基因表达的影响

目的观察川芎嗪、丹参治疗大鼠肺纤维化对胶原基因表达的影响。方法大鼠随机分为正常对照、３个模型、川芎嗪、丹参和氢化可的松琥珀酸钠（氢可）组７个组。博莱霉素复制模型后１５～２８天给药,２９天取肺作ＨＥ染色及检测α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ的原位杂交,进行组织病理学检查及图像分析定量。结果模型组两种前胶原ｍＲＮＡ在第７天表达至高峰,２９天Ⅰ型仍保持高水平,Ⅲ型已恢复正常。经治疗川芎嗪组的α１（Ⅰ）前胶原ｍＲＮＡ降至正常（Ｐ＞０．０５）,丹参、氢可组仍较高（Ｐ＜０．０１）。各组的α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ均达正常（Ｐ＞０．０５）。结论川芎嗪通过抑制α１（Ⅰ）前胶原ｍＲＮＡ而起到抗肺纤维化作用,丹参和氢可的作用次之。     

肾上腺髓质素抑制内皮素的促血管平滑肌细胞增殖作用

目的观察肾上腺髓质素ａｄｒｅｎｏｍｏｄｕｌｉｎ，ＡＭ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）内丝裂素活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏ－ｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＡＰＫ）活性和ＶＳＭＣ增殖的作用。方法测定培养的ＶＳＭＣ内ＭＡＰＫ活性和３Ｈ－ＴｄＲ参入。结果１０－８ＥＴ－１可明显增加培养的ＶＳＭＣｓ内３Ｈ－ＴｄＲ参入（增加６７％，Ｐ＜０．０１）和ＡＰＫ激活（活性增高１１倍，Ｐ＜０．０１），而１０－１０～１０－７ｍｏｌ／Ｌ肾上腺髓质素（１３－５２）［ＡＭ（１３－５２）］与ＥＴ－１（１０－８ｍｏｌ／Ｌ）同时孵育，则可显著抑制ＥＴ－１的上述作用，与１０－８ｍｏｌ／ＬＥＴ－１单独应用时相比，３Ｈ－ＴｄＲ参入和ＭＡＰＫ活性分别减低２２％～５２％（Ｐ值均＜０．０１）和８．１～２９．４％（Ｐ值分别＜０．０５或０．０１）。而单用ＡＭ（１３－５２）对培养的ＶＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ参入和ＭＡＰＫ活性无明显影响（Ｐ值＞０．０５）。结论ＡＭ（１３－５２）具有抑制ＥＴ所致的ＭＡＰＫ激活和ＶＳＭＣ增殖的作用。ＡＭ与ＥＴ相互作用，参与内皮源的细胞旁分泌调节体系的构成，共同维持循环系统功能的稳态