维甲酸对人肝癌细胞转化生长因子β1基因及蛋白水平的影响

我们运用逆转录聚合酶链反应方法,以表达比较恒定的管家基因β-actin为内对照,半定量检测全反式维甲酸(ATRA)对肝癌细胞TGF β1 mRNA的变化,并用流式细胞术观察维甲酸(RA)对肝癌细胞TGF β1蛋白表达的影响,以探讨RA作用的机制.     

人转化生长因子-β1转基因表达对大肠癌细胞(HT-29)体内生物学行为的影响

为证实 TGF-β1转基因表达对 HT-29细胞株体内生物学行为的影响,将正反义 TGF-β1基因转染后克隆出的抗性细胞株分别接种棵鼠皮下。结果证实:TGF-β1基因表达对裸鼠移植瘤产生明显的抑制作用,导致出瘤时间延长,肿瘤增殖速度减慢。TGF-β1抑制大肠癌细胞发生发展作用机制可能与 TGF-β1基因表达产物启动细胞凋亡有关。     

TGFα—PE40诱导人肝癌SMMC—7721细胞的凋亡

目的　探讨基因重组转化生长因子α－绿脓杆菌外毒素融合蛋白（ＴＧＦα－ＰＥ４０,简称ＴＰ４０）体外诱导人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１凋亡的作用。方法以不同浓度的ＴＰ４０作用于体外培养的肝癌细胞,用流式细胞仪、电子显微镜和琼脂糖电泳的方法分析和检测细胞凋亡。结果在０．０１ｎｇ／ｍｌ浓度时,ＴＰ４０作用于培养肝癌细胞２０小时后,肿瘤细胞的凋亡率为５．６０％;０．０５ｎｇ／ｍｌ时,凋亡率为１７．２２％;０．１ｎｇ／ｍｌ时,凋亡率为 ３７．０４％。电镜显示出典型的细胞核固缩、碎裂征象,琼脂糖电泳呈特征性的“梯状”带。结论　低浓度ＴＰ４０可作为细胞凋亡诱导剂用于肝癌治疗。     

转化生长因子β1与胃癌细胞BAX表达的关系

目的研究转化生长因子(TGF)β1对胃癌细胞原癌蛋白BAX表达的影响.方法TGF-β1作用于人胃癌细胞系SGC-7901,48h后收集细胞爬片,用SABC免疫组化法检测BAX在胃癌细胞中的表达并作图像分析以获得量化指标.结果胃癌细胞中BAX的表达在TGF-β1实验组较对照组增加,定量光密度值为实验组120.771±0.306,对照组110.346±0.178,两者有显著差异(P＜0.05).结论原癌蛋白BAX在TGF-β1抑制胃癌细胞系SGC-7901生长的过程中起一定作用.     

转化生长因子β1及虫草多糖对大鼠肝纤维化形成的影响

目的探讨转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１，ＴＧＦβ１）及其受体１（ＴＧＦβＲ１）在免疫性大鼠肝纤维化形成中的作用及虫草多糖对其影响。方法以牛血清白蛋白（ｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ，ＢＳＡ）制备免疫性大鼠肝纤维化，攻击注射８周后给予虫草多糖（６０ｍｇ／ｋｇ）保护，继续攻击注射４次，用药至末次注射３周后（共３４天）；用免疫组化法观察ＴＧＦβ１、ＴＧＦβＲ１、肝星状细胞及Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化。结果攻击注射ＢＳＡ８月后，大鼠已形成典型的肝纤维化；纤维隔中ＴＧＦβ１及ＴＧＦβＲ１阳染增强，后者阳染强度与胶原增生程度有相关性；肝星状细胞显著增多，Ⅰ、Ⅲ型胶原及肝羟脯氨酸含量显著增加。虫草多糖组对应指标的变化均显著轻于对照组。结论ＴＧＦβ１与ＴＧＦβＲ１表达的增加是ＢＳＡ免疫性大鼠肝纤维化发生发展的病理基础之一；虫草多糖可显著改善免疫性大鼠肝纤维化的病理变化。     

肝症口服液含药血清对转化生长因子α诱导人肝癌细胞SMMC—7721增殖和凋亡的研究

目的：观察肝症口服液含药血清对转化生长因子（TGFα）诱导人肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法：采用血清药理学方法,以病理鼠血清作对照,应用MTT比色法观察中药鼠血清对TGFα诱导人肝癌细胞SMMC－7721增殖的抑制作用。用流式细胞术检测中药血清对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响。结果：中药血清对TGFα诱导的肝部细胞SMMC－7721增殖有明显的抑制作用,抑制效应呈时间依赖性。中药血清能促进肝癌细胞凋亡,使用胞滞留于G0／1期,降低S期细胞百分比和增殖指数。结论：肝症口服液含药血清能够抑制TGFα诱导的人肝癌细胞增殖,促进其凋亡。     

转化生长因子β1mRNA检测方法的建立

目的：研究血吸虫病肝纤维化发病机理、确定肝纤维化活动程度、判断治疗效果和预后等，建立定量ＰＣＲ法。方法：从引物合成构建质粒始，建立ＲＴ－ＰＣＲ加ｄｏｔｂｌｏｔ法测ＰＢＭＣ中ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ水平，以构建的ＴＧＦ－β１质粒，精确定量后作标准对照，以看家基因β－ａｃｔｉｎ同管进行ＲＴ－ＰＣＲ为内对照，ｄｏｔｂｌｏｔ结果以多功能凝胶成像仪ＩＳ－１０００定量分析，检测梯度稀释的质粒和１１份不同血标本的复管。结果：８个梯度稀释的ＴＧＦ－β１质粒ＰＣＲ产物定量结果与原浓度对数成正比，１１份标本两次结果为１．７１±０．９０和１．５４±０．８８，显示较好的重复性和稳定性。结论：该方法可用于定量分析ＰＢＭＣ中ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ含量。     

肝癌组织中转化生长因子β2表达的免疫组化研究

目的探讨肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）组织中转化生长因子β２（ＴＧＦβ２）的表达及其临床病理学意义。方法ＡＢＣ免疫组化方法检测５２例我所１９９２～１９９５年手术切除的小肝癌中ＴＧＦβ２的免疫反应性,并根据术后２年内肝癌有无复发,将５２例小肝癌分为复发组和无复发组。分析其临床病理学意义。结果有门脉癌栓者,术后２年复发率为８２４％（１４／１７）,无门脉癌栓者,术后２年复发率为１７１％（６／３５）,两者统计学上有显著性差异（Ｐ＜００５）。复发组ＴＧＦβ２强阳性率４００％（８／２０）,无复发组ＴＧＦβ２强阳性率１２５％（４／３２）,统计学上两组之间差异有显著性（Ｐ＜００５）。有门脉癌栓者,ＴＧＦβ２强阳性率４７１％（８／１７）,无门脉癌栓者,ＴＧＦβ２强阳性率１１４％（４／３５）,两者之间统计学上有显著性差异。结论ＴＧＦβ２的表达异常与肝癌复发、门脉癌栓正相关     

转化生长因子β1对大鼠肝星状细胞表达β-连环蛋白的影响

目的研究转化生长因子β1（TGF—β1）对大鼠肝星状细胞（HSC）表达β-连环蛋白（β-catenin）的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）比较经不同浓度的TGF-β1刺激不同时间后HSC表达β-catenin、smad3和α-SMA mRNA的变化,并比较三者之间的关系。结果1ng／ml TGF—β1刺激2h后,HSC表达β—catenin mRNA、smad3 mRNA和α—SMA mRNA量最大,β—catenin mRNA表达与两者均具有明显的相关关系（r=0．947,P〈0．01;r=0．950,P〈0．01）。结论β—catenin在TGF—β1活化HSC的过程中发挥重要作用。     

转化生长因子β_1对胃癌细胞表皮生长因子受体表达的影响和定量研究

用转化生长因子β_1(transforming growth factor β_1,TGFβ_1)作用于入胃腺癌细胞(SGC-7901),48小时后收集细胞爬片。用抗表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的单抗和免疫组化SABC法及图像分析,发现TGFβ_1作用的胃癌细胞EGFR表达量(107.943±0.202)低于对照细胞(114.298±0.475),差异显著(P<0.05),研究结果提示,TGFβ_1对胃癌细胞增殖的抑制作用可能与其影响EGFR表达数量有关。     

缺氧对大鼠肝细胞转化生长因子β1表达的影响

目的:探讨缺氧对转化生长因子β1(transform-inggrowthfactor-β1,TGF-β1)在肝细胞表达的影响.方法:选择SD大鼠20只,采用气管阻塞的方法建立轻、中、重度的缺氧模型,15min和60min采集肝脏标本,用免疫组化技术SABC法检测肝细胞转化生长因子β1表达的变化.结果:在正常肝脏中TGF-β1极少表达或无表达(15和60min分别为3.6±1.9,3.6±1.9),随着缺氧时间的延长与缺氧程度的加重,肝细胞转化生长因子β1表达逐渐增加(轻度缺氧15和60min分别为8.5±2.0,15.2±3.1;中度缺氧15和60min分别为18.4±3.5,63.7±3.8;重度缺氧15和60min分别为68.9±3.2,86.7±3.6).结论:大鼠缺氧条件下肝脏TGF-β1表达增加可促进细胞外基质的合成,有利于肝细胞的再生与修复.     

类风湿关节炎滑膜组织转化生长因子β1 转化生长因子β受体Ⅰ及转化生长因子β1 mRNA的表达

类风湿关节炎 (ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ,ＲＡ)的基本病理改变为关节滑膜慢性炎症形成侵袭性血管翳 ,破坏软骨、骨与周围组织。在参与免疫炎症反应的各种因子中 ,转化生长因子 (ＴＧＦ) β1为一种重要的有双向作用的细胞因子 ,可促进炎症细胞活化、浸润 ,又可促进血管增生、组织修复。本研究应用免疫组织化学ＳＡＢＣ法与地高辛标记原位杂交法对ＲＡ滑膜组织中ＴＧＦ β1、转化生长因子 β受体Ⅰ (ＴＧＦ βＲⅠ )、ＴＧＦ β1ｍＲＮＡ的表达分布情况进行分析 ,以探讨它们与ＲＡ发病机制和治疗的关系。1　材料与方法1 1　标…     

转化生长因子-β1和AFP联检对肝癌诊断价值的研究

目的分析转化生长因子（TGF）-β1和甲胎蛋白（AFP）异常对肝癌（HCC）的诊断和鉴别价值。方法收集慢性肝病患者外周血，以酶联免疫吸附试验法（ELISA）测定慢性肝病、非肝肿瘤患者和正常对照者的血TGF—β1和AFP水平，分析两者在HCC早期诊断和鉴别方面的临床价值。结果HCC患者血TGF—β1呈异常表达水平，显著高于正常组、肝硬化、慢性肝炎和非肝肿瘤组。如以血TGF—β1浓度〉1．2μg／L、AFP浓度〉50μg／L为界，肝癌诊断的灵敏度分别为88．4％和63．7％，特异性分别为89．2％和75．7％。TGF—β1与血AFP浓度、肿块大小均无相关，两者联合检测可提高HCC诊断阳性率。结论血TGF—β1和AFP分析有助于肝癌的诊断和鉴别。     

转化生长因子β1对Ito细胞作用的分子机制

肝纤维化是所有慢性肝病向肝硬变发展的必经病理过程,其特点是细胞外基质（ＥＣＭ）的异常增多、沉积．ＥＣＭ的主要成分有胶原和弹性蛋白等纤维性蛋白质、非胶原糖蛋白及蛋白多糖．特别以Ⅰ,Ⅲ型胶原、糖蛋白及蛋白多糖增多明显．现已证明,Ｉｔｏ细胞是细胞外基质的主要细胞学来源［１］．因此,Ｉｔｏ细胞已成为肝纤维化研究的热点．许多因素参与Ｉｔｏ细胞的调控,其中转化生长因子β（主要是ＴＧＦβ１）是主要的调控作用因素之一［２］．Ｉｔｏ细胞又名贮脂细胞（ｆａｔｓｔｏｒｉｎｇｃｅｌｌ）、肝脏星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃｓ…     

胰岛素对血管平滑肌细胞转化生长因子β1及其受体表达的影响

流行病学调查的资料显示 ,5 0 %以上的 2型糖尿病患者并发高血压 ,这将加重患者的大血管粥样硬化的形成。近年来研究发现 :高血糖是血管损伤的重要因素 ,却不是此并发症的唯一因素〔1〕;胰岛素抵抗所导致的高胰岛素血症是血管硬化的独立高危因子 ,胰岛素能直接加强血管平滑肌细胞(ＶＳＭＣ)增生 ,参与血管硬化的病理过程。为此 ,本研究观察胰岛素对血管平滑肌细胞ＴＧＦβ1和Ⅰ、Ⅱ型ＴＧＦβ受体表达的影响。一、材料和方法1.材料 :实验动物 :ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠 (购自上海第二医科大学附属瑞金医院上海市高血压研究所 ) ,雄性 ,7～ 10周龄…     

类风湿关节炎中转化生长因子β1和细胞间粘附分子的变化

目的：了解类风湿关节炎（ＲＡ）血清、滑液和滑膜组织中转化生长因β１（ＴＧＦβ１）、细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）及细胞间粘附分子３（ＩＣＡＭ３）的变化。方法：采用ＥＬＩＳＡ及ＡＢＣ免疫组化方法检测ＲＡ患者血清、滑液和滑膜中ＴＧＦβ１、ＩＣＡＭ１和ＩＣＡＭ３的浓度和阳性程度。结果：ＲＡ血清中ＴＧＦβ１含量较低，而ＩＣＡＭ１含量明显升高，ＩＣＡＭ３含量正常，滑液中ＩＣＡＭ３含量低于血清含量。ＲＡ血清中ＴＧＦβ１含量与ＩＣＡＭ１含量呈中度负相关，与ＩＣＡＭ３含量无显著相关。在ＲＡ滑膜中巨噬细胞、滑膜衬里细胞和成纤维细胞ＴＧＦβ１染色阳性，巨噬细胞、滑膜衬里细胞、成纤维细胞和血管内皮细胞ＩＣＡＭ１染色阳性。结论：ＴＧＦβ１和ＩＣＡＭ１参与了ＲＡ的发生和发展过程，在ＲＡ慢性炎症中，ＩＣＡＭ１对炎细胞转移并聚集于滑膜可能有重要作用，ＲＡ外周血ＴＧＦβ１浓度减低伴随ＩＣＡＭ１浓度的增加。     

不同浓度葡萄糖、胰岛素对HK-2细胞转化生长因子β1表达的影响

用不同浓度葡萄糖和胰岛素干预人近端肾小管上皮细胞（HK-2），ELISA法测培养液上清中TGF-β1浓度，RT—PCR检测HK-2细胞中TGF—β1mRNA表达水平。结果显示高浓度葡萄糖和胰岛素通过不同途径上调HK-2细胞TGF—β1的表达。     

转化生长因子β1异常表达与肝癌早期诊断

转化生长因子 (TGF) β是一类多肽二聚体 ,具有调节细胞生长、分化及功能的细胞因子。人类TGF β家族有 3种异构体 (TGF β1、2、3 ) [1 ] ,它们的生物学特性非常相近 ,分别由特定的基因编码 :即内皮细胞及结缔组织表达TGF β1 ,上皮细胞及神经元细胞表达TGF β2 ,间质性细胞表达TGF β3 。肝细胞增殖有赖于正向和负向调节因子间的动态平衡 ,在肝细胞增殖调节方面 ,TGF β1 (2 5KD)具有负向调节作用。TGF β信号通路紊乱 ,可使肝细胞逃避TGF β1 介导的生长抑制效应而致肝癌 (HCC)发生。本文着重综述TGF β1 信号通路异常在…     

转化生长因子-β1对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡的影响。方法:采用大鼠颈部心脏移植模型,随机分为3组:对照组、移植组、TGF-β1组,分别于术后第1、3、5、7天各取4只移植心脏,原位末端标记(TUNEL)法染色检测心肌细胞凋亡,以心肌细胞凋亡阳性细胞数占总心肌细胞数的百分比作为心肌细胞凋亡指数(AI)。用免疫组化方法观察Bcl-2、Bax的表达情况。结果:移植组心肌细胞于术后第1天即出现凋亡,第3天明显增加,第7天达高峰。TGF-β1组各时间点心肌细胞AI明显小于对应的移植组(均P<0.01)。与移植组相比,TGF-β1组心肌细胞Bax表达明显降低(P<0.01)。结论:TGF-β1对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡有显著抑制作用,可能与其下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值有关。     

转化生长因子-β1对原发性肝癌诊断与鉴别的临床价值

目的　分析转化生长因子 β1(TGF β1)在原发性肝癌 (PLC)诊断和判断预后方面的价值。 方法　以酶联免疫吸附试验法 (ELISA)测定肝癌、肝硬化 ,慢性肝炎、急性肝炎、继发性肝癌 (SHC)、消化道其它肿瘤和正常对照者的血浆TGF β1水平 ,并分析在PLC诊断方面的临床意义。结果　PLC组血浆TGF β1水平 ( 2 2 1± 1 19μg/L)均显著高于 (P <0 0 5 )正常对照组 ( 0 67± 0 11μg/L)、肝硬化 ( 0 95± 0 2 3 μg/L)、慢性肝炎 ( 0 98± 0 2 0 μg/L)、急性肝炎 ( 0 72± 0 3 7μg/L)、SHC( 0 89± 0 19μg/L)和消化道其它肿瘤 ( 0 82±0 0 9μg/L)。如以血浆TGF β1水平 1 2 μg/L为界 ,其诊断PLC的灵敏性和特异性分别为 89 5 %和 94 0 %。并且与血清AFP浓度、肿块大小均无相关性 ,与AFP联合检测可提高PLC诊断阳性率。结论　资料提示TGF β1过度表达与肝癌形成有关 ,血浆TGF β1分析有助于肝癌的诊断和转移监测