骨髓间充质干细胞在肝衰竭中的应用

背景:近年来诸多研究已经报道了骨髓间充质干细胞在肝脏病理条件下能够分化为具部分功能的类肝细胞且可修复受损肝脏.目的:总结和分析骨髓间充质干细胞的生物学特性及其在肝衰竭中的研究与应用.方法:应用计算机检索 CNKI 和 PubMed 数据库中 1997-01/2009-12 关于"骨髓间充质干细胞在肝衰竭中的研究与应用"的文章,以"骨髓间充质干细胞,肝衰竭"或"肝干细胞,肝脏疾病"为检索词进行检索.选择文章内容与骨髓间充质干细胞治疗肝衰竭相关,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章.初检得到中英文共 371 篇文献,根据纳入标准选择 31 篇文章进行综述.结果与结论:骨髓间充质干细胞是成体干细胞的一种,其具有高度自我更新能力和多向分化潜能,用于肝衰竭治疗的作用机理主要是转分化和细胞融合.随着研究不断得深入,骨髓间充质干细胞移植已逐渐开展应用至肝衰竭治疗中,但其研究有待进一步完善.     

自体骨髓干细胞治疗肝硬化基础研究与临床应用现状

背景:活体肝移植仍面临很多问题:如供体的匮乏、移植后的免疫排异反应及其高额的费用等,因此使其在临床上的开展受到限制.目的:说明自体骨髓干细胞移植可以分化成熟肝细胞而替代受损的肝脏组织发挥功能,从而改善患者症状,提高患者生活质量.方法:利用计算机在PubMed、CNKI、万方数据库和维普数据库中检索2000-01/2010-12关于自体骨髓干细胞移植相关文章,在标题和摘要中用"骨髓干细胞;自体骨髓干细胞移植;肝硬化"或"Bone marrow stem cell,autologous bone marrow stem cell,hepatic cirrhosis"为检索词进行检索.选择与骨髓干细胞移植相关的文章内容,同一领域文献选择近期发表或发表在权威杂志文章.初检得到235篇文献,根据纳入标准选择20篇文章进行综述.结果与结论:通过对自体骨髓干细胞移植从基础研究及临床研究方面的最新进展的了解,说明自体骨髓干细胞移植在对肝硬化的治疗方面前景广阔.     

肝细胞移植免疫排斥反应的研究与应用

学术背景:肝细胞移植有望成为治疗急慢性肝衰竭及肝脏相关遗传性疾病的一种新方法。近年来肝细胞移植研究取得了重大进展,但免疫排斥反应仍是制约该技术进一步发展的主要原因之一。目的:综合分析肝细胞移植后免疫排斥反应的研究进展。检索策略:由两位作者应用计算机检索中国知网(www.cnki.net)及Medline(www.pumed.com)1998-01/2007-06有关肝细胞移植免疫排斥反应的文献,中文检索词"肝细胞,移植,排斥";英文检索词"hepatocyte,transplan tation,rejection"。初检得到281篇文献,包括中文109篇,英文172篇。排除研究目的与肝细胞移植免疫排斥反应无关者72篇,内容重复性的文献41篇,保留168篇中英文文献进一步分析。其中动物实验和细胞学实验103篇,综述类文献28篇,临床研究37篇。按纳入标准筛选,共37篇文献满足全部纳入标准。凡同种或异种肝细胞培养、移植及生物人工肝研究中与免疫排斥反应相关的文献均纳入文献综述范围,与此无关者均排除。不采用未发表的文献。文献评价:所有文献均为随机对照试验。资料综合:肝细胞移植免疫排斥反应是影响肝细胞移植效果的重要因素。随着细胞生物学、移植免疫学的发展,肝细胞移植免疫排斥反应的机制将会进一步得到阐明。各种抑制免疫排斥的手段,尤其基因工程技术、纳米材料的应用有可能在肝细胞移植后抗原的识别、活化和发生效应的环节中以及抑制移植细胞的凋亡方面起到一定的作用。结论:肝细胞移植目前面临的主要问题是移植后的免疫排斥反应,其具体机制仍有待于进一步阐明。现阶段采取的抑制肝细胞移植后免疫排斥的方法均有一定的局限性,更有效的方法有待于继续探索。     

肝细胞移植的临床应用

肝细胞移植被认为是一种可能替代整肝移植治疗急慢性肝衰竭和遗传性代谢性肝病的可行方法,也可作为肝移植前后肝功能支持的有效手段,具有操作简便、创伤小的优点.近年来,肝细胞移植开始应用于临床,在治疗急慢性肝衰竭和代谢性肝病方面取得一定的疗效.文章回顾了肝细胞移植临床应用情况,并探讨肝细胞移植在临床应用中的价值及一些亟待解决的难题.     

肝干细胞向成熟肝细胞诱导分化的体内外特点

学术背景:肝干细胞能够被诱导分化为肝细胞,移植肝干细胞可以修复受损肝组织,代偿部分肝功能.目的:介绍体内外诱导肝干细胞分化为成熟肝细胞的研究现状.检索策略:应用计算机检索Pubmed 2000-01/2007-10期间相关文献,检索词"liver stem cell,differentiation",并限定文献语种为"English",同时计算机检索万方数据库2000-01/2007-10期间相关文献,检索词"肝干细胞,分化",并限定文献语种为中文.纳入标准:文章内容与肝干细胞诱导分化相关.排除标准:重复研究或Meta分析类文章.文献评价:就检索到的100余篇文献进行筛选,选择以肝干细胞诱导分化为主要研究内容的文献38篇,以近年发表在较权威杂志者优先,其中关于细胞分离培养及增殖的5篇,体外诱导分化的22篇,体内诱导分化的11篇.从筛选到的30余篇文献中进一步对关于向成熟肝细胞分化的文献进行归纳及整理,选择其中28篇作为参考文献进行综述.资料综合:肝脏干细胞根据起源不同,可分为肝源性肝干细胞和非肝源性肝干细胞,前者包括卵圆细胞、分化的肝细胞、胎肝细胞和胆管上皮细胞,后者包括胚胎干细胞、骨髓造血干细胞、胰腺上皮祖细胞及肠上皮细胞等,均具有多向性演变的特性.肝干细胞的诱导分化:①体外诱导分化:可以是不同细胞因子或化学剂或病理微环境为主的细胞诱导培养体系,能使肝干细胞定向转化为肝细胞.②体内诱导分化:通过不同途径将肝干细胞植入体内,能够改善肝功能和受损肝脏的组织结构.结论:肝干细胞研究仍处于理论和实验阶段,应进一步加强对干细胞诱导分化机制的研究,防止向肿瘤细胞分化,促进其分化为成熟肝细胞,推进肝干细胞的临床应用.     

间充质干细胞向肝样细胞的诱导分化

背景:目前很多体内外实验都已表明间充质干细胞具有向肝样细胞或肝细胞分化的能力,这使间充质干细胞治疗肝脏疾病成为可能. 目的:总结和分析间充质干细胞向肝样细胞诱导分化的方法、机制以及存在的问题.方法:应用计算机检索PubMed数据库(2000-01/2009-12),以"mesenchymal stem cells,hepatocyte, differentiation"为检索词;应用计算机检索维普数据库(2000-01/2009-12),以"间充质干细胞,肝细胞,诱导分化"为检索词.选择文章内容与间充质干细胞诱导分化为肝细胞相关,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章. 结果与结论:共收集146篇关于间充质干细胞向肝样细胞诱导分化的文章,纳入 31篇符合标准的文献.间充质干细胞可在体外及肝脏病理条件下分化为肝细胞,其作用机制主要是间充质干细胞在合适的细胞因子组合诱导下,细胞因子通过特定的细胞信号传导途径,作用于细胞核,启动或关闭相应的基因,表达特异的蛋白质,使间充质干细胞向肝细胞分化.随着研究不断得深入,这使间充质干细胞治疗肝脏疾病成为可能,但其研究有待进一步完善.     

骨髓间充质干细胞向肝细胞的横向分化

目的:综合分析骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的研究现状及应用前景。资料来源:应用计算机检索Pubmed2000-01/2005-04有关干细胞及其向肝细胞横向分化方面的文献,检索词“stemcell,hepatocyte,transdifferentiation”,并限定文章种类为English。资料选择:对检索到的有关干细胞及其向肝细胞横向分化方面的文献进行整理,选取针对性强的文章。同一领域的文献则选择近期发表或权威杂志的文章。资料提炼:共检索到45篇相关文献,其中38篇符合要求,7篇为重复同一研究而排除。资料综合:利用骨髓间充质干细胞在肝损伤等病理状态下具有分化为肝细胞的特性,实现肝组织重建,纠正肝细胞代谢和合成功能障碍,为治疗肝炎、肝硬化、肝癌及肝代谢性疾病提供了新的策略。干细胞在肝病治疗中的应用无疑是对传统治疗方式的挑战。结论:多数学者的研究表明,干细胞具有分化为肝细胞及胆管细胞样细胞的潜能,但也有少数学者持否定意见。目前对于移植后干细胞是产生细胞融合还是分化作用尚存在争议。     

细胞因子修饰的间充质干细胞

背景:将细胞治疗与基因治疗相结合,通过不同的细胞因子对间充质干细胞的修饰,不但可以赋予其新的能力,更能增强其本身的功能。但是在西北高原的低氧环境下,间充质干细胞的功能发挥就会受到一定的限制。目的:文章综述了间充质干细胞近年来的研究进展,在与细胞因子联合应用后功能上的扩展,并寻找新的手段使其在高原低氧环境下充分发挥功能。方法:应用计算机检索CNKI数据库和PUBMED数据库中关于间充质干细胞的文章,以"间充质干细胞;低氧诱导因子;肝细胞生长因子"或"mesenchymal stem cells;hypoxia inducible factor;hepatocyte growth factor"为检索词进行检索。检索文献总量为71篇,选择文章内容与间充质干细胞及其临床应用有关方面的文章,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。结果与结论:最终纳入35篇符合标准的文献。通过应用细胞因子的转染,将细胞因子的功能与间充质干细胞相结合,使得间充质干细胞的功能更全面,在高原低氧的恶劣环境下,依然能够有效的发挥临床效用,满足其临床上的治疗需求。     

生物人工肝的研究与进展

目的:分析近些年来生物人工肝相关的研究,对生物人工肝的发展作一总结.资料来源:以bioartificial liver, liver cell, hepatocyte culture, bioreactor为检索词,检索Ovid、SpringerLink数据库(1990-09/2008-09);以生物人工肝、肝细胞、细胞培养、生物反应器为检索词,检索维普数据库、中国期刊网及万方数据库(1990-09/2008-09).文献检索语种限制为英文和中文.资料选择:纳入有关生物人工肝肝细胞、反应器及辅助装置的研究,排除生物人工肝免疫和动物传染的研究.结局评价指标:①生物人工肝肝细胞的来源、数量及培养方式.②生物反应器的类型及主要结构膜的性质及类别.③生物人工肝供氧及温控装置的构成.结果:计算机初检得到3 898篇文献,根据纳入排除标准,对29篇进行分析.生物人工肝是在体外生物反应器中培养肝细胞,当患者的血液流经生物反应器时,通过半透膜或直接接触的方式与培养的肝细胞进行物质交换,使其中的肝细胞发挥解毒、合成、生物转化等功能,以达到支持和治疗目的.它不但具有解毒功能,而且还能参与3大营养物质代谢,分泌促进肝细胞生长的物质等,可有效替代肝脏的解毒功能和合成功能,并可较好地预防肝性脑病、肝昏迷和脑水肿,临床上可作为肝衰竭患者肝移植前的过渡辅助措施.结论:生物人工肝研究虽然取得了重大进展,但仍然面临寻找理想肝细胞来源,长期维持肝细胞的活性和功能,进一步优化反应器设计等问题.     

骨髓间充质干细胞向肝细胞的横向分化

目的：综合分析骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的研究现状及应用前景。资料来源：应用计算机检索Pubmed 2000—01／2005—04有关干细胞及其向肝细胞横向分化方面的文献，检索词“stem cell，hepatoeyte．transdifferentiation”，并限定文章种类为English。资料选择：对检索到的有关干细胞及其向肝细胞横向分化方面的文献进行整理，选取针对性强的文章。同一领域的文献则选择近期发表或权威杂志的文章。资料提炼：共检索到45篇相关文献，其中38篇符合要求，7篇为重复同一研究而排除。资料综合：利用骨髓间充质干细胞在肝损伤等病理状态下具有分化为肝细胞的特性，实现肝组织重建，纠正肝细胞代谢和合成功能障碍，为治疗肝炎、肝硬化、肝癌及肝代谢性疾病提供了新的策略。干细胞在肝病治疗中的应用无疑是对传统治疗方式的挑战。结论：多数学者的研究表明，干细胞具有分化为肝细胞及胆管细胞样细胞的潜能，但也有少数学者持否定意见。目前对于移植后干细胞是产生细胞融合还是分化作用尚存在争议。     

A study of hepatocellular transplantation]

Clinical liver transplantation has been done for patients with irreversible hepatic diseases, but the shortage of donor livers from heart beating cadavers has become very serious. Hepatocyte transplantation requires no vascular anastomosis and donor hepatocytes are easy to obtain from living donors and easy to preserve for a long time. In the animal experiments, transplanted hepatocytes survived in the spleen for long periods of time, and cytochemical investigation revealed differentiated liver functions, such as gluconeogenesis, albumin synthesis, bilirubin conjugation. Intrasplenic transplantation of hepatocytes relieved congenital disorders of liver enzymes in rats. Moreover, transplanted hepatocytes re-composed normal cord structures with hepatic sinusoids in the spleen of rats. Hepatocytes could also be isolated from human cirrhotic livers by a multi-perfusion method, and the viability was almost 80%. After the success in transplantation of human hepatocytes into the spleen of athymic mice, 6 patients have undergone clinical trial of intrasplenic hepatocyte transplantation without any complications. In the future, the progress of gene manipulation techniques may make possible rapid growth of transplanted hepatocytes. Intrasplenic transplantation of isolated hepatocytes provides an in-vivo experimental model to study cellular growth and functions in detail.     

Transplantation of isolated hepatocytes in hepatic failure

The authors review achievements in the field of prophylaxis and treatment of acute liver failure with donor's allo- and xenogenic isolated hepatocytes. Present-day clinical and experimental data on transplantation of hepatocytes evidence for their ability to produce a detoxicating action, to restore the lost functions of the affected part of the liver, to prevent death of hepatocytes caused by ischemia, to activate regeneration. This method is easy to conduct and obtained cells from one donor can by used for many recepients. Problems in transplantation of isolated hepatocytes are shown. Factors stimulating hepatocyte regeneration are mentioned with a special focus on hepatocyte growth factor having the most potent mitogenic effect.     

肝细胞微囊化技术理论进展与临床应用

肝细胞分离技术日趋成熟,肝细胞移植成为较热门的研究领域,但供体短缺和免疫排斥反应,制约了其广泛应用.肝细胞微囊化有助于为肝细胞移植的推广应用提供大量的具有高度活性和良好功能的肝细胞.文章就肝细胞微囊化技术及其应用进展进行综述,为肝细胞大规模、高活性体外培养及长期冻存提供了新的途径.     

Spontaneous hepatic repopulation in transgenic mice expressing mutant human α1-antitrypsin by wild-type donor hepatocytes

α1-Antitrypsin deficiency is an inherited condition that causes liver disease and emphysema. The normal function of this protein, which is synthesized by the liver, is to inhibit neutrophil elastase, a protease that degrades connective tissue of the lung. In the classical form of the disease, inefficient secretion of a mutant α1-antitrypsin protein (AAT-Z) results in its accumulation within hepatocytes and reduced protease inhibitor activity, resulting in liver injury and pulmonary emphysema. Because mutant protein accumulation increases hepatocyte cell stress, we investigated whether transplanted hepatocytes expressing wild-type AAT might have a competitive advantage relative to AAT-Z-expressing hepatocytes, using transgenic mice expressing human AAT-Z. Wild-type donor hepatocytes replaced 20%-98% of mutant host hepatocytes, and repopulation was accelerated by injection of an adenovector expressing hepatocyte growth factor. Spontaneous hepatic repopulation with engrafted hepatocytes occurred in the AAT-Z-expressing mice even in the absence of severe liver injury. Donor cells replaced both globule-containing and globule-devoid cells, indicating that both types of host hepatocytes display impaired proliferation relative to wild-type hepatocytes. These results suggest that wild-type hepatocyte transplantation may be therapeutic for AAT-Z liver disease and may provide an alternative to protein replacement for treating emphysema in AAT-ZZ individuals.     

肝细胞移植治疗慢性乙型重型肝炎：2年随访

背景:近年来发展的肝细胞移植作为肝衰竭及遗传性代谢性肝脏疾病的一种治疗措施日益受到重视。目的:随访2年评估1例人肝细胞移植治疗慢性乙型重型肝炎患者的疗效。设计:病例报告,随访2年。单位:解放军第三○二医院感染九科及生物工程研究室。对象:纳入解放军第三○二医院感染住院的慢性重型肝炎患者1例。经实验室检查等确诊。用于移植的肝脏细胞由1名24岁供体提供,该供体生前签署过肝脏捐赠协议,且肝脏健康。方法:于2004-12在解放军第三○二医院放射科完成肝细胞体内移植。分离肝脏,获得人原代肝细胞并冷冻保存,复苏后经股动脉插管移植到受体脾脏,观察治疗前后患者临床症状及血液生化指标改变及脾脏核磁共振信号的改变。患者术后每半年复诊检测1次肝功能、凝血功能、B超及胃镜检查、MRI,随访2年。主要观察指标:患者肝功能、凝血功能、影像学指标、免疫学指标、并发症和排斥反应发生情况。结果:①人肝脏可获取(1～2)×1010肝细胞,复苏后肝细胞存活率在60%以上,移植的肝细胞数为2×109个。②移植后2个月,患者临床症状明显改善,血胆红素、天门冬氨酸氨基转移酶明显降低,凝血酶原活动度明显升高。移植20个月后MRI提示脾脏内可见肝细胞信号。术后2年患者血总胆红素20μmol/L,直接胆红素7μmol/L,丙氨酸氨基转移酶416.75nkat/L,天门冬氨酸氨基转移酶533.44nkat/L,白蛋白37g/L,凝血酶原活动度90%,较术前明显改善(474.5,340.3μmol/L,400.08,1200.24nkat/L,38g/L,25%)。患者可从事正常一般家务活动及轻体力工作。未出现腹水及肝功能衰竭等并发症,未出现移植排斥反应。患者多次复查B超及胃镜均提示肝硬化及食道静脉曲张有进一步加重的趋势,曾2次因食道静脉曲张破裂出血而住院治疗。结论:肝细胞体内移植可改善肝功能,且未见移植排斥反应,但不能解决门静脉高压。     

Hepatocyte culture systems for artificial liver support: implications for critical care medicine (bioartificial liver support).

OBJECTIVE: The primary purpose of this review article is to familiarize critical care practitioners with newly developing techniques of hybrid artificial liver support. Implantable and extracorporeal hepatocyte culture systems are emphasized based on their current experimental and clinical status. DATA SOURCES: Data used to prepare this document were obtained from the authors' personal files, as well as the computerized MEDLINE database. Medical headings used include: liver, artificial organs, cell culture, growth hormones, extracellular matrix, and transplantation. Only articles published in English have been cited. STUDY SELECTION: All studies are discussed in which hepatocyte culture systems have been used to support human patients with liver failure. All studies reported the patient's condition before therapy, duration of therapy, and outcome after therapy in order to be included in this review. Since the number of clinical trials is small at this time, animal studies were used to demonstrate application of other systems in the treatment of experimentally induced liver failure. Similar selection criteria were used to select animal studies for review. All initially identified human studies met these selection criteria. DATA EXTRACTION: Independent extraction by multiple observers. DATA SYNTHESIS: Liver failure, resulting from infection, drugs, or as a part of the multiple organ failure syndrome, remains a major cause of morbidity, mortality, and resource allocation. Current therapy is limited to supportive care, along with liver transplantation. Because of these therapeutic limitations, hybrid artificial liver systems have been proposed for temporary and long-term hepatic support. Several animal studies and a small number of preliminary human studies indicate that hepatocyte culture systems are capable of supporting nearly all essential hepatic functions and may supply biologically active substances that promote regeneration and repair of the damaged liver being supported. Hybrid systems may be constructed from materials that serve as immunoprotective barriers against host defenses. CONCLUSIONS: During the past decade, important progress has been made with hybrid artificial liver support systems. Cell culture technology has progressed sufficiently so that an artificial liver, composed of metabolically active hepatocytes, may be a potential reality in the foreseeable future. Both implantable and extracorporeal artificial liver support systems have been developed to provide metabolic support during acute liver failure, or to serve as a bridge to solid organ transplantation. Implantable hepatocyte systems, however, require a prolonged period for intraperitoneal engraftment and vascularization, not typically available to patients with acute liver failure. For this reason, extracorporeal hybrid designs offer the greatest hope for on-line treatment of acute liver failure. Such systems are entering the final stages of animal testing.     

不同纲(罗非鱼/大鼠)肝细胞移植中的细胞免疫反应

背景:由于人肝细胞来源困难,许多学者尝试异种肝细胞移植的研究.文献报道较多的是猪肝细胞,受体多为大鼠、豚鼠等,这些均属于哺乳纲内不同目或科动物之间的移植.不同纲动物间的肝细胞移植报道较少.目的:将罗非鱼肝细胞植入大鼠脾内,探讨不同纲动物间肝细胞移植的细胞免疫排斥反应机制.方法:以胶原酶冷消化法分离罗非鱼肝细胞,以生理盐水重悬,细胞浓度调整为2×1010 L-1.将36只SD大鼠按随机数字表法分为移植组和对照组.对照组脾内注射生理盐水,实验组脾内移植罗非鱼肝细胞.在移植后4,8,24 h,3,5d,各组分别处死2只大鼠,以苏木精-伊红染色法观察移植物组织学变化,免疫组织化学SABC法检测移植物周围大鼠CD4,CD8阳性细胞.结果与结论:移植后数小时即发生排斥反应,8 h后受体脾内很难见到正常肝细胞.移植后4 h移植物周围可见CD4和CD8阳性细胞聚集.提示罗非鱼肝细胞移植到大鼠脾内数小时诱发了排斥反应,细胞免疫参与其中,自然杀伤细胞可能具有重要作用.     

肝细胞移植治疗肝衰竭的研究现状

细胞治疗是指将干细胞或由其分化产生的功能细胞植入病变部位代偿病变细胞丧失的功能，或将细胞经体外遗传操作后用于疾病治疗的方法。经过30多年的研究，肝细胞移植技术获得重大进展．可以起到原位肝移植同样的整体器官替代效果。肝细胞移植作为治疗暴发性肝衰竭的一种有效的方法在各种动物模型及临床应用中得到广泛证实。此外，应用治疗性肝干细胞可克服肝细胞的来源和数量、免疫排斥等问题，在治疗急慢性肝病有非常广阔的前景。由于肝干细胞研究还有许多问题，到目前为止。动物肝干细胞移植的研究资料较多，而应用该技术治疗人体肝病的病例数报道较少，对于人的肝干细胞研究尚属初步阶段，研究方法有待进一步发展和完善。     

人骨髓干细胞异体内诱导分化为肝细胞的实验

背景:如何获取来源丰富的高质量人源性肝细胞是生物人工肝和肝细胞移植共同面临的问题。骨髓干细胞在适当条件下可分化为肝细胞,为获取肝细胞提供了新的思路。目的:探讨人骨髓干细胞在大鼠体内诱导分化为肝细胞的方法,为解决临床肝脏移植和生物人工肝来源提供新的思路。设计:随机对照实验。单位:南方医科大学珠江医院普通外科。材料:实验于2004-05/2005-02在南方医科大学珠江医院中心实验室完成。选取雄性清洁级SD大鼠40只,随机分为5组:单纯模型组、造模 人骨髓干细胞移植14d组、造模 人骨髓干细胞移植28d组、造模 CL-1细胞(人肝细胞系)移植14d组、造模 CL-1细胞(人肝细胞系)移植28d组,8只/组。方法:①5组均建立2-乙酰氨基芴 四氯化碳 环磷酰胺肝损伤模型。②利用治疗性肝再生策略,将人骨髓干细胞移植到大鼠肝脏内诱导分化为肝细胞。造模 人骨髓干细胞移植14d组移植人骨髓干细胞后观察14d,造模 人骨髓干细胞移植28d组移植人骨髓干细胞后观察28d,造模 CL-1细胞移植14d组移植CL-1细胞后观察14d,造模 CL-1细胞移植28d组移植CL-1细胞后观察28d,单纯模型组未进行细胞移植。③各组在正常状态下以及移植前后进行血清标本的采集与肝功能检测。应用免疫组化、聚合酶链反应法、实时荧光定量反转录聚合酶链反应技术检测各组大鼠肝脏内人白蛋白的mRNA的表达。主要观察指标:①人骨髓干细胞移植对大鼠肝功能转氨酶及总胆红素含量的影响。②各组大鼠病理切片肝细胞形态检查结果。③各组大鼠肝脏中人主要组织相容性抗原-Ⅰ类阳性率。④各组大鼠肝脏中大鼠Sox11序列、人Alu-sx序列、人白蛋白mRNA基因的表达。结果:实验选用40只大鼠,全部进入结果分析。①人骨髓干细胞移植对大鼠肝功能转氨酶及总胆红素含量的影响:各细胞移植组在正常状态以及细胞移植前与单纯模型组基本相似(P>0.05);与正常状态比较,细胞移植前各组均显著增高(P<0.01);与细胞移植前比较,各细胞移植组在细胞移植后均显著降低(P<0.01),但仍高于正常状态下的转氨酶、总胆红素含量(P<0.01)。②各组大鼠病理切片肝细胞形态检查结果:正常情况下肝脏病理切片显示肝细胞排列成条索状,围绕中央静脉成放射状排列,汇管区无炎性细胞浸润;单纯模型组呈大片状坏死表现;人骨髓干细胞移植组可见一些坏死后增生性改变;CL-1细胞移植组可见卵圆细胞以及小胆管增生。③各组大鼠肝脏中人主要组织相容性抗原-Ⅰ类阳性率:单纯模型组为0,造模 人骨髓干细胞移植14d组为(13.03±0.18)%,造模 人骨髓干细胞移植28d组为(9.47±0.46)%,造模 CL-1细胞移植14d组为(10.27±0.50)%,造模 CL-1细胞移植28d组为(9.84±0.23)%。④各组大鼠肝脏中基因序列聚合酶链反应检测结果:单纯模型组大鼠肝脏中只检测到大鼠Sox11序列;而人骨髓干细胞移植、CL-1细胞移植各时间组均可检测到人Alu-sx序列和大鼠Sox11序列。⑤各组大鼠肝脏组织实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测结果:单纯模型组大鼠肝脏组织中未检测到人白蛋白mRNA基因表达,人骨髓干细胞移植、CL-1细胞移植各时间组以及阳性对照均可检测到人白蛋白mRNA基因表达。结论:人骨髓干细胞移植能促进肝损伤大鼠的肝功能恢复,人源性细胞在肝损伤大鼠肝脏中的替代率约10%,提示人骨髓干细胞在异体内均可转化为肝细胞并可实现部分替代。