猪供心离体不停跳保存的体外循环

背景:目前供心保存方法主要是单纯低温保存,安全时限为4～6 h,不可能长途运送,势必影响组织配型和有效的应用每一颗供心.因此,开展不停跳供心保存方法的研究很有必要.目的:建立猪供心离体浅低温不停跳保存的体外循环模型,为供心不停跳保存提供实验保障.方法:取体质量25～30 kg的广西巴马小型猪12头,随机分为2组.实验组取出有完整心包的供心后头臂干插灌注针连接体外循环灌注装置,左心引流,灌注流量60～80 mL/min,使心脏保持跳动8 h.对照组按常规方法摘取供心后用低温UW保护液保存心脏8 h.实验组生理记录仪监测心脏跳动心率及灌注压,保存1～8 h各时点抽取动脉血查血气分析、电解质.两组8 h后取心肌组织行ATP测定和超微结构检查.结果与结论:①实验组保存跳动8 h的心脏中,有1头猪出现短暂的2:1下传,其余的都保持完好跳动,②实验组保存跳动期间灌注压没有上升;血气分析pH和BE有逐渐降低的趋势;游离钙离子和钾离子有逐渐升高的趋势.⑨实验组ATP含量高于对照组(p<0.05).④实验组心肌超微结构仅有少数线粒体肿胀,大致接近正常的心肌结构.对照组心肌细胞内外水肿,较多空泡变性.结果提示,利用体外循环装置进行离体不停跳心脏保存是可行的,体外循环管理有其特殊性.     

常温不停跳保存供心的超微结构和动力学变化

背景：心脏移植供心保护方法有向心脏正常生理状态改进的趋势,以期延长供心保存时间,改善供心的保存质量。理论上供心常温不停跳灌注保存是一种最接近生理状态的保存方法,有良好的发展潜力。目的：观察连续灌注不停跳供心常温长时间保存心肌超微结构和左室血流动力学的变化。方法：广西巴马小型猪24只,按随机数字表法分为不停跳连续灌注组和冷保存组,每组各6对。不停跳连续灌注组供心在顺行连续灌注跳动状态下切取,应用氧合血37℃、保存8h后移植。冷保存组供心应用UW停搏液灌停后,0-4℃UW液保存8h后移植。移植主动脉开放3h观察供心左心室收缩压、左心室舒张压、左室平均压、左室舒张末压、左室内压最大上升和下降速率。记录移植后心律变化,需要除颤例数,以及主动脉开放3h后能否脱离体外循环。主动脉开放3h后取供心左心室前外侧壁心肌组织,观察线粒体及肌膜改变。结果与结论：不停跳连续灌注组供心移植后左心室收缩压、左室平均压、左室舒张末压、左室内压最大上升和下降速率均优于冷保存组（P〈0.05）;主动脉开放后不停跳连续灌注组均可保持窦性心律,冷保存组仅1例自主恢复窦性心律;主动脉开放后3h不停跳连续灌注组5例可顺利脱机,冷保存组1例可以脱机;不停跳连续灌注组心肌超微结构保存良好。提示供心常温灌注不停跳方法有良好的心肌保护效果,适于供心的长期保存。     

不停跳摘取和保存有完整心包的供心

背景:有文献报道心脏在连续灌注、不停跳下保存,有望突破心脏保存时限。但是心脏的摘取和灌注部位沿用单纯低温保存的办法,有背于连续灌注保存的初衷。作者认为保留完整的心包,于头臂动脉干灌注,在不停跳下摘取和保存供体心脏可能更加科学。目的:评价不停跳保存完整心包的可行性以及供心功能变化情况。方法:选用年龄、体质量相当的广西巴马小型猪6只进行不停跳摘取和保存有完整心包供心的试验。实验猪用氯胺酮麻醉,取胸部正中切口,全身肝素化后,不切开心包,先阻断并切断头臂干插灌注管,后切断上腔静脉和右上肺静脉回收血液,用自行组装的灌注装置灌注心脏,在跳动状态下摘取心脏并保存4h。设4个时点连续监测左心室心功能变化,离体时为T0,保存60min为T1,保存120min为T2,保存180min为T3,保存240min为T4。结果与结论:在不停跳下,摘取和保存有完整心包的供体心脏6例全部成功。不停跳保存各个时点的左心室内压最大上升速率两两比较:T0与其他时点比较,差异有显著性意义(P<0.05);T1与T2时点比较,差异无显著性意义(P>0.05);T1与T3及T4时点比较,差异有显著性意义(P<0.05)。不停跳保存各个时点的左心室内压最大下降速率两两比较:T0与其他时点比较,差异有显著性意义(P<0.05);T1与T2,T3及T4时点比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结果表明在不停跳下摘取和保存有完整心包供心是完全可行的。     

心脏移植供心16例的切除及保护经验

目的:报告连续16例同种异体心脏移植供心切除及保护经验,以期使供体得到有效的保护,提高手术的成功率。方法:回顾性分析16例同种异体心脏移植手术,供心缺血期间采用4℃改良ST.Thomas液顺行灌注使心脏快速停搏,供心取出后冷生理盐水冲洗心腔,继之用4℃UW(university of wisconsin solution)液1 000 mL经升主动脉根部单次灌注,然后用灌注后4℃UW液浸泡保存,与受体吻合前经主动脉根部再次灌注4℃UW液500mL 1次,移植手术过程不再行心肌保护液灌注。供心热缺血时间5～10 min,冷缺血时间120～350 min。结果:心脏移植完毕开放升主动脉后13例心脏自动复跳,3例心脏电击除颤后复跳,辅助循环时间35～85 min,术后心功能恢复良好,14例存活至今,2例术后死亡。结论:冷晶体停跳液灌注心脏快速停跳,继之用4℃UW液灌注,并放置于UW液中低温保存,此方法简便,效果良好,可使供心得到良好的心肌保护。     

离体人、畜心脏心肌保护的临床研究——附成人原位心脏移植1例

目的 为探讨离体心脏的心肌保护效果，为临床心脏移植供心保护优选方案。方法 标本用同胎山羊8只，狗2只，配对进行心脏移植；脑死亡人离体心脏3枚。标准术式切取心脏，分别观察供心自动复跳率、心肌收缩力、心跳节律，切取左心室、右心室前壁全层心肌送检病理。结果 冷缺血1h供心心肌细胞基本正常，2h心肌细胞轻度水肿，4h明显水肿，6h严重水肿、坏死、肌细胞断裂。结论 本处方对离体心脏心肌保护效果满意；离体心脏冷缺血2h内可供使用。     

不同心肌保护方法对心肌细胞膜流动性影响的临床对比研究

目的 应用心肌细胞膜流动性评价间断冷晶体灌注、持续微温血灌注及微温不停跳直视手术技术的心肌保护效果。方法 将我科30例先心病患者，随机分成持续微温血灌注组(CT组)、微温心不停跳组(OB组)、间断冷晶体灌注组(IC组)，于开放升主动脉前取心肌标本，对照组(C组)取自前三组中随机10例转流前心肌标本。测每组的心肌细胞膜流动性，将测得结果进行统计学方差分析。结果 冷晶体组细胞膜流动性明显低于其他三组(P值均小于0．001)；温血组与不停跳组无差别(P＞0.05)；温血组与对照组无差别(P＞0.05)；不停跳组低于对照组(P＜0.05)。结论 持续微温血灌注组的心肌细胞膜保护效果最为满意，微温不停跳组次之，二者均明显优于冷晶体技术。     

体外循环中应用中低温含血停跳液诱导停跳的心肌保护作用

目的 比较温血心肌停跳液与冷晶体心肌停跳液在心脏瓣膜置换术中的心肌保护作用 ;评价体外循环间断温血停跳的心肌保护价值。方法 在24例心脏瓣膜置换术中分别采用温血灌注 (Ⅰ组 )和冷晶体灌注 (Ⅱ组 ) :每组各12例 ,进行心肌保护临床观察。Ⅰ组先用4 :1温血停跳液灌注心脏停跳 ,以后每隔20min用冷血停跳液灌注一次 ,保持心肌低温 ,在心脏复跳前再用温血灌注。Ⅱ组为应用4℃冷晶体心肌停跳液灌注 ,每隔20min灌注1次。结果 I组心脏自动复跳率明显高于Ⅱ组 (P<0.01) ,术后低心排征发生率明显低于Ⅱ组(P<0.05) ,术后应用心肌正性药物量及时间明显少于Ⅱ组 (P<0.05)。在停机时和停机6h ,Ⅰ组心肌肌钙蛋白明显低于Ⅱ组 (P<0.05) ,24h后心肌磷酸激酶CK,I组明显低于Ⅱ组 (P<0.05)。结论 温血心肌停跳液较冷晶体心肌停跳液具有更好的心肌保护作用     

不停跳摘取和保存有完整心包的供心

背景：有文献报道心脏在连续灌注、不停跳下保存,有望突破心脏保存时限。但是心脏的摘取和灌注部位沿用单纯低温保存的办法,有背于连续灌注保存的初衷。作者认为保留完整的心包,于头臂动脉干灌注,在不停跳下摘取和保存供体心脏可能更加科学。目的：评价不停跳保存完整心包的可行性以及供心功能变化情况。方法：选用年龄、体质量相当的广西巴马小型猪6只进行不停跳摘取和保存有完整心包供心的试验。实验猪用氯胺酮麻醉,取胸部正中切口,全身肝素化后,不切开心包,先阻断并切断头臂干插灌注管,后切断上腔静脉和右上肺静脉回收血液,用自行组装的灌注装置灌注心脏,在跳动状态下摘取心脏并保存4h。设4个时点连续监测左心室心功能变化,离体时为T0,保存60min为T1,保存120min为T2,保存180min为T3,保存240min为T4。结果与结论：在不停跳下,摘取和保存有完整心包的供体心脏6例全部成功。不停跳保存各个时点的左心室内压最大上升速率两两比较：T0与其他时点比较,差异有显著性意义（P〈0.05）;T1与T2时点比较,差异无显著性意义（P〉0.05）;T1与T3及T4时点比较,差异有显著性意义（P〈0.05）。不停跳保存各个时点的左心室内压最大下降速率两两比较：T0与其他时点比较,差异有显著性意义（P〈0.05）;T1与T2,T3及T4时点比较,差异有显著性意义（P〈0.05）。结果表明在不停跳下摘取和保存有完整心包供心是完全可行的。     

左卡尼汀强化St.Thomas No.2液对低温离体心脏的保存效果

背景:在心脏瓣膜置换中应用添加左卡尼汀的心脏停搏液可明显减轻心肌线粒体的脂质过氧化反应,保护心肌细胞.目的:观察加入左卡尼汀的St.Thomas No.2液对大鼠离体心脏低温保存的效果.方法:利用Langendorff 灌注装置建立SD大鼠离体心脏灌注和工作模型,随机分成4组,其中2组采用 St.Thomas No.2 液作为心脏停搏液与保存液分别保存心脏4 h、6 h,另2组采用添加左卡尼汀的St.Thomas No.2液作为心脏停搏液与保存液分别保存心脏4 h、6 h.结果与结论:与St.Thomas No.2 液保存4 h组比较,添加左卡尼汀的St.Thomas No.2液保存 4 h组心脏心率、冠状动脉流量、左心室收缩峰压和左心室内最大上升速率及心肌含水量、ATP含量差别无显著性意义(P > 0.05),但心肌酶漏出量明显减少(P < 0.05);添加左卡尼汀的St.Thomas No.2液保存 6 h组上述指标检测结果均优于St.Thomas No.2保存6 h组 (P < 0.05).提示左卡尼汀强化的St.Thomas No.2液可显著提高大鼠离体心脏的低温保存效果.     

金属硫蛋白在供心中的表达和作用的研究

目的　探讨金属硫蛋白 (MT)在供心中的表达和作用。方法　Wistar大鼠 2 4只 ,分为 4组 :对照组 (C ,n =6 ) ,腹腔注射蒸馏水 0 5mL 2 4h后取离体心脏行Langendorff灌注 ,然后灌注HTK心脏保护液 ,4℃保存 3h后再行Langendorff灌注12 0min ;实验组 1组 (E1,n =6 )腹腔注射ZnSO412h后取离体心脏 ,处理方法同C组 ;实验组 2组 (E2 ,n =6 )腹腔注射ZnSO42 4h后取离体心脏 ,处理方法同C组 ;实验组 3组 (E3,n =6 )腹腔注射ZnSO448h后取离体心脏 ,处理方法同C组。测定心肌细胞中MT含量、心肌含水量 (MWC)、血清肌酸激酶 (CK)和乳酸脱氢酶 (LDH)漏出率、ATP含量、丙二醛 (MDA)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)活性、心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 -ATPase活性及其Ca2 含量、心肌线粒体合成ATP能力 [ATP]m。结果　MT含量E2和E3组较C、E1组明显增高 (P <0 0 1) ;E2和E3组ATP含量、SOD活性方面均优于C组 (P <0 0 5 ) ,心肌含水量、MDA含量、CK、LDH漏出率方面均低于C组 (P <0 0 5 ) ,心肌线粒体Ca2 -ATPase活性、[ATP]m 均优于C组 (P <0 0 1) ,心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 含量低于C组 (P <0 0 1)。结论　腹腔注射ZnSO4可诱导供心MT长时间表达 ,MT对鼠离体供心具有明显保护作用     

无心跳供体肺移植大鼠模型的建立

背景:大量实验表明,供肺组织及肺血管功能在适当条件下可以保存,当供体心跳停止后,肺的气体交换系统可耐受热缺血60min。目的:建立一种简单有效的无心跳供体肺移植大鼠模型。方法:60只SD大鼠随机分为有心跳供体组、无心跳供体-缺血30min组和无心跳供体-缺血60min组,每组20只。有心跳供体组供体大鼠取供肺保存在4℃低钾右旋糖苷液中4h;无心跳供体-缺血30min组供体放血处死后,维持通气30min,使供肺在热缺血30min后冷保存;无心跳供体-缺血60min组方法同无心跳供体-缺血30min组,不同之处在于供肺热缺血60min。各组大鼠循环回路连接后,于1,15,30,45,60min测出气道峰压和肺静脉血氧气分压。灌注结束后检测供肺湿质量干质量比和丙二醛水平。结果与结论:有心跳供体组和无心跳供体-缺血30min组所有指标比较差异均无显著性意义(P>0.05)。各组气道峰压随时间的延长逐渐升高,但无心跳供体-缺血60min组升高程度高于有心跳供体组和无心跳供体-缺血30min组(P<0.05)。各组供肺血氧气分压均随着时间的延长而降低,无心跳供体-缺血60min组供肺血氧气分压低于有心跳供体组和无心跳供体-缺血30min组(P<0.05)。无心跳供体-缺血60min组供肺湿质量干质量比和丙二醛水平较有心跳供体组和无心跳供体-缺血30min组高(P<0.05)。结果提示大鼠无心跳供肺热缺血30min肺移植灌注模型是一种安全有效的肺移植方法。     

停跳和不停跳行心脏直视手术对心肌保护作用的对比研究

目的：探讨浅低温体外循环(CPB)下温血停搏液持续灌注和不停跳行心内直视手术对心肌的保护作用。方法：18只同种健康山羊采用单盲法随机分为冷晶体间断灌注组(Ⅰ组)，温血停搏液持续灌注组(Ⅱ组)，不停跳组(Ⅲ组)3组，每组6只；分别在CPB的不同时刻测定心肌组织丙二醛(MDA)含量及静脉血心钠素(ANP)含量，并切取心肌组织在电镜下观察超微结构的改变。结果：Ⅰ组MDA和ANP在CPB期间逐渐升高，恢复正常灌注后升高更明显：Ⅱ组、Ⅲ组MDA和ANP虽也有所升高，但较Ⅰ组低，且恢复正常灌注后无升高趋势。心肌超微结构也显示Ⅰ组改变明显，而Ⅱ组、Ⅲ组则基本不变。结论：温血停搏液持续灌注和不停跳行心内直视手术可有效避免心肌的缺血和再灌注损伤，有良好的心肌保护作用。     

心脏不停跳与停跳心瓣膜置换术后护理的对比观察

目的 探讨心脏不停跳二尖瓣置换与心脏停跳二尖瓣置换术后护理工作量及其临床意义。方法 30例行二尖瓣置换术的病人随机分成3组，A组：心脏不停跳组，B组：间断灌注冷晶心脏停搏液组，C组：连续灌注温血心脏停搏液组。对比观察3组不同心肌保护方法下进行二尖瓣置换术血液心肌肌钙蛋白T（cTnT)、术后心输出量（CO），正性肌力药物使用、心律失常和使用临时起搏器等情况。结果 cTnT在转机后即升高4.77-8.80ng/ml，且持续到术后2周，但A组的升高值（6.51ng/ml)较B组（7.43ng/ml)和C组（7.79ng/ml)低（P＜0.01)，A组术后心输出量（CO,5.14L/min)较术前（4.14L/min)明显改善，心律失常，低心排综合征发生率低，血管活性药用量少，患住重症监护病房（ICU）时间短。结论 心脏不停跳瓣膜置换术较心脏停跳瓣膜置换术后心功能稳定，并发症少，明显地减少了药品使用和护理工作量，是一种较理想的心肌保护方法和手术方式。     

浅低温体外循环心脏跳动二尖瓣置换术对心肌保护的体视学研究

目的用体视学定量法对比分析两种二尖瓣置换术（MVR）对心肌超微结构的影响，旨在为浅低温体外循环心脏不停跳心内直视手术对心肌保护效果作进一步客观的评价。方法将40例风湿性心脏病二尖瓣病变患者随机分为两组进行手术，20例在浅低温体外循环心脏不停跳下行MVR（不停跳组），20例在中低温冷血停搏液灌注心脏停跳下行MVR（停跳组）。两组均分别于体外循环前后切取少许心肌组织，用计算机图像分析系统对心肌超微结构的体视学定量进行对比分析。结果两组线粒体各参数在转流前差异无显著性（P均〉0.05）。停跳组在转流中、后线粒体平均直径（-↑Dmit）、平均截面积（-↑Amit）较转流前增大，但体密度（Vmit）、面数密度（Namit）、比表面（δmit）较不停跳组减少，差异均有显著性（P〈0.05或P〈0.01）；两组肌原纤维体密度（Vvmyo）在转流前、转流中变化不大，差异均无显著性（P均〉0.05），而转流后停跳组肌原纤维Vvmyo、比表面（δmyo）均较不停跳组减少，差异有显著性（P〈0.05和P〈0.01）。结论浅低温体外循环心脏跳动中心内直视手术是一种较接近生理状态的心肌保护方法，能最大程度地减轻心肌缺血、缺氧损伤，避免再灌注损伤，最大程度地保护心肌细胞形态结构的完整性，从而获得较理想的心肌保护效果。     

In-vivo Myocardial Substrate Alteration during Perfused Ventricular Fibrillation

OBJECTIVES: Earlier work suggests the in-vivo heart alters its substrate utilization as a function of cardiac work. Previous work has also demonstrated the high oxygen requirements of the heart during ventricular fibrillation (VF). The authors hypothesized that myocardial substrate utilization during VF with perfusion is similar to the normal beating heart under conditions of increased workload. METHODS: Myocardial substrate selection was studied in the in-vivo porcine myocardium using 13carbon nuclear magnetic resonance (13C NMR) under conditions of increased cardiac work (dobutamine group) and VF with extracorporeal perfusion (VF group). Once the animal preparation was completed, metabolic steady state was achieved with the infusion of unlabeled acetate into the left anterior descending (LAD) coronary artery. The infused substrate was then changed to [2-13C] acetate and glutamate pool labeling was monitored by 13C NMR. The glutamate C4 resonance areas at baseline and after intervention of either increased workload (dobutamine group) or perfused VF (VF group) were compared within groups using paired t-tests. RESULTS: Baseline aortic and great cardiac vein lactates, glucose levels, blood gases, hemoglobin levels, and temperatures were similar between groups. In both groups, there was a significant decrease from baseline in the labeling of C4 glutamate peaks (dobutamine group: 20.2+/-14.9 vs 84.7+/-32.7, p = 0.002; and VF group: 49.8+/-24.4 vs 83.9+/-24.4, p = 0.02), indicating selection against acetate oxidation in favor of other endogenous substrates. CONCLUSIONS: In the in-vivo heart, despite the absence of functional contractions, changes in substrate utilization during perfused VF are similar to changes that occur with increased workload in the normal beating heart.     

老年患者浅低温心脏不停跳瓣膜置换中的心肌保护

背景:体外循环心内直视手术引起的心肌损害是术后并发症发生的重要原因,浅低温心脏不停跳技术有明显的心肌保护作用,对某些高危患者尤为有益.目的:观察浅低温体外循环心脏不停跳瓣膜置换对老年患者的心肌保护作用.方法:选择年龄≥60岁择期行二尖瓣人工瓣膜置换的风湿性心脏病患者30例,根据治疗方式分为2组,停跳组在中度低温心脏停跳下完成心脏瓣膜置换,不停跳组在浅低温心脏跳动中完成心脏瓣膜置换.结果与结论:在转机30 min、术中关闭右心房前,两组患者肿瘤坏死因子α、白细胞介素6,8、心肌肌钙蛋白Ⅰ浓度较转机前时升高(P < 0.05),其中以停跳组明显(P < 0.05).关闭右心房时两组核转录因子κB的表达增加,以不停跳组增加幅度较小(P < 0.05).提示浅低温心脏不停跳技术可以减轻老年患者体外循环心内直视手术过程中的心肌损害,该作用可能与减轻心肌的局部炎症反应有关.     

浅低温心脏不停跳人工瓣膜置换过程中心肌保护与局部炎症反应

背景：人工心脏瓣膜置换过程中心脏不停跳技术对机体的保护效果可能与减轻体外循环心脏手术诱发的炎症反应有关。目的：观察浅低温心脏不停跳手术对体外循环人工机械瓣膜置换患者心肌的保护作用与心肌局部炎症反应的关系。方法：将二尖瓣机械瓣膜置换患者随机分为对照组和实验组,对照组在中度低温心脏停跳下完成心脏瓣膜置换手术,实验组在浅低温心脏跳动下完成心脏瓣膜置换手术。结果与结论：两组瓣膜置换过程中心肌局部白细胞介素6、白细胞介素8、肿瘤坏死因子а、肌钙蛋白Ⅰ水平均较置换前显著升高;实验组白细胞介素6、白细胞介素8和肿瘤坏死因子а、肌钙蛋白Ⅰ水平升高程度显著低于对照组,表明心脏不停跳手术可减少体外循环期间心肌局部促炎性细胞因子的生成,减轻心肌局部炎症反应,保护心肌。两组体外循环结束时核转录因子κB表达增加,实验组较对照组增加幅度较小,说明浅低温心脏跳动手术有利于抑制心肌组织释放促炎性细胞因子。提示浅低温心脏不停跳手术在一定程度上减轻心肌的局部炎症反应,可能是该手术方式保护心肌的重要机制。