缺血预处理预防肝细胞分离过程中的缺血再灌注损伤

背景：缺血预处理能否减轻肝细胞分离过程中的缺血再灌注损伤及改善供体残留肝脏功能？经检索国内外罕见这方面的研究。目的：探讨缺血预处理对分离肝细胞及供鼠残肝缺血再灌注损伤的防治作用。方法：12只SD大鼠随机分为2组：单纯肝部分切除组和缺血预处理组,各6只。采用改良四步胶原酶灌注法分离上述切除肝脏肝细胞,同时收集术前和术后1d大鼠的血清。结果与结论：缺血预处理组切除肝脏分离肝细胞成活率、增殖活性及白蛋白合成、超氧化物歧化酶水平显著高于单纯肝部分切除组（P〈0.05）,而乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、丙二醛水平显著减少（P〈0.05）;与单纯肝部分切除组比较,缺血预处理组大鼠血清白蛋白、乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、超氧化物歧化酶、丙二醛水平差异无显著性意义（P均〉0.05）。结果表明缺血预处理能减轻肝细胞分离过程中的缺血再灌注损伤,其机制可能与其自身缺血性预适应、抗氧化、清除氧自由基的能力相关,但对供鼠肝部分切除后残肝功能的影响不明显。     

缺血预处理对常温下肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :探讨缺血预处理对大鼠常温缺血再灌注损伤是否有保护作用。方法 :SD大鼠分为 3组 ,假手术组 (S组 ) ,缺血再灌注组 (IR组 ) ,预处理组 (PC组 )。于再灌注 2 4h取血、尿及肾组织标本 ,行血肌酐 (Scr)、尿素氮(BUN)、丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、一氧化氮 (NO)、尿微量白蛋白 (UALB)、尿α1 微球蛋白 (U α1 M)测定及形态学检查。结果 :(1 )血Scr、BUN、MDA、尿UALB、Uα1 M :PC组明显低于IR组 (P <0 .0 5 )。 (2 )血SOD、NO :PC组明显高于IR组 (P <0 .0 5 )。 (3)形态学 :IR组可见大量肾小管坏死 ,超微结构多呈不可逆性改变。PC组肾小管坏死较少 ,超微结构多为可逆性改变。结论 :缺血预处理对常温下大鼠肾缺血再灌注损伤具有保护作用     

缺血预处理对鼠肝不同时限缺血再灌注损伤影响的实验研究

目的：通过实验了解缺血预处理对肝组织的保护作用。并探讨缺血预处理后肝组织耐受较安全缺血的时限。方法：42只SD大鼠分为假手术组（S0组）、缺血再灌注组（IR组）和预处理＋缺血再灌注组（IPC＋IR组）3个大组，IR组及IPC＋IR组根据肝缺血时间40、50、60min时限不同又各分为IR10、IR50、IR60组及IPC＋IR10、IPC＋IR50、IPC＋IR60组，再灌注时间均为60min。各组均为6只。观察指标为超氧化物歧化酶（SOD）、肿瘤坏死因子（TNF-α）的含量，并行肝组织光镜、电镜观察。结果：再灌注60min后，IPC＋IR各组SOD与IR组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。IPC＋IR舶组TNF—α与IR舶组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。形态学上，病理切片及透射电镜结果与实验结果相符合。结论：缺血预处理可以明显减轻肝组织缺血再灌注所致肝损伤，延长阻断时间，本实验的研究结果提示预处理后肝门阻断50min可能是SD大鼠肝组织能够耐受缺血的较安全时限。     

小剂量内毒素预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护效应

目的：观察小剂量内毒素（ＬＰＳ）预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（Ｉ／Ｒ）模型。方法：小剂量内毒素预处理组于术前２４ｈ给予ＬＰＳ,分别于复灌后６０ｍｉｎ,９０ｍｉｎ,１２０ｍｉｎ国中肝功能酶性及肝组织中肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）及前列腺素Ｅ１（ＰＥＧ）含量,并与缺血再灌注组比较。结果：ＬＰＳ预处理组在各采亲时点肝功能酶活性组织ＴＮＦα含量均低于Ｉ／Ｒ组,而组织中ＰＧＥ含量则明显高于Ｉ／Ｒ组。结论：小剂     

缺血预处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨缺血预处理(ischemic preconditioniong,IP)对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用wistar大鼠原位肝移植动物模型,供肝冷保存时间150min,无肝期14min左右。80只大鼠,配成40对,配对大鼠随机分配到对照组和实验组(IP组),每组20对。对照组获取供肝前仅以4℃肝素生理盐水灌注,后获取供肝并放入4℃生理盐水中保存;IP组获取供肝前先夹闭门静脉及肝动脉,使供肝缺血10 min,再松开血管夹,恢复供肝血供10min,然后以与对照组相同的方法灌注、获取及保存供肝。各组受体的一半(n=10)用于肝移植术后采集标本:另一半(n=10)用于观察肝移植术后生存期。结果IP组大鼠肝移植术后一周生存率、胆汁分泌量高于对照组,血清AST、ALT、LDH、肝组织细胞凋亡及TNF-α低于对照组。结论缺血预处理能降低移植肝组织中TNF-α水平,减少细胞凋亡,从而减轻移植肝的缺血再灌注损伤,改善移植肝功能。     

肝细胞生长因子对肝再灌注损伤的治疗作用

目的：观察肝细胞生长因子(HGF)对肝缺血再灌注(IR)损伤的治疗作用并探讨其作用机制。方法：建立大鼠肝缺血再灌注损伤模型，在恢复灌注后立即经静脉给予HGF0．5mg／kg，以后每12h给药1次，而对照组仅给予平衡盐治疗。均检测肝功能、组织病理学变化以及肝脏重量变化，还利用免疫组化方法检测肝细胞PCNA表达情况，利用TUNEL法检测肝细胞凋亡情况。结果：在HGF治疗组，恢复灌注后血清ALT与透明质酸水平均明显下降。血清白蛋白水平升高。恢复灌注后24h在HGF治疗组肝坏死范围下降，TUNEL法检测恢复灌注后6h在HGF治疗组凋亡肝细胞下降。结论：HGF可促进IR造成的肝损伤的恢复，在IR损伤治疗中可能发挥一定的作用。     

缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤的影响

肝脏对缺血缺氧甚为敏感，在缺血一定时间后肝脏的结构功能必然受到损害，当血流恢复后，肝损伤会更为严重，即肝缺血再灌注损伤（ischemic-reperfusion injury，IRI）。肝脏的IRI是肝外科手术后常见的肝损伤过程．其损伤的程度对治疗效果影响甚大，因此对肝IRI的机制及防治措施的研究已变得越来越重要。[第一段]     

缺血预处理对肢体缺血再灌注损伤影响的临床观察

目的 临床观察缺血预处理对肢体缺血再灌注损伤的作用。方法 选择36例四肢手术需充气止血带加压肢体止血的患者，随机分为对照组和缺血预处理组。缺血预处理措施为阻断术肢血流5分钟，然后松止血带，恢复血流灌注5分钟，反复4次。肢体缺血前、再灌注0．5、1．5、3、24小时和72小时分别检测血清丙二醛(MDA)、肌酸磷酸激酶(CK)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 肢体缺血再灌注后各时相点与缺血前比较，血清MDA、CK、AST和LDH含量明显低干时照组．SOD活性明显高于时照组．结论 缺血预处理时肢体缺血再灌注损伤鼻有保护作用．     

缺血预处理对高血脂大鼠心肌再灌注损伤和氧自由基代谢的影响

目的研究缺血预处理 (IP)对缺血再灌注 (I/R)高血脂大鼠离体心脏功能、心肌酶、氧自由基的影响。方法采用大鼠离体心脏灌注模型 ,以左室收缩峰压 (LVSP)和心室内瞬间最大变化速率 (dp/dtmax)估价心功能。以心肌酶 (CK)反应心肌损伤 ,以心肌组织丙二醛 (MDA)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)活性、心肌细胞线粒体中谷胱甘肽过氧化酶 (GRH PX)活性反映心肌自由基代谢。将IP和I/R情况进行比较。结果IP使高血脂大鼠心脏再灌注后LVSP、dp/dtmax增高、CK降低、MDA减少、SOD和GSH PX增高 (均P <0 .0 5 ) ,且与正常大鼠无显著性差异 (均P >0 .0 5 )。结论IP对高血脂大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用。高血脂可能不参与心肌缺血再灌注损伤的机制。     

肌电图用于评价缺血预处理减轻大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的研究

摘要 目的：探讨针极肌电图（EMG）对缺血预处理（IPC）减轻大鼠骨骼肌再灌注损伤的应用价值。 方法：将75只健康6周龄SD鼠随机分成Ⅰ组（正常值组）,Ⅱ组（实验组或缺血预处理组）,Ⅲ组（对照组或未经预处理组）,每组25只。Ⅱ组为加压止血带捆扎大鼠后肢缺血再灌注损伤的动物模型,连续观察患侧胫前肌损伤即刻及第3、7、14、28天的针极肌电图改变、组织病理变化、后肢神经功能评分。 结果：Ⅱ组肌电图在损伤后第3天出现单个运动单位电位（MUP）,第14天与Ⅰ组比较MUP时限增宽、波幅升高、多相电位增多（P<0.01）,第28天所有参数与Ⅰ组比较差异无显著性（P>0.05）;而Ⅲ组在第7天出现单个MUP,第28天静息状态仍显示+1处正锐波、纤颤电位。病理变化在损伤后第3、7天最明显。后肢神经功能评分：损伤后第7天Ⅱ组有3只达到4级,损伤后第14天Ⅱ组有3只达到5级,第28天全部达到5级,与Ⅲ组比较有显著性差异（P<0.01）。 结论：针极肌电图的动态观察是评价缺血预处理减轻骨骼肌再灌注损伤的客观指标之一。     

Ischemic preconditioning protects against gut dysfunction and mucosal injury after ischemia/reperfusion injury

Mesenteric ischemia/reperfusion (IR) damages the gastrointestinal epithelia and impairs gut function. Ischemic preconditioning (IPC) has been shown to protect organs against IR injury. We hypothesized that IPC protects the gut from IR injury. Rats were randomized to a sham group, a sham early IPC + IR group (sham IPC + SMA occlusion for 30 min and 6 h of reperfusion), an early IPC + IR group (IPC, three cycles of SMA occlusion for 4 min and reperfusion for 10 min) followed immediately by SMA occlusion for 30 min and 6 h of reperfusion), a sham 24-h group, a sham late IPC + IR group (sham IPC followed by additional reperfusion for 24 h + SMA occlusion for 30 min and 6 h of reperfusion), and a late IPC + IR group (IPC protocol followed by additional reperfusion for 24 h, and then SMA occlusion for 30 min followed by 6 h of reperfusion). At 6 h, transit was determined and expressed as the mean geometric center. Ileum was harvested for assessment of mucosal injury and myeloperoxidase (MPO) activity. Tissue water was determined using the wet-to-dry weight ratio to assess gut edema. Early IPC + IR significantly improved transit (3.9 +/- 0.2), decreased MPO levels (3 +/- 2), and lessened mucosal injury (1.2 +/- 0.3) compared with animals subjected to sham early IPC + IR (transit, 2.9 +/- 0.2; MPO levels, 9 +/- 1; mucosal injury, 3.0 +/- 0.6). Late IPC + IR also improved transit (6.0 +/- 0.4) and decreased MPO levels (1 +/- 1) compared with sham late IPC + IR (transit, 4.4 +/- 0.2; MPO levels, 8 +/- 1), however, there was no difference in the mucosal protection between late IPC + IR (1 +/- 0.3) and sham late IPC + IR (1 +/- 1). Our results suggest that early and late IPC improves intestinal dysfunction, decreases inflammation, and provides mucosal protection in the intestine after IR. Our results show that IR-induced gut dysfunction can be improved by IPC. Both phases of IPC can potentially be useful in the clinical setting of surgical patient care.     

缺血预处理对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的探讨缺血预处理(IP)对硬化肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法Wistar雄性大鼠制成肝硬化模型。分两组:IP组离断肝周韧带,消除侧枝循环,用Pringle's法阻断肝门15min,然后恢复血供,关腹;C组只予以开、关腹。48 h后,再次Pringle's法阻断肝门30 min,恢复血供。用Western blotting法测IP后6、24、48 h肝组织中热休克蛋白70(HSP70)表达的水平;测再灌注1、3 h血清生化酶(ALT、AST、LDH)及再灌注3h肝组织中谷胱苷肽(GSH)水平;行病理学观察。结果IP后6 h,两组均有微量HSP70表达,至24-48hIP组HSP70表达显著增强,呈高水平;而C组中在各时点HSP70均无表达增强。再灌注1h,IP组的ALT、AST、LDH水平显著低于C组(P<0.01或P<0.05);再灌注3h,IP组的ALT、AST水平明显低于C组(P<0.01)而其肝组织中的GSH水平明显高于C组(P<0.05)。术后一周生存率IP组(93.10%)明显高于C组(73.33%)(P<0.05)。缺血再灌注后1、3h,IP组的肝细胞损伤明显轻于C组。结论在硬化大鼠肝脏中,IP启动内源性保护机制,诱导HSP70的大量表达,而HSP70通过增加或提高GSH的产生及其活性,清除自由基,减轻硬化肝脏缺血再灌注损伤。     

潘生丁预处理对大鼠肝缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨潘生丁预处理对肝缺血／再灌注损伤的保护作用。方法 SD大鼠30只，随机分为假手术组、缺血／再灌注组及潘生丁组，每组10只。常温下制备大鼠肝缺血／再灌注损伤模型，潘生丁组于缺血前30min经门静脉给予潘生丁10mg／kg加生理盐水至0．5ml，假手术组和缺血／再灌注组注人等量生理盐水，用小号无损伤钳阻断肝门45min后恢复血流灌注，并于1h后取门静脉血测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）、乳酸脱氢酶（LDH）、肿瘤坏死因子-α（TNF-Ⅱ）及内皮素-1（ET-1），同时取肝组织行病理组织学检查及腺苷酸含量测定。结果缺血／再灌注组血清ALT、LDH、TNF-α及ET-1均明显高于假手术组，潘生丁组则明显低于缺血／再灌注组（P均〈O．01）。缺血／再灌注组肝组织中腺苷酸含量明显低于假手术组，潘生丁组则明显高于缺血／再灌注组（P均〈O．01）。潘生丁组肝组织病理组织学改变明显轻于缺血／再灌注组，并接近假手术组。结论潘生丁预处理对肝缺血／再灌注损伤具有保护作用。     

钙预适应对缺血再灌注心肌细胞的保护作用

目的:从细胞水平研究钙预适应对培养心肌细胞的缺血再灌注损伤是否具有保护作用。方法:实验选用3日龄健康清洁级SD乳鼠15只,雌雄不限,体质量10～15g。体外分离培养SD乳鼠心肌细胞,以模拟缺血溶液和模拟再灌注溶液模拟体内缺血再灌注过程,将培养心肌细胞随机分别用正常对照组、缺血再灌注组、钙适应缺血再灌注组,实验结束后检测心肌细胞活性、培养基乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)水平和心肌细胞凋亡。结果:模拟缺血再灌注可引起明显的心肌细胞损伤,无钙复钙可明显减少模拟缺血再灌注对心肌细胞的损伤,钙适应缺血再灌注组细胞的台盼蓝摄取率、LDH活性、凋亡指数犤(6.2±1.2)%,(1592.0±111.7)μkat/L,(6.2±0.4)%犦均明显低于缺血再灌注组犤(24.6±1.8)%,(2873.9±43.3)μkat/L,(10.6±0.6)%犦(t=19.02,23.92,13.64,P<0.01)。结论:在细胞水平上证实了无钙复钙预适应对缺血再灌注心肌细胞有明显的保护作用。     

Pharmacological preconditioning protects lung injury induced by intestinal ischemia/reperfusion in rat

Intestinal ischemia/reperfusion (IIR) is a critical and triggering event in the development of distal organ dysfunction, frequently involving the lungs. Respiratory failure is a common cause of death and complications after intestinal I/R. Stress protein heme oxygenase-1 (HO-1) confers the protection against a variety of oxidant-induced cell and tissue injuries. The aim of this study was to investigate the hypothesis that the induced HO-1 expression by pharmacological preconditioning with anticancer drug doxorubicin (Dox) could protect the lung injury induced by intestinal I/R. Intravenous administration of Dox induced HO-1 expression in the lungs and high levels of the expression were sustained at least to 48 h after the injection. Therefore, as pharmacological preconditioning, a low dose of Dox was injected intravenously into rats at 48 h before the start of intestinal ischemia. Rats underwent intestinal I/R by superior mesenteric artery occlusion for 120 min followed by 120 min of reperfusion. Preconditioning with Dox significantly ameliorated the lung injury induced by the intestinal I/R. Administration of a specific inhibitor of HO activity reduced the efficacy of the preconditioning. Our results suggest that this improvement may be mediated at least in part by the HO-1 induction. These findings may offer interesting perspectives for patient management In Intestinal surgical operation and intestine transplantation.     

缺血预适应对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护效应

目的 探讨缺血预适应对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护效应.方法 健康雄性大鼠28只,尾静脉注射链脲佐菌素45 mg/kg制备糖尿病大鼠模型,普通饲料喂养4周后随机分为缺血/再灌注（I/R）组和缺血预适应（IP）组.观察两组大鼠缺血前和缺血即刻、缺血15 min、缺血30 min以及再灌注30 min、再灌注2h心电图ST段改变及室性心律失常的发生情况,TTC染色评价心肌细胞坏死情况,TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,免疫组织化学染色法检测心肌组织凋亡相关基因Bcl-2与Bax蛋白表达情况.结果 与I/R组比较,IP组缺血30 min时ST段抬高幅度明显降低[（0.675±0.150）、（0.489±0.161） mV,P＜0.05],室性期前收缩出现时间推迟[（6.47±4.28）、（18.21±5.36） min,t=5.241,P=0.000],室性期前收缩持续时间缩短[（16.71±5.48）、（6.07±4.33） min,t=4.924,P=0.002],室性心动过速、心室颤动发生率显著下降[57.14％ （8/14）与14.29％ （2/14）,x2=5.600,P=0.018;50.00％（7/14）与14.29％（2/14）,x2=4.094,P=0.043],心肌梗死范围缩小[（37.50±11.40）％、（12.50±9.45）％,t=3.211,P=0.006],凋亡指数亦降低[（24.31±3.12）％、（19.01±4.32）％,t=3.227,P=0.006],并伴有凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax上调（0.103±0.045、0.221±0.101,t=2.670,P=0.015）.结论 缺血预适应对病程4周糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤具有保护效应,其通过上调凋亡相关基因Bcl-2/Bax,减少心肌细胞凋亡.     

缺血预处理联合缺血后处理对肺移植中缺血再灌注肺损伤的影响

背景:研究显示缺血预处理和缺血后处理在缺血再灌注肺损伤中均具有明显的保护作用。目的:观察缺血预处理联合缺血后处理对肺移植中缺血再灌注损伤的累积保护效应。方法:将40只SD大鼠随机等分为假手术组、模型组、缺血预处理组、缺血后处理组和联合处理组。后4组建立缺血再灌注肺损伤动物模型,缺血预处理组、缺血后处理组和联合处理组在造模前或/和造模后反复3次阻断开放左侧肺门。结果与结论:与缺血预处理组和缺血后处理组相比,联合处理组大鼠肺组织的干质量比、丙二醛和髓过氧化物酶降低(P<0.05),而肺组织中超氧化物歧化酶活性升高(P<0.05),肺组织病理损伤程度明显减轻;缺血预处理组与缺血后处理组大鼠肺组织超氧化物歧化酶活性、丙二醛水平及髓过氧化物酶活性接近(P>0.05),且肺组织病理损伤程度基本相似。而且缺血预处理与联合处理组中超氧化物歧化酶、丙二醛和髓过氧化物酶水平呈正相关。提示缺血预处理和缺血后处理联合应用对于减轻中性粒细胞的侵润和激活及氧化反应对于肺组织的损伤有明显的累积保护效应,从而可以更好的减轻肺缺血再灌注损伤程度。     

缺血预处理联合缺血后处理对肺移植中缺血再灌注肺损伤的影响

背景：研究显示缺血预处理和缺血后处理在缺血再灌注肺损伤中均具有明显的保护作用。目的：观察缺血预处理联合缺血后处理对肺移植中缺血再灌注损伤的累积保护效应。方法：将40只SD大鼠随机等分为假手术组、模型组、缺血预处理组、缺血后处理组和联合处理组。后4组建立缺血再灌注肺损伤动物模型,缺血预处理组、缺血后处理组和联合处理组在造模前或/和造模后反复3次阻断开放左侧肺门。结果与结论：与缺血预处理组和缺血后处理组相比,联合处理组大鼠肺组织的干质量比、丙二醛和髓过氧化物酶降低（P〈0.05）,而肺组织中超氧化物歧化酶活性升高（P〈0.05）,肺组织病理损伤程度明显减轻;缺血预处理组与缺血后处理组大鼠肺组织超氧化物歧化酶活性、丙二醛水平及髓过氧化物酶活性接近（P〉0.05）,且肺组织病理损伤程度基本相似。而且缺血预处理与联合处理组中超氧化物歧化酶、丙二醛和髓过氧化物酶水平呈正相关。提示缺血预处理和缺血后处理联合应用对于减轻中性粒细胞的侵润和激活及氧化反应对于肺组织的损伤有明显的累积保护效应,从而可以更好的减轻肺缺血再灌注损伤程度。