热休克蛋白的表达与败血症关系研究进展

热休克蛋白(heat shock protein,HSP)又称应激蛋白,是普遍存在于所有生物细胞中一组结构和功能具有广泛同源性的蛋白质。败血症是因感染因素作用于机体所引发的一种过度炎症反应状态,导致炎性介质的大量、失控性释放并相互刺激、诱导、调节,形成复杂的级联反应网络,从而造成组织灌注不足、缺血再灌注损伤甚至多器官功能衰竭。机体对损伤的突出表现是炎症反应,启动细胞内源性保护机制。当细胞受到各种外界因素如增高的温度、有害的理化因素、缺氧、感染、创伤等刺激时,     

双歧杆菌对新生大鼠炎症反应及热休克蛋白70表达的影响

目的 评价双歧杆菌(BF)对肠道内毒素(LPS)诱导炎症反应的保护作用,探讨BF抗炎症反应的机制.方法 采用鼠替代奶(RMS)人工喂养的新生SD大鼠模型,按析因设计随机分为4组,2组用添加了LPS的RMS喂养,其中1组RMS中补充了BF;另2组用不添加LPS的RMS喂养,其中1组RMS中补充了BF.每天观察新生大鼠生长情况.5 d后,取远端小肠HE染色观察组织学变化,取肺、小肠和肝组织采用蛋白质免疫印迹法检测热休克蛋白(HSP)70的表达水平.结果 (1)LPS处理的2组新生大鼠.出现腹泻、腹胀、活动减少等表现,其中补充BF组新生大鼠程度较轻.新生大鼠的体质量增长受到LPS干预的影响(P＜0.05),LPS处理组新生大鼠体质量增长明显慢于未LPS处理组,补充BF对体质量增长的影响差异无统计学意义(P＞0.05).(2)远端小肠组织学变化显示LPS破坏了小肠黏膜结构;添加BF的LPS处理组新生大鼠小肠黏膜损伤程度较轻.(3)在小肠、肝脏和肺组织中,HSP70表达水平受到LPS和BF的影响(P均＜0.05),LPS和BF之间存在交互作用(P＜0.05).结论 补充BF能减轻由LPS诱导的炎症对机体的损害,这种抗炎症作用可能与BF提高各脏器组织HSP70表达水平有关.     

热休克蛋白70在人白血病细胞HL-60中表达研究

目的 探讨热休克蛋白70(HSP 70)在人白血病细胞的表达。方法 人白血病细胞HL-60经42℃休克2 h,分别于休克后4、8、12、16、24、48 h收集细胞爬片,采用ENVISION免疫组织化学法检测HSP 70在细胞中表达;为明确热休克处理前后白血病细胞表达量变化,采用间接免疫荧光法定量分析细胞休克前及休克后12 h HSP 70表达;应用DNA倍体检测分析HSP 70表达与细胞周期关系。结果 免疫组织化学和免疫荧光检测显示热休克后白血病细胞中HSP70表达明显增加,以12 h达高峰;DNA倍体分析在整个细胞周期HSP 70均有表达,G1期与G2期表达量基本一致。与休克前相比,经热休克处理人白血病细胞HL-60中HSP 70表达明显增高;HSP 70表达与细胞周期并无明显关系。结论 初步了解白细病细胞HSP 70表达规律,为今后进行HSP 70抗原肽提取和纯化及抗癌免疫研究奠定基础。     

热休克蛋白70与槲皮素在白血病耐药机制中的作用研究

热休克蛋白（heat shock protein,HSP）作为一种重要的分子伴侣,主要功能是在各种应激刺激下维持细胞的自身稳定性,保护细胞的生存和功能。新近研究表明HSP异常表达与肿瘤的发生、预后及耐药性密切相关。肿瘤的多药耐药基因（muihidrug resistance gene,MDRl）亦与细胞的耐药性有关,研究表明HSP与MDRl的表达有相关性^[1]。     

脑缺氧缺血损伤新生大鼠热休克蛋白70基因的表达研究

目的 对所建立的新生大鼠脑缺氧缺血（ＨＩ）模型进行热休克蛋白７０基因的表达研究,评估检测该基因的表达能否作为缺氧缺血及其程度的有用标志。方法 应用自行研制的新生大鼠缺氧实验装置,建立新生大鼠脑缺氧缺血模型。应用竞争性ＲＴ－ＰＣＲ方法对脑ＨＩ模型进行热休克蛋白７０基因表达的检测。结果 ＨＩ组在ＨＩ后２ｈ即观察到ＨＳＰ７０ ｍＲＮＡ出现明显表达,４８ｈ达高峰,并在７２ｈ内维持较高水平,ＨＩ后７ｄ表达明     

庆大霉素诱导急性肾损伤大鼠肾脏热休克蛋白70的表达

目的探讨庆大霉素诱导急性肾损伤大鼠模型中肾脏热休克蛋白70(HSP70)的分布及表达规律。方法大鼠150只随机分为对照组(A)[注射9g/L盐水4mL/(kg·d)]和实验组B[注射庆大霉素注射液80mg/(kg·d)],实验组C[注射庆大霉素注射液160mg/(kg·d)]。将对照组和实验组分别于注射后6、12、24、36、48h各取10只大鼠剖腹取肾,光镜、电镜下观察肾脏的病理变化,通过免疫组织化学法观察HSP70的表达情况。结果HSP70在肾皮质肾小球周围近曲小管上皮细胞胞浆内分布增加,其表达量在注射后6h已经升高,12h达到高峰,48h仍高于正常对照组(P<0.01)。同一时相点注射160mg/(kg·d)较注射80mg/(kg·d)HSP70表达量高(P<0.01)。结论肾毒性药物早期即可引起肾小管上皮细胞的应激反应,可能与细胞自我保护机制启动有关。     

新生鼠缺氧缺血性脑损伤热休克蛋白70的表达

目的利用新生鼠缺氧缺血性脑损伤动物模型,探讨缺血缺氧后不同时间热休克蛋白(HSP70)的表达.方法采用阻断左侧颈总动脉制作新生鼠缺氧缺血性脑损伤动物模型,用原位杂交的技术观察正常对照组及缺氧缺血1 h、24 h、96h、h组HSP70表达变化以及阳性染色细胞的分布部位及数量.结果核酸原位杂交DAB染色、图象扫描分析显示,HSP70表达在缺氧缺血后1 h后即有升高,24h时阳性表达最高,48h、96h表达逐渐降低.结论脑缺氧缺血后热休克蛋白(HSP)表达增加,与脑缺氧缺血后神经细胞保护作用有关.     

热休克蛋白对缺氧缺血性脑损伤神经元凋亡的保护作用及机制

热休克蛋白(HSP)是机体在受到应激刺激后诱导产生的一组蛋白质,对细胞损伤具有保护作用.近年来较多文献报道HSP对缺氧缺血性脑损伤神经元的凋亡具有保护作用.本文就HSP的特点、脑缺氧缺血后神经元中HSP的表达及其对神经元凋亡的保护作用和机制进行综述.     

新生鼠缺氧缺血性脑损伤热休克蛋白70的表达

目的利用新生鼠缺氧缺血性脑损伤动物模型，探讨缺血缺氧后不同时间热休克蛋白(HSP70)的表达。方法采用阻断左侧颈总动脉制作新生鼠缺氧缺血性脑损伤动物模型，用原位杂交的技术观察正常对照组及缺氧缺血1h、24h、48h、96h组HSP70表达变化以及阳性染色细胞的分布部位及数量。结果核酸原位杂交DAB染色、图象扫描分析显示，HSP70表达在缺氧缺血后1h后即有升高，24h时阳性表达最高，48h、96h表达逐渐降低。结论脑缺氧缺血后热休克蛋白(HSP)表达增加，与脑缺氧缺血后神经细胞保护作用有关。     

全身炎症反应综合征患儿血清C-反应蛋白测定的意义

目的　 了解全身炎症反应综合征 (SIRS)患儿在不同阶段血清C 反应蛋白 (CRP)测定的意义。 方法 　随机选择 6 0例符合SIRS诊断的患儿 ,分别于急性期和恢复期行血清CRP测定。同时选择同期住院无SIRS的非危重病儿 30例作为对照组。观察CRP水平的改变与病情严重程度的关系及对MODS发生率的影响。 结果 　SIRS患儿血清CRP水平在急性期显著升高(92 8mg/L) ,急性期与对照组 (15 1mg/L)比较有显著差异 (P <0 0 1)。SIRS患儿急性期A、B二组MODS的发生率分别为10 5 %、40 9%。 结论 　CRP在SIRS的发生、发展中起重要作用 ,在SIRS急性期CRP显著增高者提示病情危重。对预测MODS的发生 ,早期防治MODS提供理论依据     

热休克蛋白47的表达与胆道闭锁肝纤维化及预后的相关性研究

目的 研究热休克蛋白47的表达与胆道闭锁患儿肝脏纤维化程度及预后的相关性.方法 选择30例胆道闭锁、10例胆汁淤积症和10例胆总管囊肿患儿入组,分别取肝脏组织以及外周血,通过RT-PCR、Western-blot、ELISA以及病理切片来评估不同水平HSP47的表达情况及其与肝脏纤维化相关性.结果 三组HSP47在mRNA水平(0.915±0.730比0.066±0.037比0.314±0.150,P＜0.05)、蛋白水平(3.061 81±0.504 763比1.358 018±0.373 174比1.23649±0.350 173,P＜0.05)以及血清水平(63.38±17.11比57.87±14.83比45.78±11.23,P＜0.05)的表达胆道闭锁组均比胆汁淤积组以及胆总管囊肿组高,差异有统计学意义,且不同水平表达具有一致性(mRNA比蛋白水平:r=0.836,P＜0.05;蛋白水平比血清水平:r=0.989,P＜0.01;mRNA比血清水平:r=0.883,P＜0.05).胆道闭锁血清HSP47的表达与肝脏组织光镜下纤维化程度呈正相关关系(r=0.669,P＜0.01).结论 肝脏组织HSP47的表达与血清HSP47的表达水平具有一致性,能够评估肝脏纤维化程度;血清HSP47的高表达可能作为胆道闭锁预后不良的一个监测指标.     

新生儿感染性休克与危重度评分及全身炎症反应综合征关系的研究

目的 探讨新生儿感染性休克与新生儿危重病例评分(NCIS)及新生儿全身炎症反应综合征(SIRS)间的关系.方法 根据新生儿休克分度、新生儿危重度评分、新生儿新SIRS诊断标准,对广州市儿童医院1991-2004年收治的感染性休克新生儿117例分别作统计分析.结果 (1)117例中以出生3d内发病为多(59.8%).死亡69例,多于入院后3d内死亡(78.3%),原发病主要为败血症,其次为感染性肺炎及坏死性小肠结肠炎.(2)入院当天危重度评分,全部处于危重分值,其中多数忠儿处于极危重分值(82.0%).(3)非SIRS患儿68例,死亡31例,痛死率45.6%,伴发SIRS者49例,死亡38例,痛死率77.6%,与非SIRS组比较,差异有统计学意义(P＜0.01),其中符合项目越多,病死率亦越高.符合SIRS诊断的四项标准中,以体温改变为多,且多表现为体温低下(81.6%),心率改变例数不多(28.6%),主要见于重度休克儿(心率减慢).白细胞数＜5×109/L的12例,均发生于中重度休克,病死率高(75.0%).结论 (1)新生儿感染性休克多发生于出生3d内,NCIS检查能反映病情的严重度,若对可疑病例及早开展CNIS,必能早期发现危重病例.(2)感染性休克与SIRS新诊断标准关系并不密切,SIRS新诊断标准对新生儿重度感染的敏感性低,但伴发SIRS者的病死率明显高于非SIRS者.     

重症肌无力患儿外周血单个核细胞中热休克蛋白90的表达

目的：重症肌无力（myasthenia gravis,MG）是一种自身免疫性疾病,发病机制自今仍未完全清楚。在其他自身免疫性疾病研究中发现热休克蛋白90（heat shock protein 90,HSP90）表达有异常,该研究探讨MG儿童外周血单个核细胞（PBMC） 中HSP90亚型mRNA表达水平和血清皮质醇的水平,以了解机体的应激状态。方法：对新发MG患儿36例及健康儿童19例（作为对照组）留取新鲜血液,取其上清液用化学发光法测定血清皮质醇水平;从其血细胞中分离出PBMC,采用RT-PCR方法检测HSP90α和HSP90β亚型mRNA。结果：MG患儿HSP90α（0.7329±0.2120）、HSP90β（0.7193±0.2869）mRNA表达水平比对照组（分别为0.5574±0.2084,0.4892±0.2104）明显升高（P<0.01）;MG患儿血清皮质醇（285.04±146.39 nmol/L）水平比对照组（196.25±64.52 nmol/L）升高（P<0.05）。结论：HSP90α和HSP90β mRNA 表达水平升高可能与MG疾病本身有关;而血清皮质醇水平升高表明机体处于高应激状态或可能与患儿糖皮质激素受体异常有关。［中国当代儿科杂志,2009,11（6）：453-456］     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤热休克蛋白70合成与TNF-α的关系

目的 探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后HSP70合成与TNF-α的关系.方法 7日龄SD大鼠54只,随机分为空白对照组、假手术组和实验组(HIBD后2、6、12、18、24、48、72h组)共9组.用HE染色法观察脑皮质细胞形态变化,免疫组织化学法测定脑皮质HSP70阳性细胞数,放射免疫平衡法测定TNF-α含量.结果 HIBD后2h即可在皮质部位观察到HSP70阳性细胞数,HIBD后48h达到高峰,72h HSP70阳性细胞数仍比对照组高(P<0.05).HIBD后2h,实验组大鼠脑组织出现TNF-α,12h达到高峰,然后逐渐减少,HIBD后48、72h TNF-α含量明显减少(P<0.05).结论 HSP70和TNF-α共同参与了新生大鼠缺氧缺血性脑损伤病理生理过程,两者之间可能存在某种联系.     

惊厥持续状态幼年大鼠海马中葡萄糖调节蛋白78与半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶12的表达及依达拉奉对其影响

目的 观察幼年大鼠惊厥持续状态(status convulsion,SC)后脑组织海马中内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein,GRP78)、半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶12(Caspase-12)的表达及神经细胞凋亡的变化,并探讨依达拉奉(edaravone,ED)对三者...