HLA—DR、DQ座位等位基因与HIV感染及AIDS发病相关性的研究

[目的]研究中国人HLA—DR、DQ座位等位基因与HIV感染及AIDS发病的相关性，为HIV的预防、治疗提供依据，并从免疫学指标作进一步观察。[方法]应用微量聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR～SSP)技术对18例AIDS患者及18例HIV抗体阴性高危人群进行了HLA—DR、DQ座位等位基因的检测，并与81例中国人群的正常对照组进行了比较。同时对AIDS患者组的免疫球蛋白(IgG、IgM)、补体(C3、C4)、抗溶血性链球菌O(ASO)、类风湿因子(RF)、白细胞介素(IL-2、IL-6)进行了检测。[结果]发现AIDS患者组的HLA—DR8的基因频率为38．9％，正常对照组的基因频率为12．3％，AIDS患者组明显高于正常对照组，P值为0．007；HIV抗体阴性高危人群组的HLA—DR9的基因频率为0．0％，正常对照组的基因频率为19．8％，HIV阴性高危人群组明显低于正常对照组，P值为0．040。AIDS患者组与正常对照组相比较，IgG、IgM、ASO、RF有显著性差异，C3、C4、IL-2、IL-6无显著性差异。[结论]本文发现HLA—DR9与中国人HIV的易感性有关，是HIV的易感基因；HLA—DR8与中国人HIV感染后的疾病进程有关，造成AIDS的快速发展；同时伴有免疫异常，说明有内在关联性。     

异位性皮炎患者HLA—DRB基因多态性分析

目的：探讨异位性皮炎与HLA－DRB基因多态性的相关性。方法：用引物序列特异性聚合酶链反应（PCR－SSP）扩增HLA－DRB等位基因。结果：HLA－DR3基因频率在异位性皮炎患者组为14．89％，对照组为3．75％（P＜0．01）。而DR6基因频率在患者组为0，对照组为8．75％（P＜0．01），患者组较对照组明显为低。结论：我们推测DR3基因位点是天津地区汉族异位性皮炎的易感基因，DR6基因位点是天津地区汉族异位性皮炎的抗性基因。     

HLA-DRB基因分型亲子鉴定1例

痴呆女黄××的亲属控告村民黄金×强奸其女至孕,黄金×仅承认有猥亵行为,并未强奸,因此当地公安局要求本站协助鉴定妇女黄××所怀胎儿是否为黄金×亲子。经常规血清学方法鉴定,相对亲子概率为９５．５５％,为慎重起见又应用序列特异性引物扩增方法（ＰＣＲ－ＳＳＰ...     

HLA新等位基因DRB103:80的鉴定及其序列分析

本研究旨在分析鉴定中国人群HLA—DR位点1个新等位基因。应用LuminexPCR—SSO流式分型技术发现1例罕见等位基因组合样本,应用PCR-测序分型（sequence—basedtyping,SBT）及单等位基因特异性测序分型技术进行鉴定分析。结果表明,该样本DR位点1个等位基因序列与同源性最高的DRB1＊03：06等位基因相比,其第2外显子第239位核苷酸碱基由C→G,结果导致相应51位密码子编码的苏氨酸变为精氨酸。结论：确定了该样本含有1个HLA-DRB1新等位基因。该等位基因被WHOHLA因子命名委员会正式命名为DRB1＊03：80．     

自身免疫性肝病与HLA—DRB1等位基因相关性研究

目的通过检测人类白细胞抗原（HLA）Ⅱ类等位基因DRB1＊0401～＊0408，分析基因频率与临床表现的关系，初步探讨HLA-DRB1多态性与自身免疫性肝炎和原发性胆汁性肝硬化的相关性。方法按自身免疫性肝炎和原发性胆汁性肝硬化的诊断标准筛选病例。以31例江苏地区汉族人自身免疫性肝病患者（自身免疫性肝炎12例，原发性胆汁性肝硬化19例）为研究对象，以42例健康人为对照组。采集静脉血，用酚-氯仿法提取全血DNA。用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR—SSP）技术检测HLA-DRB1＊0401～＊0408等位基因频率。结果自身免疫性肝病患者HLA—DRB1＊0404等位基因的频率（35．5％）明显高于健康人（7．1％），RR为7．15，（P〈0．005），其他各等位基因频率在2组间虽有不同，但无统计学意义的显著性差异。自身免疫性肝炎组和原发性胆汁性肝硬化组之间HLA—DRB1＊0404及其他各等位基因频率无统计学意义的显著性差异。结论HLA-DRB1＊0404等位基因可能与自身免疫性肝病的发生有关联。     

DNA序列分析鉴定HLA-DRB1~*新等位基因DRB1~*1449

目的鉴定HLADRB1位点新等位基因。方法应用基因克隆和DNA测序技术对1例受检样本HLADRB1基因第2外显子(Exon2)作核苷酸序列分析,与已知等位基因序列比对并作血清学分型。结果基因组DNA和DNA克隆的测序结果一致;DRB1Exon2的核苷酸序列与已知等位基因序列均不相同,与同源性最高的HLADRB11432相比,存在4处碱基的改变;以Exon2的第1位碱基为记数起点,核苷酸71位C→>G,196位G→>A,244位T→>G和245位上G→>T,引起相应编码氨基酸28位上天门冬氨酸(Asp)→>谷氨酸(Glu),70位上精氨酸(Arg)→>谷氨酸盐(Gln),86位上缬氨酸(Val)→>氨基乙酸(Gly)。血清学分型结果表明新等位基因血清学特异性为DR14。结论被检标本HLADRB位点存在新等位基因,2005年2月WHOHLA命名委员会正式将其命名为HLADRB11449。     

新等位基因HLA-DRB1＊1462的核苷酸序列分析

本研究验证一个新的HLA等位基因DRB1＊1462的核苷酸序列。应用MR-SSO和MR-SSP基因分型技术对HLA分型,对怀疑是HLA新等位基因进行DNA测序。结果发现,该序列与已知的所有HLA-DRB1等位基因序列不一致,与HLA—DRB1＊140101的序列差异仅表现在第2外显子区域中256位碱基发生了G-〉A的替换,导致相应的氨基酸由丙氨酸变为苏氨酸。结论：该基因是HLA-DRB1位点的一个新等位基因,已经被WHOHLA命名委员会于2006年1月30日正式命名为HLA-DRB1女1462。     

山东鲁西地区汉族人群HLA—A、B、DRB1座位高分辨等位基因多态性分析

目的了解山东鲁西地区汉族人群HLA—A、B、DRB1座位高分辩水平的基因多态性特点。方法采用PCR—SBT对647例山东鲁西地区汉族造血干细胞志愿捐献者进行HLA—A、B、DRB1座位高分辨分型,直接计数法计算各等位基因频率。结果本研究共检出HLA—A、B、DRB1等位基因139种,其中,常见基因为HLA—A＊02：01（0．097372）、A＊11：01（0．165379）、A＊24：02（0．156105）;HLA—B＊13：02（0．084235）、B＊51：01（0．072643）、B＊40：01（0．065688）;HLA—DRB1＊15：01（0．139104）、DRB1＊07：01（0．138331）、DRB1＊09：01（0．125966）。结论山东鲁西地区汉族人群HLA—A、B、DRB1座位高分辨水平等位基因表现为高度多态性特点,常见基因的种类和频率分布与中国北方汉族近似,与中国南方汉族存在明显差异。     

HLA—Ⅰ、Ⅱ类PCR—SSP基因分型在移植配型及亲子鉴定中的应用

目的：建立快速、准确的HLA基因分型方法,满足临床移植配型的需要。方法：对25对已进行HLA抗原血清学分型的骨髓移植的供、受者,12例亲子鉴定应用聚合酶链反应－序列特异引物（PCR－SSP）进行HLA－Ⅰ、Ⅱ类基因A、B、DRB1、DQB1位点扩增,琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物并确定其基因型。结果：基因分型结果与血清学分型一致者有22对,基因分型能明显判断而血清学分型无法判断者有3对;排除亲子关系的有2例。结论;PCR－SSP方法具有操作简单、快速、结果可靠的特点,不仅适用于移植配型、法医学亲子鉴定和个人识别,也可用于相关疾病及人类遗传学的研究。     

人类白细胞抗原DRB1和DQB1等位基因多态性与大肠癌的关联性

目的：探讨人类白细胞抗原HLA－DRB1,－DQB1等位基因与大肠癌遗传关联性。方法：运用序列特异性引物聚合酶链反应,结合等位基因序列分析,检测无亲缘关系的湖北籍汉族健康人136名、大肠癌组54例患者的HLA－DRB1、－DQB1基因。结果：大肠癌患者与正常人比较,HLA－DRB1＊0901等闪基因分布频率明显增高（0．2315、0．1397,P＝0．033）;而－DRB1＊080X等位基因频率明显降低（0．0093、0．0809,P＝0．0071）。两组间HLA－DRB1其余等位基因及HLA－DQB1等位基因分布频率,差异均无显著意义。结论：HLA－DRB1＊0901与人大肠癌呈正关联,而HLA－DRB1＊080X则与其负关联,上述峡谷等位基因结构还得到基因序列分析印证。     

强直性脊椎炎病人中HLA—B27等位基因与细菌感染的关系初…

本文在抗肺炎克雷白杆菌和福氏志贺多菌抗体滴度研究的基础上，采用非同位素地高辛系统标ＰＣＲ／ＳＳＯ方法，对３４例强直性脊椎炎病人进行ＨＬＡ－Ｂ２７等位基因的检测。结果显示，具有Ｂ２７０４等位的病人其抗肺炎克雷白杆菌的抗体水平比Ｂ２７０５４的病人要高，其中抗福氏志贺氏菌的抗体水平则比Ｂ２７０５的病人要低，鉴于氨基酸同源序列的比较显示Ｂ２７０４编码的Ｂ２７分子与福氏志贺氏菌而Ｂ２７０５则与肺炎克雷白杆菌     

两个糖尿病家庭HLA—DQA1和—DQB1等位基因比较

糖尿病是一种多病因的疾病，具有遗传因素的作用。胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）的遗传与ＨＬＡ－ＤＱ基因具有高度相关性。本文通过对ＭＯＤＹ和ＩＤＤＭ两个糖尿病家庭成员的ＤＮＡ进行ＨＬＡ－ＤＱＡ１和ＤＱＢ１基因ＰＣＲ扩增，以Ｂｉｏ－１１－ｄＵＴＰ标记核苷酸探针杂交分析，证实：１，ＭＯＤＹ的遗传与ＨＬＡ－ＤＱ基因无关联。２．ＩＤＤＭ的遗传不仅与ＨＬＡ－ＤＱ基因高度相关而且具有环境因素作用。３．易感基因之间     

HLA-DPB1等位基因与四川汉族人哮喘的相关性研究

目的:探讨HLA-DPB1等位基因与哮喘之间是否存在相关性,从基因水平探讨支气管哮喘的发病机制。方法:用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)分析法,检测四川汉族人HLA-DPB1基因多态性。用PCR技术对HLA-DPB1基因第2外显子(exon 2)进行体外扩增;然后用Ban II、Fok I、Dde I、Rsa I、EcoN I、BstU I 6种限制性内切酶对扩增产物进行酶切,电泳分离酶切片段,根据片段格局确定相应基因型别。结果:PCR扩增在327 bp有HLA-DPB1 exon 2目的基因产生。限制性内切酶酶切HLA-DPB1后,共检测到12种等位基因。HLA-DPB1*0201在哮喘患者组的出现频率显著低于对照组(P<0．05,RR=0．115<1)。结论:HLA-DPB1* 0201可能为支气管哮喘的抗性基因。     

3例携带HLA—DRB1^＊0114新基因的家系调查

目的调查3例携带HLA—DRB1＊0114新基因的家系遗传状况。方法HLA低分辨分型采用PCR—SS0流式分型技术,DNA测序采用等位基因特异性技术。结果新基因HLA—DRB1＊0114序列与DRB1＊010101相比,第2外显子区域有3个碱基发生突变,造成2个氨基酸发生改变。257位碱基A→C,导致86编码子的氨基酸由天冬氨酸（Asp）变成丙氨酸（Ala）。265位碱基T→C,89编码子的氨基酸由酪氨酸（Tyr）变成组氨酸（His）。3个携带HLA—DRB1＊0114新基因家系均为陕西籍,HLA—DRB1＊0114等位基因携带者都有单倍型A＊26-B＊37-DRB1＊0114,该单倍型均由父亲携带,且都遗传给子代的所有成员。结论A＊26-B＊37-DRB1＊0114是紧密连锁的单倍型,可以稳定遗传。     

骨髓移植供受者HLA－DRB的单链构型多态性配型

用ＰＣＲ和单链构型多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）法检查供受者的ＨＬＡ－ＤＲＢ－１基因座的多态性的一致性，以此做ＤＲＢ的基因配型。１６例同胞供受者对的ＤＲＢ－１的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ配型，有６对相合（６／１６），１０对不合（１０／１６）。此基因配型结果与其它配型结果比较，说明ＤＲＢ－１的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ配型在区分同胞供受者对的Ⅱ类抗原多态性上有较高的灵敏度，同时表明此类配型在应用于骨髓移植前检查同胞供者的意义。     

HLA-DRB1等位基因与儿童特发性血小板减少性紫癜

目的：研究人类白细胞抗原（LA）DRB1等位基因与儿童特发性血小板减少性紫癜（ITP）的关系。方法：用PCR－SSO法对42例ITP患儿进行HLA－DRB1等位基因分型，同时用改良的血小板抗原单抗特异性固相化法（MAIPA）检测其中36例ITP患儿血清中的抗GPⅡb/Ⅲa和GPⅠb/Ⅸ自身抗体。结果：（1）与健康对照相比，ITP患儿HLA－DRB1＊17基因型显著升高（P＜0．05，RR＝2．76，EF＝0．1064），而HLA－DRB1＊1202基因型显著降低（P＜0．025，RR＝0．20，PF＝0．7616）。（2）慢性难治性ITP患儿与非难治性患儿相比，HLA－DRB1＊11基因型显著升高（P＜0．025），且具有DRB1＊11的患儿主要（5／6）为女性年长患儿；（3）抗GPⅡb/Ⅲa及抗GPⅠb/Ⅸ自身抗体的阳性率都与HLA－DRB1＊02（15／16）基因型显著相关（P分别为0．02和0．01），但难治性和非难治性ITP患儿间抗体阳性差异无显著性（P＞0．1）。结论：（1）DRB1＊17可能与儿童ITP的易感性有关，而DRB1＊1202则可能对儿童ITP的发病具有保护作用；（2）具有DRB1＊11基因型的患儿易发展为慢性难治性ITP；（3）血小板自身抗体与抗原表位的反应可能受DRB1＊02限制，但自身抗体阳性与否并不能预示ITP患儿的预后。     

HLA新等位基因的确认与研究及其在我国的开展

HLA为人类白细胞抗原英文缩写,也被称为白细胞血型或移植抗原,学名又称为主要组织相容性复合物(MHC),是受人体第6号染色体短臂上1组基因控制、在细胞膜上表达的1组糖蛋白。HLA系统是人类最为复杂的多态系统,在机体的免疫中起着不可替代的作用。在人类的进化过程中HLA逐渐形成了     

脐带血HLAⅠ类定型研究

分别采用血清方法和PCR-SSP基因定型方法对102份脐带血HLA-A,-B位点进行了检测,经对比分析结果显示血清学近18.6%不能得出满意结果,HLA-A,-B位点错定率分别在6.1%和10.8%,总错误率16.9%。我们设计了16条引物,以PCR-SSP方法特异性扩增B15等位基因,并与血清学做了比较,发现大多数B15裂解物的血清学检测结果是错误的。