胆囊结石研碎镜检法对华支睾吸虫感染检出率的研究

收集2010年1~6月于广州市番禺区第二人民医院普外科实施内镜微创取石保胆术的179例患者的血清、粪便、胆汁和胆囊结石标本,分别采用胶体金免疫层析法检测华支睾吸虫IgG抗体,粪便直接涂片法、胆汁离心沉渣镜检法和胆囊结石研碎镜检法检查华支睾吸虫虫卵,并进行比较分析。结果显示,胶体金免疫层析法检测华支睾吸虫IgG抗体的阳性率为51.4%(92/179),粪便直接涂片法、胆汁离心沉渣镜检法和胆囊结石研碎镜检法华支睾吸虫卵阳性检出率分别为30.7%(55/179)、44.7%(80/179)和69.8%(125/179),粪便直接涂片法检出率最低,胆囊结石研碎镜检法检出率最高(均P<0.05)。其中粪便直接涂片法和胆汁离心沉渣镜检法检测结果为阳性的患者,其结石研碎镜检法的检测结果也均为阳性。     

胆囊结石联合胆汁病理检查诊断华支睾吸虫感染

目的 探讨胆囊结石联合胆汁病理检查诊断胆囊结石患者合并华支睾吸虫感染的可行性.方法 采用粪便直接涂片、胆汁离心镜检和胆囊结石病理切片镜检等方法,检查350例胆囊结石患者的粪便、胆汁和结石标本中的华支睾吸虫虫卵,分析3种方法的检出率. 结果 粪便直接涂片法、胆汁离心镜检和胆囊结石病理切片镜检华支睾吸虫虫卵的检出率分别为29.4％ (103/350)、41.5％ (145/350)和44.2％(155/350).与胆汁离心镜检法相比,粪便直接涂片法检出率最低(x2=11.05,P＜0.05),胆囊结石病理切片镜检的检出率差异无统计学意义(x2＝0.583,P＞ 0.05).胆汁、胆石联合检出率为67.7％ (237/350),明显高于其它方法(x2=48.77,P＜0.05). 结论 胆囊结石与胆汁联合病理检查虫卵可提高胆囊结石患者感染华支睾吸虫的诊断率.     

PCR和实时荧光PCR法检测华支睾吸虫的比较研究

目的 利用PCR技术建立快速、灵敏、特异的检测华支睾吸虫的方法,并比较PCR和实时荧光PCR检测华支睾吸虫的灵敏性和特异性,探讨其在华支睾吸虫检测中的应用价值.方法 根据华支睾吸虫的特异性基因序列,设计了PCR引物及实时荧光PCR的特异性引物和探针,分别进行灵敏性和特异性实验.结果 设计的引物能够扩增华支睾吸虫DNA,而且探针的特异性很高.实时荧光PCR对华支睾吸虫的检测阈值为3 fg/μl,灵敏度比PCR高两个数量级.结论 PCR和实时荧光PCR检测华支睾吸虫的灵敏性和特异性均很高,操作简便,为华支睾吸虫的检测提供了有效的技术手段和方法.     

PCR和实时荧光PCR方法检测华支睾吸虫

目的利用PCR技术建立快速、灵敏、特异的检测华支睾吸虫的方法，比较PCR和实时荧光PCR检测华支睾吸虫的灵敏性和特异性，探讨其在华支睾吸虫检测中的应用。方法根据华支睾吸虫的特异性基因序列，设计了PCR引物及实时荧光PCR的特异性引物和探针，分别进行灵敏性和特异性试验。结果设计的引物能够扩增华支睾吸虫，而且探针的特异性很高。实时荧光PCR对华支睾吸虫的最低检测浓度为3fg/ul，实时荧光PCR的灵敏性比常规PCR高2个数量级。结论PCR和实时荧光PCR检测华支睾吸虫的准确性和特异性均高，操作简便，为华支睾吸虫感染的诊治和预防提供有效的技术手段和方法依据。     

华支睾吸虫病流行区胆石症患者胆囊结石类型及华支睾吸虫感染情况

目的探讨华支睾吸虫病流行区胆石症患者胆囊结石类型与华支睾吸虫感染的关系。方法选取2009年5月至2012年10月在广州市南沙区第六人民医院普外科实施内镜微创取石保胆手术的胆石症患者598例。胆石样品以红外光谱法分析结石成分,判断结石类型。胆石研碎后用光镜检查华支睾吸虫虫卵,计算不同类型结石的虫卵检出率。比较不同类型的结石患者,以及碳酸钙类结石患者中华支睾吸虫虫卵阳性和阴性患者的临床特点和生化特征。选取部分虫卵阳性的碳酸钙类结石行扫描电镜观察。结果 598例胆囊结石患者中,234例(39.1%)为胆固醇类结石,133例(22.2%)为胆色素类结石,112例(18.7%)为碳酸钙类结石,86例(14.4%)为混合类结石,33例(5.5%)为其他类结石。5类胆结石华支睾吸虫卵检出率分别为6.4%(15/234)、44.3%(59/133)、59.8%(67/112)、36.0%(31/86)和30.0%(10/33)。碳酸钙类结石的虫卵检出率最高,胆固醇类结石的虫卵检出率最低。碳酸钙类结石和混合类结石患者的血清CO2结合力高于胆固醇类结石患者(P0.05),碳酸钙类结石患者胆汁CO2结合力和p H值高于其他4组结石患者(P0.05)。碳酸钙类结石患者中华支睾吸虫虫卵阳性者的血清CO2结合力、胆汁CO2结合力和p H值均高于虫卵阴性者(P0.05)。光镜和扫描电镜观察均发现,碳酸钙类结石华支睾吸虫卵与碳酸钙结晶相互黏附。结论碳酸钙类胆囊结石患者的华支睾吸虫感染率高于其他结石类型的患者。     

广西146例华支睾吸虫疑似感染者粪样虫卵和血清IgG抗体的检测分析

检测广西华支睾吸虫疑似感染者粪样华支睾吸虫/扇棘单睾吸虫虫卵和血清华支睾吸虫IgG抗体,分析二者的相关性,为华支睾吸虫感染的监测和诊断提供参考。收集2017年3-9月于广西疾病预防控制中心预防性健康体检科就诊的疑似华支睾吸虫感染者粪样,采用改良加藤厚涂片法(一粪三检)检查华支睾吸虫/扇棘单睾吸虫虫卵并计算每克粪样虫卵数(EPG)。同步收集粪检阳性患者的血液标本,采用间接ELISA法检测血清华支睾吸虫IgG抗体。分析EPG值与IgG抗体A_(450)值的相关性,并根据华支睾吸虫感染度分类标准,分析轻度、中度和重度感染者EPG值与血清IgG抗体阳性率以及IgG抗体定性结果与EPG值的关系。在146份华支睾吸虫/扇棘单睾吸虫虫卵阳性粪样中,EPG最大值为21 502,最小值为8。血清华支睾吸虫IgG抗体阳性率为84.9%(124/146),男、女性IgG抗体阳性率分别为86.0%(111/129)和13/17,差异无统计学意义(P 0.05)。感染者EPG值和IgG抗体A_(450)值呈正相关性(r_s=0.436, P 0.01)。轻度、中度和重度感染者IgG抗体阳性率分别为78.4%(69/88)、 96.0%(48/50)和7/8,差异有统计学意义(P 0.05)。华支睾吸虫血清IgG抗体阳性组和阴性组粪样几何均数(GM EPG)值分别为736和204,差异有统计学意义(P 0.01)。提示在华支睾吸虫和扇棘单睾吸虫共感染的广西,粪样虫卵镜检和血清华支睾吸虫IgG抗体检测结果呈正相关;但单独粪便虫卵检查用于华支睾吸虫监测和诊断会存在误判,应辅助IgG抗体等血清学检测。     

华支睾吸虫病患者粪便虫卵核糖体DNA内转录间隔区序列分析

目的 通过PCR方法扩增华支睾吸虫病患者粪便虫卵核糖体DNA （ribosomal DNA,rDNA）内转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）序列进行分析,探讨其用于华支睾吸虫感染检测的价值. 方法 提取2例华支睾吸虫患者粪便中的虫卵DNA作模板,以rDNA ITS基因片段为目的片段进行PCR扩增,对扩增片段进行测序分析. 结果 从2例患者粪便虫卵样本中均扩增出1 123 bp的条带,经序列比对确定患者粪便中的虫卵为华支睾吸虫卵.测序分析发现本研究的两个样本与中国黑龙江分离株（KF740425）相似性为100％. 结论 本研究从2例华支睾吸虫病患者粪便虫卵中成功扩增出rDNA ITS基因,为从分子生物学角度检测华支睾吸虫病提供了资料.     

广西藤县人群华支睾吸虫感染调查及其分子鉴定

目的了解广西藤县人群华支睾吸虫的感染状况及其分子鉴定,为当地华支睾吸虫病的防控提供理论依据。方法2016年11月,在广西藤县采用分层整群随机抽样抽取天平镇和金鸡镇各1个自然村作为调查点。收集3岁以上常驻居民的粪便,用改良加藤厚涂片法(一粪三检)检测华支睾吸虫虫卵并计数。通过问卷调查收集被调查者社会人口学等相关信息。从镜检阳性样本中随机选取部分新鲜粪样提取DNA, PCR扩增华支睾吸虫内转录间隔区2 (ITS2),测序后在NCBI核酸数据库作比对分析。结果共调查400人,检出华支睾吸虫虫卵阳性208人,感染检出率为52.0%(208/400),感染者以轻度感染为主(69.2%, 144/208)。天平镇华支睾吸虫感染检出率为66.5%(133/200),高于金鸡镇的37.5%(75/200)(χ2=33.69, P 0.01)。男性感染检出率为58.7%(131/223),高于女性的43.5%(77/177)(χ2=9.18, P 0.01); 30～39岁组感染检出率最高,为63.8%(60/94);高中及以上学历人群感染检出率最高,为68.0%(17/25)。不同年龄组、教育程度人群感染检出率差异有统计学意义(χ2=37.1, 23.02; P 0.01)。PCR扩增出156 bp的华支睾吸虫特异性条带,其序列与越南岘港分离株ITS2 (GenBank登录号:MF319655)的一致性为100%。结论广西藤县人群华支睾吸虫感染检出率为52.0%,属于超重流行区;男性、青壮年是华支睾吸虫高感染人群。广西藤县的华支睾吸虫ITS2序列与越南岘港分离株的基因型一致。     

B超疑诊华支睾吸虫感染者实验室检测结果分析

目的探讨B超诊断华支睾吸虫感染的临床应用价值。方法采用改良醛醚法检查粪便虫卵、ELISA法测定血清抗体,对经B超检查疑为华支睾吸虫感染的就诊者进行调查测定。结果实验室检测B超怀疑者269例,检获虫卵和(或)检出抗体146例,阳性率为54.3%。男性检测阳性率60.2%(130/216),女性30.2%(16/53)。有食鱼生史者(58.5%)捡出率高于无食鱼生史者(33.3%),但无统计学意义。对164例进行虫卵及抗体两项检测,虫卵及抗体均未检获(双阴性)者61例(37.2%)。认为,当前B超检查华支睾吸虫感染仍存在较高假阳性率。结论B超诊断华支睾吸虫病假阳性率很高,作为一项诊断技术有待完善和改进。     

华支睾吸虫感染是胆囊结石患者合并壁问结石的危险因素

目的探讨华支睾吸虫感染与胆囊结石患者合并壁间结石的关系。方法回顾性分析2011年1～12月间连续340例实施硬镜取石保胆手术的胆囊结石病人合并胆囊壁间结石情况,及其与华支睾吸虫感染、年龄、性别、术前血糖、血脂水平、乙肝病毒感染、胆囊结石的数量和大小的关系。结果①340例胆囊结石患者中发现合并壁间结石79例（23．2％）检出华支睾吸虫感染阳性153例（45．0％）。②华支睾吸虫感染阳性患者合并壁间结石49例（49／153,32．0％）;感染阴性患者合并壁间结石30例（30／187,16．0％）,感染阳性者合并结石率较高（P=0．01）;79例合并壁间结石的病人中,47例壁间结石内发现华支睾吸虫卵（59．5％）。③Logistic回归分析显示,合并壁间结石的发生,与年龄、性别、术前血糖、血脂水平、乙肝病毒感染、胆囊结石的数量和大小等因素关系不大,而与华支睾吸虫感染有关（OR-2．29;95％CI=1．35～3．86,P=0．002）。结论华支睾吸虫感染是胆囊结石患者合并砖间结石的危险因素．。