不同浓度七氟烷对老年大鼠认知功能的影响

目的 探讨不同浓度七氟烷对老年大鼠认知功能的影响.方法 18月龄雄性SD大鼠40只,体重500～650 g,随机分为3组,对照组(C组,n=8)吸入空气,1.5%七氟烷组(S1组,n=16)吸入1.5%七氟烷2 h,3.0%七氟烷组(S2组,n=16)吸入3.0%七氟烷2 h.于吸入七氟烷后1、7 d(T1.2)S1组和S2组随机取8只大鼠,采用Y型迷宫实验行认知功能测试,认知功能测试后12 h时处死大鼠,断头取脑,采用RT-PCR方法测定左侧海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)mRNA表达,采用免疫组化法检测右侧海马NR2B蛋白表达.结果 与C组比较,S2组吸入七氟烷后1 d大鼠认知功能减退,右侧海马NR2B蛋白、左侧海马NR2B mRNA表达上调(P<0.05),S1.组上述指标差异无统计学意义(P0.05).结论 吸入1.5%七氟烷后老年大鼠认知功能无明显变化;吸入3%七氟烷后1 d老年大鼠认知功能减退,可能与其上调海马含2B亚基的NMDA受体表达有关.     

大鼠妊娠前后吸入异氟烷或七氟烷对子代海马NMDA受体表达的影响

目的 探讨大鼠妊娠前后吸入异氟烷或七氟烷对子代海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体表达的影响.方法 雌性SD大鼠30只,3月龄,体重250～ 300 g,采用随机数字表法,将其分为5组(n=6):对照组(C组)、妊娠前1d吸入1.6％异氟烷6h组(BI组)、妊娠6、10、14和18d时吸入1.6％异氟烷6h组(PI组)、妊娠前吸入2.4％七氟烷6h组(BS组)和妊娠6、10、14和18d吸入2.4％七氟烷6h组(PS组).于出生当天(T1)、出生后第7(T2)、14(T3)和28天(T4)时各组按窝别随机取12只子鼠处死取海马,采用免疫荧光和RT-PCR法检测NMDA受体(NRI、NR2A和NR2B)的表达水平.结果 与C组比较,BI组和BS组子鼠海马NMDA受体表达差异无统计学意义(P＞0.05),PI组和PS组T1-3时子鼠海马NR1和NR2A表达上调,NR2B表达下调,NR1 mRNA和NR2A mRNA表达上调,NR2B mRNA表达下调(P＜0.01),T4时NMDA受体表达差异无统计学意义(P＞0.05);与PI组比较,PS组T1-3时子鼠海马NR1和NR2A表达上调,NR2B表达下调,NR1 mRNA和NR2A mRNA表达上调,NR2B mRNA表达下调(P＜0.05或0.01),T4时NMDA受体表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 妊娠前吸入异氟烷或七氟烷对子鼠海马NMDA受体表达无影响,妊娠后吸入异氟烷或七氟烷可引起子鼠海马NMDA受体表达异常,可能引起子鼠海马神经细胞凋亡和神经系统发育及认知功能异常.     

反复吸入七氟醚对老龄大鼠海马组织Apaf-1和Caspase-9 mRNA表达的影响

目的 探讨反复吸入七氟醚对老龄大鼠海马组织凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)mRNA表达的影响.方法 健康Wistar大鼠30只,月龄22月,体重380～770 g,雌雄各半,随机分为4组:对照组(n=8,Ⅰ组)、2%七氟醚组(n=8,Ⅱ组)、3%七氟醚组(n=8,Ⅲ组)及颈总动脉结扎+2%七氟醚组(n=6,IV组).Ⅰ组不吸入七氟醚,Ⅱ组及Ⅲ组分别吸入2%、3%七氟醚,100 min/d,连续5 d.Ⅳ组结扎左侧颈总动脉,1周后吸入2%七氟醚,100 min/d,连续5 d.停止吸入七氟醚后第1天开始采用Morris水迷宫实验测定大鼠认知功能,4次/d,连续测定5 d(T_(1～5)),记录潜伏期、平台象限活动时间与总游泳时间的百分比(Tp/T)及撤去平台后2 min内的游泳轨迹.水迷宫实验结束后采用RT-PCR法测定海马组织Apaf-1、Caspase-9 mRNA的表达水平.结果 与T_1时比较,Ⅰ组T_(3～5)、Ⅱ组及Ⅲ组T_(2～5)时、Ⅳ组T_(4,5)时潜伏期缩短(P<0.05或0.01);与Ⅰ组比较,Ⅲ组T_1时、Ⅳ组T_(1～5),时潜伏期延长,Ⅲ组及Ⅳ组Tp/T降低,Ⅳ组Caspase-9 mRNA表达上调(P<0.05或0.01).撤去平台后,Ⅱ组大鼠游泳轨迹明显集中在平台象限(Ⅳ象限),Ⅲ组和Ⅳ组大鼠游泳轨迹明显散乱.结论 反复吸入七氟醚可导致老龄大鼠认知功能障碍,其机制与海马组织Apaf-1及Caspase-9 mRNA的表达无关.     

孕早期七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能的影响

目的 评价孕早期七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能的影响.方法 孕5～7d的SD大鼠30只,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):正常对照组(C组)、吸入七氟醚4h组(S1组)和吸入七氟醚8h组(S2组).S1组和S2组分别吸入95％氧气-1.8％七氟醚4h和8h,氧流量2L/min,C组吸入95％氧气8h.分别于出生后20、30 d取5只母鼠的子鼠,采用Morris水迷宫实验测定认知功能,持续7d,然后处死子代大鼠,分离海马组织,测定N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)mRNA及其蛋白和hippyragranin mRNA的表达水平.结果 3组子代大鼠水迷宫实验结果、NR2B mRNA及其蛋白和hippyragranin mRNA表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 孕早期七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能无影响.     

咪唑安定、异丙酚和氯胺酮对老年大鼠认知功能的影响

目的探讨咪唑安定、异丙酚和氯胺酮对老年大鼠认知功能及海马N-甲基-D-天冬氨酸受体亚单位NR1、NR2B mRNA表达的影响。方法 32只老年Wistar大鼠随机分为4组,对照组(N组, n=9),咪唑安定组(M组,n=8),异丙酚组(P组,n=7),氯胺酮组(K组,n=8),M、P、K组分别以 30、60、80mg·kg-1·d-1的剂量腹腔注射咪唑安定、异丙酚、氯胺酮,连续3 d,N组给予生理盐水2 ml。于停药后1d行水迷宫测试,连续3 d,记录潜伏期(入水时至找到平台的时间)及游泳距离(入水时至找到平台的行程),连续测试3 d,末次迷宫测试结束后1h处死大鼠,用逆转录-聚合酶链反应方法测定海马NR1、NR2B mRNA表达。结果与水迷宫测试1d比较,N、K、P组水迷宫测试3 d潜伏期缩短及游泳距离缩短,与N组比较,K组水迷宫测试1 d潜伏期延长,水迷宫测试2 d游泳距离延长,M组 NR1 mRNA表达增加,P、K组NR2B mRNA表达降低(P<0．05或0．01)。结论咪唑安定和异丙酚对老年大鼠认知功能没有明显影响;氯胺酮对老年大鼠认知功能有短暂的抑制作用;海马NR1、NR2B mRNA表达与认知功能无关。     

七氟烷对新生大鼠学习记忆功能的影响

目的 探讨七氟烷麻醉对新生大鼠学习记忆功能的影响.方法 新生7dSD大鼠80只,采用完全随机设计随机分为5组(每组16只):A、B组分别吸入3％七氟烷6h和2 h;C、D组分别吸入1.5％七氟烷6h和2h;E组吸入空气对照.新生大鼠麻醉后分别于第21～23天(Ⅰ期)和第60～62天(Ⅱ期)各组行Y型迷宫试验后立即处死,取大鼠脑海马组织,进行免疫组织化学染色,测定N-甲基-D-天冬氨酸受体1(N-nethy-D-aspatrate receptor 1,NMDAR1)的表达.结果 与E组比较,A组Ⅰ期Y型迷宫第1天测试结果中的全天总反应时间(total reaction time,TRT)和错误次数(error number,EN)分别为(100±19)s和(9.2±1.1)次(P＜0.05),第2天～第3天时无统计学差异,余各组Ⅰ期Y型迷宫测试结果无统计学差异(P＞0.05);与E组比较,Ⅱ期各组Y型迷宫测试结果均无统计学差异(P＞0.05).Ⅰ、Ⅱ期各组海马NMDAR1的表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 吸入1.5％七氟烷不会导致幼年大鼠学习记忆功能减退;吸入3％七氟烷6h对幼年大鼠早期可产生一过性学习记忆功能减退,对远期学习记忆功能未见明显影响.     

七氟烷后处理对大鼠海马缺血性损伤及胰岛素样生长因子-1表达的影响

目的 观察不同浓度七氟烷后处理对大鼠海马缺血性损伤的保护作用及其对胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)表达的影响.方法 选取雄性SD大鼠,随机分为6组:假手术组(S)、缺血但无后处理组(C)、吸氧后处理组(O_2)、不同浓度七氟烷后处理组(Sevo1组、Sevo2组、Sevo3组);不同浓度七氟烷后处理组于脑缺血/再灌注即刻给予吸入1.5%(Sevo1组)、2.4%(Sevo2组)、3.0%(Sevo3组)的七氟烷30 min.采用大脑中动脉闭塞(MCAO)改良模型,于再灌注后的24、48、72h对海马进行组织病理学观察及IGF-1 mRNA检测.结果 与S组相比,C组各时间点大鼠海马IGF-1 mRNA的表达增加(P＜0.05)且海马组织出现病理学损伤;与C组相比,Scvo2组、Scvo3组各时间点的海马IGF-1 mRNA表达进一步增加(P＜0.05),且海马组织病理学损伤较轻;Sevo1组与C组相比,海马IGF-1mRNA的表达及病理学损伤无明显差异.结论 较高浓度的七氟烷后处理可以通过上调海马IGF-1及其受体系统而发挥中枢神经保护作用.     

异氟烷对发育期大鼠海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表达的影响

目的 探讨异氟烷对发育期大鼠海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表达的影响.方法 出生7 d的SD大鼠64只,随机分为2组(n=32):对照组(C组)和异氟烷麻醉组(I组).I组大鼠吸入1.5%异氟烷麻醉6 h,C组吸入空气.I组于麻醉前(T0,基础状态)、麻醉2 h(T1)、4 h(T2)、6 h(T3)、麻醉停止后4 h(L)、6 h(T5)、12 h(T6)、24 h(T7)时,C组在对应时点各取4只大鼠,测定海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA及TNF-α mRNA的表达水平.结果 C组各时点海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA比较差异无统计学意义(P＞0.05);与C组比较,I组海马T1～5 时IL-1βmRNA表达上调,T2,3 时IL-6 mRNA表达上调,T1～6时TNF-α mRNA表达上调(P＜ 0.05).结论 1.5%异氟烷麻醉可短暂上调发育期大鼠海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA的表达.     

七氟醚对老年大鼠术后认知功能及海马miR-132表达的影响

目的 探讨七氟醚对老年大鼠认知功能及海马miR-132表达的影响.方法 雄性SD大鼠60只,18～20月龄,行水迷宫训练5d后,按随机数字表法分为对照组(C组)和七氟醚组(S组),每组30只.S组2％七氟醚,C组纯氧处理后6h、1d、3d、7d进行水迷宫实验,记录逃避潜伏期和游泳总距离.各时点水迷宫实验结束后处死大鼠取海马组织,采用实时定量聚合酶链反应检测海马组织内miR-132的表达.结果 与C组比较,S组麻醉后6h、1d、3d、7d水迷宫测试的逃避潜伏期及游泳总距离明显延长,海马miR-132表达(0.41±0.03、0.43±0.04、0.51±0.03、0.62±0.05)明显降低(P＜0.05).S组内,与麻醉后6h比较,麻醉后1d及以后时间点水迷宫测试的逃避潜伏期[(69±10)、(61±11)、(43±9)s]明显缩短(P＜0.05);麻醉后3、7d水迷宫测试的游泳总距离[(1 424±198)、(1 052±134) cm]明显缩短(P＜0.05),海马miR-132的表达明显增加(P＜0.05).S组内,麻醉后7d与麻醉后各时间点比较,水迷宫测试的逃避潜伏期及游泳总距离明显缩短(P＜0.05),海马miR-132的表达明显增加(P＜0.05).结论 七氟醚可导致老龄大鼠术后认知功能障碍,其机制可能与其抑制海马组织内miR-132表达有关.     

孕晚期七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能和海马神经元树突棘发育的影响

目的 探讨孕晚期不同浓度七氟醚麻醉对子代大鼠认知功能及树突棘发育的影响.方法 取SD孕鼠16只,用随机数字表法将其分为4组(每组4只):对照组(C组)、1.5％七氟醚麻醉组(S1组)、2.8％七氟醚麻醉组(S2组)和3.3％七氟醚麻醉组(S3组).七氟醚麻醉组母鼠于孕18～20 d进行每天1次的七氟醚麻醉,S1组、S2组和S3组孕鼠分别使用1.5％、2.8％和3.3％的七氟醚吸入4h并保持0.5、1.0、1.5 MAC;C组仅置于麻醉箱内,通入相同流量氧气暴露4h.于出生后21 d对各组子代大鼠水迷宫测定其认知功能,出生后28 d完成水迷宫测试后处死子代大鼠,采用高尔基染色法进行海马树突棘密度测定,采用RT-PCR法测定caspase-3 mRNA表达.结果 各组子代大鼠游泳路程、逃避潜伏期、穿越平台次数及平台所在象限停留时间比较差异无统计学意义(P＞0.05).与C组[(12±3)/10 μm]比较,S3组大鼠海马神经细胞树突棘密度降低[(9±3)/10μm](P＜0.05).各组子代大鼠海马内caspase-3 mRNA表达变化差异无统计意义(P＞0.05).结论 1.5 MAC七氟醚麻醉4h可降低子代大鼠海马内神经细胞树突棘密度,但未对子代大鼠认知功能及caspase-3 mRNA表达产生影响.     

反复吸入七氟烷对幼年大鼠认知功能的影响

目的 评价反复吸入七氟烷对幼年大鼠认知功能的影响.方法 健康雄性SD大鼠108只,25～35日龄,体重90～100 g,随机分为6组(n=18),C1组、C2组和C3组每天同一时间吸入纯氧0.5 L/min,1 h/次,分别吸入1、3、5 d;S1组、S2组和S3组每天同一时间吸入2.3%七氟烷及纯氧0.5 L/min,1 h/次,分别吸1、3、5 d.干预结束后7 d,各组随机取10只大鼠进行水迷宫实验,记录达标所需训练次数、逃避潜伏期及进入盲端次数;其余8只记录神经电生理强直刺激后群峰电位(PS)振幅,计算长时程增强(LTP)诱发成功率.结果 各组大鼠水迷宫实验达标所需训练次数、逃避潜伏期及进入盲端次数差异无统计学意义(P>0.05).与C3组比较,S3组LTP诱发成功率降低(P<0.05);C1组与S1组比较、C2组与S2组比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 反复吸入七氟烷虽可抑制幼年大鼠LTP形成,但抑制程度较轻,对认知功能无明显影响.     

七氟醚对不同性别大鼠海马神经元p-CREB1表达的影响

目的 评价七氟醚对不同性别大鼠海马神经元磷酸化cAMP反应元件结合蛋白1(p-CREB1)表达的影响.方法 健康成年雌性SD大鼠30只,3月龄,体重180～220 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为2组(n＝15):对照组(Fc组)和七氟醚组(Fs组);健康成年雄性SD大鼠28只,3月龄,体重380-440 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为2组(n＝14):对照组(Mc组)和七氟醚组(Ms组).Fc组和Mc组吸入95％氧气(流量4 L/min)2 h,Fs组和Ms组吸入3％七氟醚2h.于停止吸入七氟醚后2d时行避暗实验;于停止吸入七氟醚后3～7d时行Morris水迷宫实验,第7天认知功能测定结束后处死大鼠,取脑组织,剥离海马,采用Western blot法检测海马组织p-CREB1及Bcl-2、caspase-8的表达水平.结果 与Fc组比较,Fs组停止吸入七氟醚后3d时逃避潜伏期延长,游泳总路程增加,海马组织p-CREB1和Bcl-2表达下调,caspase-8表达上调(P<0.05);与Mc组比较,Ms组停止吸入七氟醚后3～6d时逃避潜伏期延长,游泳总路程增加,海马组织p-CREB1和Bcl-2表达下调,caspase-8表达上调(P<0.05);与Fs组比较,Ms组停止吸入七氟醚后4～6d时逃避潜伏期延长,游泳总路程增加,海马组织p-CREB1和Bcl-2表达下调(P<0.05).结论 七氟醚可通过抑制海马神经元CREB1蛋白磷酸化,上调caspase-8蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达,促进神经元凋亡,导致大鼠认知功能减退,且对雄性大鼠的效应更明显.     

七氟醚激活海马线粒体自噬诱导老年小鼠认知功能损伤

目的 探讨七氟醚对老年小鼠海马线粒体自噬和认知功能的影响.方法 雄性C57BL/6J小鼠48只,18～20月龄,体重35～40 g.采用随机数字表法将小鼠为三组:对照组(C组)、吸入3％七氟醚组(S组)和吸入3％七氟醚+自噬抑制剂三甲基腺嘌呤组(3-MA组),每组16只.C组小鼠吸入空氧混合气体6 h.S组和3-MA组...     

七氟醚不同吸入时间对老年大鼠认知功能的影响

目的 评价七氟醚不同吸入时间对老年大鼠认知功能的影响.方法 健康SD雄性大鼠40只,月龄18月,体重(600±50)g,采用完全随机法分为5组(每组8只):对照组(C组)、吸入3％七氟醚0.5 h组(S1组)、吸入3％七氟醚1h组(S2组)、吸入3％七氟醚2h组(S3组)、吸入3％七氟醚4h组(S4组).所有组于干预结束后第2天行水迷宫实验,于水迷宫实验结束后15 min处死大鼠,取海马组织,采用Western blot法测定海马N-甲基-D-天门冬胺酸受体2B亚基(N-methyl-D-aspartatereceptor type 2B,NR2B)的表达.结果 与C组平台穿越次数[(5.5±1.2)次]比较,S1组[(7.3±1.7)次]明显增多(P＜0.05),S3组[(3.8±1.0)次]和S4组[(1.9±1.0)次]均明显减少(P＜0.05);与S3组比较,S4组减少较为明显(P＜0.05).与C组目标象限停留时间[(48.2±6.2)s]比较,S1组[(56.8±5.1)s]明显延长(P＜0.05),S3组[(39.1±4.0)s]和S4组[(31.6±3.2)s]均明显缩短(P＜0.05);与S3组比较,S4组缩短较为明显(P＜0.05).与C组(1.00)比较,S1组(0.69±0.88)NR2B蛋白相对密度减少(P＜0.05),S3组(1.47±0.17)和S4组(2.17±0.10)NR2B蛋白相对密度均增多(P＜0.05),与S3组比较,S4组增多更为明显(P＜0.05).结论 吸入3％七氟醚2h或4h均可导致老年大鼠认知功能下降,吸入3％七氟醚4h更为明显,其机制可能与海马中过度表达NR2B蛋白有关.     

孕早期吸入安氟醚对子代大鼠认知功能的影响

目的 探讨孕早期吸入安氟醚对子代大鼠认知功能的影响.方法 孕8～10 d SD大鼠30只,随机分为对照组(C组)、吸入安氟醚4 h组(E1组)和吸入安氟醚8 h组(E2组),每组10只.E1组和E2组分别吸入1.7%安氟醚4和8 h,氧流量2 L/min,C组吸入等流量氧气.于出生后20和30 d,采用Morris水迷宫实验测试子代大鼠的认知功能.结果 与C组比较,E1组和E2组出生后20和30 d时子代大鼠认知功能测试第3至5天逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,平台象限停留时间缩短(P＜0.05);E1组和E2组子代大鼠上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 孕早期吸入安氟醚可降低子代大鼠的认知功能.     

七氟醚与异丙酚对颅内动脉瘤夹闭术患者脑能量代谢影响的比较

目的 比较七氟醚与异丙酚对颅内动脉瘤夹闭术患者脑能量代谢的影响.方法 择期拟行颅内动脉瘤夹闭术的患者68例,ASA分级Ⅱ级或Ⅲ级,年龄22 ～ 62岁,体重52～81 kg,Hunt- Hess 分级Ⅱ或Ⅲ级,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=34):异丙酚组(P组)和七氟醚组(S组).麻醉诱导时P组靶控输注异丙酚,血浆靶控浓度2.0 μg/ml,S组吸入8％七氟醚.麻醉维持时P组靶控输注异丙酚,血浆靶浓度1.5 μg/ml,S组吸入2％七氟醚.于临时阻断前5 min(T0)、临时阻断5 min(T1)、10min(T2)、15 min(T3)、动脉瘤夹闭10 min (T4)、20 min (T5)和40 min (T6)时,收集脑组织微透析液,采用邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱分析法结合荧光法检测微透析液葡萄糖、乳酸和丙酮酸浓度,计算乳酸/丙酮酸比(L/P比).结果 与P组比较,S组T1～ T6时微透析液葡萄糖、乳酸和丙酮酸浓度升高,T2～T4时L/P比降低(P＜0.05).与T0时比较,两组T1～T6时微透析液葡萄糖浓度降低,乳酸浓度升高,T1～T4时丙酮酸浓度降低,T5、T6时丙酮酸浓度升高,T1～T5时L/P比升高(P＜0.05);与T3时比较,两组T～T6时微透析液葡萄糖浓度和丙酮酸浓度升高,L/P比降低,T5、T6时乳酸浓度降低(P＜0.05).结论 七氟醚改善颅内动脉瘤夹闭术患者脑能量代谢的效果优于异丙酚.