自体骨髓干细胞移植治疗下肢慢性缺血性疾病的疗效观察

目的探讨自体骨髓干细胞移植应用于下肢慢性缺血性疾病的临床疗效评价其疗效。方法分析应用自体骨髓干细胞移植法治疗的下肢慢性缺血性疾病患者40例的临床资料。将患者随机等分为2组。第1组采用自体骨髓干细胞下肢肌内注射法移植,第2组采用下肢动脉腔内注射法移植。患者在抽取骨髓前均使用粒细胞集落刺激因子(GCSF)动员骨髓细胞2～3d,300μg/d,动员末日抽取骨髓血200mL,经分离纯化后移植入患肢(双下肢患者选取症状重侧)。每月定期电话随访症状的变化。6个月后复查皮温、经皮氧分压(TcPO2)、踝肱指数(ABI)、数字减影血管造影(DSA),随访内容包括疼痛、冷感、麻木、跛行距离、溃疡坏疽情况。结果全部患者获得随访,移值后6个月各项观察指标与移植前对比,患肢皮温、TcPO2变化差异有统计学意义(P0.01);ABI变化差异无统计学意义(P0.05);侧支循环再生及临床症状各指标总有效率均≥60%。无严重并发症发生。结论经动员刺激后的自体骨髓干细胞移植治疗下肢慢性缺血性疾病是一种简单、安全、有效的方法 。     

自体骨髓干细胞和外周血干细胞移植治疗下肢缺血的对比研究

目的 比较自体骨髓干细胞和外周血干细胞移植治疗下肢缺血的临床疗效。方法 2004年12月～2005年12月,对42例下肢缺血患者分别采用骨髓干细胞移植（A组,n=21）和外周血干细胞移植（B组,n=21）。其中男32例,女10例;年龄34～80岁,平均65．6岁。糖尿病下肢缺血28例,血栓闭塞性脉管炎8例,单纯下肢动脉硬化闭塞症6例。缺血病程：3个月～5年,平均2．1年。治疗后4周,应用主观标准包括疼痛、冷感、麻木以及客观标准包括间歇性跛行距离、踝肱指数（ankle brachial index,ABI）、经皮氧分压、血管造影、截肢率和足部创面变化等一系列指标评价其疗效。结果 治疗后4周,A、B组疼痛缓解总有效率分别为88．2％和89．5％（P〉0．05）,冷感缓解改善率分别为94．4％和94．7％（P〉0．05）,麻木改善有效率分别为69．2％和66．7％（P〉0．05）。A、B组ABI分别增加38．1％和33．3％（P〉0．05）;经皮氧分压（TcPO2）有效率分别增加85．7％和90．5％（P〉0．05）;新生侧支血管评估：A、B组分别有12例和9例患者术后复查血管造影,A、B组总有效率分别为83．3％和77．8％（P〉0．05）;截肢率评价：两组截肢率均为9．1％（P〉0．05）;足部创面变化,A、B组有效率分别为60．0％和66．7％（P〉0．05）。40例患者获随访3～15个月,平均8个月。主观评价,A、B组有效率分别为75．0％和70．0％（P〉0．05）。客观评价：A、B组ABI较术前分别增加60．0％和65．0％;A、B组TcPOz较术前分别增加80．o％和75．0％;A、B组新生侧支血管总有效率分别为90．0％和84．6％;A、B组溃疡面除B组1处明显缩小外,其余均愈合,客观评价指标两组比较差异均无统计学意义（P〉0,05）。结论 无论是骨髓干细胞还是外周血干细胞移植治疗下肢缺血都是有效的方法;但对同时伴心脑血管病变的患者,进行自体干细胞移植,尤其是采用外周血干细胞移植需特别慎重。     

骨髓动员与非动员自体骨髓源单个核细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎的疗效比较

目的观察骨髓动员与非动员自体骨髓干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎（TAO）的疗效并进行对比分析。方法25例严重缺血的TAO患者分为A、B两组,A组12例为骨髓动员组,B组13例为非动员组。两组患者抽取骨髓血150～200ml,分离纯化后行下肢肌肉注射法移植术,观察丰观及客观指标进行疗效评价。结果移植2个月后两组多数患者疼痛和冷感有缓解,但缓解率两组无差异,两组溃疡愈合率无差异;经平均10个月随访,两组主观症状缓解率及溃疡愈合率差异无统计学意义（P〉0．05）。移植2个月后踝肱指数（ABI）和经皮氧分压（TcPO2）较术前有显著提高,A、B两组间差异有统计学意义;经平均10个月随访,两组间ABI和TcPO,差异有统计学意义（P〈0．05）。两组各有2例2条患肢溃疡无改善,无步匕亡及高位截肢者,全部患者无严重并发症发乍。结论骨髓动员和非动员两种方式自体骨髓干细胞移植均是安全、有效的治疗TAO手段．尤其对改善患肢症状及促讲溃疡的愈合效果明显,而骨髓动员组的疗效优于非动员组．     

自体骨髓干细胞移植治疗下肢缺血性疾病9例

目的 探讨自体骨髓干细胞移植术治疗下肢动脉缺血性疾病的临床效果.方法 回顾性分析9例行下肢血管造影检查确诊的下肢动脉缺血患者(9条患肢)采用自体骨髓干细胞移植术治疗的临床资料.结果 经治疗后,有6例患者(6条患肢)静息痛缓解或消失,溃疡愈合,间歇性跛行消失或距离延长,3例患者效果不佳.结论 自体骨髓干细胞移植术治疗下肢缺血性疾病具有一定的疗效,方法简单、安全.     

自体骨髓干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎

目的探讨自体骨髓干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎（TAO）的疗效及安全性。方法对13例TAO患者（17条患肢）行自体骨髓单个核细胞（BM-MNC）肌注移植术,采用主观指标包括患肢疼痛和冷感以及客观指标包括踝肱指数（ABI）、经皮氧分压（TcPO2）和足部溃疡变化进行疗效评价。结果移植治疗2个月后疼痛缓解者15条,冷感缓解者16条。移植前ABI为0.37±0.06,移植治疗后2个月为0.50±0.17（P〈0.05）,ABI改善者9条。TcPO2移植治疗前为（24.59±3.36）mmHg（1mmHg=0.133kPa）,移植治疗后2个月为（35.00±10.44）mmHg（P〈0.05）,TcPO2改善14条。溃疡改善者7条。经4～18个月（平均8个月）随访,患者主观症状改善者13条;客观指标ABI为0.45±0.14,与移植治疗前和移植治疗后2个月比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）;TcPO2为（33.24±10.43）mmHg,与移植治疗前和移植治疗后2个月比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,改善率为70.6%（12/17）。溃疡愈合者5条,有2例2条患肢的溃疡伴疼痛无缓解,无死亡及高位截肢者。所有患者经常规检查未发现视网膜增生、恶性肿瘤、心肌梗塞、脑梗塞、血管瘤形成等并发症。结论自体骨髓干细胞移植是一种安全、有效的治疗TAO手段,改善患肢症状及促进溃疡愈合。     

骨髓干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎5例

目的观察骨髓干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎(TAO)的疗效。方法采用重组人粒细胞集落刺激因子动员干细胞,采集5例TAO患者自体骨髓干细胞并分离,配成干细胞悬液注射于患肢小腿肌肉。结果治疗6个月后,患肢疼痛、冷感、麻木感症状减轻,平均级别分别下降2.2级、1.4级、2.4级;跛行距离延长,平均下降2.8级;溃疡逐渐愈合,溃疡面积平均下降2.8级;踝肱指数平均升高0.27。患者术后CT血管造影及数字减影血管造影检查可见患肢有新生血管。结论骨髓干细胞移植治疗TAO是一种可行且早期有效的方法。     

自体骨髓基质干细胞移植治疗糖尿病下肢血管病变

目的探讨自体骨髓基质干细胞(BMSC)移植治疗糖尿病下肢血管病变的可行性和临床效果。方法糖尿病致双下肢血管病变的患者30例(60条下肢),双侧下肢的病变程度接近。以患者自体BMSC对一侧下肢进行治疗,以另一侧下肢为自身对照,对双侧肢体肤色、肢体疼痛、冷感、溃疡、皮温改变、间歇性跛行变化及实验室检查进行比较,观察自体BMSC治疗糖尿病周围血管病变的安全性和有效性。结果治疗侧下肢在肤色、疼痛感、冷感、溃疡、皮温等方面均明显好于对照组,间隙性跛行亦有改善;术后6个月时行数字减影动脉血管造影,治疗组可见丰富的侧支血管形成。结论自体BMSC移植治疗糖尿病下肢血管病变具有可行性,可明显改善症状,效果肯定。     

干细胞移植治疗下肢缺血性疾病的临床进展

下肢缺血性疾病是一种严重危害健康的疾病.干细胞技术是21世纪最先进的技术之一,快速地应用于临床.其理论依据是干细胞为具有分化潜能的细胞,可以分化成各种机体组织细胞.自体干细胞移植正是利用这一原理,将外周血或骨髓中的干细胞移植到缺血的肢体肌肉或闭塞的血管中,使其分化、形成新生毛细血管,改善和恢复下肢血流,达到治疗下肢缺血的目的 .     

干细胞移植治疗下肢缺血性疾病的临床进展

下肢缺血性疾病是一种严重危害健康的疾病.干细胞技术是21世纪最先进的技术之一,快速地应用于临床.其理论依据是干细胞为具有分化潜能的细胞,可以分化成各种机体组织细胞.自体干细胞移植正是利用这一原理,将外周血或骨髓中的干细胞移植到缺血的肢体肌肉或闭塞的血管中,使其分化、形成新生毛细血管,改善和恢复下肢血流,达到治疗下肢缺血的目的 .     

自体骨髓干细胞移植治疗严重下肢缺血性疾病疗效的影响因素分析

目的探讨自体骨髓干细胞移植术治疗下肢严重缺血性疾病疗效的影响因素。方法回顾性分析本院2006年1月至2015年5月期间36例严重下肢缺血患者行自体骨髓干细胞移植治疗的临床资料,按缺血原因、缺血肢体远端输出道情况、缺血速度和年龄4个可能影响疗效的因素分组。结果缺血原因分组,动脉硬化性闭塞症组有效率33.3%(3/9),血栓闭塞性脉管炎组77.8%(14/18),糖尿病足组66.7%(6/9);远端输出道分组,输出道达小腿中段组有效率27.2%(3/11),踝关节76.9%(10/13),踝关节以下83.3%(10/12);缺血速度分组,急性缺血组有效率为0(0/4),慢性缺血组71.8%(23/32);年龄分组,≤60岁78.2%(18/23),60岁38.4%(5/13),差异均有统计学意义(P0.05)。结论自体骨髓干细胞移植术治疗下肢重度缺血性疾病的疗效与缺血原因、下肢的输出道、缺血的急慢性和年龄等因素有一定关系。     

骨髓动员刺激后自体骨髓源单个核细胞移植治疗下肢缺血的初步临床研究

目的观察骨髓动员刺激后自体骨髓单个核细胞移植治疗下肢缺血的初步疗效。方法2005年5月～2005年12月收治下肢缺血35例43侧患肢,男23例,女12例。年龄34～90岁,平均71．3岁。病因：糖尿病下肢缺血30例38侧患肢,单纯动脉硬化闭塞症2例2侧患肢,血栓闭塞性脉管炎3例3侧患肢。其中间歇性跛行期5例5侧患肢;静息痛期15例19侧患肢;组织缺损期15例19侧患肢,其中组织溃疡期9例12侧患肢;组织坏疽期6例7侧患肢。在抽取骨髓前使用粒细胞集落刺激因子刺激骨髓2～3d,每天300μg;抽取骨髓血130-200ml,经分离纯化后再行移植。采用下肢肌肉局部注射13例19侧患肢,下肢动脉腔内注射16例16侧患肢,下肢肌肉局部注射与动脉腔内同时注射6例8侧患肢进行移植。结果术后2个月肢体疼痛改善率为94．7％,冷感改善率为97．1％,肢体麻木改善率为93．3％。5例5侧患肢间歇性跛行距离均有不同程度增加。44．2％患者的踝肱比值（ankle／brachial index ABI）有不同程度增加。39侧患肢行经皮氧分压（transeutaneous oxygen pressure,TeP02）测定,92．3％有不同程度增高。患肢溃疡：在9例11侧患肢中,愈合1侧,明显缩小或缩小3侧,无变化7侧,其中3侧患肢被截肢。术后行血管造影评估25例34侧患肢,91．2％患肢的侧支循环有不同程度增加。并发症：骨髓动员刺激出现发热和轻微乏力各1例,均自行缓解;单个核细胞移植后1周出现轻度心肌梗死1例,药物治疗1周后恢复出院,1个月后因患肢疼痛加重行膝下截肢。32例40侧患肢获随访3412个月,症状消失13侧,明显改善15侧,改善8侧,复发2侧,无效2侧。客观评价标准与术前比较ABI增加25侧;TcPOz测定增加36侧;21侧患肢的血管造影显示90．5％患肢有新生侧支形成;10侧患肢足部溃疡7侧愈合,3侧明显缩小;3侧患肢截除坏疽足趾者于术后2～3个月愈合出院。结论经骨髓动员刺激后的骨髓单个核细胞移植下肢缺血,具有抽取骨髓血少、细胞量多、近期效果好且安全性高的优点,是除自体骨髓单个核细胞移植和外周血干细胞移植外的又一种治疗下肢缺血的新方法。远期效果尚需进一步随访。     

转化生长因子β1联合自体骨髓移植治疗兔桡骨骨折延迟愈合

目的探讨TGF-β1局部注射联合经皮自体骨髓移植对骨折愈合的促进作用。方法预制新西兰大耳白兔骨延迟愈合模型,将40只新西兰白兔随机分为A、B、C和D组,每组10只。每组分别在骨缺损模型建立后5天和10天于骨延迟愈合区注入自体血液2ml加生理盐水1ml;自体红骨髓2ml加生理盐水1ml;自体血液2ml加TGF-β11ml(100μg);自体红骨髓2ml加TGF-β11ml治疗。术后4周行组织学观察和骨痂内骨系细胞立体定量分析;术后8周行骨几何参数和骨密度(骨痂处)测定,骨生物力学测试和单位质量骨痂中钙含量测定。结果 D组成骨细胞的平均体积密度、骨痂厚度改变、钙含量、骨折愈合处的最大抗弯强度、极限应力、极限刚度和极限负荷时的能量吸收,均非常显著性高于A组(P<0.01),显著性高于B组和C组(P<0.05)。结论 TGF-β1局部注射联合经皮自体骨髓移植,是治疗骨折延迟愈合的一种有效方法。     

自体骨髓干细胞移植治疗下肢缺血的研究

目的　为临床探索一种更简便安全的下肢动脉缺血性疾病的治疗途径。方法　建立鼠后肢缺血动物模型 ,将取于自体的骨髓细胞制成悬液注射于缺血部位 ,4周后行动脉造影并取标本 ,测定毛细血管密度。结果　动脉造影显示大鼠缺血肢体侧支动脉明显增多 ,毛细血管密度增加。结论　自体骨髓干细胞移植可望成为一种简单的、有效的治疗下肢缺血的方法     

外源性骨髓细胞在体诱导形成毛囊上皮细胞的研究

目的 观察外源性骨髓细胞能否在体诱导形成皮肤的上皮细胞.方法 获取转增强型绿色荧光蛋白基因的C57BL/6J小鼠原代骨髓细胞和野生型C57BL/6J小鼠原代表皮干细胞,植入野生型C57BL/6J小鼠背部创面并打包.分A、B两组各10只,A组每只植入1.0×107个单纯骨髓细胞,B组每只植入混合骨髓细胞、表皮干细胞各1.0×107个.创面痊愈后应用荧光法和免疫组织化学技术检测新生皮肤内EGFP的表达.结果 两组动物3个月后创面痊愈并有完整的毛发生长.A组新生皮肤内未见EGFP的表达;B组所有新生皮肤(100%)均可见EGFP阳性细胞群,多分布在毛囊内.结论 创伤后小鼠毛囊的再生过程中,骨髓细胞-表皮干细胞接触诱导对骨髓来源细胞向毛囊上皮细胞转化至关重要.     

人工骨联合自体骨髓移植技术的骨缺损修复研究与应用

目的分析人工骨联合自体骨髓移植技术治疗骨缺损的临床疗效。方法选取2011年4月至2013年9月,来本院诊治的四肢粉碎性骨折术后骨缺损患者40例,随机分为两组（A、B组）,分别行自体髂骨植骨和人工骨联合自体骨髓移植治疗四肢粉碎性骨折所致骨缺损。术后观察两组骨折愈合时间,骨折愈合率,并发症的发生及骨缺损的修复和功能重建优良率。结果两组均行6～12个月随访,平均（9.14±1.36）月,所有患者植骨术后均无切口感染、发热等并发症。A组15例骨缺损区愈合良好,住院时间平均（19.36±2.54）天,骨折愈合时间平均（5.67±1.52）个月,骨缺损的修复和功能重建评价标准,优12例,良3例,可3例,差2例,优良率75%;B组18例骨缺损区愈合良好,住院时间平均（12.19±1.52）天,骨折愈合时间平均（3.61±1.13）个月,骨缺损的修复和功能重建评价标准,优16例,良2例,可2例,差0例,优良率90%。B组骨缺损治疗效果显著优于A组。结论人工骨联合自体骨髓移植较单纯自体髂骨移植治疗骨缺损更能促进骨痂生长,加速骨折后骨缺损愈合,更加有效地减少住院时间及骨折愈合时间,骨折愈合率更高,骨缺损修复和功能重建效果更加显著。     

Allogeneic mesenchymal stem cells regenerate bone in a critical-sized canine segmental defect

BACKGROUND: Mesenchymal stem cells from adult bone marrow are multipotent cells capable of forming bone, cartilage, and other connective tissues. In a previous study, we demonstrated that autologous mesenchymal stem cells could repair a critical-sized bone defect in the dog. The objective of this study was to determine whether the use of allogeneic mesenchymal stem cells could heal a critical-sized bone defect in the femoral diaphysis in dogs without the use of immunosuppressive therapy. METHODS: A critical-sized segmental bone defect, 21 mm in length, was created in the mid-portion of the femoral diaphysis of twelve adult dogs that weighed between 22 and 25 kg. Each defect was treated with allogeneic mesenchymal stem cells loaded onto a hollow ceramic cylinder consisting of hydroxyapatite-tricalcium phosphate. A complete mismatch between donor stem cells and recipient dogs was identified by dog leukocyte antigen typing prior to implantation. The healing response was evaluated histologically and radiographically at four, eight, and sixteen weeks after implantation. The radiographic and histological results at sixteen weeks were compared with the historical data for the control defects, which included defects that had been treated with a cylinder loaded with autologous mesenchymal stem cells, defects treated with a cylinder without mesenchymal stem cells, and defects that had been left untreated (empty). The systemic immune response was evaluated by the analysis of recipient serum for production of antibodies against allogeneic cells. RESULTS: For defects treated with allogeneic mesenchymal stem cell implants, no adverse host response could be detected at any time-point. Histologically, no lymphocytic infiltration occurred and no antibodies against allogeneic cells were detected. Histologically, by eight weeks, a callus spanned the length of the defect, and lamellar bone filled the pores of the implant at the host bone-implant interface. Fluorescently labeled allogeneic cells were also detected. At sixteen weeks, new bone had formed throughout the implant. These results were consistent with those seen in implants loaded with autologous cells. Implants loaded with allogeneic or autologous stem cells had significantly greater amounts of bone within the available pore space than did cell-free implants at sixteen weeks (p < 0.05). CONCLUSIONS: The results of this study demonstrated that allogeneic mesenchymal stem cells loaded on hydroxyapatite-tricalcium phosphate implants enhanced the repair of a critical-sized segmental defect in the canine femur without the use of immunosuppressive therapy. No adverse immune response was detected in this model.     

含自体富集骨髓干细胞松质骨移植与自体松质骨镶嵌移植修复关节软骨缺损的对比研究

目的：评价含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植与自体松质骨镶嵌移植两种方法修复兔膝关节骨软骨缺损的修复效果,为临床应用提供实验依据。方法：选健康3月龄新西兰兔16只,随机分成A、B两组,每组8只16膝。A组采用含富集自体骨髓干细胞的自体松质骨移植,B组采用自体松质骨移植。术后第12周处死动物取材,分别进行大体观察、光镜观察,并对观察指标采用Wakitani组织学评分法进行评分和秩和检验。结果：大体观察及光镜观察显示含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植组大体观察关节面大多呈乳白色,表面比较平整,与周围软骨融合较好,未发现裂隙;光镜检查见关节软骨的厚度为正常软骨的2/3左右,表面较光滑,与周围组织接合较好,大多为透明软骨细胞;组织学评分为（4.44±1.41）分。自体松质骨镶嵌移植组大体观察见关节面呈灰白色,表面稍有凹陷,欠光整;光镜检查见关节软骨的厚度较薄,为正常软骨的1/3～1/2,移植物中央区域厚度更薄,见成纤维细胞和极少量透明软骨细胞;组织学评分为（8.93±1.18）分。两组组织学评分比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植能以类透明软骨组织修复全层关节软骨缺损,可用于较大面积软骨缺损的修复。自体松质骨移植修复软骨缺损的能力较差。     

P‐I‐04 Treatment for Limb Ulcer with Severe Ischemia: Therapeutic Angiogenesis by Autologous Transplantation of Bone‐Marrow

Aim: Limb ulcer due to severe ischemia often needs revascularization. In our hospital, the result of lower extremity bypass surgery for these patients is satisfactory, however, indication of this procedure is limited pathologically and technically. We recently have demonstrated a possibility of efficacy of therapeutic angiogenesis by autologous bone marrow cell transplantation for severe ischemic ulcer of extremity. Methods: Eight patients (9limbs; 3limbs with arteriosclerosis obliterans, 6limbs with Buerger's disease) with ischemic ulcer of lower and/or upper extremity were treated with implantation of autologous bone marrow mononuclear cell into ischemic skeletal muscles. Four weeks after transplantation, efficacy of this procedure were evaluated by Visual Ana log Scale, angiography and Laser Doppler Flow Analysis (LDFA). Results: In 4 out of 9 limbs, the ulcers healed dramatically. Seven limbs revealed angiographically improvement and icrease of blood flow by LDFA. Conclusions: Our findings suggest that therapeutic angiogenesis by autologous bone marrow cell transplantation is an effective and safty strategy for patient with peripheral arterial disease. We considered that it is more effective to Buerger's disease than arteriosclerosis obliterans.