乳腺癌相关microRNA的研究进展

MicroRNAs是一类内源性稳定的非编码小分子RNA，在基因转录后水平调控细胞的增殖、凋亡和分化相关的基因表达，与肿瘤的发生和发展密切相关。本文综述了乳腺癌相关的microRNA，如何通过调控目标基因的表达以控制乳腺癌的发展。     

肝干细胞研究进展

肝移植是目前治疗终末期肝病的主要方法，但供肝短缺限制了其应用，导致许多患者未能获得肝移植。近年来，肝干细胞的分离鉴定、纯化培养技术日渐成熟，在动物实验和临床研究中均取得了较大进展。移植到受体的干细胞已被证实可以分化形成正常肝细胞，从而通过提高肝细胞数量来改善肝功能，延长了患者生存期，使其有机会获得肝移植。同时为急慢性肝损伤、肝代谢性疾病的治疗提供了新的细胞移植疗法，成为肝病学和干细胞研究领域的热点。     

结肠直肠癌相关microRNA研究进展

肿瘤的发生是一个多步骤、多阶段、多基因参与的过程。业已证实,microRNA（miRNA）在肿瘤生成过程中起着癌基因及抑癌基因的作用。miRNA是一种19~22个核苷酸序列的小RNA,通过与靶mRNA的特异性碱基配对导致其降解或抑制翻译,对基因进行转录后表达的调控。     

microRNA调控胰腺癌干细胞的作用研究进展

胰腺癌干细胞在胰腺癌的发生、发展、转移及治疗抗性与复发中起着重要作用,但是其中的调节机制仍不清楚。深入研究特定微小RNA调控胰腺癌干细胞的作用,对于阐明胰腺癌发生发展的关键机制具有重要意义,同时有望为胰腺癌的诊治提供新的靶点。     

Bmi-1与干细胞及肿瘤干细胞关系的研究进展

多梳基因Bmi-1属PcG家族的一员,其可导致某些抑癌基因失活并为调节肿瘤干细胞的自我更新和分化所必需,可以作为肿瘤干细胞分选扩增的分子标记物.现在很多肿瘤都可以分离出致瘤能力强、有自我更新和分化潜能的细胞称为肿瘤干细胞,本文对Bmi-1基因在干细胞及肿瘤干细胞方面的研究进展进行综述.     

Tet-on基因表达系统转染骨髓基质干细胞和诱导调控效应检测

目的 探讨利用Tet-on基因表达系统调控目的基因在骨髓基质干细胞中表达的可能性和量效关系，为利用该系统调控BMP基因在骨髓基质干细胞中的表达奠定基础。方法 以荧光素酶（luciferase)基因为目的基因，应用Lipofectamine介导的瞬间转染方法。将pTet-on调节质粒和pTRE-luciferase反应质粒共转染骨髓基质干细胞，加入系列浓度的强力霉素（doxycyline)后，观察doxy-cyline的诱导效应。结果 （1）pTet-on表达系统质粒DNA经HindⅢ单酶切，琼脂糖凝胶电泳后，可见6.02kb和1.38kb两个片段；pTRE-luciferase质粒经HindⅢ单酶切线性化，可见5.2kb的片段，均符合质粒图谱。（2）随着doxycyline浓度的增加，荧光素酶的活性也逐渐增加，未转染的骨髓基质干细胞虽经doxycyline诱导，但其RLU值与空白对照（蒸馏水）非常接近，说明未转染的骨髓基质干细胞不受doxy-cyline诱导，而转染的骨髓基质干细胞在未加入诱导剂量，其RLU（relative-luciferase-unit)值也接近空白对照值。结论 转染Tet-on基因表达控制系统的骨髓基质干细胞对doxycyline诱导具有较好的反应性，目的基因荧光素酶基因的表达效力对doxycyline具在严格的计量依赖关系。因此，利用Tet-on基因调控系统对目标基因在骨髓基质干细胞中的表达进行调控是可行的。     

肿瘤相关间充质干细胞的研究进展

间充质干细胞普遍存在于组织间质中，对组织损伤修复、机体免疫调控等均发挥重要作用。近年研究发现，肿瘤组织中普遍存在间充质干细胞，称为肿瘤相关间充质干细胞，且与正常组织内的间充质干细胞在调控功能、基因表型等方面有所区别。可以说，肿瘤相关间充质干细胞是独立于正常间充质干细胞的特殊亚型。本文对肿瘤相关间充质干细胞的来源、转化、功能及其临床价值进行综述。     

同源框基因在脂肪组织与间充质干细胞中的表达与调控的研究进展

现有的研究已经证明同源异型框（homeobox, Hox）基因参与器官发育、细胞分化以及细胞干性的调节。近年来,Hox基因的研究多围绕肿瘤相关机制,正常人体不同部位在生长发育过程中的胚胎起源差异,以及由此而出现Hox基因差异化表达。现就Hox基因在脂肪组织与间充质干细胞中的表达以及调控作用作一综述。总结这些表达差异与调控机制为后续研究提供思路及方向。     

胰腺癌干细胞的研究进展

肿瘤是一种由单克隆细胞起源、经无限增殖形成的恶性疾病。虽然肿瘤组织中的瘤细胞起源于同一细胞,但它们的生物学特性存在差异。肿瘤干细胞（cancer stem cell,CSC）是存在于瘤体内的极少数细胞,是一类对肿瘤的发生发展、维持、侵袭、转移和耐药起到关键作用的肿瘤细胞亚群。CSC能分化为占瘤体大部分的非成瘤细胞,后者只是维持肿瘤体积并无增殖能力,或只有有限的增殖能力,异位接种很难形成新的肿瘤[1]。     

毛囊干细胞定向分化过程中Wnt信号通路介导的基因调控

皮肤的毛囊干细胞具有自我复制以及多向分化潜能,在毛囊形态发育和定向分化过程中,Wnt信号通路起决定性作用。参与这条信号通路的重要蛋白质,如Wnt蛋白、Frizzled、B—catenin、GSK313、APC、Axin等研究相对较早,且颇为深入。但对于这条通路下游的调节因子,尤其是细胞核内关键性转录因子Tcf3、Lef1,以及它们所调控的一些重要基因c—myc、eyelinDl等的研究仍处于起步阶段。本文就Wnt信号通路介导的基因调节毛囊干细胞定向分化的研究现状进行综述．为构建组织工程皮肤提供理论参考。     

间充质干细胞的研究进展与临床应用前景

目的 介绍间充质干细胞（mesenchymal stem ceils，MSCs）的研究进展及其临床成用前景。方法 查阅国内外近年有关文献，并行综合分析。结果 由于MSCs能分化为多种类型的细胞，所以在细胞移植治疗和组织工程方面有广泛的应用。由于其能稳定表达转染到细胞内的目的基因。可治疗血友病、脑梗塞及骨缺损等，因此在基因治疗中应用广泛。其所具有的免疫调节特性，使它在免疫性疾病的治疗中也有广泛的用途。结论 MSCs是一种具有自我更新和多向分化潜能的干细胞，且体外易于扩增，是一种理想的细胞治疗和基因治疗的靶细胞，临床应用前景非常广阔。     

肝干细胞的研究进展及应用前景

目的阐述肝干细胞（liver stem cell，LSC）的研究进展并展望其应用前景。方法广泛查阅近年来相关文献，根据研究成果，综述LSC研究的最新进展。结果LSC向特定的细胞分化和增殖受多种因素影响。LSC活化、分离培养、筛选及鉴定等方法尚未成熟。结论随着研究不断地深入，LSC有望成为肝病治疗的新型种子细胞，但其研究有待进一步完善。     

骨髓间充质干细胞诱导肝移植术后免疫耐受的研究

目的研究骨髓间充质干细胞（Bone mesenchymal stem cell,BMSC）的免疫调节特性,评价其诱导肝移植术后免疫耐受的效果。方法贴壁分离法分离培养BMSC并鉴定其免疫表型。分别检测单纯的和用200U／ml干扰素-γ（interferon-γ,INF-γ）干预过的BMSC PDL-1、CD54、CD40、CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ的表达,并以此为调节细胞进行单向混合淋巴细胞实验。以CFDA标识BMSC观察其在体内向肝脏归巢情况。两袖套法建立Lewis-Brown Norway（BN）大鼠原位肝移植急性排斥反应模型。实验分2组,对照组行原位肝移植术＋输注生理盐水,实验组行原位肝移植术＋输注BMSC。观察术后一般情况、肝功能、肝脏病理、微嵌合体形成情况。结果培养出的BMSC细胞纯度高。INF-γ能上调CD54、PDL-1、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ的表达,CD40、CD80、CD86均为阴性表达。BMSC呈剂量依赖性抑制淋巴细胞增生,INF-γ能增强其抑制作用。BMSC在肝脏实质内有多处定居。术后所有大鼠存活均大于14天。与对照组比,实验组大鼠术后一般情况好,嵌合体形成明显,肝功能改善明显、肝脏免疫排斥轻。结论INF-γ能增强BMSC对淋巴细胞增殖的抑制作用,BMSC能诱导肝移植免疫耐受,减轻排斥反应。这为以后BMSC应用到临床提供有利证据。     

成体干细胞与干细胞疾病

目的 结合文献对成体干细胞的特性进行总结，描述干细胞疾病的定义及特性。方法 广泛查阅近期相关文献，回顾成体干细胞及干细胞疾病。结果 成体干细胞是一类位于成熟组织器官内、维持正常组织细胞数量和功能的原始细胞，具有自我更新和多潜能分化能力，随着生物个体生命周期增长，成体干细胞出现老化。起源于干细胞的疾病可视为干细胞疾病。当成体干细胞自我更新能力增强和／或分化障碍时，细胞增殖能力变强，引起增生性疾病特别是肿瘤疾病。当成体干细胞自我更新减弱，提前老化或分化不全时，可导致功能细胞形成减少，如不能满足组织器官功能的需要，将导致相应器官功能衰竭，形成退行性疾病。结论 对成体干细胞自我更新、分化及老化的研究，在理论上将指导干细胞疾病的研究，并有助于发展干细胞疾病的诊断及治疗方法。     

骨髓源性干细胞的异质性及在肠道修复中的作用研究进展

目的 对骨髓源性干细胞(bone marrow derived stem cells,BMDSCs)的异质性及其形成机制和意义进行综述,分析其在肠上皮重建中的作用和可能机制.方法 查阅和分析近年有关BMDSCs异质性和其在肠上皮损伤修复中作用的相关文献,并作进一步综合分析.结果 BMDSCs异质性可以解释其多向分化能力,可能以直接定植于肠道或通过和肠道干细胞融合以及促进损伤微环境的重建等多种机制参与肠上皮功能修复.结论 BMDSCs在炎症性肠病等胃肠道损伤和修复中具有广阔的应用前景.     

韧带损伤及愈合机制

目的 了解近年有关韧带损伤及愈合的研究与进展。方法 广泛查阅近年有关韧带损伤及愈合的基础和临床研究相关文献，对其损伤及愈合机制，愈合后的组织学、生物学特性和重建后移植物的愈合等进行综述。结果 当生物化学和力学环境发生变化时，韧带的质量会受到影响。韧带损伤后，只能依靠瘢痕组织的形成来达到愈合。重建后的韧带并不能恢复正常的超微结构、解剖学特征和生物力学性能。结论 韧带损伤后愈合的质量较差，目前尚无真正意义上重建正常韧带的方法。     

雪旺细胞促进骨髓间充质干细胞增殖的实验研究

目的通过雪旺细胞(Schwann cell,SC)与骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)复合培养,观察SC对MSCs增殖的影响,为其在构建组织工程血管中应用提供实验依据。方法选用体重40gSD大鼠,用组织块培养法获取SC,用骨髓差速贴壁法获取MSCs;用免疫组织化学法分别对两种细胞进行鉴定。用Transwell培养板复合培养两种细胞,实验组于板上层接种MSCs,下层接种SC;同时上下两层均接种MSCs设为对照组。各组均选择第1、3、5和7天4个时间点进行检测,用氚标胸腺嘧啶核苷酸标记MSCs,液体闪烁仪进行细胞计数(counts per minute,CPM)。提取实验组SC、MSCs和对照组MSCs的细胞蛋白,分别对血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和其受体Flk-1,协同受体1(neuropilin-1,NRP-1)进行Westernblot检测。结果SC呈梭形,表达S-100蛋白,阳性率达90%。MSCs表达CD105和CD44,不表达CD34和CD45。Transwell复合培养:MSCs,第1、3、5和7天增殖数量分别为2411.00±270.84、3016.17±241.57、6570.83±2848.27、6375.83±1431.28,明显大于对照组2142.17±531.63、2603.33±389.64、2707.50±528.55、2389.00±908.01,差异有统计学意义(P<0.05),实验组CPM值于第5天最高。于复合培养第5天Westernblot显示:SC表达VEGF、Flk-1和NRP-1;VEGF、Flk-1、NRP-1在实验组MSCs中表达明显强于对照组。结论两种细胞体外复合培养后,SC在第1、3、5和7天均能显著增加MSCs的数量,并促进增殖,增殖高峰在第5天。与SC复合培养后,MSCs表达VEGF明显增加,其相应受体Flk-1、NRP-1表达上调,SC通过促进MSCs分泌VEGF增加参与了细胞的增殖过程。     

胆总管下端奥狄氏括约肌运动的研究进展及临床意义

目的 回顾上来对奥狄氏括约肌运动的研究进展。方法 通过肌电图、动态肝胆扫描照相、内镜测压、实验室检查等手段探讨和评价奥狄氏括约肌的正常与异常运动。结果 内镜测压术是临床上鉴别奥狄氏括约肌正常和异常运动的金标准；某些外科手术或药物等会干扰其正常运动，引起奥狄氏括约肌运动紊乱症。结论 内镜切开括约肌是治疗奥狄氏括约肌运动紊乱症的重要措施；在外科实践中应重视对奥狄氏括约肌功能的保留。     

羊水干细胞的研究进展

目的综述羊水干细胞（amniotic fluid—derived stem cell，AFS）的研究进展及应用前景。方法查阅近年来有关AFS的研究文献，对AFS的起源、培养方法、鉴定、定向分化进行综述，并对其应用前景进行分析。结果1993年有研究提出AFS存在的可能性。在后续的研究中证实，AFS与其他干细胞一样存在一些表面标志物，并具有多分化潜能，在细胞治疗或组织工程研究中也有广阔的应用前景。结论AFS作为一种新的干细胞，有进一步研究的价值。     

肿瘤干细胞学说与肿瘤治疗

目的 分析近年来肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)领域的主要研究成果,为肿瘤治疗和CSC的研究提供思路.方法 广泛查阅近年来有关CSC与肿瘤治疗的相关文献,并进行总结和分析.结果 CSC的概念于2001年提出,至今已在多种组织中得到证实.CSC研究包括各种实体CSC分离鉴定、CSC起源、微环境、生长机制以及肿瘤治疗等方面.根据CSC学说,传统的肿瘤治疗方法存在缺陷,CSC新治疗思路可能彻底治疗肿瘤.结论 CSC学说目前还存在一些争议,但为肿瘤的治疗提出了革命性思路和方向.