MDM2与p53

癌症被认为是基因疾病，控制细胞分化的基因有缺陷就会导致癌症，这些基因可为癌基因也可为抑癌基因 [1]。 p53是研究最多的抑癌基因，它在 DNA转录、细胞生长和增殖以及许多代谢过程中有重要作用，大约 50％以上的肿瘤中都有 p53的突变 [2]。在一些有野生型 p53的肿瘤中，则有其它的因素改变阻断 p53的功能以促进肿瘤的生长，例如 MDM2 基因的扩增或 MDM2蛋白过度表达 [3]。     

MDM2与p53在卵巢上皮性肿瘤中的表达

[目的]探讨MDM2、p53在卵巢癌发生中的作用.[方法]用免疫组化SP法检测8例卵巢良性上皮性肿瘤、7例卵巢交界性上皮性肿瘤和19例卵巢癌中MDM2、p53蛋白的表达.[结果]在卵巢良性上皮性肿瘤、卵巢交界性上皮性肿瘤和卵巢癌中,MDM2的阳性表达率分别为12.50%(1/8)、28.59%(2/7)和47.37%(9/19);p53的阳性表达率分别为25.00%(2/8)、57.14%(4/7)和78.95%(15/19).3组中,MDM2阳性表达率无显著性差异(P>0.05),而p53在卵巢癌中的阳性表达率显著高于卵巢良性上皮性肿瘤和交界性上皮性肿瘤(P<0.05).在卵巢癌中,p53与MDM2表达的阳性率不相关(P>0.05).[结论]p53的异常表达与卵巢肿瘤的恶性表型相关.在卵巢癌的发生发展过程中,p53的异常表达比MDM2可能更有意义.     

p53与MDM2及MDMX的相互作用和研究进展

p53是重要的抑癌基因,在细胞周期阻滞、DNA损伤修复及细胞凋亡等生物过程中发挥重要作用,并已成为潜在的肿瘤治疗靶点。MDM2（Mdm2 p53 binding protein homolog）及MDMX（Mdm4 p53 binding protein homolog）是p53的主要抑制因子,两者相互协同并通过不同的信号途径抑制p53的活性。MDM2是p53的E3连接酶,介导p53的泛素化从而降低p53的稳定性。MD MX则主要通过与p53的转录活性区结合,抑制p53对其下游基因的转录活性,但并不介导p53的降解。MDM2与MDMX通过不同机制协同对p53产生抑制作用,其具体分子过程及作用机制繁多且复杂。本文就p53、MDM2及MDMX的相互作用及各蛋白的功能进行综述。      

横纹肌肉瘤P53,MDM2基因及p53,p21,p185蛋白表达检测比较

目的：探讨ｐ５３、ｐ２１、ｐ１８５蛋白表达及ｐ５３、ＭＤＭ２基因与横纹肌肉瘤（ＲＭＳ）分化和预后的关系，并对几种检测方法进行了比较。方法：应用免疫组化方法检测ＲＭＳｐ５３、ｐ２１、ｐ１８５蛋白表达，银染ＰＣＲＳＳＣＰ检测ＲＭＳｐ５３的突变，原位杂交检测ＲＭＳｐ５３和ＭＤＭ２基因。结果：ｐ５３、ｐ２１、ｐ１８５蛋白在ＲＭＳ的阳性率分别为６７２％（４１／６１）、６８（３４／５０）、６０％（３０／５０）；检测３０例ＲＭＳ，ｐ５３基因７例发生点突变原位杂交检测ＲＭＳ的ｐ５３、ＭＤＭ２基因突变的检出率分别为６６７％和７７４％；上述结果均与年龄、性别、肿瘤组织类型无关，而与肿瘤分化转移和预后有关。结论：ｐ５３、ｐ２１、ＭＤＭ２蛋白表达及癌基因检测均有助于判断肿瘤恶性程度和肿瘤预后，上述３种方法比较，免疫组化与原位杂交检测的阳性结果基本相符，提示免疫组化方法同样能反映肿瘤恶性程度和预后，是一种简便可行的检测方法。     

子宫颈上皮内瘤样病变和子宫颈鳞癌组织中p53与MDM2的表达及其与PCNA的关系

探讨ＭＤＭ２、ｐ５３蛋白、增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ ｃｅｌｌ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｔｉｇｅｎ,ＰＣＮＡ）在宫颈癌发生、发展中的作用。方法：用免疫组化ＳＰ法检测ＭＤＭ２、Ｐ５３蛋白及ＰＣＮＡ在７６例正常宫颈上皮、宫颈上内瘤样病变（ｃｅｒｖｉｃａｌ ｉｎｔｒａ－ｅｐｉｔｈｅｌｉａ ｎｅｏｐｌａｓｍ,ＣＩＮ）、颈鳞     

紫外线照射对乳腺癌细胞NFkB、p53和MDM2的影响

目的 了解NFkB家族蛋白在乳腺癌细胞系的表达及紫外线照射后所引起的变化。方法 用IL-15培养液培养并传代9个乳腺癌细胞系，收获细胞，对其进行胞浆、胞核蛋白质提取，Western印迹法观察NFkB家族蛋白及其抑制物的表达；采用20J/m^2剂量紫外线照射细胞，继续培养细胞并提取蛋白质进行检测。结果 9个乳腺癌细胞系p50、p65和1kB-α胞浆表达阳性率分别为：88．9％、55．6％、77．8％，胞核表达阳性率分别为：66．7％、44．4％、22．2％。紫外线照射后胞核p50、p65和IkB-α阳性率分别为：100％、100％、33．3％。p53在乳腺癌细胞表达阳性率为44．4％，MDM2表达阳性率为33．3％，紫外线照射后p53和MDM2表达阳性率分别为：66．7％、77．8％。结论 NFkB、p53和MDM2与乳腺癌细胞的发生、发展有关。紫外线照射可引起胞核NFkB及细胞MDM2阳性率明显提高．NFkB和MDM2可望成为判断乳腺痛预后新的标志物。     

非霍奇金淋巴瘤中p53、MDM2表达与组织学类型及预后的关系

非霍奇金淋巴瘤作为原发于淋巴系统的恶性肿瘤,其发生、发展是多因素相互作用的结果.近年来,分子遗传学研究表明抑癌基因p53是许多恶性肿瘤常见的共同损伤靶的,使其丧失功能的突变,及表达异常可导致肿瘤的形成.p53也可调节MDM2(murine double minute 2)基因表达,MDM2是一种进化保守基因,它作为一种高度扩增基因,可自发地导致肿瘤发生.本研究采用免疫组织化学的方法,检测89例不同病理类型非霍奇金淋巴瘤中p53、MDM2的表达,并结合临床分期,肿瘤巨块形成等临床特点,探讨这些因素与预后的关系.     

鼻咽癌p53 p21 WAF1和MDM2蛋白异常表达的临床意义

目的：探讨p53、p21^WAF1、MDM2蛋白在原发鼻咽癌（NPC）异常表达的临床意义。方法：采用LSAB法检测69例原发NPC组织中p53、p21^WAF1和MDM2蛋白的表达状况。结果：1）p53、p21^WAF1和MDM2蛋白在原发NPC组织的阳性表达率分别为79．7％、84．1％、和82．6％；高表达率分别为50．7％、46．4％和31．9％。2）p53蛋白的高表达率随TNM分期的升高而增多，P＝0．042。3）p53或MDM2蛋白高表达者的复发间期显著短于相应蛋白低表达／阴性者，分别P＝0．038和P＝0．002。4）p53和MDM2蛋白同时高表达者、MDM2蛋白高表达同时p21^WAF1蛋白低表达／阴性者的复发间期明显短于对照组，分别P＜0．001；p21^WAF1蛋白高表达同时p53蛋白低表达／阴性者、p53和MDM2蛋白同时低表达／阴性者的复发间期显著长于对照组，分别P＝0．002和P＝0．014。5）p53和MDM2蛋白高表达同时p21^WAF1蛋白低表达／阴性者的复发间期明显短于对照组，P＜0．001；p53和MDM2蛋白低表达阴性同时p21^WAF1蛋白高表达者的复发间期明显长于对照组，P＝0．002。结论：p53或MDM2蛋白高表达提示有促进NPC复发的作用，p21^WAF1蛋白高表达提示有抑制NPC复发的作用。单独检测p53或MDM2蛋白在原发NPC组织的表达情况可以和为预测NPC复发倾向和临床预后的参考指标；如同时检测p53、MDM2和p21^WAF1蛋白的两项或三项指标，预测意义更理想。     

p53-MDM2/MDM4相关抗肿瘤药物及其机制的研究进展

由抑癌基因 TP53 编码的 p53 是体内最重要的抑癌因子之一。MDM2/MDM4 是 p53 的负向调控因子 ,通过p53-MDM2/MDM4负反馈环路调控p53功能。几乎所有肿瘤均存在p53异常,主要包括p53突变和MDM2/MDM4扩增引起的p53失活。p53相关药物研发一直是肿瘤研究中的热点,然而,直到最近10年才研发出相对成熟的药物。目前,以逆转p53失活为目标的药物研发存在以下几种设计思路：（1）诱导突变p53恢复野生型功能,如PRIMA-1/PRIMA-1MET、COTI-2;（2）促进突变p53降解,如Ganetespib、伏立诺他;（3）阻断MDM2/MDM4,如RG7388、ALRN-6924等。上述药物均已进入临床试验,其中伏立诺他、PRIMA-1MET和ALRN-6924已分别在卵巢癌及骨髓增生异常综合征、皮肤T细胞淋巴瘤、急性髓系白血病中取得较好的疗效。进一步阐明p53-MDM2/MDM4环路异常在肿瘤中的作用机制,对于未来研发p53相关抗肿瘤药物以及指导临床用药具有重要意义。     

脑胶质瘤中p14ARF、MDM2及p53的表达及其意义

目的：探讨p14^ARF、MDM2和p53蛋白在脑胶质瘤组织中的表达及p14^ARF-MDM2-p53通路在胶质瘤进展中的意义。方法：应用免疫组化SP法检测25例Ⅱ级和23例Ⅳ级胶质瘤组织中-p14^ARF、MDM2和-p53蛋白的表达，并分析其与胶质瘤组织学分级之间的关系。结果：Ⅱ级和Ⅳ级胶质瘤中，MDM2蛋白的阳性表达率分别为24．00％（6／25）及56．52％（13／23）（P=0．021），p53蛋白的阳性表达率分别为28．00％（7／25）及60．87％（14／23）（P=0．022），二者阳性表达率均随胶质瘤恶性程度的增加而升高，Spearman等级相关分析显示，MDM2、p53的表达与胶质瘤分级呈正相关；p14^ARF的阳性表达率分别为76．00％（19／25）及34．78％（8／23）（P=0．004），其阳性表达率随胶质瘤恶性程度的增加而降低，Spearman等级相关分析显示，p14^ARF的表达与胶质瘤分级呈负相关（P〈0．05）。结论：脑胶质瘤组织中，MDM2和p53均呈不同程度的过度表达，且随恶性程度的增加表达水平增高；而p14^ARF随恶性程度的增加而表达水平降低。MDM2扩增、p53突变及p14^ARF蛋白低表达均与胶质瘤的进展有关。     

膀胱癌中PGP、MDM2、p53基因表达的意义

目的探讨膀胱癌组织中Pgp、MDM2、p53基因表达的意义。方法采用免疫组织学方法检测83例膀胱移行细胞癌中Pgp、MDM2、p53基因表达的情况。结果Pgp阳性表达率为71.08%,p53阳性表达率为50.6%,MDM2阳性表达率59.03%,MDM2阳性表达与膀胱癌病理分级及临床分期呈负相关(γ=-0.263,P=0.016及γ=-0.388,P=0.001);p53阳性表达与膀胱癌病理分级呈正相关(γ=0.492,P=0.001);Pgp阳性表达与其病理分级及临床分期无相关性;Pgp、MDM2、p533种蛋白表达间无相关性。AI、p53、MDM2表达与患者5年生存率有关。结论检测Pgp可指导膀胱癌化疗药物的选择;运用膀胱癌临床分期及病理分级并检测其p53、MDM2表达,可判断膀胱移行细胞癌的预后。     

外源性p53基因导入对乳腺癌细胞系MCF-7中MDM2表达的影响

目的:探讨野生型p53导入对乳腺癌细胞系MCF-7生存的影响,及对MDM2表达的影响。方法:人腺病毒p53注射液处理人乳腺癌细胞系MCF-7,将野生型p53基因导入细胞中,用MTT和流式细胞仪研究两组MCF-7细胞的增殖凋亡情况,Western blot检测MDM2蛋白表达情况。结果:外源性野生型p53基因导入组增殖能力低于对照组,凋亡率明显高于对照组,且外源性野生型p53基因导入组MDM2表达明显高于对照组。结论:野生型p53导入可以诱导人乳腺癌细胞系MCF-7凋亡增加,且可以上调MDM2的表达,这可能与外源性p53增加后其负反馈泛素化降解酶也增加有关。     

乳腺癌组织MDM2和p53蛋白质的表达水平及其与病理指标的关系

研究乳腺癌组织ＭＤＭ２和ｐ５３蛋白质的定位、表达水平及其与肿瘤大小、病理分型、分类、分级、癌周浸润程度、纤维组织反应和淋巴细胞反应等临床病理指标的关系。方法应用单克隆抗体和链霉亲和素－生物素－过氧化物酶复合物（ＳＡＢＣ）免疫组织化学染色方法，检测１０６例乳腺癌组织石蜡切片标本ｍｄｍ２和ｐ５３蛋白质的定位和表达水平，比较其与各病理指标的关系。结果（１）乳腺癌组织ｍｄｍ２和ｐ５３蛋白质均明确定位于细胞核；（２）１０６例乳腺癌组织ｍｄｍ２表达阳性率为８１．１％，ｐ５３为７５．３％，ｍｄｍ２与ｐ５３蛋白质的表达水平呈正相关系；（３）乳腺癌组织ｍｄｍ２和ｐ５３蛋白质的表达水平与病理学分级、癌周浸润程度和纤维组织反应有关（Ｐ＜０．０５），而与肿瘤大小、病理分型、分类和淋巴细胞反应无关（Ｐ＞０．０５）。结论检测乳腺癌组织ｐ５３蛋白质和ｍｄｍ２的表达水平可作为判断细胞分级、分化和肿瘤生物学行为的指标之一。     

脑胶质瘤中p14~(ARF)、MDM2及p53的表达及其意义

目的:探讨p14ARF、MDM2和p53蛋白在脑胶质瘤组织中的表达及p14ARF-MDM2-p53通路在胶质瘤进展中的意义。方法:应用免疫组化SP法检测25例Ⅱ级和23例Ⅳ级胶质瘤组织中-p14ARF、MDM2和-p53蛋白的表达,并分析其与胶质瘤组织学分级之间的关系。结果:Ⅱ级和Ⅳ级胶质瘤中,MDM2蛋白的阳性表达率分别为24.00%(6/25)及56.52%(13/23)(P=0.021),p53蛋白的阳性表达率分别为28.00%(7/25)及60.87%(14/23)(P=0.022),二者阳性表达率均随胶质瘤恶性程度的增加而升高,Spearman等级相关分析显示,MDM2、p53的表达与胶质瘤分级呈正相关;p14ARF的阳性表达率分别为76.00%(19/25)及34.78%(8/23)(P=0.004),其阳性表达率随胶质瘤恶性程度的增加而降低,Spearman等级相关分析显示,p14ARF的表达与胶质瘤分级呈负相关(P<0.05)。结论:脑胶质瘤组织中,MDM2和p53均呈不同程度的过度表达,且随恶性程度的增加表达水平增高;而p14ARF随恶性程度的增加而表达水平降低。MDM2扩增、p53突变及p14ARF蛋白低表达均与胶质瘤的进展有关。     

紫外线照射对乳腺癌细胞NFkB、p53和MDM2的影响

目的　了解NFkB家族蛋白在乳腺癌细胞系的表达及紫外线照射后所引起的变化。方法　用L_15培养液培养并传代 9个乳腺癌细胞系 ,收获细胞 ,对其进行胞浆、胞核蛋白质提取 ,Western印迹法观察NFkB家族蛋白及其抑制物的表达 ;采用 2 0J/m2 剂量紫外线照射细胞 ,继续培养细胞并提取蛋白质进行检测。结果　 9个乳腺癌细胞系p5 0、p65和IkB_α胞浆表达阳性率分别为 :88 9%、5 5 6%、77 8% ,胞核表达阳性率分别为 :66 7%、44 4%、2 2 2 %。紫外线照射后胞核p5 0、p65和IkB_α阳性率分别为 :10 0 %、10 0 %、3 3 3 %。p5 3在乳腺癌细胞表达阳性率为 44 4% ,MDM2表达阳性率为 3 3 3 % ,紫外线照射后p5 3和MDM2表达阳性率分别为 :66 7%、77 8%。结论　NFkB、p5 3和MDM2与乳腺癌细胞的发生、发展有关。紫外线照射可引起胞核NFkB及细胞MDM2阳性率明显提高 ,NFkB和MDM2可望成为判断乳腺癌预后新的标志物。     

p53 mRNA、MDM2蛋白在肺癌组织中的表达

目的 探讨原发性肺癌组织中MDM2、p53 mRNA表达水平及其与临床预后的关系。方法 采用免疫组织化学Doko Envision^TM二步法、逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法，分别检测52例肺癌组织中MDM2、p53 mRNA的表达情况。结果在52例肺癌组织中有23例（44．2％）MDM2蛋白表达阳性，其中3例小细胞肺癌全部阳性，在非小细胞肺癌中MDM2蛋白呈过表达，低分化癌明显高于高、中分化肺癌（P＜0．01）。有27例（51．9％）肺癌组织p53 mRNA表达阳性，其中I期肺癌占82．3％（14例），Ⅱ期肺癌占71．4％（10例），明显高于Ⅲ期肺癌的14．3％（3例）。高中分化肺癌的p53 mRNA表达显著高于低分化肺癌（P＜0．05）。结论 MDM2蛋白在低分化肺癌中呈过表达，p53 mRNA在早期和高中分化肺癌中呈高表达，它们分别是肺癌发生发展过程中不同的2个基因事件。     

儿童非霍奇金淋巴瘤MDM2和p53蛋白表达的研究

 目的 探讨儿童非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者癌基因MDM2和抑癌基因p53的表达与NHL的恶性程度和预后的关系。方法 46例儿童NHL患者作为病例组,12例儿童淋巴结炎患者作为对照组。用免疫组织化学超敏S-P染色法,检测病例组NHL患者、对照组淋巴结炎患者病理组织的MDM2蛋白和p53蛋白的表达情况,阳性细胞为胞核染成黄色~棕黄色,阳性细胞数≥10 %为MDM2免疫组织化学阳性（MDM2蛋白过度表达）;阳性细胞数>5 %为p53免疫组织化学阳性。结果 病例组MDM2蛋白过度表达率为65.2 %,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。p53蛋白阳性率为19.6 %,与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。MDM2蛋白过度表达率在病理分类高度恶性、患者血清LDH增高之间差异均有统计学意义（P＜0.05）,与患者的B状态间差异有统计学意义（P＜0.01）。p53蛋白阳性率与病理工作分类、临床分期、B状态、血清LDH之间差异均无统计学意义（P＞0.05）。MDM2蛋白过度表达与p53蛋白阳性之间没有关联性。结论 儿童NHL患者MDM2基因的过度表达率较高;MDM2过度表达与儿童NHL患者的不良状况、不良预后有关;儿童NHL患者p53阳性率较低。     

膀胱癌细胞凋亡、P-gP、MDM2、p53基因表达的意义

目的:研究膀胱癌细胞凋亡、P-gp、MDM2、p53基因表达的意义。方法:采用免疫组化法及TUNEL法检测11例正常膀胱黏膜和83例膀胱移行细胞癌中P-gp、MDM2、p53基因的表达及细胞凋亡指数(AI)。结果:83例膀胱移行细胞癌中P-gp阳性71.08%,p53阳性50.6%,MDM2阳性59.03%,AI=1.4335±0.3863。MDM2阳性表达与病理分级及临床分期呈负相关(r=-0.263,P=0.016及r=-0.388,P=0.001);p53阳性表达与病理分级及临床分期呈正相关(r=0.492,P=0.001;r=0.341,P<0.01);P-gp阳性表达与病理分级及临床分期无相关性;P-gp、MDM2、p53 3种蛋白间表达无相关性;AI与MDM2呈负相关(r=-0.226,P=0.042);AI与病理分级及临床分期呈正相关(r=0.642,P=0.000;r=0.455,P=0.000);AI与P-gp、p53无相关性。AI、p53、MDM2的表达与5年生存率有关。结论:检测P-gp可指导膀胱癌化疗药物的选择;联合运用临床分期及病理分级并检测p53、MDM2可用于判断膀胱移行细胞癌的预后。     

p53蛋白和MDM 2蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

为了探讨肿瘤抑制基因ｐ５３和癌基因ＭＤＭ２在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义，采用免疫组织化学链菌素亲生物素蛋白过氧化物酶连接法（ＳＰ法），检测了６８例食管鳞状细胞癌中ｐ５３蛋白和ＭＤＭ２蛋白的表达，结果显示ｐ５３蛋白和ＭＤＭ２蛋白阳性率分别为６０．３％（４１／６８）和４２．６％（２９／６８），ｐ５３蛋白阳性率与食管鳞状细胞癌分级呈显著正相关（Ｐ＜０．０１），ＭＤＭ２蛋白阳性率与食管鳞状细胞癌分级呈显著负相关（Ｐ＜０．０１），并与食管鳞状细胞癌临床病理分期呈显著负相关（Ｐ＜０．０５）。在６８例食管鳞状细胞癌中，ｐ５３蛋白阳性表达者４１例，其中ｐ５３蛋白和ＭＤＭ２蛋白表达均阳性者１２例，ＭＤＭ２蛋白表达阴性者２９例；在６８例食管癌中，ＭＤＭ２蛋白阳性表达者２９例，其中ＭＤＭ２与ｐ５３蛋白均阳性者１２例，ｐ５３蛋白表达阴性者１７例，两者呈显著负相关（Ｐ＜０．０１），ｐ５３蛋白和ＭＤＭ２蛋白表达均阴性者１０例。可以认为ｐ５３蛋白和ＭＤＭ２蛋白表达可作为食管鳞状细胞癌病理分级参考指标之一，ＭＤＭ２蛋白表达还可作为食管鳞状细胞癌临床病理分期的参考指标之一，并间接证明ＭＤＭ２蛋白对ｐ５３蛋白表达具有负性调节作用。