PCR—SSP法检测A^1,2BO^1,2血型基因型

目的：为了建立Ａ＾１，２ＢＯ＾１，２血型系统基因分型的方法，以检测人群中Ａ＾１，Ａ＾２，Ｏ＾１，Ｏ＾２基因的频率。方法 采用盐析法进行样品ＤＮＡ的抽提，采取ＰＣＲ－ＳＳＰ法进行Ａ＾１，２ＢＯ＾１，２血型基因分型。结果 １５８例中Ａ＾１，２ＢＯ＾１，２系统基因频率分别是Ａ＾１为１８．７％，Ａ＾２为０．６％，Ｂ为１７．４％，Ｏ＾１为６２．３％，Ｏ＾２为６２．３％，Ｏ＾２为０．９％。结论：该方法可鉴定出     

广西三江地区侗族ABO血型分布

广西三江地区侗族ＡＢＯ血型分布谢乘华（广西三江县人民医院，广西５４５５００）有关广西区内各民族ＡＢＯ血型分布的资料甚少，本文累积本院历年血型资料及１９９６年学生体检抽样调查共１６２９０例侗族血型资料，统计结果如附表。血型分布基因频率：ｒ＝０．６７２８...     

ABO血型系统的基因分型

本文介绍了ＡＢＯ血型系统的分子基础及在此基础上对ＡＢＯ血型系统的基因分型的几种主要方法：ＰＣＲ－ＤＮＡ测序法、ＰＣＲ－限制性内切酶酶切法、ＰＣＲ－限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）、ＰＣＲ－序列特异性引物（ＳＳＰ）、ＰＣＲ－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）等。另外还介绍了基因分型技术在ＡＢＯ亚型研究中的应用。     

人类ABO血型基因型检测的研究

ABO血型—直采用血清学方法鉴定ABO血型的基因产物，结果可靠、准确，但不能检测出基因型。本文通过ABO血型基因中几个不同位点的差异，设计了特异性引物，采用PCR-SSP技术特异性地扩增A、B和。基因，该方法简单、快速，可鉴定出6种ABO血型基因型AB、AA、AO、BB、BO、OO。本文利用该技术对240名献血者进行了ABO血型的基因型多态性分析．结果P基因频率0.2292，q基因频率0.2125，r基因频率0.5683。     

ＡＢＯ血型不合造血干细胞移植后患者早期输血质量控制

摘要：目的 探讨ＡＢＯ血型不合的异基因造血干细胞移植（ＨＳＣＴ）后早期输血质量控制方法，确保 ＨＳＣＴ顺利进行。方法 对２３例ＨＳＣＴ患者进行早期输血治疗，做好输血前、中、后期输血管理及血液保存的质量控制。结果２３例ＡＢＯ血型不合的ＨＳＣＴ后均获得了造血重建，血型分别于移植后２４～１５０ｄ转为供者血型；无１例发生溶血反应。结论 严格输血管理，可以帮助ＨＳＣＴ患者顺利实现造血功能重建。关键词：ＡＢＯ血型不合；　干细胞移植；　输血；　输血质量控制中图分类号：Ｒ４７３．５　　文献标识码：Ｂ　　文章编号：１００１-４１５２（２００７）１３-００２９-０２     

１ 例血型嵌合体的血清学特点及测序分析

目的 研究血型嵌合体的血清学特征、输血策略及分子生物学确认方法。 方法 采用微柱凝胶法进行 ＡＢＯ 血型鉴定和 不规则抗体筛查。 采用试管法，结合多种手段，进一步进行 ＡＢＯ 血型鉴定。 ＰＣＲ 技术扩增 ＡＢＯ 基因 ７ 个外显子及其邻近内 含子序列后进行测序分析。 结果 患者 ＡＢＯ 正定型与抗 Ａ、抗 Ｂ 试剂反应均呈混合凝集外观，反定型为 ＡＢ 型，不规则抗体 筛查结果阴性；基因测序分析发现患者存在 ３ 条 ＡＢＯ 等位基因，分别为 ＡＢＯ? Ｏ．０１．０２、ＡＢＯ? Ａ１．０２ 和 ＡＢＯ? Ｂ．０１。 结论 患 者为 Ａ 型＋Ｂ 型嵌合体血型，可输注 ＡＢ 型红细胞制品。     

ＦＴＯ 基因 ｒｓ９９３９６０９ 多态性与青少年肥胖及血细胞分 析参数的相关性

摘要：目的 探讨脂肪量与肥胖相关（ｆａｔ ｍａｓｓ ａｎｄ ｏｂｅｓｉｔｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ，ＦＴＯ）基因多态性与青少年人群肥胖及血细胞分析参数之 间的关系。方法 选取 ２０２０ 年 １ 月至 １２ 月于湖北中医药大学黄家湖医院体检的青少年人群 ５４１ 例作为研究对象，并进一步 分为体重过轻组（ＢＭＩ＜１８．５）、正常组（ＢＭＩ １８．５～ ２３．９）、超重组（ＢＭＩ ２４．０～ ２７．９）和肥胖组（ＢＭＩ≥２８）。应用 Ｓａｎｇｅｒ 测序法测 定各组 ＦＴＯ 基因 ｒｓ９９３９６０９ 位点的基因型，并分析 ＦＴＯ 基因多态性对肥胖及各血细胞分析参数的影响。结果 血细胞分析 参数中白细胞（ＷＢＣ）、单核细胞（ＭＯＮＯ）、中性粒细胞（ＮＥＵＴ）、淋巴细胞（ＬＹＭＰＨ）、嗜酸性粒细胞（ＥＯ）、红细胞（ＲＢＣ）、红 细胞压积（ＨＣＴ）、血红蛋白（Ｈｂ）、红细胞分布宽度（ＲＤＷ ＳＤ）、平均血红蛋白浓度（ＭＣＨＣ）、红细胞平均体积（ＭＣＶ）、血小板 （ＰＬＴ）和血小板压积（ＰＣＴ）数值在不同 ＢＭＩ 分组间的差异均具有统计学意义（Ｆ 分别为 １０．９３１、９．９４６、４．４１２、８．９８０、４．５８４、 ２４．６４６、１９．７４７、２０．４９８、５．１２２、６．９１４、３．４２７、４．２１５、３．０９４，Ｐ 均＜０．０５）。３ 种基因型频率在肥胖组与正常组之间比较差异有统计 学意义（χ２ ＝ １９．８４５，Ｐ＜０．０１）。ＡＡ 基因型个体的 ＷＢＣ、ＥＯ 和 ＰＬＴ 数值明显高于 ＴＡ 和 ＴＴ 基因型个体（Ｆ 分别为４．０８８、５．０８７、 ３．０４７，Ｐ 均＜０．０５），且 ＦＴＯ 基因 ｒｓ９９３９６０９ 位点 ＡＡ 基因型是影响 ＥＯ 数值的独立指标［ＯＲ ＝ ０．０９２ （０．０２０ ～ ０．１６５），ｔ ＝ ２．５０７， Ｐ＝ ０．０１３］。ＡＡ 基因型个体发生肥胖的风险是 ＴＴ 基因型携带者的 ８．２６１ 倍（χ２ ＝ １９．３４，Ｐ＝ ０．０００），Ａ 等位基因的肥胖风险是 Ｔ 等位基因的１．７２１倍（χ２ ＝ ７．６０３，Ｐ＝ ０．００６）。结论 ＦＴＯ 基因 ｒｓ９９３９６０９位点多态性与肥胖及血细胞分析参数之间存在相关性。     

上消化道大出血与ABO血型关系探讨

本文将１９６例上消化道大出血病的的ＡＢＯ血型分布作了分析统计。结果为：１．上消化道大出血病人，Ｏ型轿出血所占比例较正常人大（Ｐ＜０．０１），Ａ、Ｂ、ＡＢ型出血分布与正常人近似。２、出血病因的血型分布，Ｏ型血十二指肠溃疡及急性胃粘膜病变出血比例较正常人大（Ｐ＞０．０１），Ｂ型血的十二指肠球部溃疡出血所占比例较正常人小（Ｐ＜０．０５）。肝硬化食道胃底静脉破裂出血、胃溃疡及其它出血病人的四种血型分布均与     

成都地区汉族群体ApoB3’位点扩增片段长度多态性研究

用扩增片段长度多态性分析技术对成都地区汉族群体２００名无关个体ＡｐｏＢ３’位点扩增片段长度多态性进行了分析，查出１６个等位基因，片段大小在５４２～９９２ｂｐ之间，基因频率０００２５～０３７５０，杂合性为０７９，ＤＰ值０９５。在１３８种可能的基因型中，发现了４３种基因型，基因型的观察值与期望值符合Ｈａｒｔｄ Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡定律（χ２＝２１３，ｄｆ＝１０，Ｐ＞００１），家系调查证明ＡｐｏＢ３’位点是按孟德尔定律遗传的。采用ＨＳ ＰＣＲ法提高了方法的灵敏度和特异性。     

应用PCR—SSP技术对粒细胞抗原NA进行基因分型

根据ＮＡ基因序列,合成ＮＡ特异性引物,通过ＰＣＲ－ＳＳＰ技术,特异性地扩增ＮＡ１和ＮＡ２,建立ＮＡ基因分型方法,同时对１２０例浙江汉族人群进行ＮＡ基因型的检测。结果表明ＰＣＲ－ＳＳＰ技术对ＮＡ的基因分型方法简单、翰林折汉族人群的ＮＡ基因型ＮＡ１为０．５２５,ＮＡ２为０．４７５。     

ABO血型A201等位基因表达A抗原活性的分析

目的研究ABO血型A201等位基因表达A抗原活性。方法运用血型血清学方法对1家2代3人的唾液及血液标本的ABO血型进行检测;运用Identifiler法医基因分析试剂盒作为亲缘关系鉴定;PCR扩增ABO基因后,对所有外显子做DNA测序分析,运用PCR-RFLP法进行同步检测A201等位基因中的序列变异。结果亲缘关系鉴定在Identifiler的15个遗传标记系统中显示,父母可以将所有的等位基因提供给子女,确定具有亲缘关系;然而运用不同来源的3份抗体对ABO血型进行检验时,却出现了正定型否定了母子关系,反定型无法排除母子关系的现象。3个标本ABO基因的测序:父、母、子的基因型分别为O01/O01、A201/B101及A201/O01,符合反定型结果,这就说明A201等位基因在A表型及AB表型中表达的A抗原活性差异显著。运用PCR-RFLP法可将A201等位基因中的2个主要变异点1059-1061del C和467C/T。结论 ABO血型A201基因在AB及A表型中表达A抗原活性,可由于检测抗体不同出现一定的差异;基因测序与PCR-RFLP法进行同步分析能够快速简便的鉴定A201等位基因中的1059-1061del C和467C/T。     

单管PCR扩增鉴定ABO血型基因型

本研究目的是建立单管PCR扩增鉴定ABO血型基因型的方法.采用盐析法抽提DNA,应用单管PCR扩增结合基因扫描技术对ABO血型的基因型进行鉴定.结果表明：用本方法鉴定出的132例样本的ABO基因型结果与其血清学结果完全符合,A、B、O基因频率分别为0.205、0.159、0.636,其中AA基因型8例（6.1%）,AO基因型31例（23.5%）,AB基因型7例（5.3%）,BB基因型6例（4.5%）,BO基因型23例（17.4%）,OO基因型57例（43.2%）.结论：单管PCR扩增结合基因扫描技术能鉴定ABO血型基因型.     

A unique 502C>T mutation in exon 7 of ABO gene associated with the Bel phenotype in Taiwan

BACKGROUND: The ABO system includes many variant subgroups. Some of them are difficult to identify serologically, leading to mistyping of blood groups. For example, Bel is often typed as O blood group. STUDY DESIGN AND METHODS: DNA sequencing and a molecular approach were explored to accurately determine the genotypes of Bel subgroups. Seven Bel blood donors and 106 individuals with other blood groups were analyzed serologically and molecularly. RESULTS: The serologic results of these seven Bel blood donors showed that their RBCs do not react with anti-B or anti-A,B, and their B antigen was detected by adsorption and elution methods. Sequencing results for exons 6 and 7 of ABO genes showed a new Bel allele with a C>T substitution at nucleotide position 502 in exon 7 of the ABO gene in all seven cases but not in other blood groups. Consequently, an amplification-created restriction site protocol was designed to detect the 502C>T genotype in Bel subgroup cases. CONCLUSION: A novel 502C>T mutation was found in the Bel subgroup in Taiwan and successfully developed a rapid and accurate molecular protocol to detect this mutation. To our knowledge, the new Bel allele that was found is unique in Taiwanese residents.     

ABO血型变异与B糖基转移酶关系研究

目的研究ABO血型B亚型系统Bw亚型与B糖基转移酶的关系。方法运用血型血清学鉴定方法鉴定1个家庭2例ABO血型的Bw亚型,运用聚合酶链式反应的方法扩增糖基转移酶1~7号外显子,送到试剂公司测序。结果直接测序发现2例ABO血型的Bw亚型,其中B糖基转移酶基因第721位C〉T的转变,导致糖基转移酶多肽链Arg241Trp的转变。结论糖基转移酶基因第721位的C〉T的突变引起糖基转移酶活性的消失或者减弱,导致Bw亚型。     

Determination of ABO glycosyltransferase genotypes by use of polymerase chain reaction and restriction enzymes

BACKGROUND: The molecular basis of red cell ABO group antigens has been determined. The genes encoding the group A and B glycosyltransferases and a nonfunctional group O transferase have been cloned and sequenced. All three genes were similar. When compared to the nucleotide sequence of the A gene, the O gene has a one-base deletion that leads to a frame shift and results in a nonfunctional protein. The B gene differs from the A gene at seven nucleotides. STUDY DESIGN AND METHODS: Techniques using polymerase chain reaction and restriction enzymes to determine ABO transferase genotypes from white cell DNA were modified. Nucleotide sequence differences within the genes were analyzed by the application of selected restriction enzymes. Restriction enzymes Asp718 and BstEII were used to analyze the genes at nucleotide 258, and BssHII and Kas I were used to analyze the genes at nucleotide 523. ABO red cell phenotypes were compared in 60 unrelated individuals with ABO transferase genotypes. The ABO phenotypes and genotypes of individuals from two different families were also analyzed to determine if this method could distinguish individuals who were homozygous for A or B transferase genes from those who were heterozygous. RESULTS: The phenotypes and genotypes were consistent for all unrelated individuals, and within the families, heterozygous individuals could be distinguished from homozygous individuals. Nevertheless, two individuals from one family were found to have a group A red cell phenotype, but when the transferase genes were analyzed at nucleotide 523 with enzymes BssHII and Kas I, both A and B transferase genes were detected. Further analysis of the transferase genes at nucleotide 700 by using restriction enzymes Alu I and Hpa II and those at nucleotide 793 by using enzyme BstNI found that both transferase genes in the two individuals were similar to the A transferase gene. CONCLUSION: An A allele of the group A glycosyltransferase was detected that had the same sequence as the B gene at nucleotide 523 but was identical to the A gene at positions 700 and 793. The identification of this variant gene makes genotyping at nucleotide 523 unreliable. However, analysis of the genes at other sites of nucleotide variation may accurately identify phenotypes.     

Use of maternal plasma for non-invasive prenatal diagnosis of fetal ABO genotypes.

BACKGROUND: Measurement of free fetal DNA in maternal plasma opened a door for non-invasive prenatal diagnosis. Prenatal diagnosis of fetal ABO genotypes can provide a basis for the prevention and therapy of maternal-fetal incompatibility. We identified fetal ABO genotypes using fetal DNA in plasma from pregnant women with blood group O. The aim of the study was to investigate the accuracy and feasibility of this method. METHODS: A total of 105 blood group O women in middle or late pregnancy were enrolled. Fetal DNA in maternal plasma and genomic DNA in umbilical vein blood from newborns were extracted using a QIAamp DNA Blood Kit. DNA was amplified to identify ABO genotypes by PCR with sequence-specific primers (PCR-SSP). The genotype results were evaluated using serologic tests for ABO phenotyping. RESULTS: Using DNA from umbilical vein blood, ABO genotypes of 105 newborns were successfully identified by PCR-SSP. Using fetal DNA from maternal plasma, 88.6% (93/105) fetal ABO genotypes was correct; 12 false results were from 66 pregnant women with fetuses of type non-O. The accuracy in middle pregnancy was lower than that in late pregnancy, although the difference was not significant (0.05相似文献   

新生儿血型检测的结果分析

目的：了解新生儿 ABO 正反定型符合率,研究提高新生儿血型测定准确性的方法。方法用传统试管法检测当地新生儿 ABO 血型,以微柱凝胶卡和改良试管法、增强剂法及常规试管法、纸片法、微板法、聚凝胺法等7种方法检测抗-A、抗-B、抗-D 抗体的效价,并进行新生儿血型检测比较。结果新生儿 ABO 正反定型符合率为83％（913/1100）;检测15份抗-A、抗-B、抗-D 抗体的效价,敏感性最高是改良试管法和增强剂法,最差的是纸片法,新生儿标本检测结果类似。结论ABO 正反定型应增加血浆（血清）量并延长孵育时间或选用增强剂,从而提高新生儿血型检测的准确性。     

ABO血型基因转录结构的研究及应用

目的 建立研究ABO血型系统基因转录结构的方法.方法 使用两套RNA逆转录-巢式PCR-序列测定的反应策略对中国人群6种常见ABO基因型的11个血液标本转录结构进行分析.应用所建立的方法对3例ABO血型正反定型不符的标本进行ABO基因转录结构的分析.结果 未能检测到O基因的转录结构;两套PCR策略均发现有2种转录结构,一种是完整的ABO基因编码区,另一种是缺失了整个第6外显子的ABO基因编码序列.一个变异的ABO等位基因在Bx表型个体被发现.结论 ABO基因转录结构的剪切方式是复杂的,不同剪切位点的ABO转录子被观察到.O等位基因的转录结构在RT-PCR分析未检测出来.O型基因转录结构这个特点的发现,可以应用于ABO基因单倍体序列测定中.     

徐州汉族人ABO血型及HAB分泌型基因分型研究

目的　研究徐州汉族人群ABO血型及HAB分泌型基因多态性分布特征并用于解决临床输血中血型血清学鉴定难题。方法　用快速盐析法提取外周血标本中的DNA ,用PCR SSP扩增ABO血型、HAB分泌型等位基因。结果　 1 0 4名健康、无血源关系的徐州汉族人ABO血型基因频率分别为A1:0 .1 53 8,A2 :0 .0 962 ,B :0 .2 4 52 ,O1:0 .50 4 8,O2 :未检测到 ( χ2 =6.73 2 3 ,P >0 .2 5,符合Hardy Weinberg公式 ) ;HAB分泌型基因频率分别为分泌基因Se:0 .980 8,非分泌基因se:0 .0 1 92 ( χ2 =0 .0 4 2 1 ,P >0 .75,符合Hardy Weinberg公式 )。 1份用血清学方法不能确定ABO血型的标本 ,用基因分型定为BO1型。结论　PCR SSP是一种方便、可靠的血型基因定型技术 ,与血型血清学方法相比本文非分泌基因se的频率显著偏低 ,4例血清学定为非分泌型个体用该方法鉴定基因型为Se/Se,间接提示G4 4 7A和G757A突变不能完全覆盖我国汉族人群的非分泌基因se。