生脉散皂苷部位对大鼠培养心肌细胞内游离钙的调节作用

目的：研究生脉散皂苷部位对培养的大鼠单个心肌细胞内Ca^2+浓度的影响。方法：以Fluo-3AM负载心肌细胞，采用激光扫描共聚焦显微镜检测单个细胞内Ca^2+浓度的变化，结果：生脉散皂苷部位10μg/ml可明显增加心肌细胞内Ca^2+浓度，并使其持续在高水平（P＜0．01），，随后加入高Ca^2+和高K^+，对细胞内Ca^2+浓度无明显影响。生脉散泉苷部位100μg/ml诱导心肌细胞内Ca^2+浓度迅速明显增加后又迅速下降至静脉水平（P＜0．01），外加Ca^2+高K^+，不能刺激细胞内Ca^2+浓度明显增加，结论：生脉散皂苷部位对心肌细胞内Ca^2+浓度变化的影响与其浓度有关。     

apoE4慢性作用对神经元细胞内静息[Ca^2＋]i的影响

目的观察载脂蛋白E（apoE）对神经元细胞内游离[Ca^2＋]i的影响。方法采用激光共聚焦显微镜（LSCM）和Foup-3／AM荧光探针标记技术,从单个活细胞水平检测apoE不同亚型对原代培养皮层神经元细胞内钙信号的影响,通过使用NMDA受体阻断剂MK-801,观察NMDA受体是否介导了apoE可能导致的胞内钙变化。结果ApoE4慢性作用可以浓度依赖性地升高神经元胞内静息[Ca^2＋]i．而apoE3则无影响;MK-801预处理可减弱apoE4引起的胞内静息[Ca^2＋]i升高,但不能完全阻断该效应。结论ApoE慢性作用对神经元细胞内静息[Ca^2＋]的影响具有亚型特异性．表现为apoE4对胞内静息[Ca^2＋]i的破坏作用,且NMDA受体的激活可能参与了apoE4所致的胞内钙升高。     

环维黄杨星D对培养的心肌细胞内游离钙浓度的影响

目的研究环维黄杨星D(CVB-D)对新生大鼠心肌细胞内游离Ca     

解酒口服液对酒精性肝损伤肝细胞保护作用的激光共聚焦显微镜分析

目的：探讨酒精性肝损伤肝细胞形态与功能变化的特征，以及中药对酒精性肝损伤的防护作用机理。方法：首次采用激光共聚焦扫描显微分析技术，对灌胃二锅头白酒复制的大鼠酒精性肝损伤模型进行了肝细胞形态、肝细胞内DNA与RNA含量变化分析。结果：灌胃白酒可导致严重的肝细胞代谢及形态异常，细胞内DNA和RNA代谢性损害，细胞平均周长、面积均显著大于正常状态，呈现为肝细胞肿胀，甚至肝细胞死亡。解酒口服液对酒精所致的上述形态与功能改变有显著的良好影响。     

粉背薯蓣根茎中2个甾体皂苷体外对人癌细胞的细胞毒作用

作者采用美国国立癌症研究所抗癌药筛选系统，对粉背薯蓣Dioscorea collettii var.hypoglauca日根茎中的2个甾体皂苷——甲基原新纤细薯蓣皂苷(NSC-698793)和纤细薯蓣皂苷(NSC-698787)进行了体外细胞毒活性试验。     

醒脑开窍针刺法对不同时间局灶性脑缺血/再灌注损伤时活体脑片海马神经元[Ca2+]i的影响

目的:研究醒脑开窍针刺法对局灶性脑缺血/再灌注大鼠脑细胞内Ca2 的调节作用。方法:利用激光共聚焦扫描显微镜观察海马CA1区活体脑片中锥体细胞内Ca2 的分布及动态变化。结果:脑缺血1h时海马CA1区神经元的[Ca2 ]i明显升高,再灌注后,神经元内[Ca2 ]i随再灌注时间延长而进一步升高,到再灌注6h,达到最高峰,此后虽有下降,但仍高于缺血前水平,再灌注24h时又有第二次钙积聚高峰。针刺对脑缺血/再灌注大鼠各时程的[Ca2 ]i均有降低作用,但对其下调程度,醒脑开窍针刺组明显优于传统针刺组。结论:醒脑开窍针刺法可迅速调节缺血/再灌注后海马CA1区神经元细胞内的Ca2 含量,抑制胞内钙超载,拮抗脑缺血/再灌注后继发神经元的损伤。     

环维黄杨星D对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用和对心肌细胞内游离钙浓度的影响

目的:研究环维黄杨星D(CVB-D)对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用和对急性分离大鼠心肌细胞内游离Ca²⁺浓度的影响。方法:采用培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,测定心肌细胞搏动频率、细胞存活率、肌酸激酶(CK)的含量;应用特异性荧光指示剂Fluo-3/AM负载急性分离的大鼠心肌细胞,用激光共聚焦显微镜检测胞内游离钙的变化。结果:缺氧/复氧损伤+环维黄杨星D组(H/R+CVB-D)乳鼠心肌细胞搏动频率、细胞存活率与缺氧/复氧损伤组比较明显升高,CK含量与缺氧/复氧损伤组比较明显下降。对急性分离大鼠心肌细胞内[Ca²⁺]i逐步升高,并呈剂量依赖性;在有外钙和无外钙时,CVB-D对胞内钙的升高有显著差异(P<0.05);在无外钙并加入内罗啶孵育后,CVB-D引起的胞内[Ca²⁺]i轻度升高,但与无钙组相比无显著性差异(P>0.05)。结论:环维黄杨星D对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤有保护作用,对急性分离大鼠有升高心肌细胞内游离钙离子浓度的作用,[Ca²⁺]的升高既源于内钙释放又源于外钙内流。     

用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测六君子乙酸乙酯部位对食管癌Eca9706细胞增殖的抑制作用

目的:研究六君子乙酸乙酯部位对食管癌Eca9706细胞增殖的影响。方法:MTT法检测六君子乙酸乙酯部位对食管癌Eca9706细胞株生长抑制作用,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,用激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡小体。结果:在6.25²00μg/ml范围内,不同浓度六君子乙酸乙酯部位能有效抑制Eca9706细胞增殖。用27.66μg/ml、93.00μg/ml、133.70μg/ml的六君子乙酸乙酯部位作用Eca9706细胞48小时,细胞凋亡率明显增加,与对照组相比,差异有统计学意义,并且在激光共聚焦显微镜下观察到凋亡小体。结论:六君子乙酸乙酯部位能显著抑制食管癌Eca9706细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制有待进一步研究。     

补脾方药对脾虚大鼠壁细胞胃泌素受体及细胞内[Ca2+]i作用的观察

目的:观察脾虚模型大鼠壁细胞胃泌素受体及受体后信号细胞内钙离子的变化,并观察补脾方药党参、白术、补中益气汤对其的影响。方法:大鼠壁细胞采用EDTA-Pronase酶法消化而来。胃泌素受体检测采用放射配基结合实验,壁细胞内[Ca2 ]i变化测定采用双波长荧光法。结果:大黄脾虚模型大鼠壁细胞胃泌素受体结合位点数有显著降低,经补脾方药治疗后有所恢复;同时脾虚模型壁细胞内静息钙离子浓度明显低于正常组,经胃泌素刺激后壁细胞内[Ca2 ]i有所升高,且脾虚模型升高幅度明显高于正常组,经治疗后此状态有所恢复,但无统计学意义。结论:脾虚证可能与胃泌素受体低表达相关,且壁细胞内钙离子处于低代谢状态,但对于胃泌素刺激的反应性增强,进而可能导致酸分泌敏感性相对增高,胃黏膜易损性增强。补脾方药对其有一定的调节作用。     

补中益气汤、党参、白术含药血清对离体脾虚大鼠壁细胞内[Ca2+]i的影响

目的:探讨脾虚大鼠的微观病理状态及补脾方药血清对其的调节作用.方法:采用血清药理学方法,以第三代荧光指示剂Fluo-3/AM负载细胞,用共聚焦显微镜观察大鼠单个壁细胞胃泌素刺激后[Ca2 ]i的动态变化.结果:睥虚大鼠壁细胞胃泌素刺激后[Ca2 ]i升高幅度明显高于正常大鼠,达峰时间也有缩短趋势;补脾方药血清治疗后各组中的各项指标介于两者之间.结论:壁细胞胞内[Ca2 ]i的异常变化可能是脾虚证的微观病理机制之一,Ca2 的异常介导可能参与了脾虚证的病理形成;补脾方药血清可不同程度恢复和逆转睥虚状态下的微观病理变化.     

17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮对心肌细胞内游离钙浓度及L-型钙电流的影响

目的:研究17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮(YLSC)对H2O2诱导的心肌细胞内钙超载的拮抗作用及对L型钙电流(ICa-L)的影响.方法:采用SD大鼠乳鼠进行心肌细胞培养,实验分为①正常对照组;②H2O2组:上机前加入终浓度为0.3 mmol·L-1的H2O2;③预先给予低、中、高不同终浓度YLSC药物处理组:分别给予100,200,400 μmol·L-1YLSC的无血清培养基,孵育24 h,上机前加入终浓度为0.3 mmol· L-1H202,以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术,分别于加入H202后15 min内检测细胞内[Ca2+]i的变化;分离昆明种小鼠单个心室肌细胞,全细胞膜片钳技术记录YLSC对ICa-L的影响.结果:①与正常对照组比较,H202诱导的模型组细胞内[Ca2+]i增加60.43％±7.75％,而高、中、低YLSC预处理组[Ca2+]i分别增加38.39％±13.87％,14.49％±2.94％,-28.1％ ±1.52％,与模型组比较显著降低(P＜0.01).②YLSC可使心室肌细胞ICa-L的电流-电压(Ⅰ-Ⅴ)关系曲线上移,能改变ICa-L的激活和失活特征,使ICa-L的激活曲线和稳态失活曲线左移.结论:YLSC对心肌细胞钙离子通道有较好的阻断作用,能显著减轻H2O2诱导的心肌细胞内[Ca2+];超载.     

针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠脑组织中NO、NOS及Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影响

目的:探讨针刺抗脑老化的作用机制.方法:将40只Wistar大鼠随机分为4组,每组10只.正常组10只不予任何处理.模型组、督穴组和体穴组大鼠复制D-半乳糖致急性衰老模型.模型组不予任何治疗;造模当日,督穴组予以针刺百会、大椎治疗,体穴组予以针刺关元、足三里治疗.观察各组大鼠脑组织中NO、NOS的含量及Ca2+-Mg2+-ATP酶活性.结果:造模成功后,大鼠脑组织中NO、NOS的含量明显升高,脑细胞膜Ca2+-Mg2+-ATP酶活性明显降低.针刺治疗有抑制NO、NOS含量升高和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性降低的作用,督穴组强于体穴组(均P＜0.05).结论:针刺可以通过提高Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,稳定NOS浓度,从而平衡NO含量,充分发挥NO的生理机能,而发挥抗脑衰老的作用,同时督穴组抗脑老化作用更为理想.     

Concentration Dependent Effect of (−)‐Epicatechin on Na+/K+‐ATPase and Ca2+‐ATPase Inhibition Induced by Free Radicals in Hypertensive Patients: Comparison with L‐ascorbic Acid

Although the antioxidant properties of flavonoids are well documented, it is still unclear whether these effects are dependent on radical scavenging or iron chelating activities. Oxidative stress, a state of excessive reactive oxygen species (ROS) activity, is associated with vascular disease conditions such as hypertension. Both the anti‐ and pro‐oxidant effects of tea catechins have been implicated in the alterations of cellular functions that determine their chemoprotective and therapeutic potentials in health and diseases. The present study examined the concentration dependent (10^?7 to 10^?4 m ) effects of (?)‐epicatechin and L‐ascorbic acid on Na⁺/K⁺‐ATPase and Ca²⁺‐ATPase activity in hypertensive patients and normal subjects. L‐ascorbic acid has been used as a positive control to compare the effect of (?)‐epicatechin. A significant (p < 0.0001) decrease in the activities of Na⁺/K⁺‐ATPase and Ca²⁺‐ATPase was observed in hypertensive patients compared with normal subjects. We report that (?)‐epicatechin shows a significant (p < 0.001) dose‐dependent protective effect against oxidative stress induced by tert‐butyl hydroperoxide (t‐BHP), which is manisfested as a decrease in the activity of erythrocyte Na⁺/K⁺‐ATPase and Ca²⁺‐ATPase, in hypertensive patients as well as normal subjects. The effect of L‐ascorbic acid was also significant (p < 0.001) and was comparable with that of (?)‐epicatechin. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.