益肝康等活血化瘀中药抑制IL-1β刺激的HSC增殖及TIMP-1的表达

目的:探讨活血化瘀中药益肝康、丹参小复方、丹参对IL-1β刺激的活化的大鼠肝星状细胞(HSCs)增殖及基质金属蛋白酶抑制因子 mRNA(TIMP mRNA)表达的影响．方法:体外培养活化的大鼠HSC,随机分为8 组:对照组(A组)、IL-1β 10 μg/L(B组)、IL- 1β 10μg/L 益肝康2 g/L干预组(C组)、IL- 1β 10 μg/L 丹参小复方2g/L干预组(D组)、 IL-1β 10μg/L 丹参2g/L干预组(E组)、丹参 2 g／L(F组)、丹参小复方2 g/L(G组)、益肝康 2 g／L(H组)．加药后24 h．应用活细胞计数试剂盒-CCK-8检测各组HSC增殖,采用半定量 RT-PCR方法检测各组HSC TIMP-1 mRNA的表达．结果:A组HSC增殖和TIMP-1 mRNA表达强于F、G、H组(1．291±0．09 vs 1．055±0．105, 1±0．07,0．883±0．06,P<0．01:0．591±0．064 vs 0．493±0．088．0．458±0．076．0．356±0．046． P<0．05或P<0．01);H组HSC增殖和TIMP-1 mRNA表达低于F组和G组(P<0．05);B组HSC 增殖和TIMP-1 mRNA表达均明显强于A组 (1．575±0．017 vs 1.291±0,09,P<0．01;1．369± 0．097 vs 0．591±0．064,P<0．01)和C、D、E组 (1．575±0．017 vs 0．906±0．09,1．015±0．081, 1．097±0．038,P<0．01;1．369±0．097 vs 0．694 ±0．078,0．854±0．05,0．898±0．12,P<0．01);C 组HSC增殖和TIMP-1 mRNA表达低于D组和 E组(P<0．05)．结论:益肝康等活血化瘀中药能抑制IL-1β刺激的HSCs增殖及TIMP-1 mRNA表达,发挥其抗肝纤维化功效．益肝康抗肝纤维化作用强于丹参小复方和丹参单药．     

益肝康抑制肝星状细胞Ⅰ型胶原合成的作用机制

目的:探讨活血化瘀中药复方“益肝康”抑制肝星状细胞Ⅰ型胶原合成的作用机制。方法:应用West-ern印记检测p38的活化程度;3H-Pro掺入法检测Ⅰ型胶原合成。结果:IL-1β有明显促大鼠HSCⅠ型胶原合成作用,IL-1β(10μg/L)作用培养的HSC24小时后,3H-Pro掺入量明显高于对照组(618.33±52.69vs388.83±49.72,P<0.01),阻断p38通路后,IL-1β的促HSCⅠ型胶原合成作用受到抑制。经不同浓度p38特异性阻断剂SB203580(10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L)预处理的各组细胞,3H-Pro掺入量分别为487.33±42.75、408.50±27.47、400.83±19.49,与对照组(未用SB203580预处理,629.67±69.88)相比,其掺入量均明显降低(P<0.01,P<0.01,P<0.01)。益肝康可抑制IL-1β诱导的HSC中p38活性,与未用IL-1β处理组相比,在分别刺激HSCs5分钟、15分钟、30分钟和60分钟,HSC p38活性受到明显抑制(P<0.05,P<0.01)。经益肝康浸膏预孵育的益肝康 IL-1β组与单纯IL-1β组相比,p38活性明显受到抑制(1.550±0.410vs2.973±0.953,P<0.01)。结论:IL-1β可促进大鼠HSCⅠ型胶原合成;细胞内p38信号蛋白参与了IL-1β促HSCⅠ型胶原合成;益肝康可通过阻断p38通路,从而发挥抑制HSCⅠ型胶原合成作用。     

复方益气活血化瘀中药对大鼠肝纤维化组织中胶原和转化生长因子β1表达的影响

目的应用二甲基亚硝胺（DMN）建立肝纤维化大鼠模型,研究以黄芪、丹参、三七为主的益气活血化瘀复方中药抗肝纤维化的作用机制。方法将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药干预组。采用DMN腹腔内注射的方法建立肝纤维化大鼠模型;根据病理学检查评价各组动物肝纤维化程度;应用RT-PCR检测各组肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1mRNA水平;应用免疫组化检测各组肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1的表达。结果中药干预组大鼠肝纤维化程度、肝组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原和TGF-β1mRNA水平,以及肝组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原和TGF-β1的阳性表达均分别较模型组显著减轻与下降。结论益气活血化瘀复方中药能明显减轻肝组织病理改变和肝纤维化程度,抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1表达是其抗肝纤维化的部分机制。     

鸡尾酒疗法对肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ表达的影响

目的:研究鸡尾酒疗法对肝纤维化大鼠肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)及Ⅲ型胶原(COLⅢ)表达的影响.方法:采用CCl4造成大鼠肝纤维化模型, 实验分为: 牛磺酸组、表没食子儿茶素没食子酸酯组、三羟基异黄酮组、鸡尾酒组、秋水仙碱组、模型组和正常组. 在实验的第10周末取肝组织, HE染色法观察肝组织改变, 免疫组织化学法检测肝组织中TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ的表达.结果:病理组织学观察发现各组能明显改善肝纤维化大鼠肝组织结构和肝纤维化, 免疫组织化学检测表明鸡尾酒组、三羟基异黄酮组、表没食子儿茶素没食子酸酯组、牛磺酸组的肝组织中TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ表达量与模型组比较均显著降低(TGF-β1: 2.57±0.23, 4.21±0.35, 4.93±0.21, 4.81±0.16 vs12.11±0.62, P <0.05; COLⅠ: 2.69±0.10, 4.88±0.42, 5.04±0.31, 4.79±0.29 vs 13.06±0.24,P <0.05; COLⅢ: 3.17±0.42, 5.73±0.23, 5.51±0.25, 5.24±0.18 vs 15.15±0.43, P <0.05), 并且鸡尾酒组与单一用药各组相比有统计学意义(P <0.05).结论:鸡尾酒疗法能对肝纤维化大鼠的肝脏起保护作用, 与单一用药相比更能有效降低TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ的表达, 可能具有更高的抗肝纤维化能力.     

复方中药益肝康抑制肝星状细胞增殖的作用机制

目的:探讨活血化瘀复方中药益肝康抑制大鼠肝星状细胞(HSC)增殖的作用机制.方法:采用IL-1β激活HSC,应用Westernblot检测JNK的活化程度;应用活细胞计数试剂盒-CCK-8检测HSC增殖并观察JNK特异性阻断剂SP600125对IL-1β促HSC增殖的影响.应用凝胶电泳移动抑制法测定AP-1的活性.结果:IL-1β有明显促大鼠HSC增殖作用,IL-1β作用培养的HSC24h后,吸光值明显高于对照组(1.573±0.026vs1.339±0.073,P=0.000);经JNK特异性阻滞剂SP600125预处理后,IL-1β促HSC增殖作用受到抑制,SP600125浓度为10,20及40μmol/L时,吸光值分别为1.427±0.113,0.772±0.093,0.675±0.074,与对照组(1.560±0.110)相比其增殖反应均明显降低(P=0.03;P=0.000;P=0.000);IL-1β可激活大鼠HSCsJNK信号蛋白,并呈现出一定的时相变化.IL-1β作用HSCs后0,5,15,30,60及120min,JNK活性分别为0.982±0.299,1.501±0.720,2.133±0.882,3.360±0.452,2.181±0.789,1.385±0.368.与0(未加IL-1β)相比,15min,30min及60min均有显著差异(P=0.002,P=0.000,P=0.001).益肝康可抑制IL-1β诱导的HSCsJNK活性(1.610±0.242vs3.360±0.452,P=0.000);益肝康可抑制IL-1β诱导的HSCsAP-1活性,经益肝康预处理HSCs1h后,AP-1活性明显受到抑制(342.43±85.77vs597.70±83.96,P=0.005).结论:IL-1β可刺激HSC增殖,细胞内JNK信号转导通路参与了IL-1β促HSC增殖作用;益肝康可通过阻滞JNK/AP-1通路,抑制HSC增殖.     

蕲艾提取液对免疫性肝纤维化大鼠转化生长因子-β1表达的影响

目的:观察蕲艾提取液对肝纤维化大鼠血清和肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其对肝纤维化的作用及相关机制。方法:Wister大鼠72只随机分为正常对照组、肝纤维化模型组及小、中、大剂量蕲艾提取液处理组和丹参对照组,采用猪血清腹腔内注射法构建肝纤维化大鼠模型;病理切片HE染色评价各组大鼠肝组织纤维化程度;应用ELISA法检测大鼠血清中TGF-β1含量的变化;同时分别采用荧光定量PCR和Western blot检测大鼠肝脏组织TGF-β1mRNA和蛋白表达水平。结果:不同剂量蕲艾提取液处理组大鼠与肝纤维化模型组相比,肝纤维化程度显著减轻;血清TGF-β1水平、肝脏组织中TGF-β1mRNA和蛋白水平均明显降低,差异有显著性意义。结论:蕲艾提取液能有效抗大鼠肝纤维化,其作用机制可能与通过抑制TGF-β1表达和分泌有关。     

熊果酸对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1和α-SMA表达的

织TGF-β1基因与蛋白及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响, 并探讨其抗肝纤维化作用机制.方法: SD大鼠96只随机分为正常对照组(N组)、模型组(M组)、UA低剂量组(U1组)、UA中剂量组(U2组)、UA高剂量组(U3组)及秋水仙碱组(C组), 每组16只. 除N组外, 均用二甲基亚硝胺(Dimethylnitrosamine, DMN)诱导肝纤维化4 wk, 分别给予安慰剂、不同剂量的UA、秋水仙碱腹腔注射, 治疗4 wk处死大鼠,取肝组织行病理HE染色及VG染色判断炎症和肝纤维化程度; 分别采用免疫组织化学和Western blot检测TGF-β1蛋白和α-SMA蛋白的表达; 采用RT-PCR检测TGF-β1 mRNA的表达.结果: U2和U3组肝细胞坏死和纤维组织增生明显减轻; M组TGF-β1蛋白、TGF-β1 mRNA及α-SMA蛋白较N组的表达明显增加(8.76±1.47 vs 1.48±0.24; 0.60±0.11 vs 0.05±0.02;0.51±0.10 vs 0.09±0.02, 均P<0.01). U1组和C组TGF-β1蛋白的表达较M组降低( P<0.05),U2和U3组TGF-β1蛋白的表达较M组明显降低(5.32±1.63, 3.98±0.67 vs 8.76±1.47,均P<0.01), 且低于C组的表达(7.14±1.29,P<0.05或0.01). U2和U3组的TGF-β1 mRNA的表达也明显低于M组(0.36±0.07, 0.25±0.06 vs 0.60±0.11, 均P<0.01)和C组(0.47±0.10, P<0.05或0.01). U1-U3组较M组α-SMA蛋白的表达明显降低(0.36±0.08, 0.23±0.02,0.15±0.03 vs 0.51±0.10, 均P<0.01); U2和U3组α-SMA蛋白的表达也显著低于C组(0.43±0.05, 均P<0.01).结论: UA能明显改善肝纤维化大鼠的肝脏组织结构, 减轻肝纤维化; 其抗肝纤维化的机制可能与降低TGF-β1表达, 抑制HSC的激活有关.     

排钱草总生物碱对免疫性肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF-β1表达的影响

目的:观察排钱草总生物碱对免疫性肝纤维化大鼠肝脏胶原沉积和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,研究其对肝纤维化形成的抑制作用,并探讨可能的作用机制.方法:设立模型对照组、药物对照组、排钱草总生物碱高、中、低剂量组和正常对照组,以腹腔注射猪血清方法诱导大鼠肝纤维化动物模型.排钱草总生物碱高、中、低剂量组大鼠在注射猪血清的同时分别灌服排钱草总生物碱30mg/kg,20mg/kg,10mg/kg,1次/d,共8周.大鼠肝脏HE染色,观察各组大鼠肝组织的炎性坏死与胶原纤维沉积变化;免疫组化观察大鼠肝纤维化形成过程中腓钱草总生物碱对肝脏表达Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白及TGF-β1的影响.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肝脏出现典型的肝纤维化表现,肝脏胶原纤维间隔广泛形成,肝小叶与肝窦内胶原增生沉积明显,Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原(1.28±2.59 vs 13.82±6.55,1.00±1.22 vs 14.69±7.16,1.03±1.46 vs 12.44±6.89, P值均＜0.001)及TGF-β1表达明显增多.高、中、低剂量排钱草总生物碱均可以明显减轻大鼠肝脏内胶原纤维增生沉积(P＜0.05),抑制肝脏Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原蛋白(P值均＜0.05)及TGF-β1的合成表达.结论:排钱草总生物碱通过抑制肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原蛋白及TGF-β1的合成表达,起到良好地抗肝纤维化作用.     

柔肝冲剂对大鼠肝星状细胞表达转化生长因子β1和胶原的影响

[目的]观察柔肝冲剂对大鼠肝星状细胞(HSC)表达转化生长因子β1(TGF-β1)和胶原的影响.[方法]采用血清药理学方法处理HSC,以貂肺上皮细胞(Mv1Lu)生长抑制MTT法检测培养上清液中TGF-β1活性,免疫细胞化学染色检测HSC TGF-β1和胶原的表达.[结果]经柔肝冲剂处理的HSC培养上清液中TGF-β1的生物活性和细胞内TGF-β1的表达受到显著抑制,其中对纤维肝HSC的作用更明显,抑制作用优于秋水仙碱.柔肝冲剂能显著抑制纤维肝HSC表达胶原,对Ⅳ型和Ⅰ型胶原具有较高的抑制率.[结论]柔肝冲剂能抑制HSC产生TGF-β1和胶原,阻断肝纤维化时HSC合成胶原等细胞外基质的自分泌放大过程.     

复方红景天对大鼠肝组织转化生长因子β1 mRNA表达的影响

目的 :初步探讨复方红景天抗肝纤维化的疗效与分子机制。方法 :用 CCl4 皮下注射法诱导 SD大鼠肝纤维化模型 ,同时给予复方红景天颗粒口服进行干预性治疗 ,观察大鼠血清肝纤维化指标、肝组织转化生长因子β1 -(TGF-β1 ) m RNA、α1 ( ) m RNA表达水平及肝组织病理学变化。结果 :口服复方红景天可降低肝纤维化大鼠血清 型前胶原 (PC )、 型胶原 (C )、透明质酸 (HA)水平 ,抑制 TGF-β1 m RNA与α1 ( ) m RNA表达的增加 ,并明显改善大鼠肝组织病理变化 ,TGF-β1 m RNA表达的变化与纤维化指标、αl( ) m RNA表达及肝组织病理学改变呈正相关。结论 :复方红景天可能通过抑制 TGF-β1 m RNA、α1 ( ) m RNA表达从而减少胶原纤维合成等机制有效干预CCl4 诱导的大鼠肝纤维化     

ERCP and MRCP--when and why

Since the introduction of endoscopic retrograde cholangiopancreatography (ERCP) in the 1970s, gastroenterologists have a wide spectrum of diagnostic and therapeutic options in the biliopancreatic ductal system at their disposal. With its arrival in the 1990s, magnetic resonance cholangiopancreatography (MRCP) developed as a potent diagnostic tool in biliopancreatic pathology. Currently, MRCP is widely replacing diagnostic ERCP and thereby avoiding complications related to endoscopic technique.We summarize evidence-based data and demonstrate indications and differential indications for MRCP and ERCP in pancreatic disease. Complications related to the procedures and possible medical prevention are discussed. The feasibility of interventional endoscopy in pancreatic disease is reported in detail. The role of gastroenterologists in performing MRCP is outlined on the basis of practical examples.     

Convection and permeation and albumin between plasma and interstitium.

Nonequilibrium thermodynamics is combined with compartmental analysis to interpret albumin sieving and tracer experiments in terms of a permeability-surface product PS (permeation) and a solvent drag reflection coefficient σ_f (convection) for various blood-tissue barriers. The human whole-body albumin data of Lassen, Parving, and Rossing (Lassen, Parving, and Rossing, Microvasc. Res.7, i–iv (1974)), modified for nonliver tissues by Johnson and Levitt (Johnson &; Levitt, Microvasc. Res.9, 141 (1975)) lead to P ～ 1.8 × 10^?8 cm sec^?1 (based on a surface area per unit plasma volume of 700 cm^?1) and to σ_f ～ 0.9, which imply, in agreement with Johnson and Levitt, that permeation is the dominant nonliver blood-tissue transport mechanism for albumin in the normal resting human. Similar values are derived from the dog paw muscle data of Garlick and Renkin (Garlick and Renkin, Amer. J. Physiol.219, 1595–1605 (1970)). The Casley-Smith (Casley-Smith, Microvasc. Res.9, 43–48 (1975)) mechanism of uphill albumin transport is verified as possible. It is tentatively inferred that lymph formation in resting tissue does not result from a small difference between a large fluid (volumetric) filtration and an almost equally large fluid reabsorption, either in the same capillary (Starling) or between different capillaries (Zweifach) (Zweifach, Circ. Res.34, 858–866 (1974)). Rather, reabsorption is negligibly small relative to filtration, and lymph flow is comparable to volumetric filtration.