醋酸铅对大鼠睾丸支持细胞雄激素结合蛋白、抑制素和转铁蛋白mRNA表达的影响

目的：观察醋酸铅对体外培养大鼠睾丸支持细胞雄激素结合蛋白(ABP)、转铁蛋白(Tf)和抑制素(INH)mRNA表达水平的影响。方法：体外培养大鼠睾丸支持细胞,分离纯化经鉴定后,分别给予不同浓度(0、10-8、10-7、10-6和10-5moL/L)的醋酸铅处理,培养24 h后采用MTT法测定细胞活性,采用RT-PCR检...     

重铬酸钾对大鼠睾丸支持细胞中雄激素结合蛋白、转铁蛋白和抑制素蛋白表达的影响

目的:研究重铬酸钾对大鼠睾丸支持细胞中雄激素结合蛋白(ABP)、转铁蛋白(Tf)和抑制素(INH)蛋白的表达的影响。方法:建立大鼠睾丸支持细胞体外原代培养模型,分为0mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L重铬酸钾染毒组,Westernblot法检测重铬酸钾作用24h后各组睾丸支持细胞中ABP、Tf和INH蛋白表达水平的变化。结果:ABP蛋白的表达量随重铬酸钾浓度的升高而升高(0.39±0.19、0.51±0.18及0.81±0.19),差异有统计学意义(F=10.738,P<0.001);Tf蛋白的表达量也随重铬酸钾浓度的升高而增加(0.56±0.19、1.21±0.19及1.19±0.17),差异有统计学意义(F=32.435,P<0.001);而INH蛋白表达却呈下降趋势(1.06±0.19、1.20±0.19及0.71±0.19),差异有统计学意义(F=14.116,P<0.001)。结论:重铬酸钾能够引起大鼠睾丸支持细胞分泌功能的变化,产生生殖毒性作用。     

大鼠睾丸支持细胞的分离及培养方法

目的 简化大鼠睾丸支持细胞的分离培养方法,提高支持细胞的获取量。方法 取鼠龄16－22天的Wistar大鼠,去除睾丸被膜,剪碎后用0.25%胰蛋白酶和0.1%胶原酶次第消化。然后将其制成细胞悬液并分装入25cm^2的培养瓶中,旋转在39℃5％CO2的培养箱孵育48h,以利于去除精原细胞,取出后冲洗两次,换液并移入37℃5％CO2培养箱进行培养,在此期间每天用置显微镜进行观察,并于培养第6天做光镜和电镜观察。结果 在大鼠睾丸支持细胞的分离培养中,支持细胞占培养细胞总数的90％以上,大大提高了支持细胞的获取量。结论 应用本实验方法获取大鼠睾丸扶持细胞获得成功并简化了国内现行的方法,提高了支持细胞的获取量。     

茶多酚对铝致大鼠睾丸支持细胞损伤的拮抗作用研究

目的 探讨茶多酚(TP)对铝暴露大鼠睾丸支持细胞损伤的拮抗作用.方法 原代培养大鼠睾丸支持细胞.将细胞分为0 μmol/L AlCl3(对照组)、400 μmol/L AlCl3(铝暴露组)、40 μg/mL TP +400 μmol/L AlCl3组(低剂量拮抗组)、160μg/mL茶多酚+400 μmol/L AlCl3组(高剂量拮抗组),各组用相应的药物处理24 h.四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞的生长活性;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测抑制素B(INHB) mRNA的表达.结果 与对照组比较,铝暴露组的细胞活性、IN-HB mRNA表达均明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).与铝暴露组比较,低剂量拮抗组、高剂量拮抗组能够明显提高细胞活性,差别具有统计学意义(P＜0.05).与铝暴露组比较,高剂量拮抗组能够明显提高INHB mRNA表达,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 高剂量TP能够拮抗铝对大鼠睾丸支持细胞的损伤.     

改良的大鼠睾丸支持细胞分离培养方法

目的 简化睾丸支持细胞的分离方法，提高细胞产量。方法 采用0.25%膜酶、0.05%胶原酶序贯两步消化法消化，细胞悬液在37℃、5%CO2培养箱内孵育培养48h，观察产量和细胞功能。结果 改良的分离方法所获得的睾丸支持细胞占细胞总数的90%以上，大大提高了支持细胞的获取量，细胞Fas配体（Fas-L)表达功能正常。结论 改良的分离培养方法简化了传统的分离培养方法，同时提高了细胞产量。     

磷酸二丁酯对原代培养的大鼠睾丸支持细胞的影响

目的 探讨磷酸二丁酯对原代培养的大鼠睾丸支持细胞的损伤情况.方法 采用胰蛋白酶和胶原酶二步消化法分离并提取大鼠睾丸支持细胞,用MTT法来观察磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞存活率的影响,计算半数抑制浓度(IC50)确定染毒剂量,并观察给予不同浓度的磷酸二丁酯后,其对大鼠睾丸支持细胞中的一些生化指标和代谢指标的影响.结果 磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞的生长有抑制作用并可使大鼠睾丸支持细胞孵育液中乳酸含量减少.结论 磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞有损伤,提示其具有一定的生殖毒性.     

铝对大鼠睾丸支持细胞雄激素结合蛋白mRNA表达的影响

目的:研究氯化铝对体外培养大鼠睾丸支持细胞的雄激素结合蛋白(ABP)mRNA表达的影响。方法:体外培养大鼠睾丸支持细胞为模型,分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组(0,300,400,500μmol/L)氯化铝染毒睾丸支持细胞,培养24h后采取MTT法检测细胞活性,RT-PCR法检测ABP mRNA的表达水平。结果:随着氯化铝染毒剂量的增大,ABP mRNA的表达下降。高剂量染毒组与对照组相比较,ABP mRNA的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:氯化铝对体外培养的睾丸支持细胞具有毒性作用,抑制ABP mRNA的表达,从而损伤支持细胞功能,导致生殖功能障碍。     

磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞的毒性作用

目的 探讨磷酸二丁酯对原代培养的大鼠睾丸支持细胞的损伤情况.方法 主要采用胰蛋白酶和胶原酶二步消化法分离并提取大鼠睾丸支持细胞,用MTT法来观察磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞存活率的影响,计算半数抑制浓度(IC50)确定染毒剂量,并观察给予不同浓度的磷酸二丁酯后,其对大鼠睾丸支持细胞中的一些生化指标和代谢指标的影响.结果 磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞的生长有抑制作用并可使大鼠睾丸支持细胞孵育液中乳酸含量减少.结论 磷酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞有损伤,提示其具有一定的生殖毒性.     

细胞外基质对离体大鼠睾丸支持细胞的影响

本实验利用组成细胞外基质的两种糖蛋白──纤维粘连蛋白和层粘连蛋白，以及来源于肝、肺组织的两种生物基质，在体外研究了细胞外基质对大鼠支持细胞的贴壁和铺展及形态的影响。结果证明两种糖蛋白均能促进支持细胞的贴壁和铺展。来源于肺组织的生物基质能在体外保留体内支持细胞的柱状细胞形态，而来自肝组织的生物基质则没有这种特性。     

氯喹对大鼠睾丸支持细胞溶酶体的影响

用氯喹灌胃大鼠可致生精障碍，电镜下发现服氯喹组最早有Sertoli细胞溶酶体变化。形态计量发现细胞溶酶体数目略减少（P＞0．05），体积增大（P＜0．01）。作者还讨论了Sertoli细胞溶酶体的变化对精子发生的意义。     

低氧对大鼠睾丸支持细胞形态结构与存活率的影响

目的 探讨低氧对体外培养大鼠睾丸支持细胞的影响.方法 应用大鼠睾丸支持细胞与生精细胞共培养系统,观察低氧条件下支持细胞的存活数,考马斯亮蓝染色后细胞骨架变化以及生精细胞脱落数.结果 在低氧条件下,支持细胞存活率显著降低,支持细胞细胞骨架出现松弛、回缩等现象;脱落生精细胞数随低氧时间的延长而增加,有明显时间-效应关系.结论 低氧可引起大鼠睾丸支持细胞形态结构及功能的损伤.     

草甘膦对小鼠睾丸支持细胞凋亡及雄激素结合蛋白、波形蛋白mRNA表达的影响

目的探讨不同剂量草甘膦（GLY）对小鼠睾丸支持细胞（sertoli细胞）凋亡及细胞存活率的影响,同时观察雄激素结合蛋白
（ABP）及波形蛋白mRNA表达的变化。方法体外原代培养小鼠sertoli细胞,收集细胞并分为正常对照组和不同剂量草甘膦
组,草甘膦的浓度分别为60、90、120、150和180 mg/L;各组细胞培养24 h后,倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态改变;MTT
法检测细胞存活率;Hoechst 33342检测细胞凋亡情况;RT-PCR检测草甘膦对ABP及波形蛋白mRNA表达情况。结果在不同
浓度草甘膦作用下,sertoli细胞出现不同程度缩小、脱落、甚至破碎;细胞的增值率明显低于对照组（P<0.01）;细胞凋亡指数明显
高于对照组（P<0.05）;细胞ABP mRNA和波形蛋白mRNA 表达与对照组相比均减弱（P<0.05）。结论草甘膦对小鼠sertoli细
胞有一定的毒性,能诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖,且随草甘膦剂量的增加,有害作用有增加的趋势;同时能抑制ABP和波形蛋
白mRNA的表达。
     

Effect of lead acetate toxicity on experimental male albino rat

Objective

To evaluate the effect of different doses of lead acetate (1/20, 1/40 and 1/60 of LD₅₀) on body weight gain, blood picture, plasma protein profile and the function of liver, kidney and thyroid gland.

Methods

Male albino rats were divided into four groups, the first group represented the health control animals, while the second, third and fourth groups were ingested orally with sub lethal doses of lead acetate (1/20, 1/40 and 1/60) of the oral LD₅₀, respectively. One dose was ingested every two days during the experimental period (14 weeks) including the adaptation time. Blood was collected and used for all analysis.

Results

The results showed that, the ingestion of Pb²⁺ induced significant stimulation in glutamic-pyruvic transaminase (ALT) and glutamic-oxalacetic transaminease (AST) activity. Also, total soluble protein and albumin contents of plasma were significantly decreased, while the content of globulin was changed by the Pb²⁺ treatments. The cholinesterase activity was inhibited, but the activities of alkaline and acid phosphates and lactate dehydrogenase were stimulated, while plasma glucose level was elevated as a result of lead acetate intoxication. In case of blood picture, Pb²⁺ ingestion reduced the contents of hemoglobin and RBCs count of intoxicated rat''s blood and the plasma levels of T3, T4 and blood WBCs count were decreased.

Conclusions

It can be concluded that lead acetate has harmful effect on experimental male albino rats. Therefore, the present work advises people to prevent exposure to the lead compound to avoid injurious hazard risk.     

全反式维甲酸对HL-60细胞核干细胞因子mRNA表达的影响

目的:检测全反式维甲酸(ATRA)诱导后HL-60细胞核干细胞因子(NS)mRNA表达的变化,探讨NS mRNA表达与细胞分化之间的关系.方法:从NS基因的3个变异体中筛选出共同序列设计特异性引物,用终浓度为0.1 μmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L的ATRA诱导分化HL-60白血病细胞48 h,以不加ATRA的HL-60细胞作为对照,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测HL-60细胞NS mRNA表达水平的变化.结果:ATRA诱导HL-60细胞分化后NS mRNA表达均有所降低,0.1 μmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L浓度下NS mRNA表达量分别下降3.72%±0.84%、58.70%±4.98%和61.60%±2.26%.其中1 μmol/L和10 μmol/L组与对照组和0.1 μmol/L组比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论:NS可能与白血病细胞分化有关,参与调控细胞分化过程.     

Effects of shRNA Targeting VEGF on VEGF mRNA Expression in Gastric Cancer Cells

In order to investigate the inhibitory effect of plasmid-mediated short hairpin RNA tar-geting vascular endothelial growth factor (VEGF) on the expression of VEGF mRNA in human gas-tric cancer cells, a plasmid vector for transcribing specific short hairpin RNA targeting VEGF ( pU6-VEGF ) was constructed, and then transfected into human gastric cancer cells using Lipofec-tamine2000. The VEGF mRNA expression level was detected by RT-PCR. RPMI1640 was used for blank control, and pSilencer 1.0-U6 empty plasmid for the negative control. Results showed the clone and sequence analysis revealed that the recombinant plasmid vector of pU6-VEGF was successfully constructed. The VEGF mRNA expression levels in blank control group, experimental group (pU6-VEGF) and negative control group (pSilencer1.0-U6) were 100%, 49% and 94%, respectively, indicating VEGF mRNA expression in the cells transfected with pU-VEGF vector was inhibited sig-nificantly as compared with blank control group and negative control group. It was concluded that the short hairpin RNA could significantly inhibit the expression of VEGF mRNA, which provided an experimental basis for treating human cancer with anti-angiogenesis.     

醋酸铅对小鼠骨髓间充质干细胞生长的影响

目的：探讨醋酸铅对小鼠骨髓间充质干细胞生长的影响。方法: 体外培养法培养小鼠骨髓间充质干细胞，加入40、60和100 μmol•L^-1醋酸铅，观察其对间充质干细胞成集落(CFU-F)能力的影响及其变化规律。结果：醋酸铅浓度40、60和100 μmol•L^-1时的成集落率分别为(3.30±0.20)、(2.40±0.10)和(1.57±0.21)/10⁵， 与对照组成集落率［（4.20±0.20）/105)］比较差异有显著性(P<0.05)；醋酸铅各浓度组间比较，CFU-F集落率差异有显著性(P<0.05)，剂量-效应关系分析醋酸铅浓度与CFU-F集落率呈负相关关系（r=-0.960，P<0.01)。体外培养6 d时，对照组集落中细胞多呈现梭形，加铅组细胞多呈不规则形状或圆形。结论:醋酸铅可明显抑制体外培养的骨髓间充质干细胞的成集落率生长并随剂量的增大抑制作用明显增强。     

醋酸铅对体外培养人肾小球系膜细胞的凋亡作用

目的探讨醋酸铅对人肾小球系膜细胞（HRMC）的凋亡作用。方法醋酸铅处理HRMC后,HE染色法观察细胞形态学变化;细胞免疫组织化学法检测p53、bax、bcl-2的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果经10、20μmol/L醋酸铅处理24 h后,HE染色均显示出醋酸铅组细胞成凋亡形态学改变。HRMC的细胞免疫组织化学结果显示醋酸铅组的p53和bax阳性表达升高,而bcl-2的阳性表达下降。流式细胞仪检测结果表明醋酸铅组细胞凋亡率较对照组明显升高。结论醋酸铅可促进HRMC凋亡,进而影响肾脏正常功能。     

Effects of mature Sertoli cells on allogeneic islets cocultured in vitro

INTRODUCTIONNowadays 180 million people suffer from dia-betes mellitus in world. An exogenous insulininjection has been the gold standard treatment fortype I diabetic patients, which is complicated andcould never completely correct the underlying loss ofislet cells and the resulting unregulated glucose lev-els. Islet transplantation seems to be an almost idealtherapy for insulin-dependent patients [1]. However,in isolate islet transplants the early clinical islet graftloss in 1 month is a…