缺氧诱导因子在食管鳞癌中的表达研究

目的:探讨食管鳞癌中缺氧诱导因子HIF-1α的表达及其与临床病理之间的关系。方法:采用荧光定量RT-PCR和免疫组化分别测定食管鳞癌组织和正常组织HIF-1α表达水平。对比分析HIF-1α在食管鳞癌组织和正常组织中的表达以及HIF-1α与肿瘤侵犯深度、淋巴结转移、肿瘤组织分化程度之间的关系。结果:食管鳞癌组织中HIF-1α mRNA表达高于食管正常组织(P=0.014),食管鳞癌组织中HIF-1α蛋白阳性率50%,明显高于正常组织的14%。HIF-1α mRNA表达趋向于与淋巴结转移相关(P=0.073)。HIF-1α蛋白表达在胞核和(或)胞浆中,HIF-1α蛋白表达与淋巴结转移、肿瘤组织分化相关(分别P=0.013、P=0.028)。结论:肿瘤组织中HIF-1α表达高于正常食管组织,其表达除蛋白水平受缺氧调节外,还可能存在转录及转录后水平调节;HIF-1α亦与淋巴结转移和肿瘤组织分化程度密切相关。因此,HIF-1α有可能作为反映食管癌诊断及进展的生物学指标,成为抗血管生成治疗的靶点。     

鳞癌中缺氧诱导因子-1α、血管生成因子在食管鳞癌中的表达及临床病理意义

目的 探讨食管鳞癌中缺氧诱导因子(HIF-1α)和血管生成因子(VEGF)的表达及其与临床病理之间的关系.方法 采用荧光定量RT-PCR和免疫组化分别测定食管鳞癌组织和切端正常组织HIF-1α、VEGF表达水平.对比分析HIF-1α、VEGF在食管鳞癌组织和正常切端中的表达以及HW-1α和VEGF与肿瘤侵犯深度、淋巴结转移(含淋巴侵犯)、肿瘤组织分化程度之间的关系.结果 HIF-1α mRNA在食管鳞癌组织中的相对表达量为5.88+1.12,在食管切端正常组织中的相对表达量为4.76±1.26,前者明显高于后者(P=0.014);VEGF mRNA在食管鳞癌组织中相对表达量为12.79±2.51,在食管切端正常组织中的相对表达量为10.92±2.23,前者明显高于后者(P=0.010);食管鳞癌组织中HIF-1α蛋白质阳性率50%(21/42),明显高于正常切端组织的14%(6/42);VEGF蛋白质阳性率76%(32/42),明显高于正常切端组织的33%(14/42).HIF-1α mRNA、VEGF mRNA表达趋向于与淋巴结转移相关(分别P=0.073、P=O.063).HIF-1α蛋白质表达在胞核和(或)胞质中,HIF-1α蛋白表达与淋巴结转移及淋巴侵犯、肿瘤组织分化相关(分别P=0.013、P=0.028).但没有发现HIF-1α mRNA与VEGF蛋白之间有显著相关性.结论 肿瘤组织中HIF-1α除蛋白质水平受缺氧调节外,还可能存在转录及转录后水平调节;通过对HIF-1α与临床病理关系的研究表明HIF-1α亦与淋巴结转移和肿瘤组织分化程度密切相关.因此,HIF-1α与VEGF有可能作为反映食管癌诊断及进展的生物学指标,成为抗血管生成治疗的靶点.     

食管鳞癌组织中乏氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子及微血管密度测定

目的:探讨食管鳞癌组织中乏氧诱导因子(HIF-1α的表达与血管生成的关系.方法:采用免疫组织化学SP技术检测46例食管鳞癌及26例癌旁正常组织中HIF-1α、血管内皮细胞生长因子(VEGF蛋白的表达,用CD34抗体标记肿瘤组织血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD).结果:食管鳞癌组织中HIF-1α、VEGF的阳性率分别为41.31%(19/46)、58.70%(27/46),MVD为46.12±7.64;均高于癌旁正常组织(P＜0.05).HIF-1α、VEGF的表达与食管鳞癌组织学分级和TNM分期无关(P＞0.05),与淋巴结转移及浸润深度有关(P＜0.05).食管鳞癌组织中HIF-1α的表达与VEGF表达及MVD均呈正相关(P＜0.05).结论:HIF-1α与食管癌新生血管形成有关.     

食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA表达

目的:检测食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA的表达.方法:应用免疫组化SP法和原位杂交方法检测49例食管鳞癌组织及其相应的30例癌旁不典型增生组织和49例正常食管黏膜组织中Syndecan-1蛋白及其mRNA的表达.结果:①正常食管黏膜组织中Syndecan-1蛋白和mRNA均为阳性表达.食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA阳性表达率均低于癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织(P均＜0.05).②淋巴结转移者食管鳞癌组织与不典型增生组织中Syndecan-1蛋白和mRNA阳性表达率均低于无淋巴结转移组(P均＜0.05).③浸润至外膜的食管鳞癌组织及不典型增生组织中Syndecan-1蛋白和mRNA的阳性表达率分别低于深肌层及浅肌层(P均＜0.05).结论:人食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA均呈低表达,Syndecan-1与食管鳞癌的发生发展及浸润转移有关.     

HIF-1α在食管癌组织中的表达及其意义

目的 检测HIF-1α蛋白在食管癌组织中的表达,探讨HIF-1α在食管癌发生发展,浸润和转移中的作用,以及在食管癌浸润转移中的关系.方法 利用免疫组织化学S-P法检测了100例食管鳞癌组织中HIF-1α蛋白的表达.结果 结果 表明,HIF-1α在食管癌组织、正常食管癌黏膜组织中均有不同程度的表达,其在食管癌组织中表达率明显高于其正常黏膜(P<0.05),且与肿瘤的浸润深度有关(P<0.05).结论 HIF-1α在信管癌中高表达且与食管癌浸润深度有关.     

妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘组织缺氧诱导因子HIF-1α、HIF-2α mRNA表达水平的研究

目的 观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA、缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)mRNA在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者胎盘组织上的表达,探讨其与ICP胎儿缺氧的关系.方法 ICP患者和正常晚孕妇女各20例, RT-PCR法检测两组胎盘组织上HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA的表达.结果 ICP患者胎盘组织HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA的表达和正常晚孕妇女差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 低氧条件下,ICP患者胎盘组织HIF蛋白合成的调节可能并不在mRNA表达水平,而在转录后水平.     

Expression and clinical significance of transcription factor FoxO1 in human esophageal squamous carcinoma

目的 检测FoxO1在食管鳞状细胞癌组织中的表达水平,分析其与食管鳞状细胞癌各临床病理因素的关系.方法 应用实时荧光定量PCR SYBR Green荧光染料法,检测42例手术切除的食管鳞癌组织及配对的正常食管黏膜组织中FoxO1 mRNA的表达;免疫组化S-P法检测FoxO1蛋白的表达及组织学定位.结果 正常食管黏膜组织中FoxO1mRNA及蛋白均呈低表达,而食管鳞癌组织中FoxO1 mRNA及蛋白表达显著升高(P＜0.01).高分化食管鳞癌组织的相对表达量显著高于中低分化食管鳞癌组织(P＜0.01).食管鳞癌组织中FoxO1 mRNA及蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、TNM分期及有无淋巴结转移无明显相关性(P＞0.05).结论 FoxO1在正常食管黏膜组织和食管鳞癌组织中的表达存在明显差异,其表达水平与肿瘤分化程度密切相关.     

Stathmin基因在食管鳞癌中的表达及生物学意义

目的 探讨Stathmin基因在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其与ESCC发生、发展的关系.方法 应用原位杂交和免疫组织化学法检测3株食管鳞癌细胞EC9706、Eca109和EC-1及75例食管鳞癌组织、25例癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织中Stathmin mRNA和蛋白的表达,并分析Stathmin基因表达与临床病理特征的关系.结果 StathminmRNA和蛋白在3株食管鳞癌细胞EC9706、Eca109和EC-1中均呈高表达,阳性表达率>80%.在75例食管鳞癌组织标本中,Stathmin mRNA和蛋白的阳性表达率分别为82.7%和81.3%,与癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织比较有显著性差异(χ2=19.204、25.03,均P<0.01).Stathmin mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈正相关(r=0.413,P=0.000).不同分化程度、有无淋巴结转移、肿瘤浸润深度和TNM分级的食管鳞癌组织之间Stathmin mRNA和蛋白表达差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 食管鳞癌细胞株及组织中Stathmin mRNA及蛋白高表达,与食管鳞癌的分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及TNM分期显著相关,Stathmin可能与食管鳞癌发生发展有关.Stathmin对ESCC的早期诊断及预后判断均有重要意义.Stathmin有望成为理想的生物治疗靶点.     

食管鳞癌组织中CD44V6和基质金属蛋白酶-7的表达

目的:探讨CD44V6及基质金属蛋白酶-7(MMP-7)的表达与食管癌发生、发展及浸润、转移的关系.方法:应用免疫组化SP法检测60例食管鳞癌组织、30例癌旁不典型增生组织及60例正常食管黏膜组织中CD44V6及MMP-7蛋白的表达情况.结果:癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织中CD44V6蛋白的阳性表达率依次降低,分别为76.7%(46/60)、60.0%(18/30)、43.3%(26/60),组间比较差异有统计学意义(χ2=14.222,P＜0.05);癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织中MMP-7的阳性表达率分别为73.3%(44/60)、80.0%(24/30)、36.7%(22/60),组间比较差异有统计学意义(χ2=23.431,P＜0.05).食管鳞癌组织中CD44V6蛋白表达与癌的浸润深度及淋巴结转移有关(P＜0.05);MMP-7蛋白表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移有关(P＜0.05).结论:在食管癌的浸润、转移及黏膜上皮癌变过程中CD44V6和MMP-7可能起重要作用,二者的联合检测可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.     

食管鳞状细胞癌组织中Galectin-9和MMP-2蛋白的表达及与预后的关系

目的:探讨食管鳞状细胞癌(简称食管鳞癌)组织中Galectin-9和MMP-2蛋白的表达及与预后的关系。方法:制备组织芯片,应用免疫组化SP法检测63例食管鳞癌及其癌旁正常食管黏膜组织中Galectin-9和MMP-2蛋白的表达,分析2种蛋白的表达与临床病理指标和预后的关系。结果:食管鳞癌组织中Galectin-9蛋白的阳性表达率为62.5%,低于癌旁正常食管黏膜组织的89.3%(χ2=11.529,P<0.001),其表达与肿瘤的分化程度有关(P=0.001),且阳性表达者生存期更长(P=0.013)。食管鳞癌组织中MMP-2蛋白的阳性表达率为67.9%,高于癌旁正常食管黏膜组织的35.7%(χ2=9.633,P=0.001),其表达与肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),且阳性表达者生存期较短(P=0.036)。结论:食管鳞癌组织中Galectin-9低表达,MMP-2高表达;检测二者可用于判断食管鳞癌预后。     

食管鳞状细胞癌组织中EphA2和EphrinA1的表达

目的:观察食管鳞状细胞癌(食管鳞癌)组织中EphA2和EphrinA1蛋白及mRNA的表达水平,分析它们与食管癌患者预后的关系.方法:应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测173例食管鳞癌组织和19例正常食管黏膜组织中EphA2和EphrinA1蛋白表达水平;用激光捕获显微切割(LCM)技术和RT-PCR检测食管鳞癌组织中EphA2和EphrinA1 mRNA的水平.结果:食管鳞癌组织中EphA2阳性表达率80.9%、EphrinA1阳性表达率为84.4%,均明显高于正常食管黏膜(P＜0.05);EphA2和EphrinA1蛋白表达同食管鳞癌患者的年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、组织学分级无关;EphA2蛋白的表达水平与食管鳞癌患者的性别、淋巴结转移有关(P＜0.05),EphrinA1蛋白的表达与食管鳞癌患者的临床分期有关(P＜0.05).生存分析显示:EphA2和EphrinA1蛋白的高表达与食管鳞癌患者的生存期有关.结论:EphA2和EphrinA1蛋白的高表达提示食管鳞癌患者预后不佳.     

缺氧诱导因子2α在宫颈鳞癌组织中的表达及其意义

目的:探讨缺氧诱导因子2α(HIF-2α)在宫颈鳞癌组织中的表达及其意义。方法:通过原位杂交(ISH)技术检测102例宫颈鳞癌组织、66例CIN组织和40例正常宫颈组织中HIF-2αmRNA的表达情况及其与宫颈鳞癌临床病理参数的关系。结果:HIF-2αmRNA在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率均显著高于正常宫颈组织和CIN组织(P0.05),并且HIF-2αmRNA在宫颈鳞癌组织中的阳性表达与淋巴结转移(字2=6.766,P=0.009)和临床分期(字2=11.639,P=0.001)相关,而与年龄、病理组织学分化程度、浸润深度无关(P0.05)。结论:HIF-2αmRNA在宫颈鳞癌组织中表达上调,可能与宫颈鳞癌的发生和演进有关。     

食管鳞状细胞癌组织中凋亡抑制蛋白Livin的表达

目的:探讨食管鳞状细胞癌组织中凋亡抑制蛋白家族新成员Livin 及其2种异构体Livinα和Livinβ的表达情况.方法:采用实时逆转录PCR(real-time RT-PCR)方法检测46例食管鳞状细胞癌组织及其对应的癌旁正常组织中Livinα mRNA 和Livinβ mRNA 的表达,并用免疫组织化学方法检测Livin 蛋白的表达.结果:46例食管鳞状细胞癌组织中Livinα mRNA、Livinβ mRNA和蛋白的阳性表达率分别为82.6%(38/46)、82.6%(38/46)和93.5%(43/46),而对应癌旁正常组织中Livinα mRNA、Livinβ mRNA和蛋白的阳性表达率分别为43%(2/46)、6.5%(3/46)和6.5%(3/46),均低于癌组织中的表达(P＜0.05).食管鳞状细胞癌组织中Livin 2种异构体同时表达,且Livinβ mRNA与Livinα mRNA表达量差异无统计学意义(P＞0.05).结论:食管鳞状细胞癌组织中存在Livin mRNA及蛋白高表达现象,可能与食管鳞状细胞癌的发生、发展密切相关.     

Rac1?HIF-1α在缺氧的人食管鳞癌Eca109细胞株中的表达及其对细胞增殖水平的影响

目的:探讨Rac1、HIF-1α mRNA和蛋白在缺氧的人食管鳞癌Eca109细胞株中的表达及其对细胞增殖水平的影响.方法:应用半定量RT-PCR、Western blot法检测缺氧条件下Eca109细胞株Rac1、HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平;应用半定量RT-PCR和MTT法检测常氧和缺氧下Rac1特异性抑制剂NSC23766处理后人食管鳞癌Eca109细胞株HIF-1α的mRNA表达水平和细胞增殖水平.结果:缺氧条件下,人食管鳞癌Eca109细胞株中Rac1、HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平均明显增高,约24 h到达高峰.用NSC23766处理人食管鳞癌Eca109细胞株后,HIF-1α mRNA表达水平降低,细胞增殖明显受到抑制.结论:Rac1和HIF-1α在缺氧状态下被激活,且可能均与缺氧诱导的肿瘤增殖相关.     

食管鳞癌组织中HIF-1α及Fascin蛋白的表达

目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及细胞骨架蛋白(Fascin蛋白)在食管鳞癌组织中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化SP法检测80例食管鳞癌及癌旁组织中HIF-1α及Fascin蛋白的表达,分析其与食管鳞癌病理特征的关系。结果:食管鳞癌组织中HIF-1α及Fascin蛋白的总阳性表达率均明显高于癌旁组织(P0.05),在食管鳞癌组织中HIF-1α的表达与Fascin蛋白的表达呈正相关(r=0.252,P=0.024);HIF-1α及Fascin蛋白在食管鳞癌组织中的表达与癌组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(P0.05),但均与年龄、性别等因素无关(P0.05)。结论:高表达HIF-1α及Fascin蛋白在食管鳞癌的发生、发展中起重要作用,且高表达的HIF-1α蛋白与Fascin蛋白存在相关性。     

食管鳞癌组织中HIF-1α及FHIT蛋白的表达及意义

目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及脆性组氨酸三联体基因(FHIT)蛋白在食管鳞癌组织中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化SP法检测48例食管鳞癌及癌旁组织中HIF-1α及FHIT蛋白的表达,分析其与食管鳞癌病理特征的关系。结果:食管鳞癌组织中HIF-1α的总阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.05),而FHIT蛋白的总阳性表达率明显低于癌旁组织(P<0.05);在食管鳞癌组织中HIF-1α的表达与FHIT蛋白的表达呈负相关(P=0.006,r=-0.392);HIF-1α及FHIT蛋白在食管鳞癌组织中的表达与浸润深度(pTNM分期)及淋巴结转移有明显关系(P<0.05),而HIF-1α表达还与癌组织分化程度相关(P<0.05),但均与年龄、性别等因素无关(P>0.05)。结论:HIF-1α及FHIT蛋白的异常表达在食管鳞癌的发生、发展中起重要作用,在一定程度上反映了食管鳞癌侵袭性强弱,且HIF-1α高表达与FHIT蛋白低表达存在相关性,FHIT的检测有利于食管鳞癌患者的早期诊断。     

食管鳞癌中HIF-1α的表达与凋亡的相关性研究

目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和凋亡抑制因子（bcl-2）在食管鳞癌中的表达及二者之间的相关性。方法采用SP免疫组织化学染色法检测60例食管鳞癌组织和10例正常食管黏膜中HIF-1α蛋白和bcl-2蛋白的表达情况。结果HIF-1α在正常食管黏膜不表达，食管鳞癌中的阳性表达率为61．7％，HIF-1α蛋白的阳性表达率随食管癌体积增大、组织分化程度降低而增高（P〈0．05），有淋巴结转移者的阳性表达率（78．3％）显著高于无淋巴结转移者（51．4％），（P〈0．05）；HIF-1α蛋白与bcl-2蛋白表达呈负相关（P〈0．01）。结论HIF-1α蛋白的高表达可能促进了食管鳞癌癌细胞的增殖和组织分化程度的降低，并参与了淋巴结转移：它还可能通过调节凋亡抑制因子bcl-2的水平而发挥抗凋亡作用。     

大肠癌中VHL mRNA,FIH-1 mRNA的表达对HIF-1α蛋白水平的影响

目的:检测大肠癌中VHL mRNA,FIH-1 mRNA以及HIF-1α蛋白的表达,探讨VHL,FIH-1对HIF-1α蛋白水平的影响. 方法:采用RT-PCR技术检测42例大肠癌组织和相应的癌旁正常粘膜组织中VHL mRNA,FIH-1 mRNA的表达,采用免疫组化SP法检测HIF-1α蛋白在大肠癌和癌旁正常组织中的表达,Spearman相关关系检验分析其之间的相关性. 结果:大肠癌组织VHL mRNA和FIH-1 mRNA的表达水平显著低于癌旁正常组织(t=-10.14,P=0.00;t=-15.26,P=0.00);二者的表达水平随Dukes分期而降低,DukesA B期显著高于DukesC D期(t=2.84,P=0.01;t=-5.13,P=0.00);它们的表达水平与与肿瘤部位、性别无关. 大肠癌组织HIF-1α蛋白表达阳性率为69.1%(29/42),在癌旁正常组织中均为阴性;DukesC D期(80.0%,24/30)显著高于Dukes A B期(41.7%,5/12),(t=5.89, P=0.02); Spearman相关分析显示,HIF-1α表达水平与VHL mRNA,FIH-1 mRNA的表达水平显著负相关(rs=-0.97,P=0.01,rs=-0.66,P=0.01). 结论:HIF-1α的过表达在大肠癌的发生发展、浸润转移过程中起着重要作用,大肠癌组织中VHL以及FIH-1的水平下降与HIF-1α蛋白水平的升高之间存在密切相关.     

缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子-C在食管鳞癌中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)及血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其与淋巴转移的关系.方法 采用免疫组织化学法检测30例食管鳞癌组织及癌旁组织中,淋巴转移及无淋巴转移组的HIF-1α、VEGF-C表达分布情况.结果 HIF-1α、VEGF-C在食管鳞癌组和癌旁中的表达阳性率差异均有统计学意义(均P＜ 0.05);HIF-1α、VEGF-C在食管鳞癌淋巴转移组和无淋巴转移组表达阳性率差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).在食管鳞癌组中HIF-1α与VEGF-C表达有关(P＜0.05).结论 HIF-1α、VEGF-C在食管鳞癌的发生发展和淋巴结转移中起重要作用,有望成为食管癌治疗和判断预后的重要指标.     

食管正常、癌前及癌变组织中DNA聚合酶β mRNA检测

目的观察不同演进过程食管组织中DNA聚合酶β(polβ)mRNA的表达.方法采用含有内对照的半定量RT-PCR方法,检测31例食管浸润癌(鳞癌27例,腺癌4例)、4例原位癌、6例不典型增生以及31例正常食管黏膜组织中polβ mRNA的表达.结果食管浸润癌、原位癌和不典型增生组织中polβ mRNA的表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),但均高于正常食管黏膜组织中的表达水平(P均＜0.05).食管鳞癌和腺癌组织中polβ mRNA表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结果在食管癌组织中存在着polβ的高表达,且发生于癌变早期.