血管抑素对口腔鳞癌移植瘤抑制作用的研究

目的:(1)建立口腔鳞状细胞癌裸鼠移植瘤模型。(2)血管抑素(angiostatin)对口腔鳞癌移植瘤抑制作用的研究。方法:建立口腔鳞状细胞癌裸鼠移植瘤模型:将人Tca8113细胞系培养并接种至20只裸小鼠皮下,1周后移植瘤模型建立。再将裸鼠分为一个对照组和3个治疗组,治疗组用3个不同浓度重组人血管抑素干扰。对照组用PBS液注射。每周测量1次肿瘤大小。35天后取标本并称重。结果:rhAGN处理剂量为50mg/(kg·d)、100mg/(kg·d)和200mg/(kg·d)时,肿瘤体积分别为(4945±364)mm3、(2423±258)mm3和(472±48)mm3,与对照组相比,治疗组的体积和重量明显减小(P<0.05,P<0.01);其抑瘤率分别为31.5%、62.0%和85.5%。结论:血管抑素能显著抑制人Tca8113移植瘤的生长,且作用呈剂量依赖性。     

pSERPINB3-PE38KDEL毒素质粒对人舌鳞状细胞癌裸鼠皮下移植瘤的靶向抑制

目的:验证SERPINB3鱗癌特异性启动子调控下的PE38KDEL毒素表达质粒对人舌鳞状细胞癌裸鼠皮下移植瘤的靶向抑制作用.方法:通过构建人舌鳞状细胞癌裸鼠皮下移植瘤模型,经过质粒体内转染,对小鼠进行体重、肿瘤体积变化的测量以及HE、TUNEL、Ki-67免疫组化检测.结果:在不损伤正常组织的情况下,pSERPINB3...     

NS-398对舌鳞癌基质金属蛋白酶2蛋白表达的影响

目的探讨环氧化酶2(COX-2)抑制剂NS-398对舌鳞癌基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达的影响。方法将舌鳞癌细胞株Tca8113分为对照组(A组)和NS-398 20、40、80μmol/L加药组(分别为B1、B2、B3组);荧光免疫组化和Western blot法检测各组MMP-2蛋白表达情况。结果 B1、B2、B3组MMP-2蛋白表达呈递减趋势,且均较A组明显降低(免疫组化法:366073.100±116272.561、241739.000±12320.270、120672.100±5976.391vs.591518.000±17356.450;Western blot法:0.620±0.084、0.425±0.058、0.172±0.025vs.0.950±0.124)(P<0.05)。结论 NS-398在Tca8113细胞中能抑制MMP-2蛋白表达,并且MMP-2蛋白表达随着药物浓度的增加而减少。     

舌鳞癌中bcl-2的表达及意义

目的研究bcl-2蛋白在舌鳞癌中的表达及其与临床病理因素的关系。方法应用免疫细胞化学法检测舌癌Tca-8113细胞株bcl-2蛋白的表达;应用免疫组织化学法检测bcl-2蛋白在60例舌鳞癌组织中的表达情况。结果舌癌细胞株中bcl-2阳性表达,bcl-2在舌鳞癌中阳性表达率为53.3%(32/60)其阳性表达在有无淋巴结转移、病理分化等方面差异有显著性(P<0.05)。结论bcl-2基因与舌鳞癌的自然发展过程有关,可能会成为舌癌新的诊断标志物基因治疗靶点。     

重组Canstatin蛋白联合氟尿嘧啶治疗裸鼠结肠癌移植瘤的实验研究

目的探讨血管生成抑制剂Canstatin与细胞毒药物氟尿嘧啶（5-FU）联合应用治疗结肠癌的效果,以期探索结肠癌治疗新途径。方法结肠癌SW-480细胞（1×107/只）注射到30只裸鼠皮下,建立结肠癌皮下移植瘤模型。当肿瘤长至2--3 mm时,随机分6组。给药途径均为腹腔注射给药。治疗期间,定期用圆规和游标卡尺测量皮下移植瘤大小。疗程结束时,取下瘤体,常规病理切片,观察药物毒性反应,CD31免疫组化染色,检测肿瘤内微血管密度（MVD）。结果①各试验组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤体质量明显低于对照组（P〈0.01）。5-FU＋Canstatin组低、高浓度联合治疗组抑瘤作用较对照组明显增强（P〈0.05）,其瘤重抑制率分别为74.76%和82.04%。②免疫组化：5-FU＋Canstatin组低浓度组（22.6±3.6）和5-FU＋Canstatin组高浓度组（15.0±2.8）治疗小鼠肿瘤组织内MVD显著低于对照组（36.4±5.6）和5-FU治疗组（31.2±4.0）（P〈0.05）,而5-FU治疗组与对照组间差异无统计学意义;③不良反应：各实验组未观察到明显毒性反应。结论重组人Canstatin蛋白能有效抑制人结肠癌生长,无明显毒副作用,为结肠癌治疗提供了新的有力的治疗方法。     

紫草素对裸鼠皮下绒癌移植瘤的抗癌作用及机制的研究

为探讨紫草素在裸鼠体内抗滋养细胞肿瘤的机制，应用电化学发光法，计算瘤重抑制率，检测紫草素对绒癌的抑制作用；同时应用HE染色及免疫组化法检测用药组及溶媒对照组肿瘤组织的病理改变及抑制凋亡基因bcl．2蛋白的表达。结果：①紫草素组的平均瘤重明显低于溶媒对照组(P&;lt;0．05)，对肿瘤的抑制率大于30％；②紫草素组从停药第l天开始人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)急剧下降，至第3天最低降至2000 IU／L左右，显著低于溶媒对照组，差异有非常显著意义(P&;lt;0．01)；③紫草素能够使肿瘤组织细胞发生大面积坏死，坏死组织内可见细胞核凝固或碎裂，最后细胞核溶解消失；④紫草素组肿瘤组织细胞bcl-2蛋白表达明显减少。结论：紫草素能够有效地诱导绒癌裸鼠移植肿瘤细胞凋亡和坏死，明显抑制β-HCG的分泌；Bcl-2蛋白的表达下调是紫草素抗绒癌作用的重要机制。     

GnRH激动剂对人卵巢癌裸鼠移植瘤抑制作用及不良反应的研究

目的 研究GnRH激动剂对人卵巢癌裸鼠移植瘤抑制作用及副作用.方法 将人卵巢癌细胞OVCAR3注射入裸鼠腹腔内,构建移植瘤模型.将裸鼠随机分为3组,OVCAR3对照组、低剂量曲普瑞林组(75μg)和高剂量曲普瑞林组(150 μg).镜下观察曲普瑞林对全身及腹腔各脏器的毒副作用并测定对内分泌的影响.结果 高剂量曲普瑞林组...     

Ad-ING4抑制人A549肺癌细胞及其裸鼠移植瘤的生长

目的 研究腺病毒介导的ING4基因(Ad-ING4)对肺癌体内外的抑制作用及其潜在的分子机制.方法 体外采用50 MOI的Ad-ING4感染A549肺癌细胞,并用MTT法检测Ad-ING4对A549细胞的抑制作用,流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡率.采用A549细胞株建立人肺癌裸鼠模型,瘤体局部注射干预用药,每隔5天测量一次肿瘤体积,并计算瘤重抑瘤率;瘤块免疫组化检测ING4、生存素(survivin)、CD34、HIF-1等基因的表达.结果 Ad-ING4感染A549细胞抑制率可达47.62%;72 h凋亡率为18.5%;荷瘤裸鼠经治疗后,Ad-ING4组和顺铂(DDP)组的肿瘤体积、瘤重均明显缩小,其抑瘤率分别达到42.43%和46.47%,DDP组出现不良反应;免疫组化检测Ad-ING4组和DDP组与对照组比较,生存素、CD34、HIF-1的表达下调(P<0.01).结论 Ad-ING4对人A549肺癌细胞及其裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用.其抑瘤机制可能与下调生存素、CD34、HIF-1的基因表达进而诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成等有关.     

尼美舒利对舌鳞癌Tca8113细胞前列腺素E_2释放和生存素表达的影响

<正>大量研究已表明,环氧化酶-2(cyclooxygenase 2,COX-2)在大多数正常组织中不表达,而在大多数人类肿瘤中过表达,与多种肿瘤的发生发展密切相关[1]。     

尼美舒利对人舌鳞癌裸鼠移植瘤环氧化酶-2的影响

目的研究环氧化酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利对人舌鳞癌裸鼠移植瘤的抑制作用,分析尼美舒利对COX-2基因及蛋白表达的影响,进一步探讨其抑癌机制。方法取人舌鳞癌Tca-8113细胞接种于16只裸鼠皮下,建立人舌鳞癌裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组和尼美舒利治疗组,计算尼美舒利的抑瘤率。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测裸鼠移植瘤组织COX-2mRNA表达。结果尼美舒利治疗组抑瘤率为47.2%。尼美舒利治疗组裸鼠移植瘤组织COX-2mRNA水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 COX-2抑制剂尼美舒利可下调COX-2基因表达,该作用可能是COX-2抑制剂抑制肿瘤血管生成从而抑制肿瘤生长的机制之一。     

重组人促红细胞生成素对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡与线粒体融合基因2表达的影响

目的探讨不同剂量重组人促红细胞生成素（rHu EPO)对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡和线粒体融合基因2(Mfn2蛋白)表达的影响。方法将64只成年SD大鼠随机分为模型组、大剂量治疗组(负荷量rHu EPO5 000 U&#8226;kg 1+rHu EPO 1 500 U&#8226;kg 1术后第2,4,6天腹腔注射)、小剂量治疗组(负荷量rHu EPO 5 000 U&#8226;kg 1+rHu EPO 750 U&#8226;kg 1术后第2,4,6天腹腔注射)和假手术组,每组16只。分别于术后24 h和2周采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测Mfn2蛋白表达。结果术后24 h假手术组、模型组、大剂量治疗组、小剂量治疗组心肌细胞凋亡指数分别为0,(60.99±5.28),(36.97±2.68),(38.10±3.41);Mfn2蛋白免疫组化染色平均吸光度分别为（0.080 6±0.013 4）,（0.295 2±0.024 9）,（0.125 3±0.020 9）,（0.120 2±0.019 7）。术后2周假手术组、模型组、大剂量治疗组、小剂量治疗组凋亡指数分别为0,（50.08±8.00）,（26.54±2.97）,（24.16±3.74）,Mfn2蛋白免疫组化染色平均吸光度分别为（0.095 3±0.007 3）,（0.247 3±0.019 1）,（0.146 1±0.012 6）,（0.154 2±0.010 6）。与假手术组比较,模型组凋亡指数和Mfn2蛋白表达显著增加(均P＜0.05);与模型组比较,大、小剂量治疗组凋亡指数和Mfn2蛋白表达显著减少(均P＜0.05);大剂量治疗组与小剂量治疗组凋亡指数和Mfn2蛋白表达差异无统计学意义。结论心肌梗死后即刻给予负荷剂量rHu EPO并术后减量维持治疗1周可显著降低Mfn2蛋白表达,减少心肌细胞凋亡;rHu EPO大、小剂量维持给药对Mfn2蛋白表达的调控作用和抗凋亡作用均差异无统计学意义。     

多肽HM-3对人非小细胞肺癌裸鼠移植瘤抑制作用研究

目的检测HM-3类不同血管生成抑制剂治疗人非小细胞肺癌裸鼠移植瘤的药效学,考察血管生成抑制剂与肿瘤微环境的相互作用,为临床确定治疗方案提供参考和依据。方法建立人非小细胞肺癌A549的裸鼠移植瘤模型,以多西他赛(10 mg·kg~(-1))为阳性对照药物,评价了在肿瘤体积≥300 mm~3给予有效、过高剂量HM-3和贝伐单抗对肿瘤生长的抑制作用。结果动物实验表明,肿瘤的体积≥300mm~3给药,阳性对照组多西他赛具有很好的抗肿瘤活性。G2多西他赛(10 mg·kg~(-1))组的瘤重抑瘤率为60.80%。G3 HM-3(3 mg·kg~(-1))组、G4 HM-3(48 mg·kg~(-1))组、G5Avastin(5 mg·kg~(-1))组抑瘤效果不佳,瘤重抑瘤率分别为43.60%、-34.80%、44.40%。结论由于受肿瘤生长阶段、肿瘤微环境、作用靶点等影响,血管生成抑制剂HM-3有一定抑制肿瘤生长的效果,但效果不佳。HM-3抑瘤效果在(0~6 mg·kg~(-1))范围内存在剂量依赖关系。而HM-3(48mg·kg~(-1))过高剂量对人非小细胞肺癌A549裸鼠移植瘤无抑制作用,表现促进作用。特殊量效关系提示临床使用血管抑制剂时应注意使用剂量。     

血管生成素样蛋白1和2水平在急性心肌梗死患者中的表达及临床意义

目的 探讨血管生成素样蛋白1（Ang-1）和血管生成素样蛋白2（Ang-2水平）在急性心肌梗死（AMI）患者中的表达以及与肌钙蛋白T（cTnT）的相关性.方法 选取AMI患者75例,同期选择健康体检者50例为对照组,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和化学发光法分别检测研究对象中Ang-1、Ang-2和cTnT水平,并与对照组作比较.结果 AMI患者Ang-2、Ang-2/Ang-1水平分别为（2310.2±131.6） ng/L和（11.9±1.3）,显著高于对照组的（905.8±171.4） ng/L和（4.6±1.8）,差异有统计学意义（P＜ 0.05）;AMI患者Ang-1水平为（19 589.3±2033.4） ng/L,对照组为（19 612.1±1824.1） ng/L,差异无统计学意义（P＞0.05）.Ang-2水平和Ang-2/Ang-1与cTnT均呈正相关（r=0.597,0.604,P＜0.05）.结论 高Ang-2水平和Ang-2/Ang-1是心肌梗死的危险因素,并与cTnT正相关.     

白花蛇舌草乙醇提取物对大肠癌耐药裸鼠移植瘤生长的影响

目的　探讨白花蛇舌草乙醇提取物（EEHDW）对大肠癌耐药裸鼠移植瘤生长的影响及其分子机制。方法　构建大肠癌5- 氟尿嘧啶（5-FU）耐药细胞皮下移植瘤动物模型,并将其随机分为对照组、EEHDW 组、5-FU 组、EEHDW 联合5-FU组（联合组）,通过瘤体体积测量计算抑瘤率,采用RT-PCR 和IHC 等方法检测移植瘤组织中PCNA 的表达及Cyclin D1、CDK4、p21 的mRNA 和蛋白表达。结果　与对照组比较,5-FU 对移植瘤的生长无明显影响（P>0.05）,EEHDW 及联合组移植瘤生长显著抑制（P<0.05）,且联合组抑瘤效果更显著。EEHDW 及联合组明显抑制移植瘤细胞增殖,下调移植瘤组织中Cyclin D1、CDK4、上调p21 的mRNA 和蛋白表达（P<0.05）。结论　EEHDW 可抑制大肠癌耐药移植瘤生长,可能与其下调Cyclin D1、CDK4 的表达及上调p21 表达有关。     

阿拉瑞林联合5-FU对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的观察阿拉瑞林对HEC-1B裸鼠移植瘤的抑制作用及对Bcl-2表达的影响。方法将HEC-1B荷瘤鼠随机分为4组：对照组、5-FU组、阿拉瑞林组和联合组。30d后处死裸鼠,称取移植瘤重量,观察抑瘤率,免疫组化SABC法检测移植瘤Bcl-2表达。结果阿拉瑞林组抑瘤率为21.02%,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,免疫组化显示,各治疗组Bcl-2的表达明显下调。结论阿拉瑞林有一定的抑制子宫内膜癌生长的作用,可能通过对Bcl-2的表达调控来实现,且与5-FU有协同作用。     

重组人血管内皮抑制素持续泵入对晚期非小细胞肺癌疗效及血管生成素?2的影响

目的探讨重组人血管内皮抑制素联合化疗在晚期非小细胞肺癌( NSCLC)中的有效性、完全性,并探讨血管生成素 ?2(Ang?2)在预测重组人血管内皮抑制素治疗后肿瘤血管正常化时间窗中的价值。方法选取 2015年 3月至 2016年 11月芜湖市第二人民医院收治的 ⅢB~Ⅳ期 NSCLC病人 61例,按照随机数字表法分为两组,对照组(单纯化疗组) 32例,观察组(重组人血管内皮抑制素联合化疗组) 29例。重组人血管内皮抑制素采用持续静脉泵入的方式, 21 d为 1周期。每 2个周期评价疗效,每周期记录不良反应。所有病人均完成至少 2个周期的治疗。采用疾病控制率( DCR)来评估重组人血管内皮抑制素的近期疗效。分别检测重组人血管内皮抑制素给药后第 0、2、4、6、8、10、14天血清中 Ang?2的浓度。结果在第 4周期后,两组间的 DCR分别 40.0%和 76.2%(P＜0.05)。治疗过程中与重组人血管内皮抑制素相关的主要毒副反应为窦性心动过速、高血压,未出现出血等严重毒副反应。对照组第 0天 Ang?2水平为( 1 216.2±136.8)pg/mL,第 2、4、6、8、10、14天分别为( 1 203.2±136.6)、(1 201.0±139.3)、(1 156.4±159.1)、(1 051.1±132.4)、(1 009.8±151.0)、(991.2±128.5)pg/mL,呈缓慢下降。观察组第 0天 Ang?2水平为( 1 209.8±104.5)pg/mL,在泵入重组人血管内皮抑制素第 2天( 1 116.5±160.8)pg/mL始有下降趋势,第 4天时( 832.7± 95.2)pg/mL两组间差异有统计学意义,在第 8天( 407.6±91.1)pg/mL进入平台期,并在随后一段时间第 10、14天( 360.5±122.2)、     

帕瑞昔布对人结肠癌SW1116细胞裸鼠移植瘤生长的影响及安全性观察

目的观察帕瑞昔布对人结肠癌SW1116细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及安全性。方法建立人结肠癌SW1116细胞裸鼠皮下移植瘤模型。将24只BALB/C裸鼠随机分为对照组、帕瑞昔布组和5-Fu组。记录各组裸鼠的体重和瘤体积变化,用药30 d后取瘤及脾脏,计算脾脏指数、抑瘤率,检测血清ALT和BUN,并用透射电镜观察瘤组织的形态学变化。结果帕瑞昔布组未见明显的药物相关毒副反应。帕瑞昔布能抑制SW11 16细胞裸鼠皮下移植瘤的生长。在干预前18 d,帕瑞昔布组的肿瘤抑制率逐渐增加,但随着药物干预时间的延长,抑制率却逐渐降低。结论裸鼠体内短期应用帕瑞昔布(15~18 d)是安全的,并能抑制SW1116细胞皮下移植瘤的生长。     

丁苯酞对缺氧人脐静脉血管内皮细胞Ang-2蛋白表达的影响

目的:探讨药物丁苯酞(NBP)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)缺氧损伤的保护作用及其对血管生成素2(Ang-2)表达的影响。方法:体外培养HUVEC,建立稳定的内皮细胞缺氧损伤模型。试验分为正常对照组、缺氧损伤模型组、NBP组,按要求分别给予药物处理后,用CCK-8法检测细胞活力,采用免疫细胞化学方法和图像定量分析技术检测平均吸光度,比较各组Ang-2蛋白表达的变化;Western Blot法检测各组Ang-2蛋白的表达情况。结果:NBP可提高HUVEC的存活率;与正常组比较,缺氧组Ang-2蛋白表达量明显升高(P<0.05);与缺氧组比较,NBP组Ang-2蛋白表达进一步增高(P<0.05)。结论:NBP可以上调Ang-2蛋白的表达,对HUVEC缺氧损伤有一定的保护作用。     

阿拉瑞林对子宫内膜癌裸鼠移植瘤作用的实验研究

目的观察阿拉瑞林对HEC-1B裸鼠移植瘤的抑制作用及对血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法将HEC-1B荷瘤鼠随机分为5组：阴性对照组、阿拉瑞林低、中、高剂量组和阳性对照（5-Fu）组。30d后处死裸鼠,称取移植瘤质量,并观察抑瘤率及用免疫组化SABC法检测移植瘤VEGF的表达。结果阿拉瑞林组和5-Fu组平均瘤质量和抑瘤率与阴性对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。低、中剂量阿拉瑞林组VEGF阳性率与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;高剂量阿拉瑞林组、5-Fu组VEGF阳性率与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论阿拉瑞林有一定的抑制子宫内膜癌生长的作用,且不良反应轻微,可能通过对VEGF的表达调控来实现。     

α-双炔失碳酯对前列腺癌LNCaP裸鼠移植瘤生长影响的研究

目的研究α-双炔失碳酯(α-anordrin)对前列腺癌雄激素依赖细胞系LNCaP裸鼠皮下移植瘤生长的影响并探讨其作用机制。方法建立前列腺癌雄激素依赖细胞系LNCaP裸鼠皮下移植瘤模型,将27只荷瘤裸鼠按肿瘤体积大小平均分为3组:对照组、α-双炔失碳酯1mg.kg-1组、5mg.kg-1组。皮下注射给药,隔天一次,给药周期30天,每隔5天测量肿瘤体积。于末次给药24h后摘眼球取血,测量血浆睾酮(T)、前列腺特异膜抗原(PSA)水平;取睾丸、精囊腺和前列腺称重;取肿瘤称重,并对瘤组织进行组织病理学检查和免疫组化Ki67、PCNA检测。计算肿瘤体积,抑瘤率,绘制生长曲线。结果α-双炔失碳酯给药组肿瘤体积、重量均小于给药组,1mg.kg-1组抑瘤率为34%(P<0.05),5mg.kg-1组抑瘤率为25%(P>0.05);给药组和对照组间血浆PSA含量无明显差别,PCNA和Ki67阳性表达率亦无差别。给药组裸鼠血浆T水平、睾丸、精囊腺重量显著低于对照组(P<0.01),前列腺重量亦有减轻。结论α-双炔失碳酯在低剂量下即可对前列腺癌雄激素依赖细胞系LNCaP裸鼠皮下移植瘤的生长产生抑制作用,并能显著降低裸鼠血浆T水平,抑制其性腺的正常生长。其抗肿瘤的机制可能与抑制体内雄激素分泌有关。