缺氧与缺氧/复氧诱导心肌细胞凋亡的比较及意义

目的 :研究单纯缺氧与缺氧复氧对体外培养的新生大鼠心肌细胞凋亡的影响 ,探讨凋亡在心肌细胞缺氧 /复氧损伤中的作用。方法 :取体外培养的新生大鼠心肌细胞 ,分两组 ,均置于 95 0 ml/ L N2 ,5 0 ml/ L CO2 孵箱中培养16 ,32 ,4 8h,其中一组缺氧后再恢复正常条件培养 6 h,分别造成缺氧和缺氧 /复氧损伤的细胞模型 ,TUNEL 染色观察凋亡细胞形态学变化 ,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率。结果 :心肌细胞经历缺氧和缺氧 /复氧损伤后 ,TU NEL 染色可见凋亡阳性细胞 ;应用流式细胞仪定量检测 ,心肌细胞缺氧培养 16 ,32 ,4 8h后 ,其凋亡率分别为 :（2 .9± 0 .5 ） % ,（6 .2± 0 .8） %和 （2 6 .6± 3.0 ） % ;心肌细胞在缺氧 16 ,32和 4 8h后复氧 6 h,其凋亡率分别为 :（5 .5± 0 .7） % ,（11.0± 1.1） %和 （14 .2± 1.6 ） %。结论 :心肌细胞凋亡率随着缺氧时间的延长而增高 ;缺氧 /复氧较单纯缺氧可进一步加重心肌细胞的损伤     

缺氧后处理对缺氧复氧心肌线粒体活性氧及细胞凋亡的影响

目的 观察缺氧后处理对缺氧复氧心肌线粒体活性氧及细胞膜和线粒体Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,探讨其调控心肌细胞凋亡的机制.方法 构建大鼠乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤模型,将细胞分为对照组、缺氧/复氧纽(缺氧3h后复氧6h)、缺氧后处理组(缺氧3h后行复氧5min、缺氧5 min,反复3次,再复氧6 h).应用荧光酶标仪测定线粒体活性氧量,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡,Western blot检测细胞膜和线粒体Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 缺氧/复氧组和缺氧后处理组心肌细胞线粒体活性氧量较对照组显著升高(P＜0.01).缺氧后处理组心肌细胞线粒体平均荧光强度为30.74±1.88a.u./μg,显著低于缺氧/复氧组(63.17±2.75a.u./μg,P＜0.01),仍高于对照组(14.41±2.15a.u./μg).缺氧/复氧组和缺氧后处理组心肌细胞凋亡率较对照组显著升高(45.86％±3.29％和26.99％±3.35％比5.72％±1.63％,P＜0.01),缺氧后处理组低于缺氧/复氧组(P＜0.01).细胞膜和线粒体Bcl-2蛋白在缺氧后处理组显著上调,在缺氧/复氧组显著下调;Bax蛋白在缺氧后处理组显著下调,在缺氧/复氧组显著上调.结论 缺氧后处理抑制线粒体活性氧爆发,减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡,其抗凋亡机制可能与线粒体和细胞膜Bcl-2蛋白表达上调及Bax蛋白表达下调有关.     

艾塞那肽通过抑制黄嘌呤氧化酶-活性氧类降低内皮细胞缺氧复氧损伤

目的探究原代心肌微血管内皮细胞(CMEC)在缺氧复氧损伤(H/R)模型条件下的损伤信号通路,以及艾塞那肽(Exe)的保护机制。方法双酶消化法体外分离培养SD大鼠CMEC,CD31和Ⅷ因子鉴定纯度。建立H/R模型并筛选Exe的最佳干预浓度。Fluo-3AM荧光探针检测H/R条件下胞内Ca~(2+)变化。Western blotting检测黄嘌呤氧化酶(XO)表达量。DCFH-DA标记的活性氧探针检测胞内活性氧类(ROS)水平。共聚焦显微镜观察JC-1染色和细胞色素-C(Cyt-C)释放。予以Exe干预和使用小干扰RNA(siRNA)干扰技术抑制XO的表达,同步观察各指标变化情况。计量资料以均数±标准差(x±s)表示,两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果 10nmol/L为Exe的最佳抗凋亡浓度。H/R导致胞浆内Ca~(2+)荧光强度和Ca~(2+)依赖的XO表达量升高,予以Exe处理可显著降低Ca~(2+)荧光(P0.05)。予以Exe处理或使用siRNA干扰技术可显著抑制XO的表达、降低XO-ROS生成、降低H/R损伤造成的线粒体膜电位、减少Cyt-C的释放,并伴随caspase-3和caspase-9活性的降低(P0.05)。结论 H/R通过激活Ca~(2+)-XO-ROS损伤信号通路,导致CMEC的线粒体结构功能障碍,最终诱导细胞凋亡;而予以Exe处理可通过抑制上述信号通路保护CMEC,降低H/R模型引起的细胞凋亡。     

N-乙酰半胱氨酸通过调控细胞周期蛋白加重乳鼠心肌细胞的衰老

目的 了解N-乙酰半胱氨酸(NAC)对心肌细胞衰老的影响及其机制.方法 将培养的SD乳鼠心肌细胞随机分为1 d组、5 d组、10 d组、1 d+NAC(1 mmol/L)组、5 d+NAC(1 mmol/L)组、10 d+NAC(1 mmol/L)组.采用流式细胞仪检测细胞周期.采用实时定量PCR与Western blot等方法检测p16INK4a、p21WAF1及Rb基因mRNA与蛋白水平表达的变化.采用β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒检测β-半乳糖苷酶活性的改变.结果 5 d+NAC(1 mmol/L)组、10 d+NAC(1 mmol/L)组G0/G1期细胞数分别为86.71％、91.23％,显著高于单纯5 d组、10 d组的82.13％、87.97％,P均＜0.01.5 d+NAC(1 mmol/L)组、10 d+NAC(1 mmol/L)组p16INK4a基因mRNA拷贝数与β-actin比值分别为0.48、1.31,显著高于单纯5 d组、10 d组的0.35、0.74,P＜0.05与＜0.01.p16INK4a基因蛋白表达与B-actin比值分别为0.96、1.12,显著高于单纯5 d组、10 d组的0.31、0.49,P均＜0.01.5 d+NAC(1 mmol/L)组、10 d+NAC(1 mmol/L)组p21WAF1基因mRNA拷贝数与β-actin比值分别为1.25、2.13,显著高于单纯5 d组、10 d组的0.96、1.24,P＜0.05与＜0.01.p21WAF1基因蛋白表达与β-actin比值分别为1.22、2.16,显著高于单纯5 d组、10 d组的0.71、1.13,P均＜0.01.5 d+NAC(1 mmol/L)组、10 d+NAC(1 mmol/L)组Rb基因mRNA拷贝数与β-actin比值分别为0.18、0.09,显著高于单纯5 d组、10 d组的0.35、0.17,P均＜0.01.Rb基因蛋白表达与β-actin比值分别为0.84、0.33,显著低于单纯5 d组、10 d组的1.47、0.81,P＜0.05与＜0.01.5 d+NAC(1 mmol/L)组、10 d+NAC(1 mmol/L)组β-半乳糖苷酶活性分别为29.71％、79.31％,显著高于单纯5 d组、10 d组的17.46％、58.24％,P均＜0.05.结论 NAC可通过增加p16INK4a与p21WAF1基因表达,抑制Rb蛋白的磷酸化,从而促使心肌细胞周期阻滞于G0/G1期,β-半乳糖苷酶活性明显增强,加重细胞衰老.     

吡格列酮保护缺氧复氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡的离子通道机制

目的观察吡格列酮对缺氧复氧大鼠心肌细胞凋亡的保护作用,并探讨保护作用与ATP敏感性钾通道开放的关系。方法原代培养的SD乳鼠心肌细胞,分为8组:溶媒组、缺氧复氧组、0.1μmol/L吡格列酮组、1 μmol/L吡格列酮组、2μmol/L吡格列酮组、2μmol/L吡格列酮+30μmol/L HMR-1098组、2μmol/L吡格列酮+0.5mmol/L 5-羟基葵酸盐(5-HD)组、2μmol/L吡格列酮+30μmol/L HMR-1098+0.5 mmol/L 5-HD组。利用膜联蛋白-V与碘化丙啶双染法及Hoechst 33258染色法检测心肌细胞凋亡。结果缺氧复氧组乳鼠心肌细胞发生明显凋亡,经吡格列酮预处理后减少心肌细胞凋亡(P<0.05);与0.1μmol/L、1μmol/L及2μmol/L吡格列酮组比较,5-HD削弱吡格列酮抑制心肌细胞凋亡的作用(P<0.05),HMR-1098无作用(P>0.05)。结论吡格列酮对缺氧复氧乳鼠心肌细胞凋亡具有保护作用,线粒体ATP敏感性钾通道的开放可能介导了吡格列酮的保护作用。     

异丙酚对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤后凋亡的影响

目的探讨异丙酚对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤后凋亡的影响及其作用机制。方法把培养的18孔乳鼠心肌细胞随机分成3组:对照组、单纯缺氧/复氧组、异丙酚处理组。培养3 d的乳鼠心肌细胞给予1 h缺氧和3 h复氧处理（单纯缺氧/复氧组）。复氧期间给予异丙酚（25μmol/L）处理（异丙酚处理组）,复氧结束后采用DNA原位末端缺口标记技术（TUNEL）测定心肌细胞凋亡比例同时用免疫组化法测定心肌细胞内抗凋亡分子Akt、Bcl-2和促凋亡分子p38 MAPK的表达。结果与对照组相比,异丙酚显著降低了缺氧/复氧诱导的心肌凋亡（10.1%±3.2%vs25.3%±6.2%,P<0.01）,并改变了缺氧/复氧过程中凋亡介导因子的活性。免疫组化的结果显示,异丙酚增加了心肌细胞内抗凋亡蛋白pAkt和Bcl-2的形成,降低了促凋亡蛋白p38的活性。结论异丙酚对培养心肌细胞缺氧损伤后的凋亡有显著的保护作用,该作用与其对pAkt、Bcl-2和p38的影响密切相关。     

胰升糖素样肽1对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护机制

观察胰升糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)对原代培养的心肌细胞在缺氧/复氧条件下损伤的影响及机制.结果显示,缺氧/复氧使乳酸脱氢酶活性[(210.0±11.5)对(101.4±6.5)U/L]、细胞凋亡率[(8.138±1.512)对(0.575±0.168)%]和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性[(44.52±5.69)对(19.98±1.97),均P<0.01]均升高,GLP-1能直接作用心肌细胞,并对其在缺氧/复氧的损伤具有抑制作用[乳酸脱氢酶活性(190.2±9.0)U/L,细胞凋亡率(2.688±0.580)%,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性30.34±4.18],该作用可能与磷脂酰肌醇3激酶(PBK)/Akt介导的抗细胞凋亡作用有关.     

缺氧对乳鼠心肌细胞凋亡的诱导作用

目的　观察缺氧对心肌细胞凋亡的诱导作用。方法　体外培养的Wistar乳鼠心肌细胞分别缺氧 2小时、1 2小时、2 4小时 ,采用流式细胞术、TdT介导的dUTP末端标记法 (TUNEL)以及形态学方法检测心肌细胞凋亡。结果　各缺氧组心肌细胞凋亡数量均显著高于对照组 ,随着缺氧时间延长凋亡细胞数量逐渐增加 ,对照组、缺氧 2小时、1 2小时、2 4小时组凋亡细胞数量分别为 9 3 3± 0 62 % ,1 7 2 9± 0 95% ,3 3 59± 2 0 9% ,76 0 1± 4 60 % (P <0 0 1 )。缺氧 2 4小时心肌细胞TUNEL染色阳性 ,HE染色及透射电镜观察心肌细胞表现出凋亡的形态特征。结论　缺氧可以诱导乳鼠心肌细胞凋亡。     

内皮素-1对缺氧/复氧所致心肌细胞凋亡的影响

目的探讨在缺氧/复氧过程中不同时期给予内皮素-1（ET-1）对缺氧/复氧所致心肌损伤与凋亡的影响。方法乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡,Hoechst 33258染色计算凋亡率,试剂盒检测乳酸脱氢酶（LDH）的活性。结果ET-1预处理组（EP）细胞生存率较缺氧复氧组（HR）提高,凋亡率下降,LDH活性下降;ET-1缺氧即刻处理组（EH）细胞生存率较HR组降低,凋亡率升高,LDH释放量增加;ET-1复氧处理组（ER）的细胞生存率、凋亡率及LDH活性与HR组均无统计学差异。结论ET-1预处理有心肌细胞保护作用,ET-1缺氧时有促进心肌细胞损伤和凋亡的作用。     

脂联素通过APPL1减轻缺氧/复氧损伤诱导的心肌细胞凋亡

目的:探讨APPL1在脂联素（adiponectin,ANP）拮抗SD乳鼠心肌细胞（neonatal cardiomyocytes）缺氧/复氧（H/R）损伤中的作用。方法: 分离SD乳鼠心肌细胞并培养。通过对培养的心肌细胞H/R损伤模拟缺血/再灌注（simulated ischemia reperfusion,SI/R）后,随机分为对照组、H/R组、H/R+APN组及H/R+APN+APPL1 RNAi组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的生存率,原位缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞的凋亡,Western blot检测APPL1蛋白的表达。结果: 与对照组相比,H/R组吸光度值明显降低（P<0.01）,凋亡指数(AI)显著上升（P<0.01）。与对照组和H/R组相比,H/R+APN组中APPL1的表达明显上升（P<0.05）。以RNAi抑制APPL1表达后,与H/R+APN组相比,H/R+APN+APPL1 RNAi组凋亡指数率(%)明显上升 ［(28.32±4.13)% vs.(9.78±2.16)%,P<0.01］。结论: APN可显著抑制H/R损伤诱导的心肌细胞凋亡,促进心肌细胞存活,其拮抗作用与上调APPL1蛋白的表达相关。     

胰高血糖素样肽1对乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制

目的 研究胰高血糖素样肽1(GLP-1)对缺氧复氧诱导的乳鼠心肌细胞损伤的影响及其可能机制.方法 通过给原代培养的乳鼠心室肌细胞缺氧16 h、复氧4 h,建立缺氧复氧(H/R)心室肌细胞损伤模型.于缺氧前随机分为正常对照组,H/R组,GLP-1+H/R组,GLP-1+H/R+U0126组,GLP-1+H/R+LY294002组,H/R+U0126组和H/R+LY294002组.H/R损伤后测定上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞凋亡率和半胱天冬酶-3(Caspase-3)活性.结果 H/R组LDH活性、细胞凋亡率和Caspase-3活性均明显高于正常对照组(P均<0.01).而GLP-1+H/R组LDH活性[(128.47±7.96)U/L比(223.96±22.10)U/L,P<0.01]、细胞凋亡率[(2.84±2.56)%比(12.58±6.69)%,P<0.01]和Caspase-3活性[(36 809±4750)RLU比(57 602±9161)RLU,P<0.01]则明显低于H/R组,但上述指标变化可分别被LY294002(PI3K抑制剂)和UO126(MAPK抑制剂)抑制.结论 GLP-1可以直接作用于心肌细胞,对H/R诱导的心肌细胞损伤产生一定的保护作用,保护作用可能主要是通过抑制心肌细胞的凋亡实现的,并且GLP-1对凋亡的抑制作用可能与PI3K/Akt和MAPK所介导的抗细胞凋亡作用有关.     

一氧化氮对缺氧复氧处理的新生大鼠心肌细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶-1B活性和表达的影响

目的 验证缺氧复氧诱发的新生大鼠心肌细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)的表达和活性的增加是否由一氧化氮(NO)介导.方法 分离的新生大鼠心肌细胞,随机分为正常组、缺氧复氧组、非特异性一氧化氮合成酶抑制剂L-NAME组(L-NAME组)、缺氧复氧和L-NAME组(L-NA+H/R组).心肌细胞中PTP-1B的活性和表达分别由405 nm的光谱测量仪和Western blot法检测.同时分析心肌细胞培养基中的NO的浓度和乳酸脱氢酶活性.结果 与正常组比较,缺氧复氧组中心肌细胞PTP-1B的活性和表达较高,(L-NA+H/R)组PTP-1B的活性和表达不高.与缺氧复氧组比较,(L-NA+H/R)组NO和乳酸脱氢酶浓度显著低.缺氧复氧组和L-NA+H/R组中的NO含量分别是正常组(100%)的(368±13)%和(61±7)%(P<0.005);缺氧复氧组、L-NAME+H/R组中的乳酸脱氢酶的活性值分别为41.2±6.7和23.6±4.8(P<0.05).结论 L-NAME预处理阻止了缺氧复氧诱发的大鼠心肌细胞中PTP-1B活性和表达的增加,提示缺氧复氧期间PTP-1B的变化是由NO介导的.     

西洛他唑对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:研究西洛他唑(Cilostazol,CIL)对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响及机制。方法:①分离培养SD乳鼠心肌细胞,建立H/R模型。心肌细胞随机分4组:对照组;H/R组,缺氧2 h,复氧4 h;H/R CIL组,缺氧前1 h予以CIL(10μmol.L-1)随即缺氧2 h,复氧4 h;H/R CIL Wort mannin(H/R CIL W)组,CIL处理前30 min予磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase PI3K)特异性抑制剂——渥曼青霉素(Wort mannin 0.1μmol.L-1);②检测各组培养液中乳酸脱氢酶、肌酸激酶同工酶含量,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,Western blot检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)及磷酸化丝氨酸/Akt(p-Akt)的表达。结果:CIL明显抑制H/R损伤导致的心肌细胞凋亡,并使p-Akt/Akt比值明显增加;Wort mannin可使p-Akt/Akt比值明显减少,抑制CIL的抗凋亡作用。结论:H/R损伤可导致心肌细胞凋亡,CIL可能通过PI3K-Akt途径发挥抗凋亡作用。     

福辛普利对培养心肌细胞缺氧复氧性损伤的干预研究

目的　研究缺氧复氧性损伤的发生机制及福辛普利对损伤的影响。　 方法　Wistar大鼠 5 0只 ,取其心肌细胞和主动脉内皮细胞培养 ,分离其外周血中性粒细胞 ,分设缺氧复氧正常条件培养组 (正常组 ) ,单纯缺氧复氧组 (HR组 ) ,正常培养 +白介素 1β(IL 1β ,10 0U·ml-1)刺激组 (IL 1β组 ) ,将以上 3组再分别分为 :不干预组和福辛普利干预组。于缺氧 1h后复氧 6h ,测定心肌细胞IL 1β、细胞间粘附分子 1(ICAM 1)蛋白质表达水平 ,细胞胞浆游离钙 ([Ca2 + ]i) ,一氧化氮合酶 (NOS) ,超氧化物歧化酶 (SOD) ,丙二醛 (MDA) ,还原型谷胱苷肽 (GSH)和中性粒细胞与内皮细胞粘附率。　 结果　心肌细胞缺氧复氧及IL 1β刺激时 ,IL 1β、ICAM 1蛋白质表达 ,中性粒细胞与内皮细胞的粘附率、[Ca2 + ]i和MDA均有显著增加 ,而SOD、GSH、NOS明显下降 ;缺氧复氧组上述各项指标除GSH外改变较IL 1干预刺激组更显著。福辛普利可明显改善 2组MDA、中性粒细胞与内皮细胞的粘附率的增加以及SOD、GSH、NOS的下降程度 ,但对IL 1β、ICAM 1的表达水平和 [Ca2 + ]i超载增高的程度无影响。　 结论 　IL 1β通过直接或间接作用于ICAM 1、氧自由基和NO NOS系统引起细胞损伤 ,福辛普利可通过直接或间接调节氧自由基和NO NOS系统而减轻缺     

Characteristics of death of neonatal rat cardiomyocytes following hypoxia or hypoxia-reoxygenation: the association of apoptosis and cell membrane disintegrity

Irreversibly injured cardiomyocytes are positive for terminal deoxynucleotidyl transferase nick end-labeling (TUNEL), making it controversial as to whether TUNEL-positive cardiomyocytes induced by hypoxia–reoxygenation are apoptotic (secondarily necrotic) or primarily necrotic. We investigated the relationship between plasma membrane integrity and DNA fragmentation in hypoxic-reoxygenated cardiomyocytes. Cardiomyocytes were prepared from neonatal rat heart and exposed to hypoxia. The plasma membrane integrity was assessed by propidium iodide (PI) staining. The mode of DNA fragmentation was assessed by TUNEL and in situ polymerase chain reaction ligation assay. Furthermore, caspase-3 activity was measured in hypoxic-reoxygenated cardiomyocytes. Reoxygenation for 24 h after 3–8 h of hypoxia increased TUNEL positivity. However, the appearance of PI-positivity preceded that of TUNEL at various time points following reoxygenation. In contrast, TUNEL-positive but PI-negative cells were rarely found. In the hypoxic-reoxygenated cells, caspase-3 activity was increased, and PI- and TUNEL-positive cardiomyocytes possessed a sufficient number of double-strand DNA breaks with single-base 3′-OH terminals. In cardiomyocytes subjected to hypoxia–reoxygenation, the appearance of TUNEL positivity was delayed in comparison to membrane disintegrity, but in these cells caspase-3 has been activated and the mode of DNA fragmentation was apoptosis-specific. Thus, hypoxia–reoxygenation induces apoptosis associated with cell membrane disintegrity in cardiomyocytes. Received: December 13, 2001 / Accepted: May 8, 2002 Correspondence to Y. Maruyama     

PEP-1-CAT预处理对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的:探讨细胞穿透肽PEP-1介导的人过氧化氢酶(catalase,CAT)对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:利用基因工程方法表达和纯化His-tag-PEP-l-CAT融合蛋白,将H9c2细胞随机分为正常对照组(CTL)、缺氧复氧组(H/R)、H/R加CAT组(H/R+CAT)、H/R加PEP-1-CAT组(H/R+PEP-1-CAT)。分别向H/R+PEP-1-CAT及H/R+CAT组加入2 mol/L的PEP-1-CAT及CAT500μl处理6 h,将各组细胞置于缺氧箱中缺氧21 h,再复氧6 h。采用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)水平;通过流式细胞仪检测细胞的凋亡水平;通过Western blot检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:与H/R组相比,H/R+PEP-1-CAT组的细胞的LDH、MDA、细胞的凋亡率及Bax的表达量均明显下降,Bcl-2的表达量升高(P<0.05)。结论:PEP-1-CAT预处理通过抗氧化和抗凋亡的作用发挥对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用。     

安宁包缺氧体系用于构建乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的研究

目的采用安宁包缺氧体系构建SD乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,评估其实验条件,为开展心肌缺血/再灌注损伤的分子机制研究奠定基础。方法采用安宁包缺氧体系分别处理SD乳鼠原代心肌细胞指定时间(3 h、4 h、6 h、12 h),再进行复氧24 h,并采用AnnexinV/PI双染-流式细胞术检测细胞凋亡率与坏死率。结果与正常组相比,安宁包缺氧体系处理6 h、12 h分别诱导心肌细胞坏死率上升29.82%和44.19%,差异具有统计学意义(P<0.01);与正常组相比,安宁包缺氧体系处理4 h后复氧24 h诱导心肌细胞凋亡率上升35.8%,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论采用安宁包缺氧体系处理SD乳鼠原代心肌细胞4 h后复氧24 h为较合适的缺氧/复氧损伤模型实验条件。